МУК 4.1.2910-11. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств Фосэтил алюминия в плодах огурца, томата и томатном соке методом капиллярной газожидкостной хроматографии. Методические указания
(утв. Роспотребнадзором 12.07.2011)
Примечание
Документ включен в Перечень методов (методик) определения остаточных количеств действующих веществ пестицидов в продукции (товарах), подлежащий государственному санитарно-эпидемиологическому надзору (контролю) на таможенной границе и таможенной территории Евразийского экономического союза (Решение Комиссии Таможенного союза от 28.05.2010 № 299). Документ введен в действие с 12 июля 2011 года.
Утверждаю
Руководитель Федеральной
службы по надзору в сфере
защиты прав потребителей
и благополучия человека,
Главный государственный
санитарный врач
Российской Федерации
Г. Г. Онищенко
12 июля 2011 года
4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ
ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ ФОСЭТИЛ АЛЮМИНИЯ В ПЛОДАХ ОГУРЦА, ТОМАТА И ТОМАТНОМ СОКЕ МЕТОДОМ КАПИЛЛЯРНОЙ ГАЗОЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ
с момента утверждения
1. Разработаны Российским государственным аграрным университетом МСХА им. К.А. Тимирязева, Учебно-научным консультационным центром «Агроэкология пестицидов и агрохимикатов» Минсельхоза России.
2. Рекомендованы к утверждению Комиссией по санитарно-эпидемиологическому нормированию при Федеральной службе по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (протокол от 02.06.2011 № 1).
3. Утверждены Руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г.Г. Онищенко 12 июля 2011 г.
4. Введены в действие с момента утверждения.
Свидетельство о метрологической аттестации № 0070.06.12.10 от 08.12.2010.
Настоящие методические указания устанавливают метод газожидкостной хроматографии для определения уровня остаточных количеств Фосэтила алюминия в плодах огурцов, томатов и томатном соке в диапазоне 2,0 — 16,0 мг/кг.
Название действующего вещества по ИЮПАК: этилгидрофосфонат алюминия.
Структурная формула (не приводится).
Эмпирическая формула: C H AlO P . 6 18 9 3
Химически чистый Фосэтил алюминий представляет собой бесцветный порошок.
Давление паров (при 25 °C): < 0,013 мПа.
Температура плавления: > 200 °C.
Коэффициент распределения н-октанол-вода: K log P = 2,7. ow ow Растворимость (г/куб. дм, при 20 °C): вода - 120; метанол - 920;
ацетон — 13; этилацетат — 5; ацетонитрил — 5; н-гексан — 5.
Фосэтил алюминий гидролизуется в сильно кислых или щелочных условиях (DT = 5 дней при pH 3 и 13,4 дня при pH 13).
50
В биологически активных почвах в аэробных и анаэробных условиях Фосэтил алюминий быстро разлагается со средним значением DT от 20 мин. до 1,5 ч. 50
Краткая токсикологическая характеристика: Фосэтил алюминия относится к веществам малоопасным по острой пероральной (ЛД для крыс более
50
2000 мг/кг) и дермальной токсичности (ЛД для крыс более 2000 мг/кг), но к 50 умеренно опасным веществам острой ингаляционной токсичности (ЛД для крыс 50 более 5100 мг/куб. м воздуха). ЛД для рыб более 100 мг/куб. дм 50 (экспозиция 96 ч). Вещество не токсично для птиц, пчел и дождевых червей.
Область применения: Фосэтил алюминий — системный фунгицид защитного и искореняющего действия. Высокоэффективен против возбудителей болезней плодовых, овощных и декоративных культур и виноградной лозы, вызываемых грибами из класса Phycomycetes. Вещество ингибирует прорастание спор или подавляет развитие мицелия и споруляцию. Проявляет активность против некоторых бактериальных патогенов растений.
Применяется в России в качестве фунгицида на огурцах открытого грунта, луке и винограде с нормой расхода до 2 кг д.в./га и трехкратной обработкой за сезон.
В России для Фосэтил алюминия установлены следующие гигиенические нормативы: ДСД — 3,0 мг/кг массы человека; МДУ в плодах огурца — 0,5 мг/кг.
МДУ Фосэтила алюминия (в импортируемой продукции): плоды огурца — 75 мг/кг, плоды томата — 100 мг/кг.
