---
title: "\"МУК 4.1.3876-23. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Методика измерений массовой концентрации бенз(а)пирена и его метаболитов в экскретах (моче и кале) методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания\""
number: "МУК 4.1.3876-23"
status: действует
canonical: "https://bukva.ai/docs/metodika-muk-4-1-3876-23"
---

## "МУК 4.1.3876-23. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Методика измерений массовой концентрации бенз(а)пирена и его метаболитов в экскретах (моче и кале) методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания"

# "МУК 4.1.3876-23. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Методика измерений массовой концентрации бенз(а)пирена и его метаболитов в экскретах (моче и кале) методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания"

(утв. Роспотребнадзором 26.06.2023)

> [!IMPORTANT]
> Документ [введен](#p100005) в действие с 26.09.2023.


<a id="p100001"></a>Утверждаю
Руководитель Федеральной службы
по надзору в сфере защиты прав
потребителей и благополучия человека,
Главный государственный
санитарный врач
Российской Федерации
**А.Ю.ПОПОВА**
26 июня 2023 года


#### <a id="p100002"></a>4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ


<a id="p100003"></a>**МЕТОДИКА**
**ИЗМЕРЕНИЙ МАССОВОЙ КОНЦЕНТРАЦИИ БЕНЗ(А)ПИРЕНА**
**И ЕГО МЕТАБОЛИТОВ В ЭКСКРЕТАХ (МОЧЕ И КАЛЕ) МЕТОДОМ**
**ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ**

<a id="p100004"></a>**МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ**
**МУК 4.1.3876-23**

<a id="p100005"></a>Дата введения
26 сентября 2023 года

1. <a id="p100006"></a>Разработаны Федеральным бюджетным учреждением науки "Екатеринбургский медицинский научный центр профилактики и охраны здоровья рабочих промпредприятий" Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (В.Б. Гурвич, Э.Г. Плотко, Т.Н. Штин, Т.А. Береснева).
2. <a id="p100007"></a>Утверждены руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации А.Ю. Поповой 26 июня 2023 г.
3. <a id="p100008"></a>Введены впервые.


### <a id="p100009"></a>I. ОБЩИЕ ПОЛОЖЕНИЯ И ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ


<a id="p100010"></a>1.1. Настоящие методические указания (далее - МУК) устанавливают метод высокоэффективной жидкостной хроматографии с флуориметрическим и диодноматричным детекторами для определения массовой концентрации бенз(а)пирена и его метаболитов в экскретах (моче и кале) в диапазонах измерений:
- <a id="p100011"></a>в моче
1) <a id="p100012"></a>с флуориметрическим детектором:
- <a id="p100013"></a>бенз(а)пирен: от 0,12 до 12,00 мкг/100 см3;
- <a id="p100014"></a>3-гидроксибенз(а)пирен: от 0,15 до 15,00 мкг/100 см3;
- <a id="p100015"></a>бенз(а)пирена-транс-7,8-дигидродиол: от 0,15 до 15,00 мкг/100 см3;
2) <a id="p100016"></a>с диодноматричным детектором:
- <a id="p100017"></a>бенз(а)пирен: от 11,50 до 1200,0 мкг/100 см3;
- <a id="p100018"></a>3-гидроксибенз(а)пирен: от 15,00 до 15 000,0 мкг/100 см3;
- <a id="p100019"></a>бенз(а)пирена-транс-7,8-дигидродиол: от 15,00 до 15 000,0 мкг/100 см3;
- <a id="p100020"></a>в кале
1) <a id="p100021"></a>с флуориметрическим детектором:
- <a id="p100022"></a>бенз(а)пирен: от 0,70 до 70,00 мкг/100 г;
- <a id="p100023"></a>3-гидроксибенз(а)пирен: от 1,00 до 100,00 мкг/100 г;
- <a id="p100024"></a>бенз(а)пирена-транс-7,8-дигидродиол: от 1,00 до 100,00 мкг/100 г;
2) <a id="p100025"></a>с диодноматричным детектором:
- <a id="p100026"></a>бенз(а)пирен: от 70,00 до 7000,0 мкг/100 г;
- <a id="p100027"></a>3-гидроксибенз(а)пирен: от 100,00 до 10 000,0 мкг/100 г;
- <a id="p100028"></a>бенз(а)пирена-транс-7,8-дигидродиол: от 100,00 до 10 000,0 мкг/100 г.
<a id="p100029"></a>1.2. Метод основан на разрушении стенок клеток экскретов щелочным гидролизом анализируемых проб, жидкость-жидкостной экстракции бенз(а)пирена и его метаболитов из обработанных проб экскретов хлористым метиленом, концентрировании экстрактов по технологии упаривания в вихревом потоке газа и анализе экстракта на жидкостном хроматографе с использованием флуориметрического и диодноматричного детекторов.

#### <a id="p100030"></a>1.3 МУК носят рекомендательный характер.



### <a id="p100031"></a>II. ПОКАЗАТЕЛИ ТОЧНОСТИ ИЗМЕРЕНИЙ


<a id="p100032"></a>2.1. Метод измерений обеспечивает получение результатов измерений с погрешностями, не превышающими значений, приведенных в [таблицах 1](#p100034) и [2](#p100078).

<a id="p100033"></a>Таблица 1

<a id="p100034"></a>Диапазоны измерений массовой концентрации бенз(а)пирена
и его метаболитов в моче, значения показателей
внутрилабораторной прецизионности, правильности и точности
измерений при доверительной вероятности P = 0,95


<table>
<colgroup><col width="24%"><col width="15%"><col width="25%"><col width="18%"><col width="17%"></colgroup>
<tr><td><a id="p100035"></a>Наименование определяемого аналита</td><td><a id="p100036"></a>Диапазоны измерений, мкг/100 см3</td><td><a id="p100037"></a>Показатель внутрилабораторной прецизионности (относительное среднеквадратическое отклонение внутрилабораторной прецизионности) $\sigma_{R\text{л}}$ , %</td><td><a id="p100038"></a>Показатель правильности (границы относительной систематической погрешности) $\pm \delta_{\text{сл}}$ , %</td><td><a id="p100039"></a>Показатель точности (границы относительной погрешности) $\pm \delta_{\text{л}}$ , %</td></tr>
<tr><td><a id="p100040"></a>1</td><td><a id="p100041"></a>2</td><td><a id="p100042"></a>3</td><td><a id="p100043"></a>4</td><td><a id="p100044"></a>5</td></tr>
<tr><td></td><td colspan="4"><a id="p100045"></a>с флуориметрическим детектором</td></tr>
<tr><td><a id="p100046"></a>Бенз(а)пирен</td><td><a id="p100047"></a>От 0,12 до 12,0 включ.</td><td><a id="p100048"></a>12</td><td><a id="p100049"></a>18</td><td><a id="p100050"></a>31</td></tr>
<tr><td><a id="p100051"></a>3-гидроксибенз(а)пирен</td><td><a id="p100052"></a>От 0,15 до 15,0 включ.</td><td><a id="p100053"></a>19</td><td><a id="p100054"></a>24</td><td><a id="p100055"></a>46</td></tr>
<tr><td><a id="p100056"></a>Бенз(а)пирена-транс-7,8-дигидродиол</td><td><a id="p100057"></a>От 0,15 до 15,0 включ.</td><td><a id="p100058"></a>11</td><td><a id="p100059"></a>23</td><td><a id="p100060"></a>30</td></tr>
<tr><td></td><td colspan="4"><a id="p100061"></a>с диодноматричным детектором</td></tr>
<tr><td><a id="p100062"></a>Бенз(а)пирен</td><td><a id="p100063"></a>От 11,5 до 1200 включ.</td><td><a id="p100064"></a>10</td><td><a id="p100065"></a>16</td><td><a id="p100066"></a>27</td></tr>
<tr><td><a id="p100067"></a>3-гидроксибенз(а)пирен</td><td><a id="p100068"></a>От 15,0 до 15 000 включ.</td><td><a id="p100069"></a>17</td><td><a id="p100070"></a>24</td><td><a id="p100071"></a>35</td></tr>
<tr><td><a id="p100072"></a>Бенз(а)пирена-транс-7,8-дигидродиол</td><td><a id="p100073"></a>От 15,0 до 15 000 включ.</td><td><a id="p100074"></a>15</td><td><a id="p100075"></a>22</td><td><a id="p100076"></a>32</td></tr>
</table>


<a id="p100077"></a>Таблица 2

<a id="p100078"></a>Диапазоны измерений массовой концентрации бенз(а)пирена
и его метаболитов в кале, значения показателей
внутрилабораторной прецизионности, правильности и точности
измерений при доверительной вероятности P = 0,95


<table>
<colgroup><col width="24%"><col width="15%"><col width="25%"><col width="18%"><col width="17%"></colgroup>
<tr><td><a id="p100079"></a>Наименование определяемого аналита</td><td><a id="p100080"></a>Диапазоны измерений, мкг/100 г</td><td><a id="p100081"></a>Показатель внутрилабораторной прецизионности (относительное среднеквадратическое отклонение внутрилабораторной прецизионности) $\sigma_{R\text{л}}$ , %</td><td><a id="p100082"></a>Показатель правильности (границы относительной систематической погрешности) $\pm \delta_{\text{сл}}$ , %</td><td><a id="p100083"></a>Показатель точности (границы относительной погрешности) $\pm \delta_{\text{л}}$ , %</td></tr>
<tr><td><a id="p100084"></a>1</td><td><a id="p100085"></a>2</td><td><a id="p100086"></a>3</td><td><a id="p100087"></a>4</td><td><a id="p100088"></a>5</td></tr>
<tr><td></td><td colspan="4"><a id="p100089"></a>с флуориметрическим детектором</td></tr>
<tr><td><a id="p100090"></a>Бенз(а)пирен</td><td><a id="p100091"></a>От 0,70 до 70,0 включ.</td><td><a id="p100092"></a>8</td><td><a id="p100093"></a>18</td><td><a id="p100094"></a>25</td></tr>
<tr><td><a id="p100095"></a>3-гидроксибенз(а)пирен</td><td><a id="p100096"></a>От 1,0 до 100 включ.</td><td><a id="p100097"></a>6</td><td><a id="p100098"></a>24</td><td><a id="p100099"></a>30</td></tr>
<tr><td><a id="p100100"></a>Бенз(а)пирена-транс-7,8-дигидродиол</td><td><a id="p100101"></a>От 1,0 до 100 включ.</td><td><a id="p100102"></a>12</td><td><a id="p100103"></a>23</td><td><a id="p100104"></a>35</td></tr>
<tr><td></td><td colspan="4"><a id="p100105"></a>с диодноматричным детектором</td></tr>
<tr><td><a id="p100106"></a>Бенз(а)пирен</td><td><a id="p100107"></a>От 70,0 до 7000 включ.</td><td><a id="p100108"></a>12</td><td><a id="p100109"></a>16</td><td><a id="p100110"></a>30</td></tr>
<tr><td><a id="p100111"></a>3-гидроксибенз(а)пирен</td><td><a id="p100112"></a>От 100 до 10 000 включ.</td><td><a id="p100113"></a>5</td><td><a id="p100114"></a>24</td><td><a id="p100115"></a>29</td></tr>
<tr><td><a id="p100116"></a>Бенз(а)пирена-транс-7,8-дигидродиол</td><td><a id="p100117"></a>От 100 до 10 000 включ.</td><td><a id="p100118"></a>15</td><td><a id="p100119"></a>22</td><td><a id="p100120"></a>38</td></tr>
</table>



### <a id="p100121"></a>III. СРЕДСТВА ИЗМЕРЕНИЙ, ВСПОМОГАТЕЛЬНЫЕ УСТРОЙСТВА, РЕАКТИВЫ И МАТЕРИАЛЫ


<a id="p100122"></a>3.1. При выполнении измерений применяют средства измерений, стандартные образцы, вспомогательные устройства, реактивы, материалы [(таблица 3)](#p100124).

