МУК 4.1.2915-11. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств Лямбда-Цигалотрина в семенах и масле подсолнечника методом капиллярной газожидкостной хроматографии. Методические указания
(утв. Роспотребнадзором 12.07.2011)
Примечание
Документ включен в Перечень методов (методик) определения остаточных количеств действующих веществ пестицидов в продукции (товарах), подлежащий государственному санитарно-эпидемиологическому надзору (контролю) на таможенной границе и таможенной территории Евразийского экономического союза (Решение Комиссии Таможенного союза от 28.05.2010 № 299). Документ введен в действие с 12 июля 2011 года.
Утверждаю
Руководитель Федеральной
службы по надзору в сфере
защиты прав потребителей
и благополучия человека,
Главный государственный
санитарный врач
Российской Федерации
Г. Г. Онищенко
12 июля 2011 года
4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ
ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ ЛЯМБДА-ЦИГАЛОТРИНА В СЕМЕНАХ И МАСЛЕ ПОДСОЛНЕЧНИКА МЕТОДОМ КАПИЛЛЯРНОЙ ГАЗОЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ
с момента утверждения
1. Разработаны Российским государственным аграрным университетом МСХА им. К.А. Тимирязева, Учебно-научным консультационным центром «Агроэкология пестицидов и агрохимикатов» Минсельхоза России.
2. Рекомендованы к утверждению Комиссией по санитарно-эпидемиологическому нормированию при Федеральной службе по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (протокол от 02.06.2011 № 1).
3. Утверждены Руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г.Г. Онищенко 12 июля 2011 г.
4. Введены в действие с момента утверждения.
Свидетельство о метрологической аттестации № 0087.05.05.11 от 11.05.2011.
Настоящие методические указания устанавливают метод газожидкостной хроматографии для определения уровня остаточных количеств Лямбда-Цигалотрина в семенах и масле подсолнечника в диапазоне 0,05 — 0,5 мг/кг.
Название по ИЮПАК: (S,R)-альфа-циано-3-феноксибензил(1R,1S)-цис-3-(2-хлор-3,3,3-трифторпропенил)-2,2-диметилциклопропанкарбоксилат (1:1).
Структурная формула (не приводится).
Эмпирическая формула: C H ClF NO . 23 19 3 3
Давление насыщенного пара: 0,001 мПа при 20 °C.
Коэффициент распределения в системе октанол/вода при 20 °C: K log P = 7.
ow
Растворимость в воде при 20 °C — 0,005 мг/л (pH 6,5).
Растворимость в органических растворителях г/куб. дм: в ацетоне, гексане, метаноле, толуоле, этилацетате > 500.
Устойчив на свету. Стабилен при хранении в течение 6 месяцев при температуре 15 - 25 °C. Период полураспада в почве (ДТ ) составляет от 4
50
до 12 недель.
Краткая токсикологическая характеристика: Лямбда-Цигалотрин относится к веществам опасным по острой оральной (ЛД для крыс от 56 до 79 мг/кг), 50 умеренно опасным веществам по дермальной токсичности (ЛД для крыс от 1293 50
до 1507 мг/кг, для кроликов более 2000 мг/кг), но чрезвычайно опасным веществам по ингаляционной токсичности (ЛК (4 ч) для крыс более 60
50
мг/куб. м воздуха). Побочные отрицательные эффекты не обнаружены.
Область применения: Лямбда-Цигалотрин — инсектицид контактного и кишечного действия из группы синтетических пиретроидов, обладающий слабым репеллентным эффектом. Высоко эффективен в подавлении развития вредителей из отрядов жесткокрылых, перепончатокрылых, прямокрылых, двукрылых и чешуекрылых (имаго и личинки), а также отдельных видов клещей в посевах зерновых и овощных культур, кукурузы, хлопчатника, на плантациях картофеля, технических, ягодных и плодовых культур.
Применяется в России в качестве инсектицида на зерновых и зернобобовых культурах, кукурузе, сое, сахарной свекле, картофеле, капусте, томатах, хмеле, льне-долгунце, многолетних бобовых травах, крестоцветных культурах; на плантациях плодовых, ягодных, лекарственных и декоративных культур при норме расхода 5 — 20 г д.в./га в период вегетации культур до двух обработок за сезон.
