МУК 4.1.2393-08. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств прохлораза в ботве и корнеплодах свеклы методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания
(утв. Роспотребнадзором 02.07.2008)
Примечание
Документ включен в Перечень методов (методик) определения остаточных количеств действующих веществ пестицидов в продукции (товарах), подлежащий государственному санитарно-эпидемиологическому надзору (контролю) на таможенной границе и таможенной территории Евразийского экономического союза (Решение Комиссии Таможенного союза от 28.05.2010 № 299). Документ включен в Перечень основных действующих нормативно-методических документов по методам лабораторного и инструментального контроля в системе государственного санитарно-эпидемиологического нормирования (Письмо Роспотребнадзора от 02.12.2008 № 01/14262-8-32). Документ введен в действие с 20 сентября 2008 года.
Утверждаю
Руководитель Федеральной
службы по надзору в сфере
защиты прав потребителей
и благополучия человека,
Главный государственный
санитарный врач
Российской Федерации
Г. Г. Онищенко
2 июля 2008 года
4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ
ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ ПРОХЛОРАЗА В БОТВЕ И КОРНЕПЛОДАХ СВЕКЛЫ МЕТОДОМ ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ
МУК 4.1.2393-08
20 сентября 2008 года
1. Разработаны Всероссийским НИИ защиты растений.
2. Рекомендованы к утверждению Комиссией по санитарно-гигиеническому нормированию Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (протокол от 3 апреля 2008 г. № 1).
3. Утверждены Руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г.Г. Онищенко 2 июля 2008 г.
4. Введены в действие с 20 сентября 2008 г.
1. Вводная часть
Действующее вещество: прохлораз.
Структурная формула (не приводится).
N-пропил-N-[2-(2,4,6-трихлорфенокси)этил]имидазол-1-карбоксамид (IUPAC).
N-пропил-N-[2-(2,4,6-трихлорфенокси)этил]-1H-имидазол-1-карбоксамид (CAS).
Брутто формула: C H ClN O . 15 16 3 2 Химически чистый прохлораз представляет собой бесцветные кристаллы без запаха с температурой плавления 46,5 - 49,3 °C, давлением паров -1 -2 1,5 x 10 мПа (25 °C), 9 x 10 мПа (20 °C). Коэффициент распределения в системе н-октанол-вода K lg P = 4,12.
ow
Растворимость в воде 34,4 мг/куб. дм (25 °C).
Хорошо растворим в хлороформе, диэтиловом эфире, толуоле.
Растворимость в органических растворителях (г/куб. см, 25 °C): н-гексан — 0,0075; ксилол — 2,5; ацетон — 3,5. Стабилен в водных растворах.
Не разлагается в течение 30 дней при pH 5 - 7 (22 °C). Разлагается в концентрированных кислотах и щелочах, в присутствии солнечного света и при
длительном нагревании (200 °C).
Группа токсичности по ВОЗ — III. LD для крыс 1600 — 2400 мг/кг, для 50 мышей 2400 мг/кг. Острая кожная активность для крыс LD > 2100 мг/кг, для 50 кроликов LD > 3000 мг/кг. Не ирритант для кожи, слабый — для глаз 50 (кролики). Ингаляционная активность LC (4 часа) > 2,16 мг/куб. дм. 50 Острая оральная токсичность для уток LD > 1954 мг/кг. Низкая токсичность 50 для пчел. LD для пчел 60 мкг/особь (орально). Низкая токсичность для 50 других полезных беспозвоночных.
Область применения: фунгицид с защитным и искореняющим действием, применяется против широкого диапазона заболеваний, повреждающих полевые культуры, фрукты и овощи.
Гигиенические нормативы для прохлораза в России: ОДК в почве — 0,3 мг/кг; ПДК в воде водоемов — 0,05 мг/куб. дм; ОБУВ в воздухе рабочей зоны — 0,1 мг/куб. м; МДУ для зерна хлебных злаков — 0,05 мг/кг. Для свеклы нормативы в РФ не установлены.
2. Методика определения прохлораза в ботве и корнеплодах свеклы методом ВЭЖХ
2.1. Основные положения
2.1.1. Принцип метода
Настоящий документ устанавливает методику определения остаточных количеств прохлораза в ботве свеклы в диапазоне концентраций 0,02 — 0,2 мг/кг, в корнеплодах свеклы — 0,01 — 0,1 мг/кг.