<a id="p100123"></a>Таблица 3

<a id="p100124"></a>Средства измерений, стандартные образцы, вспомогательные
устройства, реактивы и материалы


<table>
<colgroup><col width="35%"><col width="36%"><col width="28%"></colgroup>
<tr><td><a id="p100125"></a>Наименование средств измерений, стандартных образцов, вспомогательных устройств, реактивов и материалов</td><td><a id="p100126"></a>Обозначение и наименование документов, в соответствии с которыми выпускают СИ, стандартные образцы, вспомогательные устройства, реактивы и материалы</td><td><a id="p100127"></a>Метрологические, технические характеристики. Качество реактивов</td></tr>
<tr><td><a id="p100128"></a>1</td><td><a id="p100129"></a>2</td><td><a id="p100130"></a>3</td></tr>
<tr><td colspan="3"><a id="p100131"></a>Средства измерений</td></tr>
<tr><td><a id="p100132"></a>Весы высокого (II) класса точности</td><td><a id="p100133"></a>ГОСТ Р 53228</td><td><a id="p100134"></a>Наибольший предел взвешивания 220 г; дискретность 0,1 мг</td></tr>
<tr><td><a id="p100135"></a>Система высокоэффективная жидкостная хроматографическая с флуориметрическим и диодноматричным детектированием, состоящая из градиентного насоса, термостата хроматографической колонки и автосемплера</td><td><a id="p100136"></a>Выпускается в соответствии с технической документацией фирмы-изготовителя</td><td><a id="p100137"></a>-</td></tr>
<tr><td><a id="p100138"></a>Прибор для измерения постоянного и переменного напряжения, постоянной силы тока, сопротивления</td><td><a id="p100139"></a>Выпускается в соответствии с технической документацией фирмы-изготовителя</td><td><a id="p100140"></a>-</td></tr>
<tr><td><a id="p100141"></a><a id="p100142"></a>Пипетки одноканальные переменного объема<br>10 - 100 мм3; 40 - 200 мм3; 200 - 1000 мм3; 1 - 5 см3</td><td><a id="p100143"></a>-</td><td><a id="p100144"></a>Допустимая относительная погрешность дозирования по гексану не более +/- 2%</td></tr>
<tr><td><a id="p100145"></a>Пипетки градуированные исполнения 1-1-2-5</td><td><a id="p100146"></a><a href="https://bukva.ai/docs/gost-29227-91">ГОСТ 29227</a></td><td><a id="p100147"></a><a id="p100148"></a>Вместимость 5 см3.<br>Предел допускаемой погрешности вместимости: $\Delta = \pm 0,05\text{см}^{3}$</td></tr>
<tr><td><a id="p100149"></a>Пипетки градуированные исполнения 1-1-2-10</td><td><a id="p100150"></a><a href="https://bukva.ai/docs/gost-29227-91">ГОСТ 29227</a></td><td><a id="p100151"></a><a id="p100152"></a>Вместимость 10 см3.<br>Предел допускаемой погрешности вместимости: $\Delta = \pm 0,10\text{см}^{3}$</td></tr>
<tr><td><a id="p100153"></a>Пипетки с одной отметкой исполнения 2-2-1</td><td><a id="p100154"></a><a href="https://bukva.ai/docs/gost-29169-91">ГОСТ 29169</a></td><td><a id="p100155"></a><a id="p100156"></a>Вместимость 1 см3.<br>Предел допускаемой погрешности вместимости: $\Delta = \pm 0,015\text{см}^{3}$</td></tr>
<tr><td><a id="p100157"></a>Пипетки с одной отметкой исполнения 2-2-5</td><td><a id="p100158"></a><a href="https://bukva.ai/docs/gost-29169-91">ГОСТ 29169</a></td><td><a id="p100159"></a><a id="p100160"></a>Вместимость 5 см3.<br>Предел допускаемой погрешности вместимости: $\Delta = \pm 0,03\text{см}^{3}$</td></tr>
<tr><td><a id="p100161"></a>Колбы мерные 2-10-2</td><td><a id="p100162"></a><a href="https://bukva.ai/docs/gost-1770-74">ГОСТ 1770</a></td><td><a id="p100163"></a><a id="p100164"></a>Вместимость 10 см3.<br>Предел допускаемой погрешности вместимости: $\Delta = \pm 0,05\text{см}^{3}$</td></tr>
<tr><td><a id="p100165"></a>Колбы мерные 2-50-2</td><td><a id="p100166"></a><a href="https://bukva.ai/docs/gost-1770-74">ГОСТ 1770</a></td><td><a id="p100167"></a><a id="p100168"></a>Вместимость 50 см3.<br>Предел допускаемой погрешности вместимости: $\Delta = \pm 0,12\text{см}^{3}$</td></tr>
<tr><td><a id="p100169"></a>Колбы мерные 2-100-2</td><td><a id="p100170"></a><a href="https://bukva.ai/docs/gost-1770-74">ГОСТ 1770</a></td><td><a id="p100171"></a><a id="p100172"></a>Вместимость 100 см3.<br>Предел допускаемой погрешности вместимости: $\Delta = \pm 0,20\text{см}^{3}$</td></tr>
<tr><td><a id="p100173"></a>Колбы мерные 2-200-2</td><td><a id="p100174"></a><a href="https://bukva.ai/docs/gost-1770-74">ГОСТ 1770</a></td><td><a id="p100175"></a><a id="p100176"></a>Вместимость 200 см3.<br>Предел допускаемой погрешности вместимости: $\Delta = \pm 0,30\text{см}^{3}$</td></tr>
<tr><td><a id="p100177"></a>Колбы мерные 2-1000-2</td><td><a id="p100178"></a><a href="https://bukva.ai/docs/gost-1770-74">ГОСТ 1770</a></td><td><a id="p100179"></a><a id="p100180"></a>Вместимость 1000 см3.<br>Предел допускаемой погрешности вместимости: $\Delta = \pm 0,80\text{см}^{3}$</td></tr>
<tr><td><a id="p100181"></a>Цилиндр 1-250-2</td><td><a id="p100182"></a><a href="https://bukva.ai/docs/gost-1770-74">ГОСТ 1770</a></td><td><a id="p100183"></a><a id="p100184"></a>Вместимость 250 см3.<br>Предел допускаемой погрешности вместимости: $\Delta = \pm 2,0\text{см}^{3}$</td></tr>
<tr><td><a id="p100185"></a>Цилиндр 1-500-2</td><td><a id="p100186"></a><a href="https://bukva.ai/docs/gost-1770-74">ГОСТ 1770</a></td><td><a id="p100187"></a><a id="p100188"></a>Вместимость 250 см3.<br>Предел допускаемой погрешности вместимости: $\Delta = \pm 5,0\text{см}^{3}$</td></tr>
<tr><td><a id="p100189"></a>Цилиндр 1-1000-2</td><td><a id="p100190"></a><a href="https://bukva.ai/docs/gost-1770-74">ГОСТ 1770</a></td><td><a id="p100191"></a><a id="p100192"></a>Вместимость 250 см3.<br>Предел допускаемой погрешности вместимости: $\Delta = \pm 10,0\text{см}^{3}$</td></tr>
<tr><td colspan="3"><a id="p100193"></a>Стандартные образцы</td></tr>
<tr><td><a id="p100194"></a>Государственный стандартный образец (далее - ГСО) состава раствора бенз(а)пирена в гексане</td><td><a id="p100195"></a>ГСО 7515</td><td><a id="p100196"></a><a id="p100197"></a>Аттестованное значение 100 мкг/см3.<br>Предел допускаемой относительной погрешности (при P = 0,95): +/- 2,0%</td></tr>
<tr><td colspan="3"><a id="p100198"></a>Реактивы</td></tr>
<tr><td><a id="p100199"></a>Бенз(а)пирен</td><td><a id="p100200"></a>CAS N 50-32-8</td><td><a id="p100201"></a>Содержание основного вещества не менее 98%</td></tr>
<tr><td><a id="p100202"></a>3-гидроксибенз(а)пирен</td><td><a id="p100203"></a>CAS N 13345-21-6</td><td><a id="p100204"></a>Содержание основного вещества не менее 95%</td></tr>
<tr><td><a id="p100205"></a>Бенз(а)пирена-транс-7,8-дигидродиол</td><td><a id="p100206"></a>CAS N 57404-88-3</td><td><a id="p100207"></a>Содержание основного вещества не менее 98%</td></tr>
<tr><td><a id="p100208"></a>Метилен хлористый для спектроскопии</td><td><a id="p100209"></a>СТП ТУ СОМР 3-102-09</td><td><a id="p100210"></a>Содержание основного вещества не менее 99,9%</td></tr>
<tr><td><a id="p100211"></a>Этилацетат</td><td><a id="p100212"></a><a href="https://bukva.ai/docs/gost-8981-78">ГОСТ 8981</a></td><td><a id="p100213"></a>Содержание основного вещества не менее 99%</td></tr>
<tr><td><a id="p100214"></a>Ацетон</td><td><a id="p100215"></a>ГОСТ 2768</td><td><a id="p100216"></a>Содержание основного вещества не менее 99,75%</td></tr>
<tr><td><a id="p100217"></a>Метанол</td><td><a id="p100218"></a><a href="https://bukva.ai/docs/gost-2222-95">ГОСТ 2222-95</a></td><td><a id="p100219"></a>Марки А или Б</td></tr>
<tr><td><a id="p100220"></a>Калия гидроокись</td><td><a id="p100221"></a><a href="https://bukva.ai/docs/gost-24363-80">ГОСТ 24363</a></td><td><a id="p100222"></a>х.ч., массовая доля гидроокиси калия (KOH) не менее 86%</td></tr>