В России установлены следующие гигиенические нормативы:
ДСД — 0,002 мг/кг массы человека;
ОБУВ в воздухе рабочей зоны — 0,1 мг/куб. м; в атмосферном воздухе — 0,003 мг/куб. м;
ПДК в воде водоема — 0,001 мг/куб. дм;
МДУ в продукции (мг/кг): семена и масло рапса, горчицы, сои — 0,1; зерно кукурузы, капуста, томаты, горох, зерно хлебных злаков, картофель, морковь — 0,01; сахарная свекла и лук — 0,02; виноград — 0,15.
1. Метрологическая характеристика метода
При соблюдении всех регламентированных условий проведения анализа в точном соответствии с данной методикой погрешность (и ее составляющие) результатов измерений при доверительной вероятности P = 0,95 не превышает значений, приведенных в табл. 1, для соответствующих диапазонов концентраций.
МЕТРОЛОГИЧЕСКИЕ ПАРАМЕТРЫ ДЛЯ ЛЯМБДА-ЦИГАЛОТРИНА
| Анализируемый объект | Диапазон определяемых концентраций, мг/кг | Показатель точности (граница относительной погрешности), +/- дельта, %, P = 0,95 | Стандартное отклонение повторяемости, сигма , % r | Предел повторяемости, r, % | Предел воспроизводимости, R, % |
| Семена подсолнечника | 0,10 — 0,50 вкл. | 25 | 3,54 | 9,84 | 13,78 |
| 0,05 — 0,10 вкл. | 50 | 2,67 | 7,42 | 10,39 | |
| Масло подсолнечника | 0,10 — 0,50 вкл. | 25 | 1,97 | 5,48 | 7,67 |
| 0,05 — 0,10 вкл. | 50 | 3,35 | 9,32 | 13,05 |
Полнота извлечения вещества, стандартное отклонение, доверительные интервалы среднего результата для полного диапазона концентраций (n = 20) приведены в табл. 2.
ДЛЯ ЛЯМБДА-ЦИГАЛОТРИНА
| Анализируемый | Метрологические параметры, P = 0,95, n = 20 | ||||
| объект | Предел обнаружения, мг/кг | Диапазон определяемых концентраций, мг/кг | Полнота извлечения вещества, % | Стандартное отклонение, S, % | Доверительный интервал среднего результата, +/-, % |
| Семена подсолнечника | 0,05 | 0,05 — 0,5 | 88,9 | 2,7 | 1,1 |
| Масло подсолнечника | 0,05 | 0,05 — 0,5 | 86,9 | 2,3 | 0,9 |
Метод основан на определении Лямбда-Цигалотрина с помощью газожидкостной хроматографии (ГЖХ) с использованием капиллярной колонки и детектора по захвату электронов после его экстракции из образцов органическим растворителем, очистки экстракта перераспределением между двумя несмешивающимися фазами и на колонках с Флоризилом.
Идентификация проводится по времени удерживания, а количественное определение — методом абсолютной калибровки.
В предлагаемых условиях анализа метод специфичен. Избирательность метода достигается за счет подбора колонки и условий программирования.
устройства и материалы
3.1 Средства измерений
Весы аналитические «OHAUS», EP 114 с наибольшим пределом взвешивания до 110 г и дискретностью 0,0001 г, класс точности по ГОСТ 24104-1 — специальный (I)
Весы лабораторные общего назначения с наибольшим пределом взвешивания до 600 г и пределом допустимой погрешности +/- 0,038 г «ACCULAB» V600, соответствуют классу точности по ГОСТ 24104-1 — средний (III)
Колбы мерные на 10, 25, 50, 100, 500 и 1000 куб. см ГОСТ 1770-74
Микрошприц для газовой хроматографии «Hamilton, 1700», объем 10 куб. мм, фирма «SUPELCO», кат. № 20972
Пипетки мерные на 1,0; 2,0; 5,0 куб. см ГОСТ 29227-91 pH-метр/милливольтметр pH — 1500 — 14 pH; +/- 1999 мВ, номер госрегистрации № 10663
Хроматограф газовый НР6890 Series GC System с детектором по захвату электронов (ЭЗД), регистрационный номер в государственном реестре средств измерения № 201/978
Цилиндры мерные на 10, 25 и 50 куб. см ГОСТ 1770-74
Допускается использование средств измерения с аналогичными или лучшими характеристиками.
