МУК 4.1.1852-04. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Методические указания по определению остаточных количеств С-метолахлора в кочанах капусты методом капиллярной газожидкостной хроматографии

(утв. Минздравом России 05.03.2004)

5 марта 2004 года

4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ С-МЕТОЛАХЛОРА В КОЧАНАХ КАПУСТЫ МЕТОДОМ КАПИЛЛЯРНОЙ ГАЗОЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ

с 1 июля 2004 года

1. Методические указания подготовлены Федеральным научным центром гигиены им. Ф.Ф. Эрисмана при участии специалистов Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека.

2. Рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному санитарно-эпидемическому нормированию при Федеральной службе по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека.

3. Утверждены Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации, Первым заместителем Министра здравоохранения Российской Федерации, академиком РАМН Г.Г. Онищенко.

1. Вводная часть

1.1 Краткая характеристика препарата.

Фирма-производитель: ООО «СИНГЕНТА».

Торговое название: ДУАЛ ГОЛД, КЭ.

Действующее вещество (д.в.): С-метолахлор.

Название д.в. по номенклатуре ИЮПАК: 2-хлоро-6'-этил-N-(2-метокси-1-метил-этил)ацет-о-толуидид.

Структурная формула д.в.: (не приводится).

    Эмпирическая формула д.в.: C  H  ClNO .
                                15 22    2

Молекулярная масса д.в.: 283,8.

Химически чистое вещество: вязкая бесцветная жидкость.

Плотность д.в. при 20 °С: 1,12 г/куб. см.

Давление паров д.в. при 20 °С: 1,7 мПа.

Растворимость д.в. (г/л) при 20 °С: в воде — 0,53, хорошо растворим в бензоле, дихлорметане, гексане, метаноле, октаноле.

С-метолахлор устойчив к действию света и УФ-излучения, не разлагается до температуре +300 °С. Стабилен в водных растворах с рН 1 — 9. Период полураспада в почве 30 дней.

1.2 Краткая токсикологическая характеристика д.в.

Острая пероральная токсичность (LD ) для крыс — 2780 мг/кг. 50 Малотоксичен для диких животных, птиц и пчел. Кумулятивные свойства выражены слабо, слегка раздражает слизистые глаз.

Гигиенические нормативы: МДУ для капусты не установлен.

1.3 Область применения препарата.

ДУАЛ ГОЛД, КЭ — гербицид для борьбы с однолетними злаковыми и некоторыми двудольными сорными растениями.

2. Метод определения С-метолахлора в кочанах капусты с применением капиллярной газожидкостной хроматографии

2.1. Основные положения

2.1.1 Принцип метода

Метод основан на количественном определении С-метолахлора и включает извлечение остаточных количеств С-метолахлора из анализируемого объекта органическими растворителями с очисткой экстракта перераспределением в системе несмешивающихся растворителей. Количественное определение проводят методом внешнего стандарта с применением капиллярной газожидкостной хроматографии с использованием термоионного детектора (ТИД).

2.1.2 Избирательность метода

Метод специфичен в присутствии других применяемых в сельском хозяйстве пестицидов. Способ очистки экстрактов, а также применение селективного детектора и капиллярной колонки позволяет устранять влияние коэкстрактивных веществ на результаты анализа.

2.1.3 Метрологическая характеристика метода

Диапазоны измеряемых концентраций, пределы обнаружения и другие метрологические параметры метода представлены в таблицах 1 и 2.

Таблица 1

МЕТРОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА МЕТОДА

Таблица 2

ПОЛНОТА ОПРЕДЕЛЕНИЯ С-МЕТОЛАХЛОРА В МОДЕЛЬНЫХ ПРОБАХ (n = 6)

2.2. Реактивы, растворы, материалы

Аналитический стандарт С-метолахлора.

Азот газообразный высокой чистоты, ТУ 301-07-25-89.

Ацетон, осч, ТУ 2633-004-11291058-94.

Вода дистиллированная и перегнанная над KMnO и щелочью. 4

Водород газообразный высокой чистоты, ТУ 301-07-27-90.

н-Гексан, хч, ТУ 6-09-3375-78.

Гелий газообразный (сжатый) очищенный марки «А», ТУ 51-940-80.

Изооктан эталонный, ГОСТ 12433-83.

Калия гидроокись, чда, ГОСТ 24363-80.

Натрий сернокислый б/в (сульфат), чда, ГОСТ 4166-76.