<tr><td><a id="p100223"></a>Этанол для хроматографии (этиловый спирт)</td><td><a id="p100224"></a>ТУ 6-09-1710</td><td><a id="p100225"></a>х.ч.</td></tr>
<tr><td><a id="p100226"></a>Ацетонитрил</td><td><a id="p100227"></a>ТУ 2634-002-04715285</td><td><a id="p100228"></a>о.с.ч.</td></tr>
<tr><td><a id="p100229"></a>н-Гексан</td><td><a id="p100230"></a>ТУ 2631-001-54260861</td><td><a id="p100231"></a>о.с.ч.</td></tr>
<tr><td><a id="p100232"></a>Диметилсульфоксид</td><td><a id="p100233"></a>ТУ 6-09-3818-89</td><td><a id="p100234"></a>х.ч.</td></tr>
<tr><td><a id="p100235"></a>Натрий хлористый</td><td><a id="p100236"></a>ГОСТ 4233</td><td><a id="p100237"></a>х.ч.</td></tr>
<tr><td><a id="p100238"></a>Вода для лабораторного анализа</td><td><a id="p100239"></a><a href="https://bukva.ai/docs/gost-r-52501-2005">ГОСТ Р 52501</a></td><td><a id="p100240"></a>-</td></tr>
<tr><td><a id="p100241"></a>Калий хлористый</td><td><a id="p100242"></a><a href="https://bukva.ai/docs/gost-4568-95">ГОСТ 4568</a></td><td><a id="p100243"></a>1 сорт</td></tr>
<tr><td><a id="p100244"></a>Кальций хлористый</td><td><a id="p100245"></a><a href="https://bukva.ai/docs/gost-450-77">ГОСТ 450</a></td><td><a id="p100246"></a>высший сорт</td></tr>
<tr><td><a id="p100247"></a>Азотная кислота</td><td><a id="p100248"></a>ГОСТ 4461</td><td><a id="p100249"></a>х.ч.</td></tr>
<tr><td colspan="3"><a id="p100250"></a>Вспомогательные устройства, материалы</td></tr>
<tr><td><a id="p100251"></a>Сушильный шкаф</td><td><a id="p100252"></a>Выпускается в соответствии с технической документацией фирмы-изготовителя</td><td><a id="p100253"></a>Рабочий диапазон температур от 50 °C до 200 °C</td></tr>
<tr><td><a id="p100254"></a>Стакан В-1-100 ТС</td><td><a id="p100255"></a>ГОСТ 25336</td><td><a id="p100256"></a>Вместимость 100 см3</td></tr>
<tr><td><a id="p100257"></a>Стакан В-1-1000 ТС</td><td><a id="p100258"></a>ГОСТ 25336</td><td><a id="p100259"></a>Вместимость 1000 см3</td></tr>
<tr><td><a id="p100260"></a>Пластиковая лабораторная посуда</td><td><a id="p100261"></a>-</td><td><a id="p100262"></a>-</td></tr>
<tr><td><a id="p100263"></a>Колонка хроматографическая обращенно-фазная</td><td><a id="p100264"></a>-</td><td><a id="p100265"></a>Колонка заполнена силикагелем с привитым октадицилом длиной 150 мм с диаметром частиц сорбента не более 5 мкм</td></tr>
<tr><td><a id="p100266"></a>Предколонка хроматографическая обращенно-фазная</td><td><a id="p100267"></a>-</td><td><a id="p100268"></a>Предколонка заполнена силикагелем с привитым октадицилом длиной 12,5 мм с диаметром частиц сорбента не более 5 мкм</td></tr>
<tr><td><a id="p100269"></a>Контейнер для анализов</td><td><a id="p100270"></a>-</td><td><a id="p100271"></a>-</td></tr>
<tr><td><a id="p100272"></a>Стеклянная виала с крышкой</td><td><a id="p100273"></a>-</td><td><a id="p100274"></a>Вместимость 2 см3</td></tr>
<tr><td><a id="p100275"></a>Фильтры мембранные</td><td><a id="p100276"></a>-</td><td><a id="p100277"></a>Размер пор не более 0,45 мкм</td></tr>
<tr><td><a id="p100278"></a>Воронка</td><td><a id="p100279"></a>ГОСТ 25336</td><td><a id="p100280"></a>-</td></tr>
<tr><td><a id="p100281"></a>Стаканчик для взвешивания СВ-14/8</td><td><a id="p100282"></a>ГОСТ 25336</td><td><a id="p100283"></a>-</td></tr>
<tr><td><a id="p100284"></a>Груша резиновая (спринцовка) N 1</td><td><a id="p100285"></a>-</td><td><a id="p100286"></a>-</td></tr>
<tr><td><a id="p100287"></a>Шприц инъекционный однократного применения стерильный "Луер"</td><td><a id="p100288"></a><a href="https://bukva.ai/docs/gost-iso-7886-1-2011">ГОСТ ISO 7886-1-2011</a></td><td><a id="p100289"></a>Вместимость 1 см3, 50 см3</td></tr>
<tr><td><a id="p100290"></a>Запорный кран для шприца инъекционного</td><td><a id="p100291"></a>-</td><td><a id="p100292"></a>-</td></tr>
<tr><td><a id="p100293"></a>Баня-термостат</td><td><a id="p100294"></a>-</td><td><a id="p100295"></a>-</td></tr>
<tr><td><a id="p100296"></a>Микрошприц МШ-10</td><td><a id="p100297"></a>-</td><td><a id="p100298"></a>Вместимость 10 мкл <a href="#p100330">&lt;1&gt;</a></td></tr>
<tr><td><a id="p100299"></a>Микрошприц МШ-50</td><td><a id="p100300"></a>-</td><td><a id="p100301"></a>Вместимость 50 мкл</td></tr>
<tr><td><a id="p100302"></a>Микрошприц МШ-100</td><td><a id="p100303"></a>-</td><td><a id="p100304"></a>Вместимость 100 мкл</td></tr>
<tr><td><a id="p100305"></a>Устройство для очистки воды</td><td><a id="p100306"></a>-</td><td><a id="p100307"></a>-</td></tr>
<tr><td><a id="p100308"></a>Плитка электрическая</td><td><a id="p100309"></a>-</td><td><a id="p100310"></a>-</td></tr>
<tr><td><a id="p100311"></a>Ультразвуковая баня</td><td><a id="p100312"></a>-</td><td><a id="p100313"></a>Рабочая частота не менее 20 Гц, объем не менее 1 дм3</td></tr>
<tr><td><a id="p100314"></a>Камера лабораторная морозильная с цифровым контроллером температуры</td><td><a id="p100315"></a>-</td><td><a id="p100316"></a>Рабочий диапазон температур от минус 18 °C до минус 24 °C</td></tr>
<tr><td><a id="p100317"></a>Измельчитель - гомогенизатор лабораторный</td><td><a id="p100318"></a>-</td><td><a id="p100319"></a>-</td></tr>
<tr><td><a id="p100320"></a>Метаболическая клетка для мелких животных для сбора экскретов</td><td><a id="p100321"></a>-</td><td><a id="p100322"></a>-</td></tr>
<tr><td colspan="3"><a id="p100323"></a><a id="p100324"></a><a id="p100325"></a><a id="p100326"></a><a id="p100327"></a><a id="p100328"></a>Примечания.<br>Допускается использование средств измерений (далее - СИ) утвержденных типов с аналогичными или лучшими метрологическими характеристиками.<br>Допускается использование стандартных образцов утвержденных типов с аналогичными или лучшими метрологическими характеристиками.<br>Допускается использование испытательного оборудования (далее - ИО) с аналогичными или лучшими метрологическими характеристиками.<br>Допускается применение вспомогательного оборудования, отличного от указанного, с аналогичными или лучшими техническими характеристиками.<br>Допускается применение реактивов с характеристиками не хуже указанных. Метрологическое обеспечение СИ и ИО (поверку СИ и аттестации ИО) осуществляют аккредитованные организации на данный вид деятельности.</td></tr>
</table>



<a id="p100329"></a>

---

<a id="p100330"></a><1> 10 мкл = 10 мм3 = 0,01 см3.


### <a id="p100331"></a>IV. ТРЕБОВАНИЯ БЕЗОПАСНОСТИ


<a id="p100332"></a>4.1. Помещение лаборатории должно соответствовать требованиям пожарной безопасности по ГОСТ 12.1.004, а также соблюдаться требования по электробезопасности в соответствии с ГОСТ 12.1.019.
<a id="p100333"></a>4.2. Общие санитарно-гигиенические положения к воздуху рабочей зоны определены в ГОСТ 12.1.005.
<a id="p100334"></a>4.3. К выполнению измерений допускаются специалисты, имеющие высшие или средне-специальное образование, прошедшие специальную подготовку по выполнению химических и аналитических работ, имеющие опыт работы в химической лаборатории, прошедшие обучение и владеющие техникой проведения анализа, освоившие метод в процессе стажировки.


### <a id="p100335"></a>V. УСЛОВИЯ ВЫПОЛНЕНИЯ ИЗМЕРЕНИЙ



#### <a id="p100336"></a>5.1 При выполнении измерений в лаборатории соблюдаются следующие условия:

- <a id="p100337"></a>температура окружающего воздуха, °C плюс (20 +/- 5);
- <a id="p100338"></a>атмосферное давление, кПа (мм рт. ст.) 84,0 - 106,7 (630 - 800);
- <a id="p100339"></a>относительная влажность воздуха, %, не более 80.

#### <a id="p100340"></a>5.2 Электропитание при выполнении измерений в лаборатории и проведении отбора проб:

- <a id="p100341"></a>напряжения питания, В (220 +/- 22);
- <a id="p100342"></a>частота, Гц (50 +/- 1).