Методика основана на определении прохлораза методом ВЭЖХ с использованием УФ детектора после его извлечения из образцов органическим растворителем с последующей очисткой перераспределением между двумя несмешивающимися растворителями и на колонке с флорисилом.
2.1.2. Метрологическая характеристика метода
При соблюдении всех регламентированных условий проведения анализа в точном соответствии с данной методикой погрешность (и ее составляющие) результатов измерений при доверительной вероятности P = 0,95 не превышает значений, приведенных в таблице 1, для соответствующих диапазонов концентраций.
| Объект анализа | Диапазон определяемых концентраций, мг/кг | Показатель точности (граница относительной погрешности), +/- дельта, % | Стандартное отклонение повторяемости, сигма , % r | Предел повторяемости, r, % | Предел воспроизводимости, R, % |
|---|---|---|---|---|---|
| Ботва | 0,02 — 0,1 | 50 | 5,6 | 15,7 | 22,0 |
| Ботва | 0,1 — 0,2 | 25 | 4,3 | 12,0 | 16,8 |
| Корнеплоды | 0,01 — 0,1 | 50 | 5,5 | 15,3 | 21,4 |
Полнота извлечения вещества, стандартное отклонение, доверительный интервал среднего результата для полного диапазона концентраций (n = 20) приведены в таблице 2.
| Анализируемый объект | Предел обнаружения, мг/кг | Диапазон определяемых концентраций, мг/кг | Среднее значение определения, % | Стандартное отклонение, S, % | Доверительный интервал среднего результата, +/-, % |
|---|---|---|---|---|---|
| Ботва | 0,02 | 0,02 — 0,2 | 81,4 | 6,7 | 5,9 |
| Корнеплоды | 0,01 | 0,01 — 0,1 | 82,3 | 6,5 | 5,7 |
2.1.3. Избирательность метода
Избирательность метода обеспечивается сочетанием условий подготовки проб и хроматографического анализа.
2.2. Реактивы и материалы
Ацетон, ос.ч., ТУ 6-09-3513-86.
Ацетонитрил для ВЭЖХ, «В-230НМ» или х.ч., ТУ 6-09-3534-87.
Бумажные фильтры «красная лента», ТУ 6.091678-86.
Вода бидистиллированная деионизированная, ГОСТ 6709-79.
Диэтиловый эфир, ч., ОСТ 84-2006-88.
Железо (II) сернокислое, х.ч., ГОСТ 4148-78.
Калий углекислый, х.ч., ГОСТ 4221-76.
Калия перманганат, ГОСТ 20490-75.
Кальция хлорид, х.ч., ГОСТ 4161-77.
Кислота серная, х.ч., ГОСТ 4204-77.
Натрий углекислый кислый, ГОСТ 4201-79.
Натрий сернокислый безводный, ч., ГОСТ 4166-76, свежепрокаленный.
Натрий хлористый, ч.д.а., ГОСТ 4233-77.
Натрия гидроксид, х.ч., ГОСТ 4328-77.
н-Гексан, х.ч., ТУ 2631-003-05807999-98, свежеперегнанный.
Подвижная фаза для ВЭЖХ: смесь ацетонитрил-вода (65:35, по объему).
Флорисил 150 — 250 мю m (Merck, Германия).
Фосфора пентоксид, ч., МРТУ 6-09-5759-69.
Элюент № 1 для колоночной хроматографии: смесь гексан-ацетон (90:10, по объему).
Элюент № 2 для колоночной хроматографии: смесь гексан-ацетон (70:30, по объему).
Прохлораз, аналитический стандарт с содержанием д.в. 98%.
2.3. Приборы и посуда
Жидкостный хроматограф «Альянс» фирмы «Waters» с УФ детектором (Waters 2487) с дегазатором и автоматическим пробоотборником или аналогичный.
Колонка SunFire C-18 (250 x 4,6) мм, 5 мкм (Waters, USA) или аналогичная.
Предколонка SunFire C-18 (Waters, USA).
