МУК 4.1.1457-03. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Методические указания по определению остаточных количеств крезоксим-метила в воде, почве, яблоках и его метаболита крезоксима в воде и почве газохроматографическим методом
(утв. Минздравом России 24.06.2003)
Примечание
Документ включен в Перечень методов (методик) определения остаточных количеств действующих веществ пестицидов в продукции (товарах), подлежащий государственному санитарно-эпидемиологическому надзору (контролю) на таможенной границе и таможенной территории Евразийского экономического союза (Решение Комиссии Таможенного союза от 28.05.2010 № 299). Документ включен в Перечень основных действующих нормативно-методических документов по методам лабораторного и инструментального контроля в системе государственного санитарно-эпидемиологического нормирования (Письмо Роспотребнадзора от 02.12.2008 № 01/14262-8-32). Документ введен в действие с 30 июня 2003 года.
Утверждаю
Главный государственный
санитарный врач
Российской Федерации,
Первый заместитель
Министра здравоохранения
Российской Федерации
Г. Г. Онищенко
24 июня 2003 года
4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ КРЕЗОКСИМ-МЕТИЛА В ВОДЕ, ПОЧВЕ, ЯБЛОКАХ И ЕГО МЕТАБОЛИТА КРЕЗОКСИМА В ВОДЕ И ПОЧВЕ ГАЗОХРОМАТОГРАФИЧЕСКИМ МЕТОДОМ
30 июня 2003 года
1. Методические указания подготовлены Федеральным научным центром гигиены им. Ф.Ф. Эрисмана (академик РАМН, проф. В.Н. Ракитский, проф. Т.В. Юдина), Российским государственным аграрным университетом — МСХА им. К.А. Тимирязева (проф. В.А. Калинин, к.х.н. А.В. Довгилевич) при участии Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (А.П. Веселов).
2. Методические указания рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека.
3. Утверждены Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации, Руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, академиком РАМН Г.Г. Онищенко 24 июня 2003 г.
1. Вводная часть
Фирма-производитель: БАСФ (Германия).
Действующее вещество: крезоксим-метил (BAS 490 F)
(Е)-метил-2-метоксиимино-2-/2-(о-толилокси-метил)фенил/ацетат (ИЮПАК).
Структурная формула (не приводится).
Эмпирическая формула: C P NO . 18 19 4
Белое кристаллическое вещество со слабым запахом.
Температура плавления: 97,2 — 101,7 °С. -3
Давление паров при 20 °С: 2,3 х 10 мПа. Растворимость (г/л) при 20 °С: вода - 0,002, гептан - 1,7, толуол - 111, дихлорметан - 939, метанол - 14,9, ацетон - 217,
этилацетат — 123.
Стабильность к гидролизу при 20 °С: DT = 34 дня (рН 7), 7 50 часов (рН 9).
В биологически активных почвах в аэробных условиях крезоксим-метил быстро разрушается: DT = менее 3 дней.
90
Краткая токсикологическая характеристика
Острая пероральная токсичность (LD ) для крыс — более 5000 50 мг/кг; острая дермальная токсичность (LD ) для крыс — более 2000 50 мг/кг.
Крезоксим-метил не оказывает раздражающего действия на кожу и слизистую оболочку глаз кролика, не обладает мутагенными и сенсибилизирующими свойствами.
Крезоксим-метил нетоксичен для пчел, дождевых червей, полезных насекомых и птиц. Гигиенические регламенты применения крезоксим-метила: ОДК в почве — 0,2 мг/кг; ПДК в воде водоемов — 0,01 мг/куб. дм; ОБУВ в воздухе рабочей зоны — 1 мг/куб. м; ВМДУ для яблок -0,1 мг/кг.
Основной метаболит крезоксим-метила: крезоксим (BF 490-1)
(Е)-2-метоксиимино-2-/2-(о-толилокси-метил)фенил/ацетат (ИЮПАК).
структурная формула (не приводится).
Эмпирическая формула C H NO . 17 17 4
Другие физико-химические и токсикологические характеристики основного метаболита крезоксим-метила отсутствуют.
В биологически активных почвах в аэробных условиях метаболит относительно стабилен: DT = 38 дней, DT = 127 дней. 50 90
Крезоксим-метил — синтетический фунгицид из класса стробилуринов, являющихся продуцентами гриба Strobilurus tenacellus. Вещество эффективно против широкого круга грибных патогенов хлебных злаков, овощных, кормовых, технических и плодовых культур. Обладает защитным, лечебным и искореняющим действием.