### <a id="p100343"></a>VI. ПОДГОТОВКА К ВЫПОЛНЕНИЮ ИЗМЕРЕНИЙ


<a id="p100344"></a>6.1. Чистота воды. При выполнении измерений используют воду для лабораторного анализа 1 степени чистоты по [ГОСТ Р 52501](https://bukva.ai/docs/gost-r-52501-2005).

#### <a id="p100345"></a>6.2 Подготовка посуды.

<a id="p100346"></a>Мойку и сушку посуды следует проводить в помещении, оборудованном приточно-вытяжной вентиляцией.
<a id="p100347"></a>Всю используемую для хранения и измерений проб посуду промывают азотной кислотой, разбавленной водой для лабораторного анализа 1 степени чистоты в соотношении 1:1 [(п. 6.3.1)](#p100350), затем большим количеством водопроводной воды и в заключении ополаскивают три-четыре раза водой для лабораторного анализа 1 степени чистоты, с последующей последовательной промывкой органическими растворителями: этилацетатом (однократно), ацетоном (дважды).
<a id="p100348"></a>Процедуру промывки органическими растворителями следует проводить в вытяжном шкафу. Рекомендуется на стадиях промывки использовать ультразвуковую ванну. Окончательную сушку посуды проводят в сушильном шкафу, установленном в вытяжном шкафу, при температуре от плюс 105 °C до плюс 110 °C.

#### <a id="p100349"></a>6.3 Приготовление растворов реактивов.


##### <a id="p100350"></a>6.3.1 Раствор азотной кислоты с объемной долей 1:1.

<a id="p100351"></a>Раствор азотной кислоты готовят разбавлением концентрированной кислоты. Для приготовления 1000 см3 раствора берут 500 см3 концентрированной азотной кислоты (удельный вес 1,51 г/см3), отмеренной цилиндром. Отмеренный объем кислоты осторожно при перемешивании вливают в 500 см3 воды для лабораторного анализа 1 степени чистоты в термостойком стакане вместимостью 1000 см3 при охлаждении. Тщательно перемешивают.
<a id="p100352"></a>Раствор хранят до изменения внешнего вида (изменение цвета, включая мутность, образование хлопьев, осадка).

##### <a id="p100353"></a>6.3.2 Изотонический раствор Рингера.

<a id="p100354"></a>Помещают 7,5 г хлорида натрия, 0,37 г хлорида калия, 0,17 г хлорида кальция в мерную колбу вместимостью 1000 см3, растворяют примерно в 400 см3 воды для лабораторного анализа 1 степени чистоты. После растворения солей доводят до 1000 см3 водой для лабораторного анализа 1 степени чистоты.
<a id="p100355"></a>Раствор хранят при комнатной температуре 1 месяц.

##### <a id="p100356"></a>6.3.3 Спиртовой раствор гидроксида калия, 0,73 моль/дм3.

<a id="p100357"></a>В стакан вместимостью 100 см3 помещают 8,20 г гидроксида калия, растворяют примерно в 30 см3 воды для лабораторного анализа 1 степени чистоты при нагревании на электроплитке. Раствор охлаждают до комнатной температуры и количественно переносят в мерную колбу вместимостью 200 см3. Объем доводят до метки этиловым спиртом.
<a id="p100358"></a>Раствор хранят до изменения внешнего вида в пластиковой посуде.
<a id="p100359"></a>6.3.4. Элюент для хроматографии (водный раствор ацетонитрила с объемной долей 4:1).
<a id="p100360"></a>Для приготовления 1000 см3 раствора берут 800 см3 ацетонитрила, отмеренного цилиндром. Отмеренный объем ацетонитрила при перемешивании вливают в 200 см3 воды для лабораторного анализа 1 степени чистоты в стакане вместимостью 1000 см3 при охлаждении. Тщательно перемешивают.
<a id="p100361"></a>Раствор хранят при комнатной температуре не более 1 месяца.
<a id="p100362"></a>6.3.5. Основной градуировочный раствор бенз(а)пирена с массовой концентрацией 100 мкг/см3 (раствор N 1).
<a id="p100363"></a>Для приготовления градуировочного раствора на аналитических весах взвешивают 10,0 мг [<2>](#p100365) чистого вещества и переносят количественно н-гексаном в мерную колбу вместимостью 100 см3. Доводят полученный раствор н-гексаном до метки.

<a id="p100364"></a>

---

<a id="p100365"></a><2> Масса навески для чистого вещества бенз(а)пирена с содержанием основного вещества 98% составляет 10,2 мг соответственно.

<a id="p100366"></a>Концентрация бенз(а)пирена в полученном градуировочном растворе N 1 - (100,0 +/- 2,3) мкг/см3.
<a id="p100367"></a>Раствор хранят в посуде из стекла в течение 3 месяцев при температуре от плюс 2 °C до плюс 10 °C.
<a id="p100368"></a>6.3.6. Рабочий градуировочный раствор бенз(а)пирена с массовой концентрацией 10 мкг/см3 (раствор N 2).
<a id="p100369"></a>6.3.6.1. Рабочий градуировочный раствор (N 2) готовят из соответствующего ГСО раствора бенз(а)пирена в соответствии с рекомендацией в инструкции по применению.
<a id="p100370"></a>Вскрывают ампулу ГСО, содержащего 100 мкг/см3 бенз(а)пирена. Осторожно пипеткой переносят 5,00 см3 ГСО в мерную колбу вместимостью 50 см3, доводят до метки н-гексаном и перемешивают.
<a id="p100371"></a>Полученный рабочий градуировочный раствор N 2 содержит (10,0 +/- 0,2) мкг/см3 бенз(а)пирена.
<a id="p100372"></a>Раствор хранят в посуде из стекла в течение 2 месяцев при температуре от плюс 2 °C до плюс 10 °C.
<a id="p100373"></a>6.3.6.2. Рабочий градуировочный раствор (N 2) готовят соответствующим разбавлением основного градуировочного раствора (N 1).
<a id="p100374"></a>5,00 см3 раствора N 1 с помощью пипетки переносят в мерную колбу вместимостью 50 см3, доводят до метки н-гексаном и перемешивают.
<a id="p100375"></a>Полученный рабочий градуировочный раствор N 2 содержит (10,0 +/- 0,2) мкг/см3 бенз(а)пирена.
<a id="p100376"></a>Раствор хранят в посуде из стекла в течение 2 месяцев при температуре от плюс 2 °C до плюс 10 °C.
<a id="p100377"></a>6.3.7. Основной градуировочный раствор 3-гидроксибенз(а)пирена с массовой концентрацией 100 мкг/см3 (раствор N 3).
<a id="p100378"></a>Для приготовления градуировочного раствора на аналитических весах взвешивают 10,0 мг [<3>](#p100380) чистого вещества и переносят количественно метанолом или диметилсульфоксидом (далее - ДМСО) в мерную колбу вместимостью 100 см3. Доводят полученный раствор метанолом или ДМСО до метки.

<a id="p100379"></a>

---

<a id="p100380"></a><3> Масса навески для чистого вещества 3-гидроксибенз(а)пирена с содержанием основного вещества 95% составляет 10,5 мг соответственно.

<a id="p100381"></a>Концентрация 3-гидроксибенз(а)пирена в полученном градуировочном растворе N 3 - (100,0 +/- 5,3) мкг/см3.
<a id="p100382"></a>Приготовленный раствор хранят в морозильнике при температуре не выше минус 20 °C в течение 3 месяцев. Перед применением раствор выдерживают при комнатной температуре в темном месте не менее 30 мин.
<a id="p100383"></a>6.3.8. Рабочий градуировочный раствор 3-гидроксибенз(а)пирена с массовой концентрацией 10 мкг/см3 (раствор N 4).
<a id="p100384"></a>1,00 см3 раствора N 3 с помощью пипетки переносят в стаканчики для взвешивания и упаривают в вихревом потоке газа при комнатной температуре.
<a id="p100385"></a>Содержимое стаканчика для взвешивания количественно н-гексаном переносят в мерную колбу вместимостью 10 см3, доводят до метки н-гексаном и перемешивают. Концентрация 3-гидроксибенз(а)пирена в полученном градуировочном растворе N 4 - (10,0 +/- 0,6) мкг/см3. Приготовленный раствор хранят в морозильнике при температуре не выше минус 20 °C в течение 2 месяцев. Перед применением раствор выдерживают при комнатной температуре в темном месте не менее 30 мин.
<a id="p100386"></a>6.3.9. Основной градуировочный раствор бенз(а)пирена-транс-7,8-дигидродиола с массовой концентрацией 100 мкг/см3 (раствор N 5).
<a id="p100387"></a>Для приготовления градуировочного раствора на аналитических весах взвешивают 10,0 мг [<4>](#p100389) чистого вещества и переносят количественно метанолом или ДМСО в мерную колбу вместимостью 100 см3. Доводят полученный раствор метанолом или ДМСО до метки.

<a id="p100388"></a>

---

<a id="p100389"></a><4> Масса навески для чистого вещества бенз(а)пирена-транс-7,8-дигидродиола с содержанием основного вещества 98% составляет 10,2 мг соответственно.

<a id="p100390"></a>Концентрация бенз(а)пирена-транс-7,8-дигидродиола в полученном градуировочном растворе N 5 - (100,0 +/- 2,3) мкг/см3.
<a id="p100391"></a>Приготовленный раствор хранят в морозильнике при температуре не выше минус 20 °C в течение 3 месяцев. Перед применением раствор выдерживают при комнатной температуре в темном месте не менее 30 мин.
<a id="p100392"></a>6.3.10. Рабочий градуировочный раствор бенз(а)пирена-транс-7,8-дигидродиола с массовой концентрацией 10 мкг/см3 (раствор N 6).
<a id="p100393"></a>1,00 см3 раствора N 5 с помощью пипетки переносят в стаканчики для взвешивания и упаривают в вихревом потоке газа на воздухе при комнатной температуре.
<a id="p100394"></a>Содержимое стаканчика для взвешивания количественно н-гексаном переносят мерную колбу вместимостью 10 см3, доводят до метки н-гексаном и перемешивают. Концентрация бенз(а)пирена-транс-7,8-дигидродиола в полученном градуировочном растворе N 6 - (10,0 +/- 0,3) мкг/см3.
<a id="p100395"></a>Приготовленный раствор хранят в морозильнике при температуре не выше минус 20 °C в течение 2 месяцев. Перед применением раствор выдерживают при комнатной температуре в темном месте не менее 30 мин.

