ФС.2.5.0079.18. Фармакопейная статья. Кукурузы столбики с рыльцами

(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 31.10.2018 № 749)

(«Государственная фармакопея Российской Федерации. XIV издание. Том IV»)

ИСТОРИЯ ИЗМЕНЕНИЙ НОРМАТИВНО-ТЕХНИЧЕСКИХ АКТОВ

flowchart LR
  n0["Государственная фармакопея СССР. XI издание. Выпуск..."]:::rst
  click n0 "https://bukva.ai/docs/gf-xi-minzdrav-sssr-ministerstvo" "Государственная фармакопея СССР. XI издание. Выпуск 2. Общие методы анализа. Лекарственное растительное сырье"
  n1["ФС.2.5.0079.18"]:::rst
  click n1 "https://bukva.ai/docs/fs-2-5-0079-18" "ФС.2.5.0079.18. Фармакопейная статья. Кукурузы столбики с рыльцами (утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 31.10.2018 N 749)"
  n2["ФС.2.5.0079"]:::doc
  click n2 "https://bukva.ai/docs/prikaz-fs-2-5-0079" "ФС.2.5.0079. Фармакопейная статья. Кукурузы столбики с рыльцами (утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 13.03.2024 N 120)"
  n1 --> n2
  n0 --> n1
classDef rst fill:#FFEBEB,stroke:#8B0000,color:#000;
classDef doc fill:#EBFFEB,stroke:#006400,color:#000;
classDef notEnt fill:#FFFFEB,stroke:#FF8C00,color:#000;

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

Собранные в период созревания початков и высушенные столбики с рыльцами культивируемого однолетнего травянистого растения кукурузы — Zea mays L., сем. мятликовых — Poaceae.

ПОДЛИННОСТЬ

Внешние признаки. Цельное сырье. Мягкие шелковистые нити (столбики), собранные пучками или частично перепутанные, на верхушке которых находятся двухлопастные рыльца. Столбики несколько искривленные, плоские, шириной 0,1 — 0,15 мм; длиной 0,5 — 20 см, рыльца короткие, длиной 0,4 — 3 мм. Часто встречаются столбики без рылец.

Цвет коричневый, коричнево-красный, светло-желтый. Запах слабый, своеобразный. Вкус водного извлечения с ощущением слизистости.

Измельченное сырье. Смесь нитевидных кусочков столбиков и рылец, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 3 мм. Цвет коричневый, коричнево-красный, светло-желтый. Запах слабый, своеобразный. Вкус водного извлечения с ощущением слизистости.

Микроскопические признаки. Цельное сырье, измельченное сырье. При рассмотрении микропрепаратов столбиков с рыльцами кукурузы с поверхности должны быть видны клетки эпидермиса удлиненной формы с прямыми стенками, редкие простые волоски двух типов: продольноспаянные многоклеточные волоски длиной 0,2 — 0,8 мм с заостренной или конической верхушкой, состоящие из 2 — 3 ярусов клеток в длину, и многоклеточные тонкостенные изогнутые волоски.

В паренхиме двух узких сторон столбиков и рылец должны быть два параллельных проводящих пучка с хорошо заметными спиральными, кольчатыми и лестничными сосудами. Рыльца встречаются крайне редко. На рыльце должны быть заметны многоклеточные ворсинки.

Рисунок 1 — Кукурузы столбики с рыльцами

1 — фрагмент столбика. Общий вид: а — продольноспаянный многоклеточный волосок, б — простой многоклеточный тонкостенный изогнутый волосок (40x); 2 — фрагмент столбика: а — клетки эпидермиса удлиненно-прямоугольной формы с прямыми стенками, б — продольноспаянный многоклеточный волосок, в — простой многоклеточный тонкостенный волосок (200x); 3 — спиральные и кольчатые сосуды проводящего пучка (200x); 4 — схема строения основных диагностических признаков кукурузы столбиков с рыльцами: а — участок столбика с ворсинками (50x), б — участок паренхимы с проводящим пучком (100x), в — простые многоклеточные волоски (280x), г — ворсинки (200x), д — сложные волоски (200x), е — клетки эпидермиса со сложными волосками (280x)

Определение основных групп биологически активных веществ

Тонкослойная хроматография

Приготовление растворов.

Раствор дифенилборной кислоты аминоэтилового эфира 1%. 0,1 г дифенилборной кислоты аминоэтилового эфира растворяют в 10 мл спирта 96% и перемешивают. Срок годности раствора 1 мес.

Раствор стандартного образца (СО) лютеолин-7-гликозида. Около 0,01 г СО лютеолин-7-гликозида растворяют при нагревании на водяной бане в 10 мл спирта 60%. Срок годности раствора 3 мес.

На линию старта аналитической хроматографической пластинки со слоем силикагеля с флуоресцентным индикатором наносят 20 мкл (0,02 мл) испытуемого раствора А (см. раздел «Количественное определение») и 10 мкл (0,01 мл) раствора СО лютеолин-7-гликозида. Пластинку с нанесенными пробами сушат на воздухе, помещают в камеру, предварительно насыщенную в течение 2 ч смесью растворителей этилацетат — муравьиная кислота — вода (86:16:16), и хроматографируют восходящим способом.

Когда фронт растворителей пройдет около 80 — 90% длины пластинки от линии старта, ее вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей. Затем хроматограмму опрыскивают дифенилборной кислоты аминоэтилового эфира раствором 1% и просматривают в УФ-свете при длине волны 365 нм.