Проходит регистрационные испытания в России и странах СНГ под торговым названием Строби, ВДГ (500 г/кг) в яблоневых садах в качестве средства борьбы с возбудителями мучнистой росы, парши, пятнистостей и ржавчины с нормой расхода препарата 0,14 — 0,32 кг/га при трехкратной обработке (по розовому бутону, после опадения 75% лепестков и по мелким плодам).
Крезоксим-метил весьма лабильное вещество и при попадании в воду или почву быстро гидролизуется с образованием более устойчивого соединения — крезоксима (2-метоксиимино-2-/2-(о-толилокси-метил)фенил/ацетат или BF 490-1). В яблоках крезоксим-метил слабо метаболизируется.
2. Методика определения крезоксим-метила в воде, почве, яблоках и его метаболита крезоксима в воде и почве газохроматографическим методом
2.1. Основные положения
2.1.1 Принцип методики
Методика основана на газохроматографическом определении крезоксим-метила и крезоксима (в виде метилового эфира) на неподвижной фазе OV-17 с использованием детектора постоянной скорости рекомбинации ионов (ДПР) или электронзахватного детектора (ДЭЗ) после экстракции препарата из воды гексаном, из почвы и яблок водным ацетоном, а метаболита из подкисленной воды хлористым метиленом и из почвы водным ацетоном при ультразвуковой обработке, предварительной очистки экстрактов перераспределением в системе несмешивающихся растворителей, метилирования метаболита диазометаном до метилового эфира крезоксима и окончательной очистки экстрактов на колонке с силикагелем.
Количественное определение проводится методом абсолютной калибровки.
2.1.2 Избирательность метода
В предлагаемых условиях метод специфичен в присутствии пестицидов, применяемых при возделывании яблоневых садов.
2.1.3 Метрологическая характеристика метода
МЕТРОЛОГИЧЕСКИЕ ПАРАМЕТРЫ МЕТОДА
| Анализируемый объект | Предел обнаружения мг/куб. дм, мг/кг | Диапазон определяемых концентраций мг/куб. дм, мг/кг | Среднее значение определения, % | Стандартное отклонение, S | Относительное отклонение, DS | Доверительный интервал среднего, % |
| Крезоксим-метил | ||||||
| Вода | 0,001 | 0,001 — 0,01 | 88,9 | 4,7 | 2,1 | +/- 4,4 |
| Почва | 0,02 | 0,02 — 0,2 | 85,0 | 5,6 | 2,5 | +/- 5,2 |
| Яблоки | 0,04 | 0,04 — 0,4 | 83,1 | 5,9 | 2,6 | +/- 5,5 |
| Крезоксим | ||||||
| Вода | 0,0005 | 0,0005 — 0,005 | 91,7 | 6,8 | 3,0 | +/- 6,3 |
| Почва | 0,01 | 0,01 — 0,1 | 85,6 | 3,9 | 1,7 | +/- 3,6 |
2.2. Реактивы, растворы и материалы
Крезоксим-метил, аналитический стандарт с содержанием д.в. 99,9% (БАСФ, Германия).
Крезоксим (BF 490-1), аналитический стандарт с содержанием д.в. 99,3% (БАСФ, Германия).
Вода дистиллированная, ГОСТ 7602-72.
Калий углекислый, хч, ГОСТ 4221-76.
Калия гидроксид, ГОСТ 24363-80.
Калия перманганат, хч, ГОСТ 20490-75.
Кальция хлорид, хч, ГОСТ 4161-77.
Кислота серная, хч, ГОСТ 4204-77.
Кислота хлористоводородная, хч, ГОСТ 3118-77.
Натрия гидроксид, хч, ГОСТ 4328-77.
Натрия сульфат безводный, хч, ГОСТ 4166-76.
Натрий углекислый, хч, ГОСТ 83-63.
Натрия хлорид, хч, ГОСТ 4233-77.
N-метил-N-нитрозо-п-толуолсульфонамид (Мерк, Германия) или N-нитрозо-метилмочевина, ТУ 6-09-11-1643-82.
Спирт метиловый, хч, ГОСТ 6995-77.
Хлористый метилен, ГОСТ 12794-80.
Этилацетат, ГОСТ 22300-76.
