МУК 4.1.2208-07. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Измерение концентраций дифеноконазола в атмосферном воздухе населенных мест методом капиллярной газожидкостной хроматографии. Методические указания
(утв. Роспотребнадзором 25.05.2007)
Примечание
Документ включен в Перечень основных действующих нормативно-методических документов по методам лабораторного и инструментального контроля в системе государственного санитарно-эпидемиологического нормирования (Письмо Роспотребнадзора от 02.12.2008 № 01/14262-8-32). Документ введен в действие с 15 августа 2007 года.
Утверждаю
Руководитель Федеральной
службы по надзору в сфере
защиты прав потребителей
и благополучия человека,
Главный государственный
санитарный врач
Российской Федерации
Г. Г. Онищенко
25 мая 2007 года
4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ
ИЗМЕРЕНИЕ КОНЦЕНТРАЦИЙ ДИФЕНОКОНАЗОЛА В АТМОСФЕРНОМ ВОЗДУХЕ НАСЕЛЕННЫХ МЕСТ МЕТОДОМ КАПИЛЛЯРНОЙ ГАЗОЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ
15 августа 2007 года
1. Разработаны Федеральным научным центром гигиены им. Ф.Ф. Эрисмана.
2. Рекомендованы к утверждению комиссией по санитарно-эпидемиологическому нормированию при Федеральной службе по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (протокол № 1 от 29.03.2007).
3. Утверждены Руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г.Г. Онищенко 25 мая 2007 г.
Настоящие Методические указания устанавливают метод капиллярной газожидкостной хроматографии для измерения массовой концентрации дифеноконазола в атмосферном воздухе в диапазоне 0,008 — 0,08 мг/куб. м.
Дифеноконазол — действующее вещество препарата РАЕК, КЭ (250 г/л), производитель ЗАО «Фирма „Август“, Россия.»
Цис,транс-3-хлор-4-[4-метил-2-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил-метил)-1,3 диоксолан-2-ил-]фенил 4-хлорфениловый эфир (IUPAC).
Структурная формула (не приводится).
C H Cl N O . 19 17 2 3 3
Кристаллическое вещество белого или бледно-бежевого цвета. Температура -5
плавления - 78,6 °С. Давление паров при 25 °С: 3,3 х 10 мПа. Коэффициент распределения н-октанол/вода: K log P = 4,2. Растворимость в органических
ow
растворителях при 25 °С (г/куб. дм): ацетон - 610; этанол - 330; толуол - 490; н-октанол - 95; н-гексан - 3,4. Растворимость в воде при 25 °С
(г/куб. дм): 0,015.
Дифеноконазол стабилен на воздухе при температуре до 150 °С, а также в водных растворах.
Агрегатное состояние в воздушной среде — аэрозоль.
Краткая токсикологическая характеристика:
Острая пероральная токсичность (LD ) для крыс — 1453 мг/кг, для мышей 50
2000 мг/кг; острая дермальная токсичность (LD ) для кроликов > 2010 50 мг/кг; острая ингаляционная токсичность (LK ) для крыс >= 3300 мг/куб. м. 50
Дифеноконазол — системный фунгицид, рекомендуемый к применению для борьбы с болезнями яблони, груши, свеклы и зерновых культур.
ОБУВ в атмосферном воздухе населенных мест — 0,01 мг/куб. м.
Методика обеспечивает выполнение измерений с погрешностью, не превышающей +/- 25%, при доверительной вероятности 0,95.
Измерения концентраций дифеноконазола выполняют методом капиллярной газожидкостной хроматографии (ГЖХ) с детектором электронного захвата ионов (ДЭЗ).
Концентрирование дифеноконазола из воздуха осуществляют на фильтр «синяя лента», экстракцию с фильтров проводят ацетоном.
Нижний предел измерения в анализируемом объеме пробы — 0,5 нг. Средняя полнота извлечения с фильтров — 94,5%.
Определению не мешают компоненты препаративной формы.