3.2 Реактивы
Лямбда-Цигалотрин, аналитический стандарт с содержанием действующего вещества не менее 95%, чист., ГСО 7732
Ацетон, ос.ч. ТУ 6-09-3513-86 Ацетонитрил, ос.ч., УФ-200 нм ТУ 6-09-2167-84 Гелий, очищенный марки "А" ТУ 51-940-80 n-Гексан, х.ч. ТУ 6-09-3818-89
Калий марганцовокислый, х.ч. ГОСТ 20490-75
Кальций хлористый, ч. ТУ 6-09-4711-81
Натрий сернокислый, безводный, х.ч. ГОСТ 4166-76
Натрий хлористый, х.ч. ГОСТ 4233-77
Флоризил(R) (Магния силикат, 99%, CAS 1343-88-0) для колоночной хроматографии, зернение 60/100 меш фирма «Acros Organics»
Допускается использование реактивов иных производителей с аналогичной или более высокой классификацией.
3.3 Вспомогательные устройства, материалы
Аппарат для встряхивания проб «SKLO UNION TYP LT1» Банки с крышками для экстракции на 250 куб. см, полипропилен, кат. № 3120-0250, фирма «NALGENE»
Вата медицинская гигроскопическая хлопковая нестерильная ГОСТ 5556-81
Воронки делительные на 250 куб. см ГОСТ 25336-82
Воронки лабораторные стеклянные ГОСТ 25336-82
Испаритель ротационный Rota vapor R110 Buchi с водяной баней B-480, фирма «Buchi»
Колбы конические плоскодонные на 100, 250 и 1000 куб. см ГОСТ 25336-82
Колбы круглодонные со шлифом (концентраторы) на 100, 250 куб. см и 4000 куб. см ТС ТУ 92-891.029-91
Колонка хроматографическая капиллярная кварцевая Rtx(R)-1 (100% диметилполисилоксана), длина 30 м, внутренний диаметр 0,25 мм, толщина пленки 0,25 мкм, фирма «Restek»
Насос диафрагменный FT.19, фирма «KNF Neu Laboport»
Стаканы стеклянные термостойкие объемом 100 — 2000 куб. см ГОСТ 25336-82
Установка для перегонки растворителей с круглодонной колбой объемом 4000 куб. см и приемной конической колбой объемом 1000 куб. см Фильтры бумажные «красная лента» ТУ 6-09-1678-86
Допускается применение хроматографических колонок и другого оборудования с аналогичными или лучшими техническими характеристиками.
4.1. При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007, требования электробезопасности при работе с электроустановками по ГОСТ 12.1.019, а также требования, изложенные в технической документации на газовый хроматограф.
4.2. Помещение должно соответствовать требованиям пожаробезопасности по ГОСТ 12.1.004 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009. Содержание вредных веществ в воздухе не должно превышать норм, установленных ГН 2.2.5.1313-03 «Предельно допустимые концентрации (ПДК) вредных веществ в воздухе рабочей зоны». Организация обучения работников безопасности труда — по ГОСТ 12.0.004.
5. Требования к квалификации операторов
К выполнению измерений и обработке их результатов допускаются специалисты, имеющие высшее или специальное химическое образование, опыт работы в химической лаборатории, прошедшие обучение и владеющие техникой проведения анализа, освоившие метод анализа в процессе тренировки и уложившиеся в нормативы контроля при проведении процедуры контроля погрешности анализа.
При выполнении измерений соблюдают следующие условия:
- процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха (20 +/- 5) °C, относительной влажности не более 80% и нормальном атмосферном давлении;
- выполнение измерений на жидкостном хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.
Выполнению измерений предшествуют следующие операции: очистка растворителей (при необходимости), приготовление растворов, кондиционирование хроматографической колонки, подготовка колонок с Флоризилом для очистки экстракта, проверка хроматографического поведения вещества на колонках с Флоризилом, построение калибровочной кривой.
7.1 Подготовка органических растворителей
7.1.1 Очистка ацетонитрила
Ацетонитрил, содержащий воду, предварительно осушают, добавляя в него гранулированный безводный хлористый кальций из расчета не менее 100 г/куб. дм. Выдерживают его над осушителем в течение 5 — 6 ч. Затем ацетонитрил сливают с осушителя в круглодонную колбу со шлифом объемом 4000 куб. см аппарата для перегонки растворителей.
Ацетонитрил перегоняют при температуре 81,5 °C, а фракции, отогнанные при температуре ниже и выше 81,5 °C, отбрасывают.
