ФС.3.4.0003.18. Фармакопейная статья. Ландыша травы настойка
(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 31.10.2018 № 749)
(«Государственная фармакопея Российской Федерации. XIV издание. Том IV»)
Примечание
В соответствии с Приказом Минздрава России от 31.10.2018 № 749 данный документ введен в действие с 01.12.2018. Текст документа приведен в соответствии с публикацией на сайте http://femb.ru/femb/pharmacopea.php по состоянию на 15.03.2019. Взамен ГФ X ст. 687.
МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
| Ландыша травы настойка | ФС.3.4.0003.18 |
|---|---|
| Convallariae herbae tinctura | Взамен ГФ X ст. 687 |
Настоящая фармакопейная статья распространяется на Ландыша травы настойку, получаемую из травы дикорастущего растения ландыша майского — Convallaria majalis L., ландыша закавказского — Convallaria transcaucasica Utkin ex Grossh. и ландыша Кейске — Convallaria keiskei Mig., сем. лилейных — Liliaceae, применяемую в качестве лекарственного средства.
| Для получения настойки используют: | |
| Ландыша травы измельченной | - 100 г |
| Этанола (спирта этилового) 70% | - достаточное количество для получения 1 л настойки |
Прозрачная жидкость зеленовато-коричневого цвета со слабым характерным запахом.
На линию старта аналитической хроматографической пластинки со слоем силикагеля наносят 8 мкл настойки. Пластинку с нанесенной пробой сушат на воздухе и помещают в камеру, предварительно насыщенную в течение не менее 2 ч смесью растворителей хлороформ — ацетон — метанол (6:2:2) и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт растворителей пройдет около 80 — 90% длины пластинки от линии старта, пластинку вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей, обрабатывают ванилина раствором 1% в хлорной кислоте разведенной 10% и нагревают при температуре 80 — 110 °C в течение 10 — 30 мин.
На хроматограмме настойки в средней трети должна обнаруживаться зона адсорбции конваллятоксина синевато-красного цвета; допускается обнаружение других зон адсорбции.
К 3 мл испытуемого раствора А (см. раздел «Количественное определение. Спектрофотометрический метод» приготовление испытуемого раствора А) прибавляют 2,5 мл натрия пикрата нейтрального раствора и 0,5 мл натрия гидроксида раствора 2%, через 10 мин должно наблюдаться желтое окрашивание (сердечные гликозиды).
Спирт этиловый. Не менее 64%. В соответствии с ОФС «Определение спирта этилового в лекарственных средствах».
<*> Метанол и 2-пропанол. Не более 0,05% метанола и не более 0,05% 2-пропанола. В соответствии с требованиями ОФС «Определение метанола и 2-пропанола».
<*> Контролируется в течение технологического процесса.
Сухой остаток. Не менее 1,7%. В соответствии с ОФС «Настойки».
Тяжелые металлы. Не более 0,001%. В соответствии с требованиями ОФС «Настойки».
Объем содержимого упаковки. В соответствии с требованиями ОФС «Настойки».
Микробиологическая чистота. В соответствии с требованиями ОФС «Микробиологическая чистота».
Количественное определение. Определение сердечных гликозидов проводят методом 1 или 2; арбитражным является биологический метод.
1. Биологический метод. 1 мл препарата должен содержать от 10,4 до 13,3 ЛЕД.
В соответствии с требованиями ОФС «Биологические методы оценки активности лекарственного растительного сырья и лекарственных препаратов, содержащих сердечные гликозиды».
Испытания проводят на травяных лягушках, вводя растворы в лимфатические бедренные мешки (под кожу) или в сердце (в полость желудочка); на водяных лягушках — в сердце (в полость желудочка) или в вену.
Раствор стандартного образца (СО) экстракта ландыша. К 2 мл СО экстракта ландыша прибавляют 8 мл воды (1:4) при введении раствора под кожу. Готовят в день опыта.
К 2 мл СО экстракта ландыша прибавляют 2 мл воды, выпаривают до 2 мл и доводят водой до 8 мл (1:4) при введении раствора в полость сердца или вену. Готовят в день опыта.
