ФС.3.1.0004.18. Фармакопейная статья. Амоксициллин, порошок для приготовления суспензии для приема внутрь
(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 31.10.2018 № 749)
Примечание
В соответствии с Приказом Минздрава России от 31.10.2018 № 749 данный документ введен в действие с 01.12.2018. Текст документа приведен в соответствии с публикацией на сайте http://femb.ru/femb/pharmacopea.php по состоянию на 14.03.2019.
МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
Настоящая фармакопейная статья распространяется на лекарственный препарат амоксициллин, порошок для приготовления суспензии для приема внутрь. Препарат должен соответствовать требованиям ОФС «Порошки» и ниже приведенным требованиям.
Содержит не менее 90,0% и не более 110,0% от заявленного количества амоксициллина C16H19N3O5S.
Описание. Содержание раздела приводится в соответствии с ОФС «Порошки» и ОФС «Суспензии».
1. Тонкослойная хроматография (ОФС «Тонкослойная хроматография»).
Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля силанизированного на стеклянной подложке.
Подвижная фаза (ПФ). Пиридин-вода-хлороформ-метанол 1:3:8:9.
Испытуемый раствор. Навеску порошка, эквивалентную около 20 мг амоксициллина тригидрата, встряхивают с 5 мл хлористоводородной кислоты раствора 0,1 М и фильтруют.
Раствор стандартного образца амоксициллина. Растворяют 20 мг стандартного образца амоксициллина тригидрата в 5 мл хлористоводородной кислоты раствора 0,1 М.
Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. Растворяют около 20 мг стандартного образца амоксициллина тригидрата и около 20 мг стандартного образца ампициллина тригидрата в 5 мл хлористоводородной кислоты раствора 0,1 М.
На линию старта пластинки наносят по 1 мкл испытуемого раствора (4 мкг), раствора стандартного образца амоксициллина (4 мкг) и раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы. Пластинку с нанесенными пробами сушат на воздухе, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдет около 80 — 90% длины пластинки от линии старта, ее вынимают из камеры, сушат на воздухе до удаления следов растворителей и опрыскивают нингидрина раствором 0,2%, нагревают при температуре 130 °C в течение 10 мин и просматривают при дневном свете.
Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы должны наблюдаться две четко разделенных зоны адсорбции.
Основная зона адсорбции на хроматограмме испытуемого раствора по положению, интенсивности окраски и величине должна соответствовать зоне адсорбции амоксициллина на хроматограмме раствора стандартного образца амоксициллина.
2. ВЭЖХ. Время удерживания пика основного вещества на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика амоксициллина на хроматограмме раствора стандартного образца амоксициллина (раздел «Количественное определение»).
Седиментационная устойчивость. Определение проводят в соответствии с ОФС «Суспензии».
Испытуемый раствор. К содержимому флакона прибавляют указанное в прилагаемой инструкции по медицинскому применению препарата количество растворителя и непрерывно встряхивают в течение 1 — 2 мин и помещают полученную суспензию в цилиндр вместимостью 100 мл.
Не должно наблюдаться признаков седиментации и образования агрегатов и агломератов в течение не менее 15 мин.
Размер частиц. Определение проводят в соответствии с ОФС «Суспензии» для испытуемого раствора после проведения испытания «Седиментационная устойчивость».
pH. От 4,0 до 7,0 (испытуемый раствор после проведения испытания «Седиментационная устойчивость», ОФС «Ионометрия», метод 3).
Светопоглощающие примеси. Оптическая плотность испытуемого раствора не должна превышать 0,3. Определение проводят методом спектрофотометрии (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).
Испытуемый раствор. Точную навеску порошка, эквивалентную около 0,25 г амоксициллина помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, прибавляют 20 мл воды, перемешивают, доводят объем раствора водой до метки и фильтруют через мембранный фильтр с диаметром пор 0,45 мкм.
Измеряют оптическую плотность испытуемого раствора на спектрофотометре при длине волны 325 нм в кювете с толщиной слоя 1 см.
Оптическая плотность испытуемого раствора не должна превышать 0,3.
Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).
Все растворы используют свежеприготовленными или хранят при температуре 4 °C не более суток.
Буферный раствор pH 5,0. В мерную колбу вместимостью 1 л помещают 250 мл калия дигидрофосфата раствора 0,2 М, доводят значение pH до 5,00 +/- 0,05 натрия гидроксида раствором 2 М и доводят объем раствора водой до метки.
Подвижная фаза А (ПФА). Ацетонитрил-Буферный раствор pH 5,0 1:99.
Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил-Буферный раствор pH 5,0 20:80.
Испытуемый раствор. Готовят суспензию как указано в инструкции по медицинскому применению лекарственного препарата. Объем суспензии, эквивалентный около 30 мг амоксициллина, помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, прибавляют 30 мл ПФА, доводят объем тем же растворителем до метки и фильтруют.
Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объем раствора ПФА до метки.
Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. Около 4 мг стандартного образца цефадроксила и около 30 мг стандартного образца амоксициллина тригидрата помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в ПФА и доводят объем раствора тем же растворителем до метки.
Цефадроксил: (6R,7R)-7-[(2R)-2-амино-2-(4-гидроксифенил)ацетамидо]-3-метил-8-оксо-5-тиа-1-азабицикло[4.2.0]окт-2-ен-2-карбоновая кислота, CAS 66592-87-8.
| Колонка | 25 x 0,46 см, силикагель октадецилсилильный для хроматографии (C18), 5 мкм; |
|---|---|
| Температура колонки | 25 °C; |
| Скорость потока | 1,0 мл/мин; |
| Детектор | спектрофотометрический, 254 нм; |
| Объем пробы | 50 мкл. |
| Время, мин | ПФА (%) | ПФБ (%) |
| 0 — tR | 92 | 8 |
| tR — (tR + 25) | 92 \rightarrow 0 | 8 \rightarrow 100 |
| (tR + 25) — (tR + 40) | 0 | 100 |
| (tR + 40) — (tR + 55) | 92 | 8 |
| tR — время удерживания пика амоксициллина. | ||
Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.
Пригодность хроматографической системы.
На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (R) между пиками амоксициллина и цефадроксила должно быть не менее 2,0.
На хроматограмме раствора сравнения:
- относительное стандартное отклонение площади пика амоксициллина должно быть не более 2% (6 определений);
- фактор асимметрии пика (As) амоксициллина должен быть не более 2,0;
- эффективность хроматографической колонки (N), рассчитанная по пику амоксициллина, должна составлять не менее 1500 теоретических тарелок.
Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:
- площадь пика любой примеси не должна превышать площадь пика амоксициллина на хроматограмме раствора сравнения (не более 1%);
- суммарная площадь пиков всех примесей не должна превышать пятикратной площади пика амоксициллина на хроматограмме раствора сравнения (не более 5%).
Вода. Не более 8,0% (ОФС «Определение воды», метод 1).
Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».
Количественное определение. Испытание проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси».
Подвижная фаза (ПФ). ПФА-ПФБ 92:8.
Испытуемый раствор. Готовят суспензию как указано в инструкции по медицинскому применению лекарственного препарата и определяют ее плотность в соответствии с ОФС «Плотность», метод 1. Точную навеску суспензии, эквивалентную около 30 мг амоксициллина, помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, прибавляют 30 мл ПФА, доводят объем раствора тем же растворителем до метки и фильтруют.
Раствор стандартного образца амоксициллина. Около 35 мг (точная навеска) стандартного образца амоксициллина тригидрата помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, растворяют в ПФА и доводят объем раствора тем же растворителем до метки.
Хроматографируют раствор стандартного образца амоксициллина и испытуемый раствор.
Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца амоксициллина:
- эффективность хроматографической колонки (N), рассчитанная по пику амоксициллина, должна быть не менее 2000 теоретических тарелок;
- фактор асимметрии пика (As) амоксициллина должен быть не более 2,0;
- относительное стандартное отклонение площади пика амоксициллина должно быть не более 2% (6 определений).
Содержание амоксициллина C16H19N3O5S в процентах от заявленного количества (X) вычисляют по формуле:
X = \frac{S_{1} \cdot a_{0} \cdot \rho \cdot 50 \cdot P}{S_{0} \cdot a_{1} \cdot 50 \cdot L} = \frac{S_{1} \cdot a_{0} \cdot \rho \cdot P}{S_{0} \cdot a_{1} \cdot L} ,
где S1 — площадь пика амоксициллина на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 — площадь пика амоксициллина на хроматограмме раствора стандартного образца амоксициллина;
a1 — навеска суспензии, взятая для приготовления испытуемого раствора, г;
a0 — навеска стандартного образца амоксициллина тригидрата, мг;
\rho — плотность восстановленной суспензии, г/см3;
P — содержание амоксициллина в стандартном образце амоксициллина тригидрата, %;
L — заявленное количество амоксициллина в препарате, мг/мл.
Хранение. В защищенном от света месте.