1. Метрологическая характеристика метода
При соблюдении всех регламентированных условий проведения анализа в точном соответствии с данной методикой погрешность (и ее составляющие) результатов измерений при доверительной вероятности P = 0,95 не превышает значений, приведенных в табл. 1, для соответствующих диапазонов концентраций.
МЕТРОЛОГИЧЕСКИЕ ПАРАМЕТРЫ ДЛЯ ФОСЭТИЛ АЛЮМИНИЯ
| Анализируемый объект | Диапазон определяемых концентраций, мг/кг | Показатель точности (граница относительной погрешности), +/- дельта, %, P = 0,95 | Стандартное отклонение повторяемости, сигма , % r | Предел повторяемости, r, % | Предел воспроизводимости, R, % |
|---|---|---|---|---|---|
| Плоды огурца | 2,0 — 16,0 | 25 | 4,72 | 13,12 | 15,62 |
| Плоды томата | 2,0 — 16,0 | 25 | 3,41 | 9,48 | 11,29 |
| Томатный сок | 2,0 — 16,0 | 25 | 5,01 | 13,93 | 16,58 |
Полнота извлечения вещества, стандартное отклонение, доверительные интервалы среднего результата для полного диапазона концентраций (n = 20) приведены в табл. 2.
ДЛЯ ФОСЭТИЛ АЛЮМИНИЯ
| Анализируемый объект | Метрологические параметры, P = 0,95, n = 20 | ||||
| Предел обнаружения, мг/кг | Диапазон определяемых концентраций, мг/кг | Полнота извлечения вещества, % | Стандартное отклонение, S, % | Доверительный интервал среднего результата, +/-, % | |
| Плоды огурца | 2,0 | 2,0 — 16,0 | 82,63 | 4,44 | 1,63 |
| Плоды томата | 2,0 | 2,0 — 16,0 | 82,34 | 3,37 | 1,28 |
| Томатный сок | 2,0 | 2,0 — 16,0 | 83,97 | 3,78 | 1,52 |
Метод основан на определении Фосэтила алюминия методом капиллярной газожидкостной хроматографии с использованием термоионного детектора после его экстракции из образцов 1%-м водным раствором серной кислотой и последующего получения его метилового производного.
Идентификация проводится по времени удерживания, а количественное определение — методом абсолютной калибровки.
В предлагаемых условиях анализа метод специфичен. Специфичность обеспечивается подбором капиллярной колонки и условий программирования температуры.
устройства и материалы
3.1 Средства измерений
Весы аналитические «OHAUS», EP 114 с наибольшим пределом взвешивания до 110 г и дискретностью 0,0001 г, класс точности по ГОСТ 24104-1 — специальный (I)
Весы лабораторные общего назначения с наибольшим пределом взвешивания до 600 г и пределом допустимой погрешности +/- 0,038 г «ACCULAB» V600, соответствуют классу точности по ГОСТ 24104-1 — средний (III)
Колбы мерные на 10, 25, 50, 100, 500 и 1000 куб. см ГОСТ 1770-74
Микрошприц для газовой хроматографии «Hamilton, 1700», объем 10 куб. мм, фирма «SUPELCO», кат. № 20972
Пипетки мерные на 1,0; 2,0; 5,0 и 10 куб. см ГОСТ 29227-91
Хроматограф газовый «Кристалл 5000.1» с термоионным детектором (ТИД) с пределом детектирования по фосфору в Паратион-метиле -14 3 х 10 г/куб. см и приспособлениями для капиллярной колонки. Номер в государственном реестре средств измерений 14516-95
Цилиндры мерные на 10, 25 и 50 куб. см ГОСТ 1770-74
Допускается использование средств измерения с аналогичными или лучшими характеристиками.
3.2 Реактивы
Фосэтил алюминий, аналитический стандарт с содержанием действующего вещества не менее 96,2%, чист. ГСО 7734
Вода бидистиллированная (бидистиллят), деионизированная или перегнанная над KMnO ГОСТ 6709-72 4
Гелий, очищенный марки «А» ТУ 51-940-80
Калий гидроокись, ч.д.а. ГОСТ 24363-80
Калий марганцовокислый, ч.д.а. ГОСТ 20490-75
Карбамид (мочевина), ч.д.а. ГОСТ 6691-77
Кислота серная, х.ч. ГОСТ 4204-77
Метиламин гидрохлорид, ч., CAS 593-51-1, фирма «Acros», кат. № 15678
Натрия нитрит, ч.д.а. ГОСТ 4197-74
Спирт изопропиловый, ч. ГОСТ 9805-84
Эфир диэтиловый, ФС 42-3643-98
Допускается использование реактивов иных производителей с аналогичной или более высокой квалификацией.