реактивы и материалы
3.1 Средства измерений
Газовый хроматограф "Кристалл-2000М", ТУ 9443-001-12908609-95 снабженный детектором электронного захвата Номер Госреестра 14516-95
ионов с пределом детектирования по Линдану -14 5 х 10 г/с, предназначенный для работы с капиллярной колонкой
Весы аналитические ВЛА-200 ГОСТ 24104
Микрошприц типа МШ-1М вместимостью 1 куб. мм ТУ 2.833.105 Пробоотборное устройство ОП-442ТЦ (ЗАО Номер Госреестра 18860-05
«ОПТЭК», г. Санкт-Петербург)
Барометр-анероид М-67 ТУ 2504-1797-75 Термометр лабораторный шкальный ТЛ-2, цена ТУ 215-73Е
деления 1 °С, пределы измерения 0 — 55 °С
Колбы мерные вместимостью 100 куб. см ГОСТ 1770
Пипетки градуированные 2-го класса точности ГОСТ 29227
вместимостью 1,0, 2,0, 5,0, 10 куб. см
Допускается использование средств измерения с аналогичными или лучшими характеристиками.
3.2 Реактивы
Дифеноконазол, аналитический стандарт с содержанием ГСО 7656-99 действующего вещества 99,4% (НИИХСЗР, НПК «Блок-1»)
Азот особой чистоты, из баллона ГОСТ 9293
Спирт этиловый ректификованный ГОСТ Р 51652 или ГОСТ 18300
Допускается использование реактивов иных производителей с аналогичной или более высокой квалификацией.
3.3 Вспомогательные устройства, материалы
Аппарат для встряхивания типа АВУ-6с ТУ 64-1-2851-78 Бумажные фильтры "синяя лента" обеззоленные ТУ 6-09-2678-77
Воронки конусные диаметром 40 — 45 мм ГОСТ 25336
Колбы грушевидные на шлифе вместимостью ГОСТ 9737 150 куб. см
Стаканы химические с носиком вместимостью 150 куб. см ГОСТ 25336
Ректификационная колонна с числом теоретических тарелок не менее 50
Ротационный вакуумный испаритель В-169 фирмы
Установка для перегонки растворителей
Хроматографическая колонка капиллярная ZB-5 длиной 15 м, внутренним диаметром 0,53 мм, толщина пленки сорбента 0,5 мкм
Допускается применение другого оборудования с аналогичными или лучшими техническими характеристиками.
4.1. При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007, требования по электробезопасности при работе с электроустановками по ГОСТ 12.1.019, а также требования, изложенные в технической документации на газовый хроматограф.
4.2. Помещение должно соответствовать требованиям пожаробезопасности по ГОСТ 12.1.004 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009. Содержание вредных веществ в воздухе на должно превышать норм, установленных ГН 2.2.5.1313-03 «Предельно допустимые концентрации (ПДК) вредных веществ в воздухе рабочей зоны». Организация обучения работников безопасности труда — по ГОСТ 12.0.004.
К выполнению измерений допускают специалистов, имеющих квалификацию не ниже лаборанта-исследователя, с опытом работы на газовом хроматографе.
К проведению пробоподготовки допускают оператора с квалификацией «лаборант», имеющего опыт работы в химической лаборатории.
При выполнении измерений соблюдают следующие условия:
- процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха (20 +/-5) °С и относительной влажности не более 80%;
- выполнение измерений на газовом хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.
Выполнению измерений предшествуют следующие операции: очистка ацетона (при необходимости), приготовление градуировочных растворов, установление градуировочной характеристики, подготовка фильтров для отбора проб, отбор проб.
7.1 Очистка ацетона
Ацетон перегоняют над небольшим количеством KMnO и прокаленным 4 карбонатом калия или подвергают ректификационной перегонке на колонне с числом теоретических тарелок не менее 50.
7.2 Приготовление градуировочных растворов
и растворов внесения
7.2.1. Исходный раствор дифеноконазола для градуировки (концентрация 1 мг/куб. см). В мерную колбу вместимостью 100 куб. см помещают 0,1 г дифеноконазола, растворяют в 40 — 50 куб. см ацетона, доводят ацетоном до метки, тщательно перемешивают.