7.1.2 Очистка ацетона
Ацетон помещают в круглодонную колбу со шлифом объемом 4000 куб. см от аппарата для перегонки растворителей, добавляют к нему марганцовокислый калий из расчета 1 г/куб. дм.
Ацетон перегоняют при температуре 56,2 °C, а фракции, отогнанные при температуре ниже и выше 56,2 °C, отбрасывают.
7.2 Приготовление градуировочных растворов
7.2.1 Стандартный раствор № 1 с концентрацией
Лямбда-Цигалотрина 1,0 мг/куб. см
Взвешивают 50 мг Лямбда-Цигалотрина в мерной колбе объемом 50 куб. см. Навеску растворяют в гексане и доводят объем до метки гексаном. Полученный стандартный раствор № 1 используется для приготовления стандартных растворов для хроматографического исследования и для установления градуировочной характеристики. Стандартный раствор № 1 хранится в холодильнике не более 4 месяцев.
7.2.2 Стандартный раствор № 2 с концентрацией
Лямбда-Цигалотрина 10,0 мкг/куб. см
Из стандартного раствора № 1 отбирают пипеткой 1 куб. см, помещают в мерную колбу объемом 100 куб. см и доводят объем до метки гексаном. Стандартный раствор № 2 используется для приготовления стандартных растворов и для установления градуировочной характеристики. Стандартный раствор № 2 хранится в холодильнике не более 1 месяца.
7.2.3 Стандартный раствор № 3 с концентрацией
Лямбда-Цигалотрина 1,0 мкг/куб. см
Из стандартного раствора № 2 отбирают пипеткой 1 куб. см, помещают в мерную колбу объемом 10 куб. см и доводят объем до метки гексаном. Стандартный раствор № 3 используется для приготовления стандартных растворов и для установления градуировочной характеристики. Стандартный раствор № 3 хранится в холодильнике не более 1 месяца.
7.2.4 Стандартный раствор № 4 с концентрацией
Лямбда-Цигалотрина 0,1 мкг/куб. см
Из стандартного раствора № 3 отбирают пипеткой 1 куб. см, помещают в мерную колбу объемом 10 куб. см и доводят объем до метки гексаном. Стандартный раствор № 4 используется для приготовления стандартных растворов и для установления градуировочной характеристики. Стандартный раствор № 4 хранится в холодильнике не более 10 дней.
7.2.5 Стандартный раствор № 5 с концентрацией
Лямбда-Цигалотрина 0,05 мкг/куб. см
Из стандартного раствора № 4 отбирают пипеткой 5 куб. см, помещают в мерную колбу объемом 10 куб. см и доводят объем до метки гексаном. Стандартный раствор № 5 используется для установления градуировочной характеристики. Стандартный раствор № 5 хранится в холодильнике не более 10 дней.
7.2.6 Стандартный раствор № 6 с концентрацией
Лямбда-Цигалотрина 0,02 мкг/куб. см
Из стандартного раствора № 4 отбирают пипеткой 2 куб. см, помещают в мерную колбу объемом 10 куб. см и доводят объем до метки гексаном. Стандартный раствор № 6 используется для установления градуировочной характеристики. Стандартный раствор № 6 хранится в холодильнике не более 10 дней.
7.2.7 Стандартный раствор № 7 с концентрацией
Лямбда-Цигалотрина 0,01 мкг/куб. см
Из стандартного раствора № 4 отбирают пипеткой 1 куб. см, помещают в мерную колбу объемом 10 куб. см и доводят объем до метки гексаном. Стандартный раствор № 7 используется для установления градуировочной характеристики. Стандартный раствор № 7 хранится в холодильнике не более 10 дней.
7.3 Установление градуировочной характеристики
Градуировочную характеристику, выражающую зависимость площади (высоты) пика от концентрации Лямбда-Цигалотрина в растворе (мкг/куб. см), устанавливают методом абсолютной калибровки по 4 растворам для градуировки с концентрацией 0,1; 0,05; 0,02 и 0,01 мкг/куб. см.
В испаритель хроматографа вводят по 1 куб. мм каждого градуировочного раствора и анализируют в условиях хроматографирования по п. 9.3. Осуществляют не менее 5 параллельных измерений.
7.4 Подготовка колонки с Флоризилом для очистки экстракта
и проверка хроматографического поведения Лямбда-Цигалотрина
7.4.1 Подготовка колонки с Флоризилом для очистки экстракта
В пластиковую или стеклянную колонку диаметром 15 мм помещают 4 г Флоризила с зернением 60/100 меш и, аккуратно постукивая по стенкам колонки, формируют слой адсорбента. На слой Флоризила наносят слой безводного сернокислого натрия толщиной 1 см.