Весы аналитические ВЛА-200, ГОСТ 24104-2001 или аналогичные.
Гомогенизатор, МРТУ 42-1505-63.
Установка ультразвуковая «Серьга», ТУ 3.836.008.
Ротационный испаритель вакуумный ИР-1М, ТУ 25-11-917-74 или аналогичный.
Насос водоструйный, МРТУ 42861-64.
Колбы плоскодонные на шлифах КШ500 29/32 ТС, ГОСТ 10384-72.
Колбы круглодонные на шлифах КШ50 29-32 ТС, ГОСТ 10384-72.
Воронки лабораторные В-75-110, ГОСТ 25336-82.
Воронки делительные ВД-3-250, ГОСТ 8613-75.
Цилиндры мерные на 100, 250 и 1000 куб. см, ГОСТ 1774-74.
Колбы мерные на 25, 50, 100 и 1000 куб. см, ГОСТ 1770-74.
Пипетки на 1, 2, 5, 10 куб. см, ГОСТ 22292-74.
Колонки стеклянные (25 x 1) см.
2.4. Отбор проб
Отбор образцов свеклы для анализа проводят в соответствии с ГОСТ 1722-85 «Свекла столовая свежая, заготовляемая и поставляемая». Для длительного хранения аналитические пробы свеклы (ботва и корнеплоды) помещают в морозильную камеру с температурой -18 °C и хранят в закрытой полиэтиленовой таре.
2.5. Подготовка к определению
2.5.1. Подготовка и очистка реактивов и растворителей
Органические растворители при необходимости перед началом работы очищают, сушат и перегоняют в соответствии с типовыми методиками. Гексан встряхивают с небольшими порциями концентрированной серной кислоты до прекращения окрашивания свежей порции кислоты, затем промывают водой, 2%-ным раствором гидроксида натрия и снова водой, после чего его сушат над гидроксидом натрия и перегоняют. Диэтиловый эфир (1 л) предварительно встряхивают с 20 куб. см свежеприготовленного раствора железного купороса (30 г сульфата железа в 55 куб. см воды с добавлением 1,5 г концентрированной серной кислоты). Затем диэтиловый эфир последовательно промывают 0,5%-ным раствором перманганата калия, 5%-ным раствором гидроксида натрия и водой, после чего сушат над хлористым кальцием и перегоняют. Ацетон перегоняют над перманганатом калия и поташом (на 1 куб. дм ацетона 10 г KMnO и 2 г K CO ). Ацетонитрил сушат над 4 2 3 пентоксидом фосфора и перегоняют; отогнанный растворитель повторно
перегоняют над углекислым калием.
2.5.2. Кондиционирование колонки
Перед началом анализа колонку (SunFire C-18) кондиционируют в потоке подвижной фазы (1 куб. см/мин.) до стабилизации нулевой линии в течение 1 — 2 часов.
2.5.3. Приготовление растворов
Для получения 50%-го водного ацетона в колбе емкостью 1 л смешивают 500 куб. см ацетона с 500 куб. см дистиллированной воды.
Для получения 75%-го водного ацетона в колбе емкостью 1 л смешивают 750 куб. см ацетона с 250 куб. см дистиллированной воды.
Для приготовления насыщенного раствора хлорида натрия 380 г NaCl растворяют при нагревании в 1 л дистиллированной воды, полученный раствор фильтруют через бумажный фильтр «красная лента» и охлаждают до комнатной температуры.
Для приготовления 1 М раствора NaHCO 78 г бикарбоната натрия помещают 3 в мерную колбу емкостью 1000 куб. см, растворяют при перемешивании в 600 куб. см дистиллированной воды и доводят объем раствора до метки.
Для приготовления 1 М раствора NaOH 40 г едкого натра помещают в мерную колбу емкостью 1000 куб. см, растворяют при перемешивании в 600 куб. см дистиллированной воды и доводят объем раствора до метки.
Для приготовления 0,025 М раствора NaOH 25 куб. см 1 М раствора едкого натра помещают в мерную колбу емкостью 1000 куб. см и доводят объем раствора до метки дистиллированной водой.
Для приготовления подвижной фазы смешивают ацетонитрил с бидистиллированной водой в соотношении 65:35 по объему, используя мерные цилиндры.