Раствор хранят в холодильнике при температуре 4 — 6 °С в течение 3-х месяцев.
7.2.2. Раствор № 1 дифеноконазола для градуировки (концентрация 50 мкг/куб. см). В мерную колбу вместимостью 100 куб. см помещают 5 куб. см исходного раствора дифеноконазола с концентрацией 1 мг/куб. см (п. 7.2.1), разбавляют ацетоном до метки.
Градуировочный раствор № 1 хранят в холодильнике при температуре 4 — 6 °С в течение 3-х месяцев.
7.2.3. Рабочие растворы № 2 — 5 дифеноконазола для градуировки и внесения (концентрация 0,5 — 5,0 мкг/куб. см).
В 4 мерные колбы вместимостью 100 куб. см помещают по 1,0, 2,0, 4,0 и 10,0 куб. см градуировочного раствора № 1 дифеноконазола с концентрацией 50 мкг/куб. см (п. 7.2.2), доводят до метки ацетоном, тщательно перемешивают, получают рабочие растворы № 2 — 5 с концентрацией дифеноконазола 0,5, 1,0, 2,0 и 5,0 мкг/куб. см соответственно.
Растворы хранят в холодильнике при температуре 4 — 6 °С в течение 20-ти дней.
Эти растворы дифеноконазола используют для приготовления проб с внесением при оценке полноты извлечения действующего вещества методом «внесено-найдено».
7.3 Установление градуированной характеристики
Градуировочную характеристику, выражающую зависимость площади пика (мВ х сек.) от концентрации дифеноконазола в растворе (мкг/куб. см), устанавливают методом абсолютной калибровки по 4-м растворам для градуировки.
В испаритель хроматографа вводят по 1 куб. мм каждого градуировочного раствора и анализируют в условиях хроматографирования по п. 7.3.1. Осуществляют не менее 3-х параллельных измерений. Устанавливают площадь пика действующего вещества.
Градуировочный график проверяют перед проведением измерений, анализируя один из градуировочных растворов. Если значения площадей отличаются более чем на 20% от данных, заложенных в градуировочную характеристику, ее строят заново, используя свежеприготовленные рабочие растворы для градуировки.
7.3.1 Условия хроматографирования
Измерения выполняют при следующих режимных параметрах:
Газовый хроматограф «Кристалл-2000М», снабженный детектором электронного захвата ионов.
Колонка капиллярная ZB-5 длиной 15 м, внутренним диаметром 0,53 мм, толщина пленки сорбента 0,5 мкм.
Температура термостата колонки программированная. Начальная температура — 240 °С, нагрев колонки со скоростью 15 градусов в минуту до температуры 270 °С, выдержка — 8 мин.
Скорость газа 1 (азот): 40 см/сек., давление 20,901 кПа, поток 5,6468 куб. см/мин.
Газ 2: деление потока 1:2,003; сброс 11,31 куб. см/мин.
Хроматографируемый объем: 1 куб. мм.
Ориентировочное время выхода дифеноконазола: 4 мин. 50 сек.
Линейный диапазон детектирования: 0,5 — 5 нг.
7.4 Подготовка фильтров для отбора проб воздуха
Фильтры «синяя лента» промывают на воронке Бюхнера последовательно (по 3 раза) этанолом, затем ацетоном порциями 25 — 30 куб. см, сушат с помощью разряжения, создаваемого водоструйным насосом, затем на воздухе при комнатной температуре. До использования фильтры хранят в герметично закрытой стеклянной таре.
Отбор проб проводят в соответствии с требованиями ГОСТ 17.2.4.02-81 «ОПА. Общие требования к методам определения загрязняющих веществ в воздухе населенных мест». Воздух с объемным расходом 4 — 5 куб. дм/мин. аспирируют через бумажный фильтр «синяя лента», помещенный в фильтродержатель.