Непосредственно перед использованием колонку промывают 15 куб. см ацетона, тщательно отжимают 20 куб. см гексана.
7.4.2 Проверка хроматографического поведения
Лямбда-Цигалотрина на колонке с Флоризилом
В концентратор объемом 100 куб. см вносят 1 куб. см стандартного раствора Лямбда-Цигалотрина в гексане с концентрацией 0,1 мкг/куб. см и выпаривают его досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °C. Сухой остаток растворяют в 5 куб. см гексана, тщательно обмывают стенки концентратора и наносят на заранее подготовленную колонку. Элюат собирают в концентратор и выпаривают досуха при температуре не выше 30 °C. Исходную колбу последовательно обмывают 20 куб. см гексана и 15 куб. см смеси гексана с ацетоном в соотношении 10:1, полученные растворы вносят на колонку. Затем колонку последовательно промывают четырьмя порциями смеси гексана с ацетоном в соотношении 4:1 объемом 5 куб. см каждая. Каждую порцию собирают отдельно в концентраторы и выпаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °C.
Сухой остаток каждой фракции растворяют в 1 куб. см гексана и 1 куб. мм пробы вводят в хроматограф.
Определяют фракции, содержащие Лямбда-Цигалотрин, полноту смывания с колонки и необходимый объем элюата.
Изучение поведения Лямбда-Цигалотрина на колонке проводят каждый раз при отработке методики или поступлении новой партии Флоризила.
Отбор проб производится в соответствии с «Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов», № 2051-79 от 21.08.79, а также в соответствии с ГОСТ 22391-89 «Подсолнечник. Требования при заготовках и поставках», ГОСТ 10852-86 «Семена масличные. Правила приемки и методы отбора проб», ГОСТ Р 52465-2005 «Масло подсолнечное. ТУ» и ГОСТ Р 52062-2003 «Масла растительные. Правила приемки и методы отбора проб».
Семена подсолнечника подсушивают до стандартной влажности, хранят в тканевых мешочках в сухом, защищенном от света месте при комнатной температуре не более 6 месяцев. Влажные семена замораживают и хранят в морозильной камере при -14 °C до 2 лет. Пробы подсолнечного масла хранят в плотно закрытой стеклянной или полиэтиленовой таре в холодильнике при температуре 0 — 4 °C в течение 10 суток.
9. Подготовка проб и выполнение измерений
9.1 Семена подсолнечника
9.1.1 Экстракция
Образец измельченных семян подсолнечника массой 10 г помещают в полипропиленовую банку для экстракции и центрифугирования объемом 200 куб. см, прибавляют 50 куб. см ацетонитрила и помещают на 45 мин. на аппарат для встряхивания проб. Пробу центрифугируют в течение 5 мин. при скорости 4000 оборотов в минуту и экстракт фильтруют в коническую колбу объемом 250 куб. см через фильтр «красная лента». Экстракцию повторяют еще два раза, используя каждый раз по 30 куб. см ацетонитрила и помещая каждый раз на 30 мин. на аппарат для встряхивания проб.
Из объединенного экстракта мерным цилиндром отбирают аликвоту объемом 22 куб. см (1/5 часть), помещают ее в концентратор объемом 100 куб. см и выпаривают до капель масла на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °C.
9.1.2 Очистка экстракта перераспределением в системе
несмешивающихся растворителей
К масляному остатку в концентраторе, полученному по п. 9.1.1, прибавляют 5 куб. см ацетонитрила, тщательно обмывают стенки концентратора, туда же приливают 50 куб. см дистиллированной воды, перемешивают и переносят в делительную воронку объемом 250 куб. см. Затем концентратор обмывают еще 50 куб. см дистиллированной воды и все смывы объединяют в делительной воронке. Добавляют 5 г сухого хлорида натрия и встряхивают воронку до полного растворения соли.
Лямбда-Цигалотрин экстрагируют тремя порциями гексана объемом по 30 куб. см, каждый раз встряхивая делительную воронку 2 мин. После полного разделения фаз в делительной воронке верхний слой (гексан) собирают в концентратор объемом 250 куб. см через слой безводного сульфата натрия. Осушитель обмывают 10 куб. см гексана, объединяют смыв с основным экстрактом и выпаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °C.