3.3 Вспомогательные устройства и материалы
Банки с крышками для экстракции на 250 куб. см, полипропилен, кат. № 3120-0250, фирма «NALGENE»
Вата медицинская гигроскопическая хлопковая нестерильная ГОСТ 5556-81
Воронки лабораторные стеклянные ГОСТ 25336-82
Испаритель ротационный Rota vapor R 110 Buchi с водяной баней B-480, фирма «Buchi»
Колбы конические плоскодонные на 50, 100, 250 и 1000 куб. см ГОСТ 25336-82
Колбы круглодонные со шлифом (концентраторы) на 100 и 4000 куб. см ТС ТУ 92-891.029-91
Колба с тубусом с взаимозаменяемыми конусами (Бунзена) ГОСТ 8682-93
Колонка хроматографическая капиллярная кварцевая Rtx-225 (50% цианопропилметил и 50% фенилметил полисилоксан), длина 15 м, внутренний диаметр 0,25 мм, толщина пленки 0,25 мкм, фирма «RESTEK»
Насос водоструйный ГОСТ 25336-82
Насос диафрагменный FT.19, фирма «KNF Neu Laboport»
Палочки стеклянные ТУ 9464-001-52876351-2000
Стаканы стеклянные термостойкие объемом 100 — 2000 куб. см ГОСТ 25336-82
Установка для перегонки растворителей с круглодонной колбой объемом 4000 куб. см и приемной конической колбой объемом 1000 куб. см
Фильтры бумажные «красная лента» ТУ-6-09-1678-86
Холодильник спиралевидный с внутренним охлаждением обратимый ГОСТ 25336-82
Центрифуга MPW-350e с набором полипропиленовых банок емкостью 200 куб. см
Эксикатор вакуумный ГОСТ 25336-82
Допускается применение хроматографических колонок и другого оборудования с аналогичными или лучшими техническими характеристиками.
4.1. При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007, требования электробезопасности при работе с электроустановками по ГОСТ 12.1.019, а также требования, изложенные в технической документации на жидкостный хроматограф.
4.2. Помещение должно соответствовать требованиям пожаробезопасности по ГОСТ 12.1.004 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009. Содержание вредных веществ в воздухе не должно превышать норм, установленных ГН 2.2.5.1313-03 «Предельно допустимые концентрации (ПДК) вредных веществ в воздухе рабочей зоны». Организация обучения работников безопасности труда — по ГОСТ 12.0.004.
5. Требования к квалификации операторов
К выполнению измерений и обработке их результатов допускаются специалисты, имеющие высшее или специальное химическое образование, опыт работы в химической лаборатории, прошедшие обучение и владеющие техникой проведения анализа, освоившие метод анализа в процессе тренировки и уложившиеся в нормативы контроля при проведении процедуры контроля погрешности анализа.
При выполнении измерений соблюдают следующие условия:
- процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха (20 +/- 5) °C, относительной влажности не более 80% и нормальном атмосферном давлении;
- выполнение измерений на жидкостном хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.
7. Подготовка к выполнению измерений
Выполнению измерений предшествуют следующие операции: очистка растворителей (при необходимости), приготовление растворов, кондиционирование хроматографической колонки, установление градуировочной характеристики.
7.1 Подготовка органических растворителей
7.1.1 Очистка диэтилового эфира
Диэтиловый эфир, содержащий воду, предварительно осушают, добавляя в него гранулированный безводный хлористый кальций из расчета не менее 100 г/куб. дм. Выдерживают его над осушителем в течение 5 — 6 ч. Затем эфир сливают с осушителя в круглодонную колбу со шлифом объемом 4000 куб. см аппарата для перегонки растворителей.
Диэтиловый эфир перегоняют при температуре 34,6 °C, а фракции, отогнанные при температуре ниже и выше 34,6 °C, отбрасывают.
7.1.2 Приготовление бидистиллированной воды
Дистиллят помещают в круглодонную колбу со шлифом объемом 4000 куб. см от аппарата для перегонки растворителей, добавляют к нему марганцовокислый калий из расчета 1 г/куб. дм и кипятят в течение 6 ч.
