МУК 4.1.3373-16. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств карфентразон-этила по его метаболиту карфентразону в клубнях картофеля методом капиллярной газожидкостной хроматографии. Методические указания

(утв. Роспотребнадзором 05.07.2016)

Утверждаю Руководитель Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главный государственный санитарный врач Российской Федерации А. Ю. Попова 5 июля 2016 года

4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ КАРФЕНТРАЗОН-ЭТИЛА ПО ЕГО МЕТАБОЛИТУ КАРФЕНТРАЗОНУ В КЛУБНЯХ КАРТОФЕЛЯ МЕТОДОМ КАПИЛЛЯРНОЙ ГАЗОЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ МУК 4.1.3373-16

1. Разработаны Российским государственным аграрным университетом — МСХА им. К.А. Тимирязева, Учебно-научным консультационным центром «Агроэкология пестицидов и агрохимикатов» Минсельхоза России (В.А. Калинин, А.В. Довгилевич, А.В. Калинин, Е.Н. Тестова).

2. Рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (протокол от 20 мая 2016 г. № 1).

3. Утверждены руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации А.Ю. Поповой 5 июля 2016 г.

4. Введены впервые.

Свидетельство о метрологической аттестации РОСС RU.0001.310430/0217.16.10.14 от 16.10.2014.

Настоящие методические указания устанавливают порядок применения метода газожидкостной хроматографии для совместного определения уровня остаточных количеств карфентразон-этила по его метаболиту карфентразону в клубнях картофеля в диапазоне 0,01 — 0,10 мг/кг. Методические указания носят рекомендательный характер.

Карфентразон-этил

Этиловый эфир (R,S)-2-хлор-3-[2-хлор-5-(4-дифторметил-4,5-дигидро-3-метил-5-оксо-1H-1,2,4-триазол-1-ил)-4-фторфенил]пропионовой кислоты

Структурная формула:

Эмпирическая формула: C15H14Cl2F3N3O3.

Молекулярная масса: 412,2.

Агрегатное состояние: вязкая жидкость.

Цвет, запах: желтый, с легким нефтяным запахом.

Давление насыщенного пара: 1,6 x 10-2 мПа (при 25 °C).

Температура плавления/замерзания: -22,1 °C.

Коэффициент распределения в системе октанол-вода: Kow logP = 2,5 при 20 °C.

Растворимость в воде (мг/дм3): 12 — 30 (в зависимости от pH).

Растворимость в органических растворителях (г/дм3, при 25 °C): гексан — 3, толуол — 90. Смешивается во всех соотношениях с ацетоном, хлористым метиленом, этанолом и этилацетатом.

Карфентразон-этил в водной среде гидролитически стабилен при pH 5; при pH 7 гидролизуется на 50% за 13,7 дней, а при pH 9 — за 5,1 часа.

Под действием солнечного излучения и при повышенных температурах разрушается относительно быстро.

Карфентразон-этил практически не связывается с почвой, однако вследствие его чрезвычайно низкой устойчивости в почве время полуразложения составляет 0,55 — 0,58 сут.

Краткая токсикологическая характеристика. Карфентразон-этил относится к веществам малоопасным по острой пероральной (ЛД₅₀ для крыс — 5 143 мг/кг) и дермальной токсичности (ЛД50 для крыс — более 4 000 мг/кг), но к умеренно опасным по ингаляционной токсичности (ЛД50 (4 часа) для крыс более 5 000 мг/м3). Слабо раздражает кожу и конъюнктиву.

Область применения. Карфентразон-этил — гербицид из группы триазолинонов системного действия, хорошо проникающий в растения через листья, но слабо передвигающийся по растению. Механизм действия связан с ингибированием активности протопорфириногеноксидазы. Высокоэффективен против широкого спектра двудольных сорняков в посевах злаковых культур при норме расхода 9 — 35 г д.в./га.

В России установлены следующие гигиенические нормативы: ДСД — 0,03 мг/кг массы тела человека; ОДК в почве — 0,06; ПДК в воде водоема — 0,1 мг/дм3; ОБУВ в атмосферном воздухе — 0,01 мг/м3; ОБУВ в воздухе рабочей зоны — 1,4 мг/м3; МДУ в продукции (мг/кг): зерно хлебных злаков, рапс (зерно, масло), подсолнечник (семена, масло), кукуруза (зерно, масло) — 0,02.