Для приготовления элюента № 1 в колбе на 1000 куб. см смешивают 900 куб. см н-гексана и 100 куб. см ацетона.
Для приготовления элюента № 2 в колбе на 1000 куб. см смешивают 700 куб. см н-гексана и 300 куб. см ацетона.
Приготовление стандартного и градуировочных растворов:
Берут точную навеску прохлораза (50 мг), переносят в мерную колбу на 100 куб. см, растворяют навеску в ацетонитриле и доводят до метки (стандартный раствор с концентрацией 0,5 мг/куб. см). Градуировочные растворы с концентрациями 0,1, 0,2, 0,5, 1,0 и 2,0 мкг/куб. см готовят методом последовательного разбавления по объему, используя раствор подвижной фазы: смесь ацетонитрил-вода (65:35, по объему).
Стандартный раствор можно хранить в холодильнике при температуре 0 — 4 °C в течение 1 месяца, градуировочные растворы — в течение суток.
При изучении полноты определения прохлораза в ботве и корнеплодах свеклы используют ацетонитрильные растворы вещества. Растворы внесения с концентрациями 0,1 и 1,0 мкг/куб. см готовят из стандартного раствора с концентрацией 0,5 мг/куб. см методом последовательного разбавления по объему ацетонитрилом.
2.5.4. Построение градуировочного графика
Для построения градуировочного графика (площадь пика — концентрация прохлораза в растворе) в хроматограф вводят по 50 куб. мм градуировочных растворов (не менее 3-х параллельных измерений для каждой концентрации, не менее 4-х точек по диапазону измеряемых концентраций); измеряют площади пиков и строят график зависимости среднего значения площади пика от концентрации прохлораза в градуировочном растворе (мкг/куб. см).
2.5.5. Подготовка колонки с флорисилом для очистки экстракта
В нижнюю часть стеклянной колонки длиной 25 см и внутренним диаметром 1 см помещают тампон из стекловаты, закрывают кран и вносят суспензию 5 г флорисила в 30 куб. см смеси гексан-ацетон (90:10, по объему). Дают растворителю стечь до верхнего края сорбента. Колонку последовательно промывают 30 куб. см элюента № 2 и 30 куб. см элюента № 1 со скоростью 1 — 2 капли в секунду, после чего она готова к работе.
2.5.6. Проверка хроматографического поведения прохлораза на колонке с флорисилом
В круглодонную колбу емкостью 10 куб. см отбирают 0,1 куб. см стандартного раствора прохлораза с концентрацией 10 мкг/куб. см. Отдувают растворитель током теплого воздуха (температура не выше 40 °C), остаток растворяют в 5 куб. см элюента № 1 и наносят на колонку. Колбу обмывают еще 5 куб. см элюента № 1 и также вносят на колонку. Промывают колонку 70 куб. см элюента № 1, который отбрасывают, затем 100 куб. см элюента № 2 со скоростью 1 — 2 капли в секунду. Отбирают фракции по 10 куб. см каждая, выпаривают, остаток растворяют в 2 куб. см подвижной фазы для ВЭЖХ (п. 2.5.3) и анализируют на содержание прохлораза (п. 2.6.3).
Фракции, содержащие прохлораз, объединяют, выпаривают досуха, остаток растворяют в 2 куб. см подвижной фазы для ВЭЖХ и вновь анализируют (п. 2.6.3). Рассчитывают содержание прохлораза в элюате, определяя полноту вымывания вещества из колонки и необходимый для этого объем элюента.
Примечание: параметры удерживания прохлораза и сопутствующих экстрактивных веществ могут меняться при использовании новой партии сорбента и растворителей.
2.6. Проведение определения
2.6.1. Извлечение прохлораза из проб ботвы и корнеплодов свеклы
Гомогенизированные пробы корнеплодов массой 20 г или ботвы массой 10 г помещают в коническую колбу емкостью 250 куб. см и экстрагируют прохлораз из корнеплодов и ботвы 50 куб. см 75%-ного водного ацетона на ультразвуковой установке в течение 15 мин. Суспензию фильтруют через бумажный фильтр «красная лента». Осадок с фильтра количественно переносят назад в колбу.