Собирают фракции, отогнанные при температуре 100,0 °C, а фракции, отогнанные при температуре ниже и выше 100,0 °C, отбрасывают.
7.2 Приготовление растворов для проведения анализа
7.2.1 Приготовление рабочих растворов
7.2.1.1 Приготовление 1%-го водного раствора серной кислоты.
Раствор готовят из химически чистой концентрированной серной кислоты с плотностью 1,83 путем разведения 10,5 куб. см кислоты очищенной водой в мерной колбе на 1000 куб. см.
7.2.1.2. Приготовление смеси изопропилового спирта с 1%-м раствором серной кислоты.
Раствор готовят в конической колбе на 100 куб. см, смешивая 90 куб. см изопропилового спирта и 10 куб. см 1%-й серной кислоты (соотношение 9:1 по объему).
7.2.1.3 Приготовление 40%-го раствора гидроокиси калия.
В мерную колбу на 100 куб. см переносят 40 г гидроокиси калия, куда предварительно наливают около 40 куб. см дистиллированной воды. Затем раствор перемешивают и после охлаждения доводят водой объем в колбе до метки (при приготовлении раствора соблюдать осторожность и работать под тягой).
7.2.1.4 Получение N-нитрозо-N-метилмочевины.
При отсутствии коммерческого препарата нитрозометилмочевины осуществляют его синтез.
При получении нитрозометилмочевины соблюдать осторожность и обязательно работать под тягой.
В круглодонную колбу на шлифе вместимостью 1000 куб. см, снабженную обратным холодильником, помещают 80 г метиламина гидрохлорида и 300 г мочевины, растворяют содержимое в 400 куб. см воды и нагревают 3 ч с обратным холодильником. После этого добавляют в раствор 110 г нитрита натрия, охлаждают в бане со льдом до -10 °C и медленно при перемешивании вливают в смесь 600 г льда и 60 куб. см концентрированной серной кислоты, помещенную в стакан вместимостью 2000 куб. см, охлаждаемый снаружи смесью льда с поваренной солью. Выпавшее нитрозосоединение немедленно отфильтровывают на воронке Бюхнера, хорошо отсасывают под вакуумом и промывают на фильтре ледяной водой.
ВНИМАНИЕ! Нитрозометилмочевину хранят в темной склянке в холодильнике, т.к. под действием света и тепла она может взорваться.
Продукт без дальнейшей очистки может быть использован для получения диазометана.
7.2.1.5 Получение раствора диазометана (метилирующей смеси).
ВНИМАНИЕ! Диазометан взрывоопасен и очень ядовит. При получении раствора диазометана, а также при работе с этим раствором необходимо соблюдать осторожность и обязательно работать под тягой.
В коническую колбу на 100 куб. см вносят 20 куб. см 40%-го раствора гидроокиси калия и 50 куб. см диэтилового эфира, колбу помещают в баню со льдом и охлаждают до температуры 2 — 5 °C. Затем, постоянно встряхивая колбу, небольшими порциями прибавляют 5 г нитрозометилмочевины. Через 10 мин. после внесения последней порции сливают эфирный раствор диазометана и сушат его 3 ч над небольшим количеством твердого едкого калия.
Полученный раствор диазометана годен в течение 1 — 2 суток при хранении в холодильнике в неплотно закрытом сосуде.
7.2.2 Приготовление градуировочных растворов
7.2.2.1. Стандартный раствор № 1 с концентрацией Фосэтила алюминия 1,0 мг/куб. см.
Взвешивают 50 мг Фосэтила алюминия в мерной колбе объемом 50 куб. см. Навеску растворяют в очищенной воде и доводят объем до метки водой. Полученный стандартный раствор № 1 используется для приготовления стандартных растворов для хроматографического исследования и установления градуировочной характеристики. Стандартный раствор № 1 хранится в холодильнике в течение 120 суток.
7.2.2.2. Стандартный раствор № 2 с концентрацией Фосэтила алюминия 100 мкг/куб. см.
Из стандартного раствора № 1 отбирают пипеткой 10 куб. см, помещают в мерную колбу объемом 100 куб. см и доводят объем до метки смесью изопропилового спирта с 1%-м раствором серной кислоты (соотношение 9:1 по объему). Стандартный раствор № 2 используют для приготовления градуировочных растворов метилового производного Фосэтила алюминия и для внесения в контрольные образцы. Стандартный раствор № 2 хранится в холодильнике в течение 1 месяца.
