ФС.3.4.0006.18. Фармакопейная статья. Полыни горькой травы настойка

(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 31.10.2018 № 749)

(«Государственная фармакопея Российской Федерации. XIV издание. Том IV»)

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

Полыни горькой травы настойка	ФС.3.4.0006.18
Artemisiae absinthii herbae tinctura	Взамен ГФ X ст. 685 и ФС 42-2434-93

Настоящая фармакопейная статья распространяется на Полыни горькой травы настойку, получаемую из высушенной травы дикорастущего многолетнего травянистого растения полыни горькой Artemisia absinthium L., сем. астровых — Asteraceae, применяемую в качестве лекарственного средства.

Для получения настойки используют:

    Полыни горькой травы                - 200 г;
    этанола (спирта этилового) 70%      - достаточное количество

                                      для получения 1000 мл.

Описание. Прозрачная жидкость коричневато-зеленого цвета, с характерным запахом.

Подлинность

Тонкослойная хроматография

Приготовление растворов.

Раствор стандартного образца (СО) рутина. Около 0,001 г СО рутина (рутина тригидрата) растворяют при нагревании на водяной бане в 10 мл спирта 96% и перемешивают. Срок годности раствора не более 3 мес при хранении в прохладном, защищенном от света месте.

Раствор стандартного образца (СО) хлорогеновой кислоты. Около 0,001 г СО хлорогеновой кислоты растворяют в 10 мл спирта 96% и перемешивают. Срок годности раствора не более 3 мес при хранении в прохладном, защищенном от света месте.

На линию старта аналитической хроматографической пластинки со слоем силикагеля наносят в виде полос длиной 10 мм и шириной 2 мм 20 мкл (0,02 мл) препарата и параллельно в одну полосу по 10 мкл (0,01 мл) растворов СО рутина и хлорогеновой кислоты. Пластинку с нанесенными пробами сушат в течение 5 мин, помещают в камеру, предварительно насыщенную в течение не менее 30 мин смесью растворителей этилацетат — муравьиная кислота безводная — вода (40:4:6), и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт растворителей пройдет около 80 — 90% длины пластинки от линии старта, ее вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей, выдерживают при температуре 100 — 105 °C в течение 2 — 3 мин и еще теплую обрабатывают последовательно дифенилборной кислоты аминоэтилового эфира раствором 1% в спирте 96% и макрогола 400 раствором спиртовым 5% и просматривают через 30 мин в УФ-свете (365 нм).

На хроматограмме растворов СО рутина и СО хлорогеновой кислоты должны обнаруживаться: зона адсорбции с флуоресценцией желтого, желто-оранжевого или оранжевого цвета (рутин) и зона адсорбции с флуоресценцией голубого цвета (хлорогеновая кислота).

На хроматограмме препарата должны обнаруживаться: зона адсорбции с флуоресценцией желтого, желто-зеленого, желто-оранжевого или оранжевого цвета на уровне зоны адсорбции СО рутина; две зоны адсорбции с флуоресценцией голубого цвета на уровне зоны адсорбции СО хлорогеновой кислоты и выше нее; допускается обнаружение дополнительных зон адсорбции.

Качественные реакции

1. 10 мл препарата помещают в фарфоровую чашку, упаривают на водяной бане до объема около 1 мл, прибавляют 0,2 мл аммиака раствора 10%, 0,1 г смеси кальция и талька (1:1), перемешивают до получения порошкообразной массы, которую обрабатывают 10 мл эфира. Эфирные извлечения помещают в фарфоровую чашку, эфир отгоняют досуха. К сухому остатку прибавляют 0,5 мл серной кислоты концентрированной; должно наблюдаться красновато-коричневое окрашивание, переходящее в фиолетовое при прибавлении спирта 96% (гликозиды).

2. 10 мл препарата помещают в делительную воронку, прибавляют 10 мл воды, тщательно перемешивают и взбалтывают с эфиром 2 раза порциями по 10 мл в течение 3 мин. После разделения слоев эфирное извлечение сливают. Первое эфирное извлечение отбрасывают, второе эфирное извлечение осторожно упаривают на водяной бане досуха. Сухой остаток растворяют в 2 мл спирта 96%, осторожно прибавляют 2 мл хлористоводородной кислоты концентрированной и нагревают на водяной бане; должно наблюдаться зеленое окрашивание, постепенно переходящее в коричневое (сесквитерпеновые лактоны азуленового ряда).