Экстракцию проводят еще дважды. Объединенный экстракт упаривают на ротационном испарителе при температуре бани не выше 40 °C до полного удаления ацетона (объем 35 — 40 куб. см). Объем экстракта доводят до 70 куб. см добавлением насыщенного раствора хлорида натрия. К полученному раствору добавляют 10 мл 1 М раствора бикарбоната натрия. Раствор помещают в делительную воронку объемом 250 куб. см и экстрагируют прохлораз диэтиловым эфиром трижды порциями по 50 куб. см, встряхивая смесь каждый раз в течение 2 — 3 мин. и собирая верхний эфирный слой <*>. Объединенный экстракт промывают в делительной воронке 0,025 М раствором NaOH дважды порциями по 25 куб. см, встряхивая смесь каждый раз в течение 2 — 3 мин. и собирая верхний эфирный слой. Экстракт пропускают через слой безводного сульфата натрия (2 г), осушитель промывают 10 — 15 куб. см диэтилового эфира. После этого экстракт выпаривают досуха на ротационном испарителе при температуре не выше 40 °C. Дальнейшую очистку экстракта проводят по пункту 2.6.2.
<*> В случае образования сравнительно стойких эмульсий для сокращения времени расслоения можно добавить в делительную воронку на стадии переэкстракции из водного раствора в диэтиловый эфир насыщенный раствор хлорида натрия (15 — 20 куб. см).
Внимание! Отделение водного слоя следует производить только после полного расслоения жидкостей в делительной воронке.
2.6.2. Очистка на колонке с флорисилом
Сухой остаток в колбе, полученный при выпаривании очищенных по п. 2.6.1 экстрактов, количественно переносят двумя порциями по 5 куб. см смеси гексан-ацетон (90:10, по объему) в кондиционированную хроматографическую колонку (п. 2.5.5). Промывают колонку 70 куб. см элюента № 1, который отбрасывают. Прохлораз элюируют 60 куб. см элюента № 2, собирая элюат в грушевидную колбу емкостью 250 куб. см. Раствор выпаривают досуха на вакуумном ротационном испарителе при температуре не выше 40 °C.
Сухой остаток растворяют в 2 куб. см подвижной фазы для ВЭЖХ и 50 куб. мм раствора вводят в жидкостный хроматограф.
2.6.3. Условия хроматографирования
Жидкостный хроматограф «Альянс» фирмы «Waters» с УФ детектором (Waters 2487), снабженный дегазатором, автоматическим пробоотборником и термостатом колонки, или другой с аналогичными характеристиками.
Колонка SunFire C18 (250 x 4,6) мм, зернение 5 мкм (Waters, USA) или Nova Pac Phenyl (150 x 3,9) мм, зернение 4 мкм (Waters, USA).
Температура колонки 30 +/- 1 °C.
Предколонка SunFire C18 (или Nova Pac Phenyl) для защиты аналитической колонки.
Подвижная фаза: ацетонитрил-вода в объемном соотношении 65:35 (или 45:55 при использовании колонки Nova Pac Phenyl).
Скорость потока элюента: 1 куб. см/мин.
Объем вводимой пробы 50 куб. мм.
Время удерживания прохлораза 11,5 +/- 0,2 мин. (на колонке SunFire C18) или 11,4 +/- 0,2 мин. (на колонке Nova Pac Phenyl).
Линейный диапазон детектирования 0,1 — 2,00 мкг/куб. см.
2.6.4. Обработка результатов анализа
Количественное определение проводят методом абсолютной калибровки, содержание прохлораза в ботве и корнеплодах свеклы (X, мг/кг) вычисляют по формуле:
S x C x V
2
где: S — площадь пика прохлораза в стандартном растворе, мм; 1 S — площадь пика прохлораза в анализируемой пробе, мм; 2 V — объем пробы, подготовленной для хроматографического анализа, куб. см; P — навеска анализируемого образца, г; C — концентрация стандартного раствора прохлораза, мкг/куб. см.
Содержание остаточных количеств прохлораза в анализируемом образце вычисляют как среднее из 2-х параллельных определений.
Образцы, дающие пики большие, чем стандартный раствор прохлораза 2 мкг/куб. см, разбавляют подвижной фазой для ВЭЖХ.