7.2.2.3. Приготовление градуировочных растворов метилового производного Фосэтила алюминия.
Градуировочные растворы метилового производного Фосэтила алюминия используют для построения градуировочного графика. Растворы готовят непосредственно перед использованием.
7.2.2.3.1. Стандартный раствор № 3 с концентрацией метилового производного Фосэтила алюминия 2 мкг/куб. см.
В концентратор объемом 50 куб. см помещают 1 куб. см стандартного раствора № 2, добавляют 7 куб. см метилирующей смеси (п. 7.2.1.5), закрывают концентратор пробкой и перемешивают его содержимое. Выдерживают в течение 15 мин., периодически перемешивая содержимое концентратора. По истечении времени к смеси в концентраторе приливают 1 куб. см изопропилового спирта и выпаривают содержимое на роторном вакуумном испарителе при температуре 30 °C до объема 2 — 3 куб. см. Раствор метилового производного Фосэтила алюминия переносят в мерную колбу вместимостью 50 куб. см. Концентратор обмывают тремя порциями по 10 куб. см изопропилового спирта, которые также переносят в мерную колбу. Объем раствора в колбе доводят до метки изопропиловым спиртом, перемешивают и получают градуировочный раствор № 3 с концентрацией 2 мкг/куб. см (по Фосэтил алюминию). Раствор хранят в холодильнике в течение суток.
7.2.2.3.2. Стандартный раствор № 4 с концентрацией метилового производного Фосэтила алюминия 1 мкг/куб. см.
Из стандартного раствора № 3 отбирают пипеткой 5 куб. см, помещают в мерную колбу объемом 10 куб. см, доводят объем до метки изопропиловым спиртом и получают градуировочный раствор № 4 с концентрацией 1 мкг/куб. см (по Фосэтил алюминию). Раствор хранят в холодильнике в течение суток.
7.2.2.3.3. Стандартный раствор № 5 с концентрацией метилового производного Фосэтила алюминия 0,5 мкг/куб. см.
Из стандартного раствора № 4 отбирают пипеткой 5 куб. см, помещают в мерную колбу объемом 10 куб. см, доводят объем до метки изопропиловым спиртом и получают градуировочный раствор № 5 с концентрацией 0,5 мкг/куб. см (по Фосэтил алюминию). Раствор хранят в холодильнике в течение суток.
7.2.2.3.4. Стандартный раствор № 6 с концентрацией метилового производного Фосэтила алюминия 0,25 мкг/куб. см.
Из стандартного раствора № 5 отбирают пипеткой 5 куб. см, помещают в мерную колбу объемом 10 куб. см, доводят объем до метки изопропиловым спиртом и получают градуировочный раствор № 6 с концентрацией 0,25 мкг/куб. см (по Фосэтил алюминию). Раствор хранят в холодильнике в течение суток.
7.3 Установление градуировочной характеристики
Градуировочную характеристику, выражающую зависимость площади (высоты) пика от концентрации Фосэтила алюминия (метилового производного) в растворе (мкг/куб. см), устанавливают методом абсолютной калибровки по 4 растворам для градуировки с концентрацией 0,25; 0,5; 1,0; 2,0 мкг/куб. см.
В испаритель хроматографа вводят по 1 куб. мм каждого градуировочного раствора и анализируют в условиях хроматографирования, указанных в п. 9.3. Осуществляют не менее 5 параллельных измерений.
Отбор проб производится в соответствии с «Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов», № 2051-79 от 21.08.79, а также в соответствии с ГОСТ 1726-85 «Огурцы свежие, реализуемые в розничной торговой сети», ГОСТ Р 51810-2001 «Томаты свежие, реализуемые в розничной торговой сети», ГОСТ Р 52183-2003 «Консервы. Соки овощные. Сок томатный. ТУ».
Пробы плодов томата и огурца хранят в холодильнике в полиэтиленовых пакетах при температуре 0 — 4 °C не более суток. Для длительного хранения пробы замораживают и хранят в полиэтиленовой таре в морозильнике при температуре -18 °C до 2 лет.
Пробы томатного сока хранят в стеклянной герметично закрытой таре в холодильнике при температуре 4 °C не более 10 суток.