9.1.3 Очистка экстракта на колонке с Флоризилом
Сухой остаток, полученный по п. 9.1.2, растворяют в 5 куб. см гексана, обмывают стенки концентратора и вносят на заранее подготовленную колонку. Колонку промывают 20 куб. см гексана и 15 куб. см смеси гексана с ацетоном в соотношении 10:1, элюаты отбрасывают. Лямбда-Цигалотрин элюируют с колонки 15 куб. см смеси гексана с ацетоном в соотношении 4:1, элюат собирают в концентратор объемом 100 куб. см и выпаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °C.
Сухой остаток растворяют в 10 куб. см гексана и 1 куб. мм раствора вводят в хроматограф.
9.2 Масло подсолнечника
9.2.1 Экстракция
Из пробы подсолнечного масла отбирают в стакан навеску массой 5 г и переносят ее в делительную воронку объемом 250 куб. см двумя порциями гексана объемом по 15 куб. см. Лямбда-Цигалотрин экстрагируют тремя порциями ацетонитрила объемом по 50 куб. см, встряхивая делительную воронку 2 мин. После полного разделения фаз в делительной воронке нижний ацетонитрильный слой объединяют в коническую колбу объемом 250 куб. см. Верхний слой (гексан) отбрасывают.
Из объединенного экстракта мерным цилиндром отбирают аликвоту объемом 30 куб. см (1/5 часть), помещают ее в концентратор объемом 100 куб. см и выпаривают до капель масла на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °C.
Далее проводят очистку экстракта по схеме, указанной в пунктах 9.1.2 и 9.1.3.
Сухой остаток растворяют в 5 куб. см гексана и 1 куб. мм раствора вводят в хроматограф.
9.3 Условия хроматографирования
Хроматограф газовый НР6890 Series GC System с детектором по захвату электронов (ЭЗД), в модификации с электронным управлением пневмонической системы (ЭУПС).
Колонка хроматографическая капиллярная кварцевая Rtx(R)-1 (100% диметилполисилоксана), длина 30 м, внутренний диаметр 0,25 мм, толщина пленки 0,25 мкм.
Температура детектора — 300 °C, поток обдува анода (азот) — 6,0 куб. см/мин., поток поддува — 59,0 куб. см/мин.
Температура испарителя — 260 °C, режим Split, тип газа гелий, давление 20,2 psi, деление потока 15:1, split поток 14,8 куб. см/мин.
Программированный нагрев колонки с 220 °C (выдержка 1 мин.) по 10 град./мин. до 260 °C (выдержка 7 мин.), режим постоянный поток, поток колонки 1,0 куб. см/мин., средняя скорость 31 см/с.
Абсолютное время удерживания Лямбда-Цигалотрина: 8,44 мин. +/- 2%.
Линейный диапазон детектирования сохраняется в пределах 0,01 — 0,1 нг.
10. Обработка результатов анализа
Для обработки результатов хроматографического анализа используется программное обеспечение химического анализа HP GC ChemStation Rev. A.06.03RUS.
Альтернативная обработка результатов.
Содержание Лямбда-Цигалотрина рассчитывают по формуле:
S x A x V
пр
X = ------------- x P, 100 x S x m ст
X — содержание Лямбда-Цигалотрина в пробе, мг/кг;
S — высота (площадь) пика стандарта, Hz; ст
S — высота (площадь) пика образца, Hz; пр
A — концентрация стандартного раствора, мкг/куб. см;
V — объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, куб. см;
m — масса анализируемого образца, г;
P — содержание Лямбда-Цигалотрина в аналитическом стандарте, %.
параллельных определений
За результат анализа принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений, расхождение между которыми не превышает предела повторяемости (1):
2 x |X - X | x 100
1 2
------------------- <= r, (1)
(X + X )
1 2
X , X - результаты параллельных определений, мг/кг; 1 2
r — значение предела повторяемости (табл. 1), при этом r = 2,8 x сигма . r
При невыполнении условия (1) выясняют причины превышения предела повторяемости, устраняют их и вновь выполняют анализ.
Результат анализа представляют в виде:
_
(X +/- ДЕЛЬТА) мг/кг при вероятности P = 0,95,
X — среднее арифметическое результатов определений, признанных приемлемыми, мг/кг;
ДЕЛЬТА — граница абсолютной погрешности, мг/кг;
_
дельта x X
где дельта — граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций, табл. 1), %.