3. Проверка приемлемости результатов параллельных определений
За результат анализа принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений, расхождение между которыми не превышает предела повторяемости (1):
2 x |X - X | x 100
1 2
------------------- <= r, (1)
(X + X )
1 2
X , X - результаты параллельных определений, мг/кг;
1 2
r - значение предела повторяемости (r = 2,8 сигма ).
r
При невыполнении условия (1) выясняют причины превышения предела повторяемости, устраняют их и вновь выполняют анализ.
4. Оформление результатов
Результат анализа представляют в виде:
_
(X +/- ДЕЛЬТА), мг/кг, при вероятности P = 0,95,
где: _ X — среднее арифметическое результатов определений, признанных приемлемыми, мг/кг;
ДЕЛЬТА — граница абсолютной погрешности, мг/кг:
дельта — граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций), %.
В случае, если содержание компонента менее нижней границы диапазона определяемых концентраций, результат анализа представляют в виде:
«содержание вещества в пробе „менее нижней границы определения“ (например: менее 0,005 мг/кг*, где * — 0,005 мг/кг — предел обнаружения).»
5. Контроль качества результатов измерений
Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с ГОСТ Р ИСО 5725-1-6-2002 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений».
5.1. Стабильность результатов измерений контролируют перед проведением измерений, анализируя один из градуировочных растворов.
5.2. Плановый внутрилабораторный оперативный контроль процедуры выполнения анализа проводится с применением метода добавок.
Величина добавки С должна удовлетворять условию: д
С = ДЕЛЬТА + ДЕЛЬТА , д л,X л,X' где +/- ДЕЛЬТА (+/- ДЕЛЬТА ) - характеристика погрешности л,X л,X' (абсолютная погрешность) результатов анализа, соответствующая содержанию компонента в испытуемом образце (расчетному значению содержания компонента
в образце с добавкой, соответственно), мг/кг; при этом:
где ДЕЛЬТА — граница абсолютной погрешности, мг/кг:
дельта — граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций), %.
Результат контроля процедуры К рассчитывают по формуле: к
К = X' - X - С , к д где X', X, С - среднее арифметическое результатов параллельных
д
определений (признанных приемлемыми по п. 4) содержания компонента в образце с добавкой, испытуемом образце, концентрация добавки, соответственно, мг/кг.
Норматив контроля К рассчитывают по формуле:
_____________________
/ 2 2 К = \/ДЕЛЬТА + ДЕЛЬТА . л,X' л,X Проводят сопоставление результата контроля процедуры (К ) с нормативом
к
контроля (К).
Если результат контроля процедуры удовлетворяет условию:
процедуру анализа признают удовлетворительной.
При невыполнении условия (2) процедуру контроля повторяют. При повторном невыполнении условия (2) выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и принимают меры к их устранению.
5.3 Проверка приемлемости результатов измерений, полученных в условиях воспроизводимости:
Расхождение между результатами измерений, выполненных в двух разных лабораториях, не должно превышать предела воспроизводимости (R):
2 x |X - X | x 100
1 2
------------------- <= R, (3)
(X + X )
1 2
X , X - результаты измерений в двух разных лабораториях, мг/кг;
1 2
R - предел воспроизводимости (в соответствии с диапазоном
концентраций), %.
6. Требования техники безопасности
При проведении работы необходимо соблюдать требования безопасности, установленные для работ с токсичными, едкими, легковоспламеняющимися веществами (ГОСТ 12.1005-88).
При выполнении измерений с использованием жидкостного хроматографа и работе с электроустановками соблюдать правила электробезопасности в соответствии с ГОСТ 12.1.019-79 и инструкциями по эксплуатации приборов.
Помещение лаборатории должно соответствовать требованиям пожарной безопасности по ГОСТ 12.1.004-91.
7. Требования к квалификации оператора
Измерения в соответствии с настоящей методикой может выполнять специалист-химик, имеющий опыт работы методом высокоэффективной жидкостной хроматографии, ознакомленный с руководством по эксплуатации хроматографа, освоивший данную методику и подтвердивший экспериментально соответствие получаемых результатов нормативам контроля погрешности измерений по п. 5.