Для измерения концентрации дифеноконазола на уровне 0,8 ОБУВ для атмосферного воздуха необходимо отобрать 62,5 куб. дм воздуха. Срок хранения отобранных проб, помещенных в полиэтиленовые пакеты, в холодильнике при температуре +4 — 6 °С — 20 дней.
Экспонированный фильтр переносят в химический стакан вместимостью 150 куб. см, заливают 20 куб. см ацетона, помещают на встряхиватель на 10 минут. Растворитель сливают, фильтр еще дважды обрабатывают новыми порциями ацетона объемом 10 куб. см, выдерживая на встряхивателе по 5 минут.
Объединенный экстракт упаривают в грушевидной колбе на ротационном вакуумном испарителе при температуре бани не выше 40 °С почти досуха, оставшийся растворитель отдувают потоком теплого воздуха. Остаток растворяют в 1 куб. см ацетона и анализируют при условиях хроматографирования, указанных в п. 7.3.1.
Пробу вводят в испаритель хроматографа не менее двух раз. Устанавливают площадь пика действующего вещества, с помощью градуировочного графика определяют концентрацию дифеноконазола в хроматографируемом растворе.
Образцы, дающие пики, большие чем градуировочный раствор с концентрацией 5 мкг/куб. см, разбавляют ацетоном (не более чем в 50 раз).
Перед анализом опытных образцов проводят хроматографирование холостой (контрольной) пробы — экстракта неэкспонированного фильтра.
Массовую концентрацию дифеноконазола в пробе атмосферного воздуха Х, мг/куб. м, рассчитывают по формуле:
где:
С - концентрация дифеноконазола в хроматографируемом растворе, найденная по градуировочному графику в соответствии с величиной площади
хроматографического пика, мкг/куб. см; W — объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, куб. см; V — объем пробы воздуха, отобранный для анализа, приведенный к t нормальным условиям (давление 760 мм рт. ст., температура 0 °С), куб. дм.
V = 0,357 х Р х u t / (273 + Т), t
где:
Т - температура воздуха при отборе пробы (на входе в аспиратор), град.
С; Р — атмосферное давление при отборе пробы, мм рт. ст.; u — расход воздуха при отборе пробы, куб. дм/мин.; t — длительность отбора пробы, мин. _
За результат анализа (Х) принимается среднее арифметическое результатов _
двух параллельных определений Х и Х (Х = (Х + Х ) / 2), расхождение
1 2 1 2
между которыми не превышает значений норматива оперативного контроля
сходимости (d):
|Х - Х | <= d. 1 2
_
d = d х Х / 100, мг/куб. м, отн.
где:
d - норматив оперативного контроля сходимости, мг/куб. м;
d - норматив оперативного контроля сходимости, % (равен 16%).
отн.
Примечание: Идентификация и расчет концентрации дифеноконазола в пробах могут быть проведены с помощью компьютерной программы обработки хроматографических данных, включенной в аналитическую систему.
11. Оформление результатов измерений
Результат количественного анализа представляют в виде: _ - результат анализа Х в мг/куб. м, характеристика погрешности дельта, % (+/- 25%), Р = 0,95 или
_
Х +/- ДЕЛЬТА, мг/куб. м, Р = 0,95,
где ДЕЛЬТА - абсолютная погрешность.
_
дельта х Х
ДЕЛЬТА = ----------, мг/куб. м. 100
Результат измерений должен иметь тот же десятичный разряд, что и погрешность.
Если содержание вещества менее нижней границы диапазона определяемых концентраций, результат анализа представляют в виде:
«содержание дифеноконазола в пробе атмосферного воздуха — менее 0,008 мг/м» <*>.
<*> 0,008 мг/куб. м — предел обнаружениями отборе 62,5 куб. дм атмосферного воздуха.
12. Контроль погрешности измерений
Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с ГОСТ ИСО 5725-1-6.2002 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений».
ФГУН «Федеральный научный центр гигиены им. Ф.Ф. Эрисмана Роспотребнадзора».