В случае если содержание компонента менее нижней границы диапазона определяемых концентраций, результат анализа представляют в виде:
«содержание вещества в пробе менее 0,05 мг/кг» <*>.
13. Контроль качества результатов измерений
Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений, а также контроль стабильности градуировочной характеристики осуществляется в соответствии с ГОСТ Р ИСО 5725-1-6-2002 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений».
13.1 Контроль стабильности градуировочной характеристики.
Стабильность результатов измерений контролируют перед проведением измерений, анализируя один из градуировочных растворов.
Контроль стабильности градуировочной характеристики для Лямбда-Цигалотрина проводят при смене основного градуировочного раствора № 1 каждые 4 месяца, при смене основных градуировочных растворов № 2 и № 3 — каждый месяц, при смене основных градуировочных растворов № 4, 5, 6 и 7 — каждые 10 дней, а также в начале и окончании каждой серии анализов.
При контроле стабильности градуировочной характеристики проводят измерения не менее трех образцов концентраций для градуировки, содержание Лямбда-Цигалотрина в которых должно охватывать весь диапазон концентраций от 0,01 до 0,1 мкг/куб. см.
Градуировочная характеристика считается стабильной, если для каждого из используемого для контроля градуировочного раствора сохраняется соотношение:
(X - C) x 100
X — концентрация Лямбда-Цигалотрина контрольного измерения, мкг/куб. см;
C — известная концентрация градуировочного раствора Лямбда-Цигалотрина в гексане, взятая для контроля стабильности градуировочной характеристики, мкг/куб. см;
4,5 — погрешность градуировочной характеристики, %.
Если величина расхождения (A) превышает 4,5%, делают вывод о невозможности применения градуировочной характеристики для дальнейших измерений. В этом случае выясняют и устраняют причины нестабильности градуировочной характеристики и повторяют контроль ее стабильности с использованием других градуировочных растворов Лямбда-Цигалотрина, предусмотренных МВИ. При повторном обнаружении нестабильности градуировочной характеристики определяют ее заново согласно п. 7.3.
13.2. Плановый внутрилабораторный оперативный контроль процедуры выполнения анализа проводится методом добавок.
Величина добавки C должна удовлетворять условию: д
C = ДЕЛЬТА + ДЕЛЬТА , д _ _ л,X л,X' где +/- ДЕЛЬТА (+/- ДЕЛЬТА ) - характеристика погрешности _ _ л,X л,X' (абсолютная погрешность) результатов анализа, соответствующая содержанию компонента в испытуемом образце (расчетному значению содержания компонента
в образце с добавкой соответственно), мг/кг, при этом:
где ДЕЛЬТА — граница абсолютной погрешности, мг/кг;
_
дельта x X
где дельта — граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций, табл. 1), %.
Результат контроля процедуры K рассчитывают по формуле: к
_ _ K = X' - X - C , к д _ _ где X', X, C - среднее арифметическое результатов параллельных
д
определений (признанных приемлемыми по п. 11), содержания компонента в образце с добавкой, испытуемом образце и концентрация добавки, соответственно, мг/кг.
Норматив контроля K рассчитывают по формуле:
_____________________
/ 2 2 K = \/ДЕЛЬТА + ДЕЛЬТА . _ _ л,X' л,X Проводят сопоставление результата контроля процедуры (K ) с нормативом
к
контроля (K).
Если результат контроля процедуры удовлетворяет условию:
процедуру анализа признают удовлетворительной.
При невыполнении условия (2) процедуру контроля повторяют. При повторном невыполнении условия (2) выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и принимают меры по их устранению.
13.3. Проверка приемлемости результатов измерений, полученных в условиях воспроизводимости.
Расхождение между результатами измерений, выполненных в условиях воспроизводимости (разное время, разные операторы, разные лаборатории), не должно превышать предела воспроизводимости (R):
2 x |X - X | x 100
1 2
------------------- <= R, (3)
(X + X )
1 2
X , X - результаты измерений в двух разных лабораториях, мг/кг; 1 2
R — предел воспроизводимости (в соответствии с диапазоном концентраций,
табл. 1), %.
Российский государственный аграрный университет — МСХА имени К.А. Тимирязева.
Учебно-научный консультационный центр «Агроэкология пестицидов и агрохимикатов». 127550, Москва, Тимирязевская ул., д. 53/1. Телефон: (499)976-37-68, факс: (499)976-43-26.