Карфентразон — основной метаболит карфентразон-этила:

2-хлор-3-[2-хлор-4-фтор-5-(4-дифторметил-4,5-дигидро-3-метил-5-оксо-1H-1,2,4-триазол-1-ил)фенил]пропионовая кислота.

Структурная формула:

Эмпирическая формула: C₁₃H₁₀Cl₂F₃N₃O₃.

Молекулярная масса 384,2.

1. Погрешность измерений

При соблюдении всех регламентированных условий проведения анализа в точном соответствии с данной методикой погрешность (и ее составляющие) результатов измерений при доверительной вероятности P = 0,95 не превышает значений, приведенных в табл. 1 для соответствующих диапазонов концентраций.

Таблица 1

Метрологические параметры для карфентразона

Полнота извлечения вещества, стандартное отклонение, доверительные интервалы среднего результата для полного диапазона концентраций (n = 20) приведены в табл. 2.

Таблица 2

Полнота извлечения вещества, стандартное отклонение, доверительный интервал среднего результата для карфентразона

2. Метод измерения

Остаточное количество карфентразон-этила определяется по его основному метаболиту (карфентразону) методом газожидкостной хроматографии с использованием детектора по захвату электронов (ЭЗД) после экстракции карфентразона из образцов органическим растворителем, очистки экстракта перераспределением между двумя несмешивающимися фазами, бутилирования и дополнительной очистки полученного бутилового эфира карфентразона на колонках с флоризилом.

Идентификация веществ проводится по времени удерживания, а количественное определение — методом абсолютной калибровки.

В предлагаемых условиях анализа метод специфичен. Избирательность метода достигается за счет подбора колонки и условий программирования.

3. Средства измерений, реактивы, вспомогательные устройства и материалы

3.1 Средства измерений

Примечание. Допускается использование средств измерений с аналогичными или лучшими характеристиками.

3.2 Реактивы

Примечание. Допускается использование реактивов с аналогичными или лучшими характеристиками.

3.3 Вспомогательные устройства, материалы

Примечание. Допускается применение хроматографических колонок и другого оборудования с аналогичными или лучшими техническими характеристиками.

4. Требования безопасности

4.1. При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007-76, требования электробезопасности при работе с электроустановками по ГОСТ Р 12.1.019-09, а также требования, изложенные в технической документации на газовый хроматограф.

4.2. Помещение должно соответствовать требованиям пожаробезопасности по ГОСТ 12.1.004-91 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009-83. Содержание вредных веществ в воздухе не должно превышать норм, установленных ГН 2.2.5.1313-03 «Предельно допустимые концентрации (ПДК) вредных веществ в воздухе рабочей зоны». Организация обучения работников безопасности труда — по ГОСТ 12.0.004-91.

5. Требования к квалификации операторов

К выполнению измерений и обработке их результатов допускаются специалисты, имеющие опыт работы в химической лаборатории, прошедшие обучение и владеющие техникой проведения анализа, освоившие метод анализа в процессе тренировки и уложившиеся в нормативы контроля при проведении процедуры контроля погрешности анализа.

6. Условия измерений

При выполнении измерений соблюдают следующие условия:

• приготовление растворов и подготовку проб к анализу проводят при температуре воздуха (20 +/- 5) °C, относительной влажности не более 80% и нормальном атмосферном давлении;
• измерения на газовом хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.

7. Подготовка к определению

Выполнению измерений предшествуют следующие операции: очистка растворителей (при необходимости), приготовление растворов, кондиционирование хроматографической колонки, подготовка колонок с флоризилом для очистки экстракта, проверка хроматографического поведения вещества на колонках с флоризилом, установление градуировочной характеристики.

7.1 Подготовка органических растворителей

7.1.1 Очистка ацетонитрила

Ацетонитрил, содержащий воду, предварительно осушают, добавляя в него гранулированный безводный хлористый кальций из расчета не менее 100 г/дм3. Выдерживают его над осушителем в течение 5 — 6 часов. Затем ацетонитрил сливают с осушителя в круглодонную колбу со шлифом объемом 4 000 см3 аппарата для перегонки растворителей. Ацетонитрил перегоняют при температуре 81,5 °C, а фракции, отогнанные при температуре ниже и выше 81,5 °C, отбрасывают.