#### <a id="p100396"></a>6.4 Подготовка хроматографической колонки к работе.

<a id="p100397"></a>Колонку устанавливают в хроматограф и подают элюент со скоростью 1,5 см3/мин до установления равновесия колонки, которое определяют по стабильности нулевой линии детектора.
<a id="p100398"></a>Подготовку хроматографической колонки к работе проводят в соответствии с рекомендациями руководства по эксплуатации ВЭЖХ. Скорость подачи элюента (в данном случае) установлена производителем прибора.

#### <a id="p100399"></a>6.5 Установление градуировочных зависимостей.

<a id="p100400"></a>Градуировочные растворы бенз(а)пирена и его метаболитов, используемые для построения градуировочной характеристики, готовят в соответствии с [таблицами 4](#p100402) - [5](#p100530).

<a id="p100401"></a>Таблица 4

<a id="p100402"></a>Приготовление градуировочных растворов бенз(а)пирена
и его метаболитов для флуориметрического детектора


| <a id="p100403"></a>Номер градуировочного раствора | <a id="p100404"></a>1 | <a id="p100405"></a>2 | <a id="p100406"></a>3 | <a id="p100407"></a>4 | <a id="p100408"></a>5 | <a id="p100409"></a>6 |
| --- | --- | --- | --- | --- | --- | --- |
| <a id="p100410"></a>1 | <a id="p100411"></a>2 | <a id="p100412"></a>3 | <a id="p100413"></a>4 | <a id="p100414"></a>5 | <a id="p100415"></a>6 | <a id="p100416"></a>7 |
| <a id="p100417"></a>Объем рабочего градуировочного раствора бенз(а)пирена с массовой концентрацией 10,0 мкг/см3 (рабочий градуировочный раствор N 2), см3 | <a id="p100418"></a>- | <a id="p100419"></a>- | <a id="p100420"></a>- | <a id="p100421"></a>- | <a id="p100422"></a>- | <a id="p100423"></a>1 |
| <a id="p100424"></a>Объем рабочего градуировочного раствора 3-гидроксибенз(а)пирена с массовой концентрацией 10,0 мкг/см3 (рабочий градуировочный раствор N 4), см3 | <a id="p100425"></a>- | <a id="p100426"></a>- | <a id="p100427"></a>- | <a id="p100428"></a>- | <a id="p100429"></a>- | <a id="p100430"></a>1 |
| <a id="p100431"></a>Объем рабочего градуировочного раствора бенз(а)пирена-транс-7,8-дигидродиола с массовой концентрацией 10,0 мкг/см3 (рабочий градуировочный раствор N 6), см3 | <a id="p100432"></a>- | <a id="p100433"></a>- | <a id="p100434"></a>- | <a id="p100435"></a>- | <a id="p100436"></a>- | <a id="p100437"></a>1 |
| <a id="p100438"></a>Объем градуировочного раствора бенз(а)пирена с массовой концентрацией 1,0 мкг/см3 (градуировочный раствор N 6), см3 | <a id="p100439"></a>- | <a id="p100440"></a>- | <a id="p100441"></a>- | <a id="p100442"></a>- | <a id="p100443"></a>5 | <a id="p100444"></a>- |
| <a id="p100445"></a>Объем градуировочного раствора бенз(а)пирена-транс-7,8-дигидродиола с массовой концентрацией 1,0 мкг/см3 (градуировочный раствор N 6), см3 | <a id="p100446"></a>- | <a id="p100447"></a>- | <a id="p100448"></a>- | <a id="p100449"></a>- | <a id="p100450"></a>5 | <a id="p100451"></a>- |
| <a id="p100452"></a>Объем градуировочного раствора 3-гидроксибенз(а)пирена с массовой концентрацией 1,0 мкг/см3 (градуировочный раствор N 6), см3 | <a id="p100453"></a>- | <a id="p100454"></a>- | <a id="p100455"></a>- | <a id="p100456"></a>- | <a id="p100457"></a>5 | <a id="p100458"></a>- |
| <a id="p100459"></a>Объем градуировочного раствора бенз(а)пирена с массовой концентрацией 0,50 мкг/см3 (градуировочный раствор N 5), см3 | <a id="p100460"></a>- | <a id="p100461"></a>- | <a id="p100462"></a>- | <a id="p100463"></a>2 | <a id="p100464"></a>- | <a id="p100465"></a>- |
| <a id="p100466"></a>Объем градуировочного раствора бенз(а)пирена-транс-7,8-дигидродиола с массовой концентрацией 0,50 мкг/см3 (градуировочный раствор N 5), см3 | <a id="p100467"></a>- | <a id="p100468"></a>- | <a id="p100469"></a>- | <a id="p100470"></a>2 | <a id="p100471"></a>- | <a id="p100472"></a>- |
| <a id="p100473"></a>Объем градуировочного раствора 3-гидроксибенз(а)пирена с массовой концентрацией 0,50 мкг/см3 (градуировочный раствор N 5), см3 | <a id="p100474"></a>- | <a id="p100475"></a>- | <a id="p100476"></a>- | <a id="p100477"></a>2 | <a id="p100478"></a>- | <a id="p100479"></a>- |
| <a id="p100480"></a>Объем градуировочного раствора бенз(а)пирена с массовой концентрацией 0,10 мкг/см3 (градуировочный раствор N 4), см3 | <a id="p100481"></a>- | <a id="p100482"></a>- | <a id="p100483"></a>5 | <a id="p100484"></a>- | <a id="p100485"></a>- | <a id="p100486"></a>- |
| <a id="p100487"></a>Объем градуировочного раствора бенз(а)пирена-транс-7,8-дигидродиола с массовой концентрацией 0,10 мкг/см3 (градуировочный раствор N 4), см3 | <a id="p100488"></a>- | <a id="p100489"></a>- | <a id="p100490"></a>5 | <a id="p100491"></a>- | <a id="p100492"></a>- | <a id="p100493"></a>- |
| <a id="p100494"></a>Объем градуировочного раствора 3-гидроксибенз(а)пирена с массовой концентрацией 0,10 мкг/см3 (градуировочный раствор N 4), см3 | <a id="p100495"></a>- | <a id="p100496"></a>- | <a id="p100497"></a>5 | <a id="p100498"></a>- | <a id="p100499"></a>- | <a id="p100500"></a>- |
| <a id="p100501"></a>Объем градуировочного раствора бенз(а)пирена с массовой концентрацией 0,050 мкг/см3 (градуировочный раствор N 3), см3 | <a id="p100502"></a>- | <a id="p100503"></a>2 | <a id="p100504"></a>- | <a id="p100505"></a>- | <a id="p100506"></a>- | <a id="p100507"></a>- |
| <a id="p100508"></a>Объем градуировочного раствора бенз(а)пирена-транс-7,8-дигидродиола с массовой концентрацией 0,050 мкг/см3 (градуировочный раствор N 3), см3 | <a id="p100509"></a>- | <a id="p100510"></a>2 | <a id="p100511"></a>- | <a id="p100512"></a>- | <a id="p100513"></a>- | <a id="p100514"></a>- |
| <a id="p100515"></a>Объем градуировочного раствора 3-гидроксибенз(а)пирена с массовой концентрацией 0,050 мкг/см3 (градуировочный раствор N 3), см3 | <a id="p100516"></a>- | <a id="p100517"></a>2 | <a id="p100518"></a>- | <a id="p100519"></a>- | <a id="p100520"></a>- | <a id="p100521"></a>- |
| <a id="p100522"></a>Концентрация бенз(а)пирена и его метаболитов в градуировочном растворе, мкг/см3 | <a id="p100523"></a>- | <a id="p100524"></a>0,010 | <a id="p100525"></a>0,050 | <a id="p100526"></a>0,10 | <a id="p100527"></a>0,50 | <a id="p100528"></a>1,0 |


<a id="p100529"></a>Таблица 5

<a id="p100530"></a>Приготовление градуировочных растворов бенз(а)пирена
и его метаболитов для диодноматричного детектора