К 2 мл настойки ландыша прибавляют 8 мл воды (1:4) (испытуемый раствор — при введении раствора под кожу).
К 2 мл настойки ландыша прибавляют 2 мл воды, выпаривают до 2 мл и доводят водой до 8 мл (1:4) (испытуемый раствор — при введении раствора в полость сердца или вену).
Определив наименьшие дозы раствора СО и испытуемого раствора (в мл на массу травяной лягушки или в мл на 1 г массы водяной лягушки), вычисляют содержание ЛЕД в 1 мл препарата (X) по формуле:
X = \frac{B \cdot K}{0,3 \cdot A} ,
где A — наименьшая доза в мл, установленная для испытуемого раствора;
B — наименьшая доза в мл, установленная для раствора стандартного образца;
0,3 — доза в мл, соответствующая 1 ЛЕД;
K — число, обозначающее разведение, равное 4.
2. Спектрофотометрический метод. Содержание суммы сердечных гликозидов в пересчете на конваллятоксин в 1 мл препарата должно быть от 0,104 до 0,133 мг.
5,0 мл препарата помещают в выпарительную чашку, упаривают на водяной бане до приблизительно 2 мл. Объем жидкости доводят водой до первоначального объема, прибавляют 1 мл свинца (II) ацетата раствора 10% и тщательно перемешивают.
Раствор фильтруют через бумажный складчатый фильтр в делительную воронку, фильтр промывают 5 мл воды, прибавляют 30 мл смеси спирт 95% — хлороформ (2:8) и взбалтывают в течение 5 мин. После расслоения органическую фазу фильтруют через бумажный фильтр с 3 г натрия сульфата безводного, смоченного 5 мл хлороформа, в колбу для отгона. Операцию извлечения спирто-хлороформной смесью повторяют еще дважды, используя по 30 мл спирто-хлороформной смеси того же состава и фильтруют спирто-хлороформное извлечение в ту же колбу для отгона. Фильтр с натрия сульфатом безводным промывают 10 мл спирто-хлороформной смеси. Полученное спирто-хлороформное извлечение отгоняют под вакуумом при 45 — 50 °C на роторном испарителе досуха.
Сухой остаток растворяют в 10 мл спирта 25%, затем колбу выпарительную дважды промывают 5 мл этого же спирта и раствор переносят в мерную колбу вместимостью 25 мл. Объем раствора в колбе доводят тем же спиртом до метки и перемешивают.
25 мл полученного раствора пропускают через колонку диаметром 1 см, заполненную 1,5 г полиамида для колоночной хроматографии или 5 г силикагеля для хроматографии (L 100/250) (испытуемый раствор А).
В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 15 мл испытуемого раствора А, прибавляют 7,5 мл натрия пикрата раствора нейтрального 1%, доводят до метки тем же растворителем и тщательно перемешивают (испытуемый раствор Б).
Через 10 мин измеряют оптическую плотность испытуемого раствора Б при длине волны 495 нм, в кювете с толщиной слоя 10 мм. В качестве раствора сравнения используют смесь, состоящую из 15 мл спирта 25%, 7,5 мл натрия пикрата раствора нейтрального 1%, и 2,5 мл натрия гидроксида раствора 2%.
Содержание суммы сердечных гликозидов в пересчете на конваллятоксин в 1 мл препарата (X) вычисляют по формуле:
X = \frac{\text{А} \cdot 25 \cdot 1000}{\text{А}_{1\text{см}}^{1\%} \cdot \text{а} \cdot 100} = \frac{\text{А} \cdot 50}{\text{А}_{1\text{см}}^{1\%} \cdot \text{а}} ,
где A — оптическая плотность испытуемого раствора Б;
\text{А}_{1\text{см}}^{1\%} — удельный показатель поглощения комплекса конваллятоксина с натрия пикратом при длине волны 495 нм, равный 170;
1000 — коэффициент пересчета г в мг.
Хранение. В соответствии с требованиями ОФС «Настойки».