3. К остатку в делительной воронке (после обработки эфиром) прибавляют 5 мл бутанола, предварительно насыщенного водой (7:3), и взбалтывают в течение 3 мин. После разделения слоев бутанольное извлечение сливают и упаривают на водяной бане до полного удаления растворителя. Остаток бутанольного извлечения растворяют в 5 мл спирта 96%, прибавляют 0,2 г магния порошка и постепенно, осторожно приливают 1 мл хлористоводородной кислоты концентрированной; через 20 — 30 мин должно наблюдаться красновато-коричневое окрашивание (флавоноиды).

Спирт этиловый. Не менее 64%. В соответствии с ОФС «Определение спирта этилового в лекарственных средствах».

<*> Метанол и 2-пропанол. Не более 0,05% метанола и не более 0,05% 2-пропанола. В соответствии с требованиями ОФС «Определение метанола и 2-пропанола».

---

<*> Контролируется в течение технологического процесса.

Сухой остаток. Не менее 3,0%. В соответствии с ОФС «Настойки».

Тяжелые металлы. Не более 0,001%. В соответствии с требованиями ОФС «Определение содержания тяжелых металлов и мышьяка в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Объем содержимого упаковки. В соответствии с требованиями ОФС «Настойки».

Микробиологическая чистота. В соответствии с требованиями ОФС «Микробиологическая чистота».

Количественное определение. Содержание суммы флавоноидов в пересчете на рутин в препарате должно быть не менее 0,05%.

Приготовление растворов.

Раствор стандартного образца (СО) рутина. Около 0,05 г (точная навеска) СО рутина помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл и растворяют при нагревании на водяной бане в 85 мл спирта 96%, охлаждают, доводят объем раствора тем же спиртом до метки и перемешивают (раствор А СО рутина). Срок годности раствора не более 1 мес при хранении в прохладном, защищенном от света месте.

1,0 мл раствора А СО рутина, 5 мл алюминия хлорида спиртового раствора 2% и 0,1 мл уксусной кислоты ледяной, помещенных в мерную колбу вместимостью 25 мл, доведенных спиртом 96% до метки (раствор Б СО рутина). Срок годности раствора не более 1 мес при хранении в прохладном, защищенном от света месте.

2,0 мл препарата помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл, доводят спиртом 70% до метки и перемешивают (испытуемый раствор А).

5,0 мл испытуемого раствора А помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл, прибавляют 5 мл алюминия хлорида раствора 2% в спирте 96%, 0,1 мл уксусной кислоты разведенной 30%, доводят объем раствора спиртом 96% до метки и перемешивают (раствор Б испытуемого раствора).

Через 30 мин измеряют оптическую плотность испытуемого раствора Б на спектрофотометре при длине волны 410 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм. В качестве раствора сравнения используют раствор, состоящий из 5 мл испытуемого раствора А, 0,1 мл уксусной кислоты разведенной 30%, доведенный спиртом 96% до метки в мерной колбе вместимостью 25 мл.

Параллельно измеряют оптическую плотность раствора Б СО рутина в таких же условиях. В качестве раствора сравнения используют раствор, состоящий из 1,0 мл раствора А СО рутина, 0,1 мл уксусной кислоты разведенной 30%, доведенный спиртом 96% до метки в мерной колбе вместимостью 25 мл.

Содержание суммы флавоноидов в препарате в пересчете на рутин в процентах (X) вычисляют по формуле:

X = \frac{A \cdot a_{0} \cdot 1 \cdot 25 \cdot 25 \cdot P \cdot 100}{A_{0} \cdot a \cdot 5 \cdot 100 \cdot 25 \cdot 100} = \frac{A \cdot a_{0} \cdot 0,05 \cdot P}{A_{0} \cdot a} ,

где A — оптическая плотность раствора Б испытуемого раствора;

A0 — оптическая плотность раствора Б СО рутина;

a — объем настойки, мл;

a0 — навеска СО рутина, г;

P — содержание основного вещества в СО рутина, %.

Допускается содержание суммы флавоноидов в пересчете на рутин вычислять с использованием удельного показателя поглощения комплекса рутина с алюминия хлоридом по формуле:

где A — оптическая плотность раствора Б испытуемого раствора;

a — объем настойки, мл;

A_{1\text{см}}^{1\%} — удельный показатель поглощения комплекса рутина с алюминия хлоридом при длине волны 410 нм, равный 260.

Хранение. В соответствии с требованиями ОФС «Настойки».

---