| <a id="p100531"></a>Номер градуировочного раствора | <a id="p100532"></a>1 | <a id="p100533"></a>2 | <a id="p100534"></a>3 | <a id="p100535"></a>4 | <a id="p100536"></a>5 |
| --- | --- | --- | --- | --- | --- |
| <a id="p100537"></a>1 | <a id="p100538"></a>2 | <a id="p100539"></a>3 | <a id="p100540"></a>4 | <a id="p100541"></a>5 | <a id="p100542"></a>6 |
| <a id="p100543"></a>Объем государственного стандартного образца (ГСО) состава раствора бенз(а)пирена в гексане, с аттестованным значением СО 100,0 мкг/см3 (или основного градуировочного раствора (N 1) с массовой концентрацией 100,0 мкг/см3), см3 | <a id="p100544"></a>- | <a id="p100545"></a>- | <a id="p100546"></a>- | <a id="p100547"></a>- | <a id="p100548"></a>10 |
| <a id="p100549"></a>Объем основного градуировочного раствора 3-гидроксибенз(а)пирена с массовой концентрацией 100,0 мкг/см3 (основной градуировочный раствор N 3), см3 | <a id="p100550"></a>- | <a id="p100551"></a>- | <a id="p100552"></a>- | <a id="p100553"></a>- | <a id="p100554"></a>10 [<5>](#p100622) |
| <a id="p100555"></a>Объем основного градуировочного раствора бенз(а)пирена-транс-7,8-дигидродиола с массовой концентрацией 100,0 мкг/см3 (основной градуировочный раствор N 5), см3 | <a id="p100556"></a>- | <a id="p100557"></a>- | <a id="p100558"></a>- | <a id="p100559"></a>- | <a id="p100560"></a>10 <6> |
| <a id="p100561"></a>Объем рабочего градуировочного раствора бенз(а)пирена с массовой концентрацией 10,0 мкг/см3 (рабочий градуировочный раствор N 2), см3 | <a id="p100562"></a>- | <a id="p100563"></a>- | <a id="p100564"></a>- | <a id="p100565"></a>10 | <a id="p100566"></a>- |
| <a id="p100567"></a>Объем рабочего градуировочного раствора 3-гидроксибенз(а)пирена с массовой концентрацией 10,0 мкг/см3 (рабочий градуировочный раствор N 4), см3 | <a id="p100568"></a>- | <a id="p100569"></a>- | <a id="p100570"></a>- | <a id="p100571"></a>10 | <a id="p100572"></a>- |
| <a id="p100573"></a>Объем рабочего градуировочного раствора бенз(а)пирена-транс-7,8-дигидродиола с массовой концентрацией 10,0 мкг/см3 (рабочий градуировочный раствор N 6), см3 | <a id="p100574"></a>- | <a id="p100575"></a>- | <a id="p100576"></a>- | <a id="p100577"></a>10 | <a id="p100578"></a>- |
| <a id="p100579"></a>Объем градуировочного раствора бенз(а)пирена с массовой концентрацией 10,0 мкг/см3 (градуировочный раствор N 4), см3 | <a id="p100580"></a>- | <a id="p100581"></a>- | <a id="p100582"></a>5 | <a id="p100583"></a>- | <a id="p100584"></a>- |
| <a id="p100585"></a>Объем градуировочного раствора бенз(а)пирена-транс-7,8-дигидродиола с массовой концентрацией 10,0 мкг/см3 (градуировочный раствор N 4), см3 | <a id="p100586"></a>- | <a id="p100587"></a>- | <a id="p100588"></a>5 | <a id="p100589"></a>- | <a id="p100590"></a>- |
| <a id="p100591"></a>Объем градуировочного раствора 3-гидроксибенз(а)пирена с массовой концентрацией 10,0 мкг/см3 (градуировочный раствор N 4), см3 | <a id="p100592"></a>- | <a id="p100593"></a>- | <a id="p100594"></a>5 | <a id="p100595"></a>- | <a id="p100596"></a>- |
| <a id="p100597"></a>Объем градуировочного раствора бенз(а)пирена с массовой концентрацией 5,0 мкг/см3 (градуировочный раствор N 3), см3 | <a id="p100598"></a>- | <a id="p100599"></a>2 | <a id="p100600"></a>- | <a id="p100601"></a>- | <a id="p100602"></a>- |
| <a id="p100603"></a>Объем градуировочного раствора бенз(а)пирена-транс-7,8-дигидродиола с массовой концентрацией 5,0 мкг/см3 (градуировочный раствор N 3), см3 | <a id="p100604"></a>- | <a id="p100605"></a>2 | <a id="p100606"></a>- | <a id="p100607"></a>- | <a id="p100608"></a>- |
| <a id="p100609"></a>Объем градуировочного раствора 3-гидроксибенз(а)пирена с массовой концентрацией 5,0 мкг/см3 (градуировочный раствор N 3), см3 | <a id="p100610"></a>- | <a id="p100611"></a>2 | <a id="p100612"></a>- | <a id="p100613"></a>- | <a id="p100614"></a>- |
| <a id="p100615"></a>Концентрация бенз(а)пирена и его метаболитов в градуировочном растворе, мкг/см3 | <a id="p100616"></a>- | <a id="p100617"></a>1,0 | <a id="p100618"></a>5,0 | <a id="p100619"></a>10,0 | <a id="p100620"></a>100,0 |



<a id="p100621"></a>

---

<a id="p100622"></a><5> Во избежание нарушения равновесия жидкость - жидкость (плотность метанола: $\rho^{20} = 0,7925\text{г}/\text{см}^{3}$ , плотность гексана: $\rho^{20} = 0,6594\text{г}/\text{см}^{3}$ , плотность ДМСО: $\rho^{20} = 1,1000\text{г}/\text{см}^{3}$ ) 10,00 см3 основного градуировочного раствора N 3 (N 5) с помощью пипетки переносят в стаканчик для взвешивания и упаривают в вихревом потоке газа при комнатной температуре. Содержимое стаканчика для взвешивания количественно н-гексаном переносят в мерную колбу вместимостью 10,00 см3, доводят до метки н-гексаном и перемешивают.

<a id="p100623"></a>Растворы для градуировки готовят в мерных колбах вместимостью 10,00 см3.
<a id="p100624"></a>После добавления каждого реактива содержимое колб тщательно перемешивают.
<a id="p100625"></a>Объем раствора в каждой колбе доводят до метки гексаном и тщательно перемешивают.
<a id="p100626"></a>Растворы готовят в день использования.
<a id="p100627"></a>Градуировочные характеристики строят при помощи "матричной" градуировки. Для этого проводят обработку "чистых" проб ("чистые" пробы выбирают среди проб того же вида биосубстратов - экскреты (моча, кал), проанализированных тем же методом ранее, и не содержащих бенз(а)пирена и его метаболитов) в соответствии с главами VIII, IX. На стадии перерастворения перед введением в хроматограф в стаканчики для взвешивания с обработанной пробой экскретов добавляют по 1 см3 градуировочных растворов бенз(а)пирена и его метаболитов ([таблицы 3](#p100124) - [4](#p100402)), тщательно перемешивают. Полученные растворы фильтруют через мембранный фильтр с размером пор не более 0,45 мкм, используя медицинский шприц "Луер", в стеклянную виалу вместимостью 2 см3 и анализируют на жидкостном хроматографе в условиях:
- <a id="p100628"></a>инжектируемый объем 5 мм3;
- <a id="p100629"></a>колонка хроматографическая обращенно-фазная, заполненная силикагелем с привитым октадицилом длиной 150 мм с диаметром частиц сорбента не более 5 мкм;
- <a id="p100630"></a>режим подачи элюента (80% ацетонитрила и 20% воды) - изократический;
- <a id="p100631"></a>скорость подачи элюента 1,0 см3/мин;
<a id="p100632"></a>Инструментальные параметры и программа хроматографирования подобрана экспериментально. Скорость подачи элюента при построении градуировочной зависимости и проведении исследований с использованием рабочих проб составляет 1,0 см3/мин.
- <a id="p100633"></a>температура термостата колонки 40 °C;
- <a id="p100634"></a>флуориметрический детектор [(таблица 3)](#p100124):
<a id="p100635"></a>а) для бенз(а)пирена
- <a id="p100636"></a>длина волны возбуждения 260 нм;
- <a id="p100637"></a>длина волны эмиссии 415 нм;
<a id="p100638"></a>б) для бенз(а)пирена-транс-7,8-дигидродиола
- <a id="p100639"></a>длина волны возбуждения 260 нм;
- <a id="p100640"></a>длина волны эмиссии 415 нм;
<a id="p100641"></a>в) для 3-гидроксибенз(а)пирена
- <a id="p100642"></a>длина волны возбуждения 260 нм;
- <a id="p100643"></a>длина волны эмиссии 445 нм;
- <a id="p100644"></a>диодноматричный детектор [(таблица 4)](#p100402):
<a id="p100645"></a>а) для бенз(а)пирена, бенз(а)пирена-транс-7,8-дигидродиола, 3-гидроксибенз(а)пирена
- <a id="p100646"></a>аналитическая длина волны 254 нм (референсная длина волны 390 нм).
<a id="p100647"></a>Для установления градуировочных зависимостей выполняют измерения аналитического сигнала холостого опыта (градуировочный раствор N 1), представляющего собой "чистую" пробу, выбранную из проб того же вида биосубстрата - экскреты (моча, кал), проанализированную тем же методом ранее, и не содержащую бенз(а)пирен и его метаболиты в соответствии с [главами VIII](#p100667), [IX](#p100678). Далее выполняют измерения градуировочных образцов различных уровней концентраций в порядке их возрастания в соответствии с [таблицами 4](#p100402), [5](#p100530).
<a id="p100648"></a>Затем, используя программное обеспечение для сбора и обработки хроматографических данных, устанавливают градуировочные характеристики, выражающие зависимость площади пика на хроматограмме (в единицах оптической плотности для диодноматричного детектора и в единицах флуоресценции для флуориметрического детектора) от массовой концентрации бенз(а)пирена и его метаболитов (мкг/см3).
<a id="p100649"></a>Построение графиков допускается проводить при помощи программы обработки данных ВЭЖХ или при помощи компьютерной программы (например, электронные таблицы).
<a id="p100650"></a>*Примечание.* Если программным обеспечением хроматографа предусмотрен автоматический расчет, при построении градуировочной зависимости руководствуются инструкцией по эксплуатации применяемого средства измерений.

<a id="p100651"></a>Контроль стабильности градуировочной характеристики проводят по [п. 12.2](#p100715).


### <a id="p100652"></a>VII. ОТБОР ПРОБ



#### <a id="p100653"></a>7.1 Отбор проб экскретов у человека.

<a id="p100654"></a>Пробы экскретов отбирают в специальные одноразовые контейнеры для анализов по общепринятым правилам взятия экскретов в соответствии с [ГОСТ Р 53079.4](https://bukva.ai/docs/pravila-gost-r-53079-4-2008).
<a id="p100655"></a>Оптимальный объем пробы мочи на химическое исследование (1 - 10) см3.
<a id="p100656"></a>Оптимальная масса пробы кала на химическое исследование (0,2 - 2) г.
<a id="p100657"></a>Допускается хранение проб экскретов в пластиковой посуде с плотно закрывающейся крышкой в холодильной камере при минус 20 °C в течение 1 - 2 лет. В ходе проведения анализа допускается кратковременное хранение (в течение 1 - 3 дней) в холодильнике при минус 4 °C.

#### <a id="p100658"></a>7.2 Отбор проб экскретов у животных.

<a id="p100659"></a>Пробы экскретов отбирают в утренние часы перед кормлением, обычно при самопроизвольном мочеиспускании и испражнении по общепринятым правилам взятия экскретов у животных.
<a id="p100660"></a>Собирают экскреты в чистые сосуды с широким "горлом".
<a id="p100661"></a>Когда невозможно получить мочу самопроизвольно, ее берут из мочевого пузыря путем катетеризации.
<a id="p100662"></a>Для сбора суточной мочи или за 6 - 12 ч у крупных животных используют мочеприемники.
<a id="p100663"></a>Для сбора экскретов у мелких животных используют специальные метаболические клетки.
<a id="p100664"></a>Оптимальный объем пробы мочи на химическое исследование (1 - 10) см3.
<a id="p100665"></a>Оптимальная масса пробы кала на химическое исследование (0,2 - 2) г.
<a id="p100666"></a>Допускается хранение проб экскретов в пластиковой посуде с плотно закрывающейся крышкой в холодильной камере при минус 20 °C в течение 1 - 2 лет. В ходе проведения анализа допускается кратковременное хранение (в течение 1 - 3 дней) в холодильнике при минус 4 °C.