9. Подготовка проб и выполнение измерений
9.1 Плоды огурца и томата
9.1.1 Экстракция
Образец измельченных плодов томата или огурца массой 50 г помещают в стакан гомогенизатора вместимостью 500 куб. см, добавляют 50 куб. см 1%-го раствора серной кислоты и гомогенизируют в течение 1 — 2 мин. Суспензию переносят в полипропиленовую банку для экстракции и центрифугирования объемом 200 куб. см и центрифугируют в течение 15 мин. при скорости 4000 об./мин. Экстракт фильтруют через вату в мерный цилиндр объемом 100 куб. см и доводят объем экстракта до 100 куб. см раствором 1%-й серной кислоты. Отбирают пипеткой 5 куб. см фильтрата, помещают в мерный цилиндр объемом 50 куб. см и доводят объем до 50 куб. см изопропиловым спиртом. Полученный раствор отфильтровывают через фильтр «красная лента» в коническую колбу объемом 50 куб. см. Отбирают из колбы пипеткой 10 куб. см раствора, помещают в концентратор объемом 100 куб. см и выпаривают до объема 1 — 2 куб. см на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 35 °C.
9.1.2 Метилирование
К остатку в концентраторе, полученному по п. 9.1.1, приливают 10 куб. см метилирующей смеси, плотно закрывают крышкой, перемешивают и оставляют на 15 мин., периодически перемешивая содержимое в концентраторе. По истечении времени в концентратор добавляют 1 куб. см изопропилового спирта и выпаривают до объема 2 — 2,5 куб. см на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °C. Остаток в концентраторе переносят в мерный цилиндр объемом 10 куб. см. Исходный концентратор обмывают 1 куб. см изопропилового спирта, который также переносят в цилиндр. Объем раствора в цилиндре доводят до 4 куб. см изопропиловым спиртом.
В испаритель хроматографа вводят 1 куб. мм полученного раствора.
9.2 Томатный сок
Навеску томатного сока массой 25 г помещают в мерный цилиндр вместимостью 50 куб. см и доводят объем до 50 куб. см раствором 1%-й серной кислоты. Отбирают пипеткой 5 куб. см полученного раствора, помещают в мерный цилиндр объемом 50 куб. см и доводят объем до 50 куб. см изопропиловым спиртом. Полученный раствор отфильтровывают через фильтр «красная лента» в коническую колбу объемом 50 куб. см. Отбирают из колбы пипеткой 10 куб. см раствора, помещают в концентратор объемом 100 куб. см и выпаривают до объема 1 — 2 куб. см на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 35 °C.
Далее проводят метилирование, как указано в п. 9.1.2.
В испаритель хроматографа вводят 1 куб. мм полученного после метилирования раствора.
9.3 Условия хроматографирования
Хроматограф газовый «Кристалл 5000.1» с термоионным детектором (ТИД) с -14 пределом детектирования по фосфору в Паратион-метиле 3 x 10 г/куб. см и приспособлениями для капиллярной колонки.
Колонка хроматографическая капиллярная кварцевая Rtx-225 (50% цианопропилметил и 50% фенилметил полисилоксан), длина 15 м, внутренний диаметр 0,25 мм, толщина пленки 0,25 мкм, фирма «RESTEK».
Температура термостата колонки программированная. Начальная температура — 80 °С, выдержка 3 мин., нагрев колонки по 10 градусов в минуту до температуры 120 °C, а затем по 25 градусов в минуту до 260 °C.
Температура испарителя — 230 °C, температура детектора — 300 °C.
Газ 1 — гелий (газ-носитель), давление на входе — 50 кПа, линейная скорость — 29,143 см/с, давление на выходе — 101,3 кПа; поток через колонку — 0,915 куб. см/мин.; мертвое время — 0,86 мин.
Газ 2 — гелий, режим — Split less, деление потока — 1:40 (сброс пробы), начало сброса — 1 мин., длительность сброса — 2 мин., расход во время анализа — 20 куб. см/мин.
Регулятор давления гелия — РРГ-10; регулятор расхода гелия — РРГ-11.
Газ 4 — азот (поддув в детектор), расход во время анализа — 30 куб. см/мин.
Газ 5 — водород, расход во время анализа — 10 куб. см/мин.
Газ 6 — воздух, расход — 200 куб. см/мин.
Продувка детектора азотом после анализа — по 50 куб. см/мин. в течение 3 мин. при температуре колонки 260 °C. Расход газов: Г1 — 50; Г2 — 40; Г4 — 40 куб. см/мин.