7.1.2 Очистка ацетона

Ацетон, содержащий воду, предварительно осушают, добавляя в него гранулированный безводный хлористый кальций из расчета не менее 100 г/дм3. Выдерживают его над осушителем в течение 5 — 6 часов. Затем ацетон сливают с осушителя в круглодонную колбу со шлифом объемом 4 000 см3 аппарата для перегонки растворителей, добавляют туда марганцовокислый калий из расчета 100 мг/дм3. Ацетон перегоняют при температуре 56,2 °C, а фракции, отогнанные при температуре ниже и выше 56,2 °C, отбрасывают.

7.1.3 Приготовление бидистиллированной воды

Дистиллированную воду помещают в круглодонную колбу со шлифом объемом 4 000 см3 от аппарата для перегонки растворителей, добавляют к ней марганцовокислый калий из расчета 1 г/дм3 и кипятят в течение 6 часов.

Собирают фракции, отогнанные при температуре 100,0 °C, а фракции, отогнанные при температуре ниже и выше 100,0 °C, отбрасывают.

7.1.4 Очистка хлористого метилена

Хлористый метилен промывают равным объемом 5% раствора натрия углекислого (безводного), осушают, добавляя в него гранулированный безводный хлористый кальций из расчета не менее 100 г/дм3. Выдерживают его над осушителем в течение 12 — 24 часов. Затем хлористый метилен сливают с осушителя в круглодонную колбу со шлифом объемом 4 000 см3 аппарата для перегонки растворителей. Хлористый метилен перегоняют при температуре 40,0 °C, а фракции, отогнанные при температуре ниже и выше 40,0 °C, отбрасывают.

7.1.5 Очистка этилацетата

Этилацетат промывают равным объемом 5% раствора натрия углекислого (безводного), осушают, добавляя в него гранулированный безводный хлористый кальций из расчета не менее 100 г/дм3. Выдерживают его над осушителем в течение 12 — 24 часов. Затем этилацетат сливают с осушителя в круглодонную колбу со шлифом объемом 4 000 см3 аппарата для перегонки растворителей. Этилацетат перегоняют при температуре 77,1 °C, а фракции, отогнанные при температуре ниже и выше 77,1 °C, отбрасывают.

7.2 Приготовление растворов для проведения анализа

7.2.1 Приготовление рабочих растворов

7.2.1.1. Приготовление 4 н раствора серной кислоты. Мерным цилиндром отбирают 112 см3 концентрированной серной кислоты и осторожно переносят в мерную колбу на 1 000 см3, куда предварительно наливают около 300 см3 дистиллированной воды. Затем раствор перемешивают и после охлаждения доводят водой объем в колбе до метки (при приготовлении раствора соблюдать осторожность и работать под тягой).

7.2.1.2. Приготовление 2% раствора серной кислоты в бутаноле (бутилирующей смеси). Мерной пипеткой отбирают 2 см3 концентрированной серной кислоты и осторожно переносят в мерную колбу на 100 см3, куда предварительно наливают около 60 см3 бутанола. Затем раствор перемешивают и доводят бутанолом объем в колбе до метки (при приготовлении раствора соблюдать осторожность и работать под тягой).

7.2.2 Приготовление градуировочных растворов

7.2.2.1. Стандартный раствор № 1 с концентрацией карфентразона 1,0 мг/см3. Взвешивают 50 мг карфентразона в мерной колбе объемом 50 см3. Навеску растворяют в ацетоне и доводят объем до метки ацетоном. Полученный стандартный раствор № 1 используется для приготовления стандартных растворов для хроматографического исследования и построения калибровочной кривой. Стандартный раствор № 1 хранится в холодильнике в течение 6 месяцев.

7.2.2.2. Стандартный раствор № 2 с концентрацией карфентразона 100,0 мкг/см3. Из стандартного раствора № 1 отбирают пипеткой 1 см3, помещают в мерную колбу объемом 10 см3 и доводят объем до метки ацетоном. Стандартный раствор № 2 используется для приготовления стандартных растворов для построения калибровочной кривой. Стандартный раствор № 2 хранится в холодильнике в течение месяца.

7.2.2.3. Стандартный раствор № 3 с концентрацией карфентразона 1,0 мкг/см3. Из стандартного раствора № 2 отбирают пипеткой 1 см3, помещают в мерную колбу объемом 100 см3 и доводят объем до метки ацетоном. Стандартный раствор № 3 используется для приготовления стандартных растворов для построения калибровочной кривой и для внесения в контрольные образцы. Стандартный раствор № 3 хранится в холодильнике в течение 14 суток.