### <a id="p100667"></a>VIII. ОБРАБОТКА ПРОБ ЭКСКРЕТОВ



#### <a id="p100668"></a>8.1 Обработка проб мочи.

<a id="p100669"></a>Пробы гомогенизируют.
<a id="p100670"></a>(1 - 10) см3 анализируемой мочи в зависимости от ожидаемого содержания определяемых аналитов в пробе из одноразового контейнера для анализов помещают в одноразовый медицинский шприц типа "Луер" вместимостью 50 см3 с надетым на наконечник шприца запорным краном, прибавляют 5 см3 0,73 моль/дм3 раствора гидроксида калия в этиловом спирте [(п. 6.3.3)](#p100356). Раствор тщательно перемешивают, закрывают воронкой и помещают на кипящую водную баню на 40 мин. После окончания процесса щелочного гидролиза медицинский шприц типа "Луер" с анализируемой пробой снимают с водяной бани, охлаждают до комнатной температуры.
<a id="p100671"></a>Для экстракции бенз(а)пирена и его метаболитов к содержимому медицинского шприца типа "Луер" добавляют 5 см3 хлористого метилена и интенсивно перемешивают в течение 2 мин. После полного разделения слоев органический слой экстракта переносят в стаканчик для взвешивания. Для улучшения разделения слоев к анализируемому образцу допускается добавлять несколько капель этилового спирта. Описанную процедуру экстракции повторяют еще дважды, объем хлористого метилена для второй экстракции - 3 см3, для третьей экстракции - 2 см3. Объединенные экстракты упаривают в вихревом потоке газа на воздухе при комнатной температуре.

#### <a id="p100672"></a>8.2 Обработка проб кала.

<a id="p100673"></a>Перед исследованиями пробы кала замораживают при температуре не выше минус 20 °C для разрушения стенок клеток и извлечения из клеток белков, в которые встраивается бенз(а)пирен и его метаболиты.
<a id="p100674"></a>После заморозки пробы кала выдерживают при комнатной температуре в темном месте не более 1 часа.
<a id="p100675"></a>Пробы гомогенизируют.
<a id="p100676"></a>(<sub>0</sub>,2 - <sub>2</sub>) г анализируемого кала в зависимости от ожидаемого содержания определяемых аналитов в пробе из одноразового контейнера для анализов помещают в одноразовый медицинский шприц типа "Луер" вместимостью 50 см3 с надетым на наконечник шприца запорным краном, прибавляют 5 см3 изотонического раствора Рингера [п. 6.3.2](#p100353) и 5 см3 0,73 моль/дм3 раствора гидроксида калия в этиловом спирте [(п. 6.3.3)](#p100356). Раствор тщательно перемешивают, закрывают воронкой и помещают на кипящую водную баню на 1 час. После окончания процесса щелочного гидролиза медицинский шприц типа "Луер" с анализируемой пробой снимают с водяной бани, охлаждают до комнатной температуры.
<a id="p100677"></a>Для экстракции бенз(а)пирена и его метаболитов к содержимому медицинского шприца типа "Луер" добавляют 5 см3 хлористого метилена и интенсивно перемешивают в течение 2 мин. После полного разделения слоев органический слой экстракта переносят в стаканчик для взвешивания. Для улучшения разделения слоев к анализируемому образцу допускается добавлять несколько капель этилового спирта. Описанную процедуру экстракции повторяют еще дважды, объем хлористого метилена для второй экстракции - 3 см3, для третьей экстракции - 2 см3. Объединенные экстракты упаривают в вихревом потоке газа при комнатной температуре.


### <a id="p100678"></a>IX. ВЫПОЛНЕНИЕ ИЗМЕРЕНИЙ


<a id="p100679"></a>9.1. В стаканчики для взвешивания с обработанной пробой экскретов добавляют 1 см3 н-гексана, тщательно перемешивают. Полученный раствор (концентрат) объемом 1 см3 фильтруют через мембранный фильтр с размером пор не более 0,45 мкм, используя медицинский шприц типа "Луер" вместимостью 1 см3, в стеклянную виалу вместимостью 2 см3 и хроматографируют на жидкостном хроматографе в условиях, указанных в [п. 6.5](#p100399).
<a id="p100680"></a>9.2. Идентификацию бенз(а)пирена и его метаболитов проводят путем сравнения абсолютных времен удерживания хроматографических пиков в анализируемой пробе и градуировочных растворах.


### <a id="p100681"></a>X. ОБРАБОТКА РЕЗУЛЬТАТОВ ИЗМЕРЕНИЙ


<a id="p100682"></a>10.1. Содержание бенз(а)пирена и его метаболитов, приходящееся на 100 см3 анализируемой пробы мочи (X, мкг/100 см3), рассчитывают по формуле:

<a id="p100683"></a>X = [(C·l·100)/V]/К, (1)

<a id="p100684"></a>где C - массовая концентрация бенз(а)пирена или его метаболитов, найденная по градуировочной зависимости в соответствии с [п. 6.5](#p100399), мкг/см3;
<a id="p100685"></a>l - объем концентрата, см3;
<a id="p100686"></a>100 - коэффициент пересчета анализируемой пробы мочи на 100 см3;
<a id="p100687"></a>V - анализируемый объем пробы мочи, полученный в соответствии с [п. 8.1](#p100668), см3;
<a id="p100688"></a>К - коэффициент, учитывающий степень экстракции бенз(а)пирена и его метаболитов из мочи:
<a id="p100689"></a>К = 0,70 - для бенз(а)пирена;
<a id="p100690"></a>К = 0,50 - для метаболитов (бенз(а)пирена-транс-7,8-дигидродиола и 3-гидроксибенз(а)пирена).
<a id="p100691"></a>10.2. Содержание бенз(а)пирена и его метаболитов, приходящееся на 100 г анализируемой пробы кала (X, мкг/100 г), рассчитывают по формуле:

<a id="p100692"></a>X = [(C·l·100)/m]/К, (2)

<a id="p100693"></a>где C - массовая концентрация бенз(а)пирена или его метаболитов, найденная по градуировочной зависимости в соответствии с [п. 6.5](#p100399), мкг/см3;
<a id="p100694"></a>l - объем концентрата, см3;
<a id="p100695"></a>100 - коэффициент пересчета анализируемой пробы кала на 100 г;
<a id="p100696"></a>m - анализируемая масса пробы кала, полученная в соответствии с [п. 8.2](#p100672), г;
<a id="p100697"></a>К - коэффициент, учитывающий степень экстракции бенз(а)пирена и его метаболитов из кала:
<a id="p100698"></a>К = 0,70 - для бенз(а)пирена;
<a id="p100699"></a>К = 0,50 - для метаболитов (бенз(а)пирена-транс-7,8-дигидродиола и 3 гидроксибенз(а)пирена).


### <a id="p100700"></a>XI. ОФОРМЛЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИЗМЕРЕНИЙ



#### <a id="p100701"></a>11.1 Результат измерений по настоящей методике в документах, предусматривающих ее использование, представляют в виде:


<a id="p100702"></a> $(X \pm \Delta_{\text{л}})\text{мкг}/100\text{см}^{3},(\text{Р } = 0,95);$ (3)

<a id="p100703"></a>где X - содержание бенз(а)пирена или его метаболитов в анализируемой пробе, мкг/100 см3;
<a id="p100704"></a> $\Delta_{\text{л}}$ - значение абсолютной погрешности, мкг/100 см3, рассчитанное по формуле:

<a id="p100705"></a> $\Delta_{\text{л}} = 0,01 \cdot \delta_{\text{л}} \cdot X;$ (4)

<a id="p100706"></a>где $\delta_{\text{л}}$ - показатель точности (границы относительной погрешности), приведенный в [таблице 1](#p100034), %.
<a id="p100707"></a>11.2. Численные значения результатов измерений должны оканчиваться цифрой того же разряда, что и значения характеристики погрешности, которые не должны содержать более двух значащих цифр.


### <a id="p100708"></a>XII. КОНТРОЛЬ ТОЧНОСТИ РЕЗУЛЬТАТОВ ИЗМЕРЕНИЙ



#### <a id="p100709"></a>12.1 Общие сведения.


##### <a id="p100710"></a>12.1.1 Контроль точности результатов измерений при реализации методики в лаборатории предусматривает:

- <a id="p100711"></a>контроль стабильности градуировочной характеристики;
- <a id="p100712"></a>оперативный контроль исполнителем процедуры выполнения измерений на основе оценки погрешности при реализации отдельно взятой контрольной процедуры;
- <a id="p100713"></a>проверка приемлемости результатов, полученных в условиях внутрилабораторной прецизионности.
<a id="p100714"></a>12.1.2. Периодичность контроля исполнителем процедуры выполнения измерений, а также реализуемые процедуры контроля стабильности результатов выполняемых измерений проводятся в соответствии с руководством по качеству аккредитованной лаборатории.

#### <a id="p100715"></a>12.2 Контроль стабильности градуировочной характеристики.

<a id="p100716"></a>12.2.1. Стабильность градуировочной характеристики контролируют не реже, чем через каждые 15 проб.
<a id="p100717"></a>12.2.2. Для этого дважды проводят измерения аналитического сигнала одного и того же градуировочного раствора, приготовленного по [п. 6.5](#p100399), вычисляют относительное отклонение средней концентрации, найденной по градуировочной характеристике, от номинального значения концентрации градуировочного раствора. Используют не менее двух градуировочных растворов бенз(а)пирена или его метаболитов с массовой концентрацией, близкой к началу и концу градуировочной характеристики.