Эфир диэтиловый, ГОСТ 6562-74.
Элюент № 1 для колоночной хроматографии: смесь гексан — этилацетат, 95:5, по объему.
Элюент № 2 для колоночной хроматографии: смесь гексан — этилацетат, 90:10, по объему.
Силикагель для адсорбционной хроматографии (Вельм, Германия) I степени активности или силикагель КСК (60 — 100 меш).
Целит 535 (2 — 15 мкм) /Серва, Германия/ или аналогичный.
Фильтры бумажные, синяя лента, ТУ 6-09-1678.
2.3. Приборы, аппаратура, посуда
Газовый хроматограф с детектором постоянной скорости рекомбинации ионов «Цвет-560» или хроматограф газовый с электронзахватным детектором «Кристалл 2000 М».
Колонка хроматографическая стеклянная, 2000 х 2 мм, неподвижная фаза — 3% OV-17 на Инертоне N-AW супер (0,16 — 0,20 мм).
Колонка хроматографическая стеклянная, 2000 х 2 мм, неподвижная фаза — 5% SE-30 на Инертоне N-AW-DMCS (0,16 — 0,20 мм).
Микрошприц емкостью 10 мкл МШ-10Ф по ТУ 64-1-2850.
Баня ультразвуковая, модель D-50, Branson Inst.Co., США, или другая аналогичного типа.
Весы аналитические типа ВЛР-200, ГОСТ 19401-74.
Водоструйный насос, ГОСТ 10696-75.
Встряхиватель механический, ТУ 64-1-1081-73.
Гомогенизатор, МРТУ 42-1505-63, или аналогичный.
Иономер ЭВ-74, ГОСТ 22261-76, или аналогичный.
Прибор для перегонки при атмосферном давлении.
Ротационный испаритель тип ИР-1М, ТУ 25-11-917-76.
Сито с диаметром отверстий 1 мм.
Баня водяная, ТУ 46-22-603-75.
Воронка Бюхнера, ГОСТ 0147-73.
Воронки делительные вместимостью 100, 250 и 500 мл, ГОСТ 25336-82.
Воронки для фильтрования стеклянные, ГОСТ 8613-75.
Колбы круглодонные на шлифе вместимостью 100, 250 и 500 мл, ГОСТ 9737-70.
Колбы конические с притертыми пробками вместимостью 250 мл, ГОСТ 25336-82.
Колбы мерные вместимостью 25, 50 и 100 мл, ГОСТ 1770-74.
Колбы грушевидные вместимостью 20 и 100 мл, ГОСТ 25336-82.
Пипетки мерные вместимостью 1, 2, 5 и 10 мл, ГОСТ 20292-74Е.
Пробирки градуированные с притертыми пробками вместимостью 5 и 10 мл, ГОСТ 10515-75.
Цилиндры мерные вместимостью 25, 50, 100, 250 и 500 мл, ГОСТ 1770-74.
2.4. Отбор проб
Отбор проб производится в соответствии с «Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, продуктов питания и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов» (N 2051-79 от 21.08.79).
Отобранные пробы почвы и яблок хранят в стеклянной или полиэтиленовой таре в холодильнике не более 3 дней. Для длительного хранения пробы почвы доводят до воздушно-сухого состояния и хранят в холодильнике; пробы яблок хранят до анализа в морозильной камере при температуре -18 °С. Пробы воды хранят при температуре не выше 4 °С в течение 3 дней, при температуре -18 °С в течение месяца.
Перед анализом сухую почву просеивают через сито с отверстиями диаметром 1 мм, а яблоки измельчают.
2.5. Подготовка к определению
2.5.1 Подготовка и очистка реактивов и растворителей
Органические растворители перед началом работы очищают, сушат и перегоняют в соответствии с типовыми методиками. Гексан и хлористый метилен встряхивают с небольшими порциями концентрированной серной кислоты до тех пор, пока свежая порция кислоты не перестанет окрашиваться. Затем растворители последовательно промывают водой, 2,5%-ным раствором гидроксида натрия и снова водой, после чего сушат над гидроксидом натрия и перегоняют.
Ацетон перегоняют над перманганатом калия и поташом (на 1 л ацетона 10 г KMnO и 2 г K CO ). 4 2 3
Этилацетат промывают равным объемом 5%-ного раствора углекислого натрия, сушат над хлористым кальцием и перегоняют.