На хроматограмме раствора СО лютеолин-7-гликозида должна обнаруживаться зона адсорбции с флуоресценцией желтого цвета.

На хроматограмме испытуемого раствора должны наблюдаться зона адсорбции с флуоресценцией желтого цвета на уровне зоны адсорбции СО лютеолин-7-гликозида и зона адсорбции с флуоресценцией желтого или желто-зеленого цвета выше зоны адсорбции СО лютеолин-7-гликозида; допускается обнаружение других зон адсорбции.

Качественная реакция

Аналитическую пробу сырья измельчают до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,5 мм. 1,0 г измельченного сырья помещают в коническую колбу вместимостью 200 — 250 мл, прибавляют 50 мл спирта 70%, присоединяют колбу к обратному холодильнику, нагревают, поддерживая слабое кипение, в течение 1 часа. После охлаждения до комнатной температуры содержимое колбы фильтруют. 10 мл извлечения выпаривают до густого осадка, остаток обрабатывают 5 мл спирта 96%, фильтруют. К 2 мл фильтрата прибавляют 5 — 7 капель хлористоводородной кислоты концентрированной и 10 — 15 мг цинка металлического, нагревают на водяной бане; должно наблюдаться розовое окрашивание (флавоноиды).

К 2 мл настоя (1:20) прибавляют несколько капель раствора свинца (II) ацетата; должно наблюдаться выпадение осадка (сапонины).

ИСПЫТАНИЯ

Влажность. Цельное сырье, измельченное сырье — не более 13%.

Зола общая. Цельное сырье, измельченное сырье — не более 7%.

Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте. Цельное сырье, измельченное сырье — не более 2,5%.

Измельченность сырья. Измельченное сырье: частиц, не проходящих сквозь сито с отверстиями размером 3 мм — не более 5%; частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,2 мм — не более 5%.

Посторонние примеси

Почерневших столбиков с рыльцами. Цельное сырье, измельченное сырье — не более 3%.

Органическая примесь. Цельное сырье, измельченное сырье — не более 0,5%.

Минеральная примесь. Цельное сырье, измельченное сырье — не более 0,5%.

Тяжелые металлы и мышьяк. В соответствии с требованиями ОФС «Определение содержания тяжелых металлов и мышьяка в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Радионуклиды. В соответствии с требованиями ОФС «Определение содержания радионуклидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Остаточные количества пестицидов. В соответствии с требованиями ОФС «Определение содержания остаточных пестицидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Микробиологическая чистота. В соответствии с требованиями ОФС «Микробиологическая чистота».

Количественное определение. Цельное сырье, измельченное сырье: экстрактивных веществ, извлекаемых спиртом 70% — не менее 15%; суммы флавоноидов в пересчете на лютеолин-7-гликозид — не менее 0,35%.

Экстрактивные вещества

В соответствии с требованиями ОФС «Определение содержания экстрактивных веществ в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах» (метод 1, из навески 1,0 г сырья, измельченного до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 2 мм, экстрагент спирт 70%).

Сумма флавоноидов

Аналитическую пробу сырья измельчают до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 2 мм. Около 2,0 г (точная навеска) измельченного сырья помещают в плоскодонную колбу вместимостью 100 мл и прибавляют 50 мл спирта 60%. Колбу с содержимым взвешивают с погрешностью (+/- 0,01) и кипятят на кипящей водяной бане с обратным холодильником в течение 2 часов. Полученный экстракт охлаждают до комнатной температуры, взвешивают и при необходимости доводят массу спиртом 60% до первоначальной. Полученное извлечение фильтруют через бумажный фильтр «красная лента», отбрасывая первые 10 мл (раствор А).

1,0 мл раствора А помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл, прибавляют 1 мл алюминия хлорида раствора 3% в спирте 60%, 0,1 мл уксусной кислоты разведенной 30%, доводят объем раствора спиртом 60% до метки и перемешивают (испытуемый раствор). Через 40 мин измеряют оптическую плотность испытуемого раствора на спектрофотометре при длине волны 405 нм в кюветах с толщиной слоя 10 мм относительно раствора сравнения.

В качестве раствора сравнения используют раствор, состоящий из 1,0 мл раствора А, 0,1 мл уксусной кислоты разведенной 30%, помещенный в мерную колбу вместимостью 25 мл и доведенный спиртом 60% до метки.

Содержание суммы флавоноидов в пересчете на лютеолин-7-гликозид (X) в процентах в абсолютно сухом сырье вычисляют по формуле:

X = \frac{A \cdot 50 \cdot 25 \cdot 100}{A_{1\text{см}}^{1\%} \cdot a \cdot 1 \cdot (100 - W)} = \frac{A \cdot 125000}{A_{1\text{см}}^{1\%} \cdot a \cdot (100 - W)} ,

где A — оптическая плотность испытуемого раствора;

a — навеска сырья, г;

A_{1\text{см}}^{1\%} — удельный показатель поглощения комплекса лютеолин-7-гликозида с алюминия хлоридом при длине волны 405 нм, равный 401;

W — влажность сырья, %.

Примечание. Определение содержания экстрактивных веществ, извлекаемых спиртом 70%, определяется в сырье, предназначенном для производства экстрактов.

Упаковка, маркировка и транспортирование. В соответствии с требованиями ОФС «Упаковка, маркировка и транспортирование лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

Хранение. В соответствии с требованиями ОФС «Хранение лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».