##### <a id="p100718"></a>12.2.3 Градуировочная зависимость признается стабильной, если для обоих градуировочных растворов выполняется условие:


<a id="p100719"></a> $|\text{С } - \text{С}_{\text{к}}| \leq \delta_{\text{гр}.} \cdot \text{С } \cdot 0,01;$ (5)

<a id="p100720"></a>где C - действительное значение массовой концентрации бенз(а)пирена или его метаболитов в градуировочном растворе, мкг/см3;
<a id="p100721"></a>Cк - результат контрольного измерения массовой концентрации бенз(а)пирена или его метаболитов в этом же градуировочном растворе, мкг/см3;
<a id="p100722"></a> $\delta_{\text{гр}.}$ - относительная погрешность построения градуировочной характеристики:

<a id="p100723"></a>для флуорометрического детектора:

<a id="p100724"></a> $\delta_{\text{гр}.} = 15\%$ - для бенз(а)пирена
<a id="p100725"></a> $\delta_{\text{гр}.} = 19\%$ - для бенз(а)пирена-транс-7,8-дигидродиола
<a id="p100726"></a> $\delta_{\text{гр}.} = 17\%$ - для 3-гидроксибенз(а)пирена

<a id="p100727"></a>для диодноматричного детектора:

<a id="p100728"></a> $\delta_{\text{гр}.} = 14\%$ - для бенз(а)пирена
<a id="p100729"></a> $\delta_{\text{гр}.} = 19\%$ - для бенз(а)пирена-транс-7,8-дигидродиола
<a id="p100730"></a> $\delta_{\text{гр}.} = 18\%$ - для 3-гидроксибенз(а)пирена.
<a id="p100731"></a>В случае невыполнения [условия (4)](#p100705) для выбранных градуировочных растворов с массовой концентрацией, близкой к началу и концу градуировочной характеристики, проводят повторную градуировку прибора. Если [условие (5)](#p100719) не выполняется только для одного градуировочного раствора, то этот раствор измеряют повторно. Если при повторном измерении [условие (5)](#p100719) выполняется, то градуировочная характеристика считается стабильной, если условие не выполняется, то проводят повторную градуировку прибора.
<a id="p100732"></a>Градуировочная характеристика в таком случае соответствует линейной зависимости с коэффициентом корреляции не менее 0,95.
<a id="p100733"></a>12.3. Алгоритм оперативного контроля процедуры выполнения измерений с использованием образца для контроля.
<a id="p100734"></a>12.3.1. Образец для контроля (далее - ОК) представляет собой матричный раствор для градуировки.
<a id="p100735"></a>На стадии перерастворения перед введением в хроматограф в стаканчики для взвешивания с обработанной пробой экскретов добавляют 1 см3 градуировочного раствора бенз(а)пирена и его метаболитов, тщательно перемешивают. Полученный раствор фильтруют через мембранный фильтр с размером пор не более 0,45 мкм, используя медицинский шприц "Луер", в стеклянную виалу вместимостью 2 см3 и анализируют на жидкостном хроматографе в условиях, указанных в [п. 6.5](#p100399).

##### <a id="p100736"></a>12.3.2 Результат контрольной процедуры Кк, мкг/100 см3, рассчитывают по формуле:


<a id="p100737"></a>Кк = X - C, (6)

<a id="p100738"></a>где X - содержание бенз(а)пирена или его метаболитов в ОК, мкг/100 см3;
<a id="p100739"></a>C - рассчитанное содержание бенз(а)пирена или его метаболитов в ОК, мкг/100 см3.

##### <a id="p100740"></a>12.3.3 Норматив контроля погрешности Кn рассчитывают по формуле


<a id="p100741"></a> $\text{К}_{n} = \Delta_{\text{л}},$ (7)

<a id="p100742"></a>где $\Delta_{\text{л}}$ - абсолютное значение характеристики погрешности результата измерений, соответствующее массовой концентрации бенз(а)пирена или его метаболитов в исследуемой пробе, мкг/100 см3:

<a id="p100743"></a> $\Delta_{\text{л}} = 0,01 \cdot \delta_{\text{л}} \cdot \text{С}.$ (8)


##### <a id="p100744"></a>12.3.4 Если результат контрольной процедуры удовлетворяет условию:


<a id="p100745"></a>Кк <= Кn, (9)

<a id="p100746"></a>процедуру признают удовлетворительной.
<a id="p100747"></a>При невыполнении [условия (9)](#p100745) контрольную процедуру повторяют. При повторном невыполнении [условия (9)](#p100745) выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и принимают меры по их устранению.
<a id="p100748"></a>12.4. Алгоритм проведения контрольной процедуры при контроле внутрилабораторной прецизионности.
<a id="p100749"></a>12.4.1. Контроль внутрилабораторной прецизионности осуществляют для результатов измерений, полученных в соответствии с методикой в условиях внутрилабораторной прецизионности (разные исполнители и (или) разное время, и (или) разные наборы средств измерений и т.д.). В качестве образца для контроля используют рабочие пробы экскретов.

##### <a id="p100750"></a>12.4.2 Результат контрольной процедуры признают удовлетворительным при выполнении следующего условия:


<a id="p100751"></a>|X1 - X2| <= Rл, (10)

<a id="p100752"></a>где X<sub>1</sub> и X<sub>2</sub> - результаты контрольных измерений содержания бенз(а)пирена или его метаболитов в образце для контроля, полученные в условиях внутрилабораторной прецизионности, мкг/100 см3;
<a id="p100753"></a>Rл - абсолютное значение допускаемого расхождения между двумя результатами, полученными в одной лаборатории в условиях внутрилабораторной прецизионности, мкг/100 см3, рассчитываемое по формуле:

<a id="p100754"></a> $R_{\text{л}} = 0,01 \cdot \sigma_{R\text{л}} \cdot 2,77 \cdot X,$ (11)

<a id="p100755"></a>где X - среднее арифметическое значение контрольных результатов измерений содержания бенз(а)пирена или его метаболитов в образце для контроля, мкг/100 см3;
<a id="p100756"></a> $\sigma_{R\text{л}}$ - относительное значение показателя внутрилабораторной прецизионности [(таблица 1)](#p100034), %.
<a id="p100757"></a>12.4.3. При выполнении [условия (10)](#p100751) говорят об удовлетворительной внутрилабораторной прецизионности результатов измерений.
<a id="p100758"></a>При превышении предела внутрилабораторной прецизионности анализ повторяют. При повторном превышении указанного предела выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам контроля, и устраняют их.






## <a id="p100759"></a>БИБЛИОГРАФИЧЕСКИЕ ССЫЛКИ


1. <a id="p100760"></a>Федеральный закон от 30 марта 1999 г. N 52-ФЗ "О санитарно-эпидемиологическом благополучии населения".
2. <a id="p100761"></a>ГОСТ 12.1.019 Система стандартов безопасности труда (ССБТ). Электробезопасность. Общие требования и номенклатура видов защиты.
3. <a id="p100762"></a>[ГОСТ Р 52501](https://bukva.ai/docs/gost-r-52501-2005) "Вода для лабораторного анализа. Технические условия".
4. <a id="p100763"></a>[ГОСТ Р 53079.4](https://bukva.ai/docs/pravila-gost-r-53079-4-2008) "Технологии лабораторные клинические. Обеспечение качества клинических лабораторных исследований. Часть 4. Правила ведения преаналитического этапа".
5. <a id="p100764"></a>ГОСТ Р 53228 "Весы неавтоматического действия. Часть 1. Метрологические и технические требования. Испытания".
6. <a id="p100765"></a>[ГОСТ Р ИСО 5725-1 - ГОСТ Р ИСО 5725-6](https://bukva.ai/docs/gost-r-iso-5725-5-2002) "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений".
7. <a id="p100766"></a>[ГОСТ 8.315](https://bukva.ai/docs/standart-gost-8-315-2019) "Государственная система обеспечения единства измерений. Стандартные образцы состава и свойств веществ и материалов. Основные положения".
8. <a id="p100767"></a>ГОСТ 12.1.004 "Система стандартов безопасности труда. Пожарная безопасность. Общие требования".
9. <a id="p100768"></a>ГОСТ 12.1.005 "Система стандартов безопасности труда. Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху рабочей зоны".
10. <a id="p100769"></a>[ГОСТ 450](https://bukva.ai/docs/gost-450-77) "Кальций хлористый технический. Технические условия".
11. <a id="p100770"></a>[ГОСТ 1770](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74) "Посуда мерная лабораторная стеклянная. Цилиндры, мензурки, колбы, пробирки. Общие технические условия".
12. <a id="p100771"></a>[ГОСТ 2222](https://bukva.ai/docs/gost-2222-95) "Метанол технический. Технические условия".
13. <a id="p100772"></a>ГОСТ 2768 "Ацетон технический. Технические условия".
14. <a id="p100773"></a>ГОСТ 4233 "Реактивы. Натрий хлористый. Технические условия".
15. <a id="p100774"></a>ГОСТ 4461 "Реактивы. Кислота азотная. Технические условия".
16. <a id="p100775"></a>[ГОСТ 4568](https://bukva.ai/docs/gost-4568-95) "Калий хлористый. Технические условия".
17. <a id="p100776"></a>[ГОСТ 8981](https://bukva.ai/docs/gost-8981-78) "Эфиры этиловый и нормальный бутиловый уксусной кислоты технические. Технические условия".
18. <a id="p100777"></a>[ГОСТ 24363](https://bukva.ai/docs/gost-24363-80) "Реактивы. Калия гидроокись. Технические условия".
19. <a id="p100778"></a>ГОСТ 23932 "Посуда и оборудование лабораторные стеклянные. Общие технические условия".
20. <a id="p100779"></a>ГОСТ 25336 "Посуда и оборудование лабораторные стеклянные. Типы, основные параметры и размеры".
21. <a id="p100780"></a>[ГОСТ 28311](https://bukva.ai/docs/standart-gost-28311-2021) "Дозаторы медицинские лабораторные. Общие технические требования и методы испытаний".
22. <a id="p100781"></a>[ГОСТ 29169](https://bukva.ai/docs/gost-29169-91) "Посуда лабораторная стеклянная. Пипетки с одной отметкой".
23. <a id="p100782"></a>[ГОСТ 29227](https://bukva.ai/docs/gost-29227-91) "Посуда лабораторная стеклянная. Пипетки градуированные. Часть 1. Общие требования".
24. <a id="p100783"></a>[ГОСТ ISO 7886-1](https://bukva.ai/docs/gost-iso-7886-1-2011) "Шприцы инъекционные однократного применения стерильные. Часть 1. Шприцы для ручного использования (с Поправками)".
25. <a id="p100784"></a>ТУ 6-09-1710 "Этанол для хроматографии (этиловый спирт) химически чистый. Технические условия".
26. <a id="p100785"></a>ТУ 6-09-3818 "Диметилсульфоксид (метилсульфоксид). Технические условия".
27. <a id="p100786"></a>ТУ 2631-001-54260861 "Гексан для хроматографии".
28. <a id="p100787"></a>ТУ 2634-002-04715285 "Ацетонитрил".
29. <a id="p100788"></a>СТП ТУ СОМР 3-102 "Дихлорметан для спектроскопии (метилен хлористый)".



<a id="p100789"></a>

---