Диэтиловый эфир (1 л) предварительно встряхивают с 20 мл свежеприготовленного раствора железного купороса (30 г сульфата железа в 55 мл воды с добавлением 1,5 г концентрированной серной кислоты). Затем диэтиловый эфир последовательно промывают 0,5%-ным раствором перманганата калия, 5%-ным раствором гидроксида натрия и водой, после чего сушат над хлористым кальцием и перегоняют.
2.5.2 Подготовка и кондиционирование колонки
Готовую насадку (3% OV-17 на Инертоне N-AW супер) засыпают в стеклянную колонку, уплотняют под вакуумом, колонку устанавливают в термостат хроматографа, не подсоединяя к детектору, и стабилизируют в токе азота при температуре 270 °С в течение 8 — 10 часов.
2.5.3 Приготовление стандартных растворов
Основной стандартный раствор крезоксим-метила с содержанием 100 мкг/мл готовят растворением 0,010 г препарата, содержащего 99,9% д.в., в толуоле в мерной колбе на 100 мл. Раствор хранят в холодильнике не более месяца.
Рабочие растворы с концентрациями 0,025, 0,05, 0,1, 0,25 и 0,5 мкг/мл готовят из основного стандартного раствора крезоксим-метила соответствующим последовательным разбавлением толуолом. Рабочие растворы хранят в холодильнике не более трех дней.
При изучении полноты открывания крезоксим-метила в модельных матрицах используются ацетоновые растворы вещества.
Основной стандартный раствор метаболита крезоксима с содержанием 100 мкг/мл готовят растворением 0,010 г препарата, содержащего 99,3% д.в., в ацетоне в мерной колбе на 100 мл. Раствор хранят в холодильнике не более месяца.
Из основного стандартного раствора метаболита готовят разбавлением ацетоном рабочие растворы с концентрациями 0,1, 0,5 и 2,5 мкг/мл, которые хранят в холодильнике не более 10 дней. Рабочие растворы используются при изучении полноты открывания крезоксима в воде и почве. При расчете количества вводимого в матрицу метаболита учитывают соотношение молекулярных масс крезоксима и метилового эфира крезоксима.
2.5.4 Построение калибровочного графика
Для построения калибровочного графика в инжектор хроматографа вводят по 2 мкл рабочего стандартного раствора крезоксим-метила с концентрацией 0,025, 0,05, 0,1, 0,25 и 0,5 мкг/мл. Осуществляют не менее 5 параллельных измерений и находят среднее значение высоты хроматографического пика для каждой концентрации. Строят калибровочный график зависимости высоты хроматографического пика в мм от концентрации крезоксим-метила в мкг/мл.
2.5.5 Приготовление раствора диазометана в эфире
(Рисунок прибора для получения диазометана не приводится.)
В круглодонной колбе на 100 мл растворяют 5 г N-метил-N-нитрозо-п-толуолсульфонамида в 16 мл смеси диэтилового эфира и метанола (1:1). Колбу присоединяют к холодильнику, нижний конец которого снабжен аллонжем с отводом, проходящим через резиновую пробку с отводом и погруженным в слой эфира (40 мл) на дне приемника. Приемник охлаждают смесью льда и соли. В капельницу помещают 15 мл 50%-ного раствора едкого калия.
Реакцию начинают добавлением в реакционный сосуд раствора едкого калия по каплям, избегая бурного вскипания реакционной массы. Об окончании реакции судят по прекращению выделения диазометана в диэтиловый эфир.
2.5.6 Подготовка колонки с силикагелем для очистки экстракта
В нижнюю часть стеклянной колонки длиной 25 см и внутренним диаметром 1,2 см вставляют тампон из стекловаты, закрывают кран и приливают около 10 мл гексана. Затем в колонку вносят суспензию 5 г силикагеля в 20 мл гексана. Дают растворителю стечь до верхнего края сорбента и помещают на него слой безводного сульфата натрия высотой 1 см. Колонку промывают последовательно 50 мл элюента № 2 и 30 мл элюента № 1 со скоростью 1 — 2 капли в секунду, после чего она готова к работе.