7.2.2.4. Стандартным раствор № 4 с концентрацией карфентразона 0,5 мкг/см3. Из стандартного раствора № 3 отбирают пипеткой 5 см3, помещают в мерную колбу объемом 10 см3 и доводят объем до метки ацетоном. Стандартный раствор № 4 используется для построения калибровочной кривой и для внесения в контрольные образцы. Стандартный раствор № 4 хранится в холодильнике в течение 14 суток.

7.2.2.5. Стандартный раствор № 5 с концентрацией карфентразона 0,2 мкг/см3. Из стандартного раствора № 3 отбирают пипеткой 2 см3, помещают в мерную колбу объемом 10 см3 и доводят объем до метки ацетоном. Стандартный раствор № 5 используется для построения калибровочной кривой и для внесения в контрольные образцы. Стандартный раствор № 5 хранится в холодильнике в течение 14 суток.

7.2.2.6. Стандартный раствор № 6 с концентрацией карфентразона 0,1 мкг/см3. Из стандартного раствора № 3 отбирают пипеткой 1 см3, помещают в мерную колбу объемом 10 см3 и доводят объем до метки ацетоном. Стандартный раствор № 6 используется для построения калибровочной кривой и для внесения в контрольные образцы. Стандартный раствор № 6 хранится в холодильнике в течение 14 суток.

7.2.2.7. Стандартный раствор № 7 с концентрацией карфентразона 0,05 мкг/см3. Из стандартного раствора № 4 отбирают пипеткой 1 см3, помещают в мерную колбу объемом 10 см3 и доводят объем до метки ацетоном. Стандартный раствор № 7 используется для построения калибровочной кривой и для внесения в контрольные образцы. Стандартный раствор № 7 хранится в холодильнике в течение 14 суток.

7.2.2.8. Стандартный раствор № 8 с концентрацией карфентразона 0,02 мкг/см3. Из стандартного раствора № 5 отбирают пипеткой 1 см3, помещают в мерную колбу объемом 10 см3 и доводят объем до метки ацетоном. Стандартный раствор № 7 используется для построения калибровочной кривой и для внесения в контрольные образцы. Стандартный раствор № 8 хранится в холодильнике в течение 14 суток.

7.2.2.9. Стандартный раствор № 9 с концентрацией карфентразона 0,01 мкг/см3. Из стандартного раствора № 6 отбирают пипеткой 1 см3, помещают в мерную колбу объемом 10 см3 и доводят объем до метки ацетоном. Стандартный раствор № 9 используется для построения калибровочной кривой и для внесения в контрольные образцы. Стандартный раствор № 9 хранится в холодильнике в течение 14 суток.

7.3 Бутилирование

7.3.1 Бутилирование стандартных растворов

В виалы объемом 40 см3 помещают по 1 см3 каждого стандартного раствора карфентразона в ацетоне (N 6, 7, 8, 9), удаляют растворитель током теплого воздуха и проводят бутилирование.

К сухому остатку в виале прибавляют 1,5 см3 2% раствора концентрированной серной кислоты в бутаноле (бутилирующей смеси), полученной по п. 7.2.1.2, тщательно обмывают стенки виалы. Виалу плотно закрывают крышкой, помещают в блок для виал, нагретый до 100 °C, и оставляют на 60 минут. По истечении этого времени виалу вынимают из блока, охлаждают до комнатной температуры, добавляют 10 см3 гексана и 15 — 25 см3 бидистиллированной воды. Смесь интенсивно встряхивают и после разделения фаз в виале из верхнего (гексанового) слоя 1 мм3 вводят в хроматограф.

7.4 Установление градуировочной характеристики

Градуировочную характеристику, выражающую зависимость площади (высоты) пика от концентрации карфентразона в растворе (мкг/см3), устанавливают методом абсолютной калибровки по 4 растворам для градуировки с концентрацией 0,01; 0,02; 0,05; 0,1 мкг/см3.

В испаритель хроматографа вводят по 1 мм3 каждого градуировочного раствора и анализируют в условиях хроматографирования по п. 9.4. Осуществляют не менее 3 параллельных измерений.

7.5 Подготовка колонок с флоризилом для очистки экстракта

и проверка хроматографического поведения бутилового эфира карфентразона на ней

7.5.1 Подготовка колонки с флоризилом для очистки экстракта

В пластиковую или стеклянную колонку диаметром 15 мм помещают 4 г флоризила с зернением 60/100 меш. и, аккуратно постукивая по стенкам колонки, формируют слой адсорбента. На слой флоризила наносят слой безводного сернокислого натрия толщиной 1 см.