Натрий хлористый, чда, ГОСТ 4233-77.

Фильтры бумажные красная лента, ТУ 2642-001-42624157-98.

Фильтры бумажные белая лента, ТУ 2642-001-42624157-98.

Фильтры бумажные синяя лента, ТУ 2642-001-42624157-98.

2.3. Приборы, аппаратура, посуда

Газовый хроматограф с ТИД и хроматографической капиллярной кварцевой колонкой длиной 15 м, внутренним диаметром 0,32 мм, с неподвижной фазой SE-52, толщина слоя — 0,4 мкм.

Аппарат для встряхивания, ТУ 64-1-1081-73, или аналогичный.

Весы аналитические типа ВЛА-200, ГОСТ 34104-80.

Весы лабораторные типа ВЛКТ-500, ГОСТ 24104-80.

Воронки делительные емкостью 500 мл, ГОСТ 25336-82.

Воронки для фильтрования стеклянные, ГОСТ 25336-82.

Индикаторная бумага универсальная, ТУ 6-09-1181-76.

Инструментарий для подготовки проб (пинцет анатомический, скальпель, ножницы и др.).

Колбы-концентраторы емкостью 150 и 250 мл, ГОСТ 25336-82.

Колбы плоскодонные емкостью 300 мл, ГОСТ 25336-82.

Колбы мерные со шлифом емкостью 25, 50, 100 мл, ГОСТ 1770-74.

Микрошприц МШ-10, ТУ 2-833-106.

Насос водоструйный, ГОСТ 10696-75.

Ротационный вакуумный испаритель типа ИР-1 или аналогичный.

Пипетки мерные емкостью 1, 2, 5 и 10 мл, ГОСТ 20292-74.

Пробирки мерные со шлифом емкостью 10 мл, ГОСТ 1770-74.

Стаканы химические емкостью 300 мл, ГОСТ 25336-82.

Установка для перегонки растворителей при атмосферном давлении.

Установка для упаривания растворителей в токе азота.

Установка ультразвуковая «Серьга» УЗМ002 или аналогичная.

Цилиндры мерные емкостью 100 и 250 мл, ГОСТ 1774-74.

Электроплитка, ГОСТ 14919-83.

2.4. Подготовка к определению

2.4.1 Подготовка и очистка растворителей

Перед началом работы рекомендуется проверить чистоту применяемых органических растворителей. Для этого 100 мл растворителя упаривают в ротационном вакуумном испарителе при температуре 40 °С до объема 1,0 мл и хроматографируют.

При обнаружении мешающих определению примесей очистку растворителей производят в соответствии с общепринятыми методиками.

2.4.2 Приготовление стандартных растворов

Основной раствор С-метолахлора с содержанием 100 мкг/мл готовят растворением в изооктане 0,01 г аналитического стандарта в мерной колбе емкостью 100 мл. Раствор хранят в холодильнике при температуре +4 — 6 °С не более трех месяцев.

Калибровочные стандартные растворы с концентрациями 2,0, 1,0, 0,5 и 0,25 мкг/мл готовят из основного стандартного раствора С-метолахлора соответствующим последовательным разбавлением изооктаном.

Стандартные растворы, используемые для проверки полноты определения, готовят из основного раствора разбавлением в ацетоне до соответствующих концентраций.

Растворы хранят в холодильнике при температуре +4 — 6 °С в течение одного месяца.

2.4.3 Построение калибровочного графика

Для построения калибровочного графика в инжектор хроматографа вводят по 2 мкл приготовленных по п. 2.4.2 растворов, содержащих С-метолахлор в концентрациях 0,25, 0,5, 1,0 и 2,0 мкг/мл. Осуществляют не менее трех параллельных измерений и находят среднее значение высоты (площади) хроматографического пика для каждой концентрации. Строят калибровочный график зависимости высоты (площади) хроматографического пика в мм (кв. мм) от концентрации С-метолахлора в рабочем растворе в мкг/мл.

2.5. Отбор, первичная обработка и хранение проб

Отбор проб для анализа проводят в соответствии с «Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, продуктов питания и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов», утвержденными 21.08.1979 № 2051-79.

После отбора проб из каждого кочана капусты по осевой линии вырезают 1/8 часть. Полученную среднюю пробу измельчают, перемешивают и выделяют аналитические пробы. Для длительного хранения аналитические пробы кочанов капусты помещают в морозильную камеру с температурой -18 °С и хранят в закрытой стеклянной или полиэтиленовой таре.