2.6. Описание определения
2.6.1 Экстракция крезоксим-метила и крезоксима и очистка экстракта
2.6.1.1. Вода. 100 мл предварительно отфильтрованной воды помещают в делительную воронку емкостью 250 мл, добавляют 20 мл гексана и встряхивают 1 мин. Верхний органический слой отделяют, собирая в грушевидную колбу на 100 мл. Водную фазу экстрагируют гексаном еще дважды порциями по 20 мл. Объединенную органическую фазу, содержащую крезоксим-метил, пропускают через слой безводного сульфата натрия и упаривают на роторном вакуумном испарителе досуха при температуре 30 °С. Остаток растворяют в 2 мл толуола и анализируют на содержание крезоксим-метила по п. 2.7.
Водную фазу, оставшуюся после экстракции гексаном, переносят в делительную воронку емкостью 250 мл, подкисляют 1 н HCl до рН 2 и трижды экстрагируют хлористым метиленом порциями по 20 мл. Объединенную органическую фазу, содержащую метаболит крезоксим, пропускают через слой безводного сульфата натрия и упаривают небольшими порциями в 20-мл грушевидной колбе на роторном вакуумном испарителе досуха при температуре 30 °С. Дальнейшую очистку экстракта проводят по пп. 2.6.2 и 2.6.3.
2.6.1.2 Яблоки
К навеске (25 г) измельченного материала добавляют 100 мл смеси ацетон — вода (2:1, по объему), гомогенизируют 3 минуты при 10000 об./мин. и суспензию перемешивают в течение 20 мин. на аппарате для встряхивания. Добавляют 2 г целита и фильтруют под вакуумом на воронке Бюхнера через бумажный фильтр в колбу на 250 мл. Осадок на фильтре промывают 50 мл смеси ацетон — вода (2:1, по объему). Из объединенного экстракта отбирают аликвоту раствора (15 мл), эквивалентную 2,5 г растительного материала, и упаривают ее до водной фазы на роторном вакуумном испарителе при температуре 40 °С. Водный остаток переносят в делительную воронку емкостью 100 мл, приливают 10 мл насыщенного раствора хлорида натрия и 15 мл гексана. Смесь встряхивают в течение 1 мин. и после ее расслоения отделяют гексановый слой, который пропускают через стеклянный фильтр, заполненный безводным сульфатом натрия, в грушевидную колбу вместимостью 100 мл. Экстракцию водной фракции гексаном повторяют еще два раза (по 15 мл). Объединенный гексановый экстракт, содержащий крезоксим-метил, выпаривают на роторном испарителе досуха при температуре 30 °С. Дальнейшую очистку экстракта проводят по п. 2.6.3.
2.6.1.3. Почва. Навеску (25 г) воздушно-сухой почвы помещают в коническую колбу емкостью 250 мл, приливают 100 мл смеси ацетон — вода (2:1, по объему) и помещают в ультразвуковую баню на 5 мин. К суспензии добавляют 2 г целита и фильтруют под вакуумом на воронке Бюхнера через бумажный фильтр. Осадок на фильтре промывают 50 мл смеси ацетон — вода (2:1, по объему). Из объединенного экстракта отбирают аликвоту раствора (27 мл), эквивалентную 5 г почвы, и упаривают ее до водной фазы на роторном вакуумном испарителе при температуре 40 °С. Водный остаток переносят в делительную воронку емкостью 100 мл, приливают 15 мл бидистиллированной воды и 15 мл гексана. Смесь встряхивают в течение 1 мин. и после ее расслоения отделяют гексановую фракцию, которую пропускают через стеклянный фильтр, заполненный безводным сульфатом натрия, в грушевидную колбу вместимостью 100 мл. Экстракцию водной фракции гексаном повторяют еще два раза (по 15 мл). Объединенный гексановый экстракт, содержащий крезоксим-метил, выпаривают на роторном испарителе досуха при температуре 30 °С. Дальнейшую очистку экстракта проводят по п. 2.6.3.
Оставшуюся после обработки гексаном водную фазу подкисляют 1 н HCl до рН 2 и переносят в делительную воронку емкостью 100 мл, приливают 10 мл хлористого метилена и воронку встряхивают в течение 1 мин. После разделения слоев отделяют дихлорметановую фракцию, которую пропускают через стеклянный фильтр, заполненный безводным сульфатом натрия, в грушевидную колбу вместимостью 20 мл. Экстракцию водной фракции хлористым метиленом повторяют еще два раза (10 + 5 мл). Объединенный дихлорметановый экстракт, содержащий метаболит крезоксим, выпаривают на роторном испарителе досуха при температуре 30 °С. Дальнейшую очистку экстракта проводят по пп. 2.6.2 и 2.6.3.