Перед использованием колонку промывают 25 см3 этилацетата, затем 20 см3 гексана.

7.5.2 Проверка хроматографического поведения бутилового

эфира карфентразона на колонке с флоризилом

В концентратор объемом 100 см3 вносят 1 см3 стандартного раствора бутилового эфира карфентразона в гексане с концентрацией 0,1 мкг/см3 и выпаривают его досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °C. Сухой остаток растворяют в 5 см3 гексана, тщательно обмывают стенки концентратора и наносят на подготовленную колонку. Элюат собирают в концентратор объемом по 100 см3 и выпаривают досуха при температуре не выше 30 °C.

Исходную колбу обмывают сначала 20 см3 гексана, затем 10 см3 смеси гексана с этилацетатом в соотношении 95:5, а затем еще тремя порциями смеси гексана с этилацетатом в соотношении 8:2 объемом 10 см3 каждая и последовательно вносят их на колонку. Каждую порцию собирают отдельно в концентраторы объемом по 100 см3 и выпаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °C.

Сухой остаток каждой фракции растворяют в 1 см3 гексана и 1 мм3 пробы вводят в хроматограф.

Определяют фракции, содержащие карфентразон, полноту смывания с колонки и необходимый объем элюента.

Изучение поведения карфентразона на колонке проводят каждый раз при отработке методики или поступлении новой партии флоризила.

8. Отбор проб и хранение

Отбор проб производится в соответствии с «Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, продуктов питания и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов», № 2051-79 от 21.08.79, а также в соответствии с ГОСТ 27853-88, ГОСТ 13341-77 «Свежие и свежемороженые овощи, картофель, бахчевые, фрукты, ягоды, грибы. Правила приемки и методы отбора проб», ГОСТ 7176-85 «Картофель свежий продовольственный, заготовляемый и поставляемый. ТУ».

Пробы клубней картофеля хранят в полиэтиленовой таре в морозильнике при температуре -18 °C.

9. Выполнение определения

9.1 Клубни картофеля

9.1.1 Экстракция и очистка полученного экстракта

перераспределением в системе несмешивающихся растворителей

Образец измельченных клубней картофеля массой 10 г помещают в полипропиленовую банку для экстракции объемом 250 см3, добавляют 50 см3 смеси ацетонитрила с водой и уксусной кислотой в соотношении 80:20:2 и помещают на аппарат для встряхивания проб на 30 минут. Экстракт фильтруют через бумажный фильтр низкой плотности в концентратор объемом 250 см3. Экстракцию повторяют еще один раз в тех же условиях. Экстракты объединяют в концентраторе объемом 250 см3 и упаривают до водного остатка на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °C.

9.1.2 Очистка экстракта перераспределением

в системе несмешивающихся растворителей

К водному остатку в концентраторе, полученному по п. 9.1.1, добавляют 50 см3 дистиллированной воды и доводят значение pH до 1 — 2, добавляя 4 н серную кислоту. Перемешивают содержимое концентратора и переносят в делительную воронку объемом 250 см3. Добавляют в делительную воронку 5 г хлористого натрия, перемешивают содержимое воронки.

Карфентразон экстрагируют тремя порциями хлористого метилена по 30 см3, встряхивая каждый раз делительную воронку в течение 2 минут. Хлористый метилен собирают через слой безводного сульфата натрия в концентратор объемом 250 см3 и упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °C.

9.1.3 Бутилирование экстракта

К сухому остатку в концентраторе, полученному по п. 9.1.2, прибавляют 2 см3 хлористого метилена, тщательно обмывают стенки концентратора и переносят его в виалу. Процедуру повторяют еще 2 раза, используя по 2 см3 хлористого метилена. Растворитель удаляют током теплого воздуха и проводят бутилирование.

К сухому остатку в виале прибавляют 1,5 см3 2% раствора концентрированной серной кислоты в бутаноле (бутилирующей смеси), полученной по п. 7.2.1.2, тщательно обмывают стенки виалы. Виалу плотно закрывают крышкой, помещают в блок для виал, нагретый до 100 °C, и оставляют на 60 минут. По истечении этого времени виалу вынимают из блока, охлаждают до комнатной температуры, добавляют 10 см3 гексана и 15 — 25 см3 бидистиллированной воды. Смесь интенсивно встряхивают.