Абсолютное время удерживания Фосэтила алюминия: 5,42 мин. +/- 2%.
Объем вводимой пробы: 1 куб. мм.
Линейный диапазон детектирования сохраняется в пределах 0,25 — 2,0 нг.
Для обработки результатов хроматографического анализа используется программное обеспечение химического анализа «Хроматэк Аналитик», версия 1.20.
Содержание Фосэтил алюминия в пробах рассчитывают методом абсолютной калибровки по формуле:
S x A x V
пр
X = ------------- x P, 100 x S x m ст
X — содержание Фосэтил алюминия в пробе, мг/кг;
S — высота (площадь) пика стандарта, мВ; ст
S — высота (площадь) пика образца, мВ; пр
A — концентрация стандартного раствора, мкг/куб. см;
V — объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, куб. см;
m — масса анализируемого образца, г;
P — содержание Фосэтил алюминия в аналитическом стандарте, %.
параллельных определений
За результат анализа принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений, расхождение между которыми не превышает предела повторяемости (1):
2 x |X - X | x 100
1 2
------------------- <= r, (1)
(X + X )
1 2
X , X - результаты параллельных определений, мг/кг; 1 2
r — значение предела повторяемости (табл. 1), при этом r = 2,8 x сигма . r
При невыполнении условия (1) выясняют причины превышения предела повторяемости, устраняют их и вновь выполняют анализ.
Результат анализа представляют в виде:
_
(X +/- ДЕЛЬТА) при вероятности P = 0,95,
X — среднее арифметическое результатов определений, признанных приемлемыми, мг/кг;
ДЕЛЬТА — граница абсолютной погрешности, мг/кг;
_
дельта x X
где дельта — граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций, табл. 1), %.
В случае если содержание компонента менее нижней границы диапазона определяемых концентраций, результат анализа представляют в виде:
«содержание вещества в пробе менее 2,0 мг/кг» <*>.
13. Контроль качества результатов измерений
Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с ГОСТ Р ИСО 5725-1-6-2002 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений».
13.1. Стабильность результатов измерений контролируют перед проведением измерений, анализируя один из градуировочных растворов.
13.2. Плановый внутрилабораторный оперативный контроль процедуры выполнения анализа проводится методом добавок.
Величина добавки C должна удовлетворять условию: д
C = ДЕЛЬТА _ + ДЕЛЬТА _ , д л,X л,X' где +/- ДЕЛЬТА _ (+/- ДЕЛЬТА _ ) - характеристика погрешности л,X л,X' (абсолютная погрешность) результатов анализа, соответствующая содержанию компонента в испытуемом образце (расчетному значению содержания компонента
в образце с добавкой соответственно), мг/кг, при этом:
где ДЕЛЬТА — граница абсолютной погрешности, мг/кг;
_
дельта x X
где дельта — граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций, табл. 1), %.
Результат контроля процедуры K рассчитывают по формуле: к
_ _ K = X' - X - C , к д
_
где X', X, C — среднее арифметическое параллельных определений д (признанных приемлемыми по п. 11), содержания компонента в образце с добавкой, испытуемом образце и концентрация добавки, соответственно, мг/кг.
Норматив контроля K рассчитывают по формуле:
_____________________
/ 2 2 K = \/ДЕЛЬТА _ + ДЕЛЬТА _. л,X' л,X Проводят сопоставление результата контроля процедуры (K ) с нормативом
к
контроля (K).
Если результат контроля процедуры удовлетворяет условию:
процедуру анализа признают удовлетворительной.
При невыполнении условия (2) процедуру контроля повторяют. При повторном невыполнении условия (2) выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и принимают меры по их устранению.
13.3. Проверка приемлемости результатов измерений, полученных в условиях воспроизводимости.
Расхождение между результатами измерений, выполненных в двух разных лабораториях, не должно превышать предела воспроизводимости (R):
2 x |X - X | x 100
1 2
------------------- <= R, (3)
(X + X )
1 2
X , X - результаты измерений в двух разных лабораториях, мг/кг; 1 2
R — предел воспроизводимости (в соответствии с диапазоном концентраций,
табл. 1), %.
Российский государственный аграрный университет — МСХА имени К.А. Тимирязева.
Учебно-научный консультационный центр «Агроэкология пестицидов и агрохимикатов». 127550, Москва, Тимирязевская ул., д. 53/1. Телефон: (499)976-37-68, факс: (499)976-43-26.