2.6.2 Метилирование
К сухим остаткам водного (из п. 2.6.1.1) и почвенного (из п. 2.6.1.3) экстрактов, содержащим метаболит крезоксим, приливают соответственно 2 и 3 мл эфирного раствора диазометана (из п. 2.5.5), перемешивают, закрывают колбочки пробками и оставляют стоять в течение 1 часа при комнатной температуре. Затем растворы упаривают досуха током воздуха.
2.6.3 Очистка на колонке с силикагелем
Остаток в колбе, полученный при упаривании экстрактов растительного материала и почвы (из 2.6.1.2 и 2.6.1.3) или метилированных по п. 2.6.2 экстрактов воды и почвы, количественно переносят тремя 1-мл порциями элюента № 1 в подготовленную хроматографическую колонку (п. 2.5.6). Промывают колонку 20 мл элюента № 1, которые отбрасывают. Крезоксим-метил элюируют 50 мл элюента № 2, собирая элюат в грушевидную колбу емкостью 100 мл. Раствор упаривают досуха на роторном испарителе при температуре 30 °С. Сухие остатки экстрактов воды, почвы и яблок растворяют в 2 мл толуола и анализируют по п. 2.7.
2.7. Условия хроматографирования
Газовый хроматограф "Цвет-560" с детектором постоянной скорости рекомбинации ионов с пределом детектирования по линдану
-14
не выше 1,6 х 10 г/куб. см или газовый хроматограф "Кристалл - 2000 М" с электронзахватным детектором с пределом детектирования
-15
по линдану не выше 8,2 х 10 г/куб. см. 10
Показания электрометра — 4 х 10 .
Скорость движения ленты самописца — 25,4 см/час.
Колонка стеклянная, спиральная 2000 х 2 мм; неподвижная фаза — 3% OV-17 на Инертоне N-AW супер (0,16 — 0,20 мм).
Температура детектора 320 °С, инжектора — 280 °С, термостата колонки — 265 °С.
Скорость потока газа-носителя (азота) — 30 мл/мин.
Время удерживания крезоксим-метила — 4 мин.
Предел детектирования — 0,1 нг.
Линейный диапазон детектирования — 0,1 — 1,0 нг.
Каждую анализируемую пробу вводят в хроматограф 3 раза и вычисляют среднюю высоту пика.
Образцы, дающие пики большие чем стандартный раствор с концентрацией 0,5 мкг/мл, разбавляют толуолом.
Альтернативная фаза: 5% SE-30 на Инертоне N-AW DMCS (0,16 — 0,20 мм); колонка стеклянная 2000 х 2 мм; условия хроматографирования те же.
2.8. Обработка результатов анализа
Содержание крезоксим-метила рассчитывают методом абсолютной калибровки по формуле:
Н х А х V
1
где:
Х - содержание крезоксим-метила в пробе, мг/кг или мг/куб. дм;
Н - высота пика образца, мм;
1
Н - высота пика стандарта, мм;
0
А - концентрация стандартного раствора крезоксим-метила,
мкг/мл; V — объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, мл; m — объем (мл) или масса (г) анализируемой части образца (для воды 100 мл; для почвы 5 г; для яблок 2,5 г).
Содержание метаболита крезоксима рассчитывают методом абсолютной калибровки по формуле:
Н х А х V
1
где:
Х - содержание крезоксима в пробе, мг/кг или мг/куб. дм;
Н - высота пика образца, мм;
1
Н - высота пика стандарта, мм;
0
А - концентрация стандартного раствора крезоксим-метила,
мкг/мл; V — объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, мл; m — объем (мл) или масса (г) анализируемой части образца (для воды 100 мл; для почвы 5 г). К — коэффициент пересчета учитывающий, соотношение молекулярных масс крезоксим-метила и крезоксима, равный 1,05.
3. Требования техники безопасности
Необходимо соблюдать общепринятые правила безопасности при работе с органическими растворителями, токсичными веществами, электронагревательными приборами и сжатыми газами.
4. Разработчики
Дубовая Л.В., научн. сотр.; Талалакина Т.Н., научн. сотр.; Макеев А.М., зав. лаб., канд. биол. наук.
ВНИИ фитопатологии, 143050, Московская обл., п/о Большие Вяземы, тел. 592-92-20.