9.1.4 Очистка бутилированного экстракта

на колонках с флоризилом

Из верхнего (гексанового) слоя в виале, полученного в п. 9.1.3, отбирают 5 см3 и наносят на заранее подготовленную колонку с флоризилом.

Исходную колбу обмывают сначала 20 см3 гексана, затем 10 см3 смеси гексана с этилацетатом в соотношении 95:5, элюаты отбрасывают.

Карфентразон элюируют с колонки 15 см3 смеси гексана с этилацетатом в соотношении 8:2. Элюат собирают в концентратор объемом 100 см3 и выпаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °C.

Сухой остаток растворяют в 5 см3 гексана и 1 мм3 пробы вводят в хроматограф.

9.2 Условия хроматографирования

Хроматографическая система, включающая:

• хроматограф газовый с детектором по захвату электронов (ЭЗД), снабженный приспособлениями для капиллярной колонки;
• компьютерное программное обеспечение, контролирующее работу всего прибора, обеспечивающее сбор и хранение всех хроматограмм в процессе проведения хроматографического анализа, обработку результатов измерений, вывод и расчет хроматограмм и количественный анализ.

Колонка хроматографическая капиллярная из кварцевого стекла, с внутренним диаметром 0,25 мм, длиной 30 м, с неподвижной фазой, содержащей 5% дифенилполисилоксана и 95% диметилполисилоксана, и толщиной пленки 0,25 мкм.

Температура детектора — 300 °C, поток поддува в детектор (азот) — 45 мл/мин.

Температура испарителя — 280 °C.

Нагрев термостата колонки программированный: начальная температура 180 °C, выдержка 1 мин; нагрев колонки по 10 градусов в минуту до 270 °C.

Газ-носитель — (РРГ-2, гелий), линейная скорость — 26,0 см/с, давление — 110 кПа, поток 0,79 мл/мин.

Расход сбросной (РРГ-1, гелий) — 10 мл/мин (1 мин), деление потока 12,6.

Линейность детектирования сохраняется в пределах 0,01 — 0,1 нг.

10. Обработка результатов анализа

Для обработки результатов хроматографического анализа используется компьютерное программное обеспечение химического анализа, которое входит в хроматографическую систему.

Альтернативная обработка результатов.

Содержание карфентразон-этила по карфентразону в пробах картофеля рассчитывают по формуле, без учета полноты извлечения вещества из проб:

X = \frac{S_{\text{пр}} \cdot A \cdot V}{100 \cdot S_{\text{ст}} \cdot m} \cdot P,

где X — содержание карфентразон-этила в пробе, мг/кг;

Scm — высота (площадь) пика бутилового эфира стандарта, мм;

Sпр — высота (площадь) пика бутилового эфира образца, мм;

A — концентрация карфентразона в бутилированном стандартном растворе, мкг/см3;

V — объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, см3;

m — масса анализируемого образца, г;

P — содержание карфентразона в аналитическом стандарте, %;

K — коэффициент пересчета молекулярных масс карфентразона и карфентразон-этила, равный 1,073.

11. Проверка приемлемости результатов параллельных определений

За результат анализа принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений, расхождение между которыми не превышает предела повторяемости (1):

\frac{2·|X_{1} - X_{2}| \cdot 100}{(X_{1} + X_{2})} \leq r, (1)

где X₁, X₂ - результаты параллельных определений, мг/кг или мг/дм3;

r — значение предела повторяемости (табл. 1), при этом r = 2,8 \times \sigma_{r} .

При невыполнении условия (1) выясняют причины превышения предела повторяемости, устраняют их и вновь выполняют анализ.

12. Оформление результатов

Результат анализа представляют в виде:

(\overline{X} \pm \Delta) мг/кг при вероятности P = 0,95,

где \overline{X} — среднее арифметическое результатов определений, признанных приемлемыми, мг/кг;

\Delta — граница абсолютной погрешности, мг/кг;

\Delta = \frac{\delta \cdot \overline{X}}{100} ,

где \delta — граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций, табл. 1), %.

В случае если содержание компонента менее нижней границы диапазона определяемых концентраций, результат анализа представляют в виде:

«содержание вещества в пробе менее 0,01 мг/кг» <*>.

<*> 0,01 мг/кг — предел обнаружения.