2.6. Проведение определения

2.6.1 Экстрагирование и очистка экстракта

Аналитическую пробу массой 25,0 +/- 0,1 г помещают в плоскодонную колбу емкостью 300 мл, добавляют 150 мл ацетона, слегка встряхивают и подвергают обработке ультразвуком в УЗ-бане в течение 10 минут. После этого экстракт фильтруют через бумажный фильтр красная лента в колбу-концентратор емкостью 250 мл. Содержимое колбы с пробой промывают 50 мл ацетона, который также фильтруют в колбу-концентратор.

При использовании аппарата для встряхивания в колбу с аналитической пробой вносят 150 мл ацетона и встряхивают в течение 60 минут. Экстракт фильтруют через бумажный фильтр красная лента в колбу-концентратор емкостью 250 мл. Содержимое колбы с пробой промывают 50 мл ацетона, который также фильтруют в колбу-концентратор.

Колбу-концентратор с объединенным экстрактом подсоединяют к ротационному вакуумному испарителю и упаривают ацетон до объема 10 — 20 мл при температуре +40 °С. В колбу-концентратор добавляют 200 мл бидистиллированной воды и 1,0 мл 10%-ного водного раствора гидроокиси калия. После этого раствор фильтруют через бумажный фильтр белая лента в делительную воронку емкостью 500 мл. К содержимому воронки добавляют 30 мл насыщенного водного раствора хлористого натрия, приливают 75 мл н-гексана и встряхивают содержимое воронки в течение 2-х минут. После полного разделения слоев нижний водный слой сливают в химический стакан емкостью 300 мл, а верхний гексановый слой фильтруют через фильтр синяя лента со слоем безводного сульфата натрия (толщина слоя ~ 1,0-1,5 см) в колбу-концентратор емкостью 150 мл. Экстрагирование и фильтрование повторяют с использованием 50 мл н-гексана. Нижний водный слой отбрасывают.

Колбу-концентратор с объединенным экстрактом подсоединяют к ротационному вакуумному испарителю и упаривают н-гексан до объема 3 — 5 мл при температуре +40 °С. Остаток экстракта переносят из колбы-концентратора в пробирку мерную со шлифом емкостью 10 мл, добавляют 1,0 мл изооктана и упаривают растворители до объема 1,0 мл в токе азота при температуре +40 °С. Количественное определение С-метолахлора проводят по п. 2.6.2.

2.6.2 Условия хроматографирования

Газовый хроматограф с ТИД.

Колонка хроматографическая капиллярная кварцевая длиной 15 м, внутренним диаметром 0,32 мм, с неподвижной фазой SE-52, толщина слоя — 0,4 мкм.

Температура колонки: программирование от 80 °С (1 мин.) до 280 °С (15 мин.) со скоростью 10 °С/мин.

Температура испарителя: 230 °С.

Температура детектора: 290 °С.

Расход газов: газа-носителя (гелий марки «А») — 1,5 куб. см/мин., водорода и воздуха к ТИД — 30 и 200 куб. см/мин. соответственно, дополнительного газа (гелий марки «А») к ТИД — 40 куб. см/мин.

Объем вводимой пробы: 2 мкл.

Время удерживания С-метолахлора: 15,6 +/- 0,1 мин.

Предел детектирования: 0,25 нг.

Линейный диапазон детектирования: 0,5 — 4,0 нг.

2.6.3 Обработка результатов анализа

Содержание С-метолахлора рассчитывают методом внешнего стандарта по формуле:

                               Н  х А х V
                                1

Х = ----------, Н х m 0

где:
Х - содержание С-метолахлора в пробе, мг/кг;
Н  - высота (площадь) пика анализируемого вещества, мм (кв. мм);
 1
Н  - высота (площадь) пика стандартного вещества, мм (кв. мм);
 0
А - концентрация стандартного рабочего раствора С-метолахлора, мкг/мл;
V - объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, мл;

m - масса (г) аналитической пробы.

3. Требования техники безопасности

Необходимо соблюдать общепринятые правила техники безопасности при работе с органическими растворителями, токсичными веществами, электронагревательными приборами и сжатыми газами, а также требования, изложенные в документации к приборам.

4. Контроль погрешности измерений

Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости результатов измерений осуществляется в соответствии с рекомендациями МИ 2335-95 «Внутренний контроль качества результатов количественного химического анализа».

5. Разработчики

ВНИИ защиты растений.