13. Контроль качества результатов измерений

Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений, а также контроль стабильности градуировочной характеристики осуществляется в соответствии с ГОСТ Р ИСО 5725-1-6-02 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений».

13.1 Контроль стабильности градуировочной характеристики.

Стабильность результатов измерений контролируют перед проведением измерений, анализируя один из градуировочных растворов.

Контроль стабильности градуировочной характеристики для карфентразона проводят при смене основного градуировочного раствора № 1 каждые 6 месяцев, при смене основного градуировочного раствора № 2 — каждый месяц, при смене основных градуировочных растворов № 3, 4, 5, 6, 7, 8 и 9 — каждые 14 дней, а также в начале и по окончании каждой серии анализов.

При контроле стабильности градуировочной характеристики проводят измерения не менее трех образцов концентраций для градуировки, содержание карфентразона в которых должно охватывать весь диапазон концентраций от 0,01 до 0,10 мкг/см3.

Градуировочная характеристика считается стабильной, если для каждого градуировочного раствора, используемого для контроля, сохраняется соотношение:

A = \frac{(X - C) \cdot 100}{C} \leq 4,59,

где X — концентрация карфентразона контрольного измерения, мкг/см3;

C — известная концентрация градуировочного раствора карфентразона в гексане, взятая для контроля стабильности градуировочной характеристики, мкг/см3;

4,59 — погрешность градуировочной характеристики, %.

Если величина расхождения (A) превышает 4,59%, делают вывод о невозможности применения градуировочной характеристики для дальнейших измерений. В этом случае выясняют и устраняют причины нестабильности градуировочной характеристики и повторяют контроль ее стабильности с использованием других градуировочных растворов карфентразона, предусмотренных МВИ. При повторном обнаружении нестабильности градуировочной характеристики определяют ее заново согласно п. 7.4.

13.2. Плановый внутрилабораторный оперативный контроль процедуры выполнения анализа проводится методом добавок.

Величина добавки C_{\text{д}} должна удовлетворять условию:

C_{\text{д}} = \Delta_{\text{л},X} + \Delta_{\text{л},X\prime},

где \pm \Delta_{\text{л},X}( \pm \Delta_{\text{л},X\prime}) — характеристика погрешности (абсолютная погрешность) результатов анализа, соответствующая содержанию компонента в испытуемом образце (расчетному значению содержания компонента в образце с добавкой соответственно), мг/кг, при этом:

\Delta_{\text{л}} = \pm 0,84\Delta,

где \Delta — граница абсолютной погрешности, мг/кг;

\Delta = \frac{\delta \cdot \overline{X}}{100} ,

где \delta — граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций, табл. 1), %.

Результат контроля процедуры Kк рассчитывают по формуле:

K_{\text{к}} = \overline{X}\prime - \overline{X} - C_{\text{д}},

где \overline{X}\prime , \overline{X} , C_{\text{д}} — среднее арифметическое результатов параллельных определений (признанных приемлемыми по п. 11), содержания компонента в образце с добавкой, испытуемом образце и концентрация добавки соответственно, мг/кг.

Норматив контроля K рассчитывают по формуле:

K = \sqrt{\Delta_{\text{л},X\prime}^{2} + \Delta_{\text{л},X}^{2}).}

Проводят сопоставление результата контроля процедуры (Kк) с нормативом контроля (K).

Если результат контроля процедуры удовлетворяет условию:

|Kк| <= K, (2)

процедуру анализа признают удовлетворительной.

При невыполнении условия (2) процедуру контроля повторяют. При повторном невыполнении условия (2) выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и принимают меры по их устранению.

13.3. Проверка приемлемости результатов измерений, полученных в условиях воспроизводимости.

Расхождение между результатами измерений, выполненных в условиях воспроизводимости (разное время, разные операторы, разные лаборатории), не должно превышать предела воспроизводимости (R):

\frac{2·|X_{1} - X_{2}|·100}{(X_{1} + X_{2})} \leq R, (3)

где X₁, X₂ - результаты измерений в двух разных лабораториях, мг/кг;

R — предел воспроизводимости (в соответствии с диапазоном концентраций, табл. 1), %.

Приложение 1

ПОЛНОТА ИЗВЛЕЧЕНИЯ КАРФЕНТРАЗОНА ИЗ КЛУБНЕЙ КАРТОФЕЛЯ (5 ПОВТОРНОСТЕЙ ДЛЯ КАЖДОЙ КОНЦЕНТРАЦИИ, P = 0,95)