ФС.2.4.0003.18. Фармакопейная статья. Красавки листьев настойка
(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 31.10.2018 № 749)
(«Государственная фармакопея Российской Федерации. XIV издание. Том IV»)
Примечание
В соответствии с Приказом Минздрава России от 31.10.2018 № 749 данный документ введен в действие с 01.12.2018. Текст документа приведен в соответствии с публикацией на сайте http://femb.ru/femb/pharmacopea.php по состоянию на 15.01.2019. Взамен ГФ X, ст. 686.
| Красавки листьев настойка | ФС.2.4.0003.18 |
|---|---|
| Belladonnae folii tinctura | Взамен ГФ X, ст. 686 |
Красавки листьев настойка, получаемая из листьев красавки белладонны — Atropa belladonna L., сем. пасленовых — Solanaceae, применяемая для производства лекарственных препаратов.
Для получения настойки используют:
| красавки листьев | - 100 г; |
|---|---|
| этанола (спирта этилового) 40% | - достаточное количество для получения 1000 мл. |
Описание. Прозрачная жидкость желтовато-коричневого, зеленовато-коричневого или красновато-коричневого цвета с характерным запахом.
Раствор стандартного образца (СО) атропина сульфата. 0,01 г СО атропина сульфата растворяют в 10 мл спирта 70% и перемешивают. Срок годности раствора 1 мес.
10 мл настойки выпаривают с помощью роторного испарителя досуха, сухой остаток растворяют в 1 мл воды при перемешивании. К полученному раствору прибавляют 0,2 мл аммиака раствора концентрированного 25%, 5 мл хлороформа и взбалтывают в течение 3 мин, затем добавляют 2 г натрия сульфата безводного, снова взбалтывают в течение 3 мин и фильтруют через вату (испытуемый раствор).
На линию старта аналитической хроматографической пластинки со слоем силикагеля наносят в виде полосы длиной 20 мм и шириной не более 2 мм 100 мкл (0,1 мл) испытуемого раствора (приготовленного для количественного определения), рядом наносят по 30 мкл (0,03 мл) раствора СО атропина сульфата (приготовленного для количественного определения). Пластинку с нанесенными пробами помещают в камеру, предварительно насыщенную в течение не менее 1 ч смесью растворителей метанол-хлороформ-аммиака раствор концентрированный 25% (20:10:1), и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт растворителей пройдет около 80 — 90% длины пластинки от линии старта, ее вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей, обрабатывают реактивом Драгендорфа, просматривают при дневном свете и фиксируют результаты разделения в течение не более 10 мин.
На хроматограмме раствора СО атропина сульфата должна обнаруживаться зона адсорбции красно-оранжевого цвета на желтом фоне.
На хроматограмме испытуемого раствора должна обнаруживаться доминирующая зона адсорбции красно-оранжевого цвета на уровне зоны адсорбции СО атропина сульфата; допускается обнаружение других зон адсорбции красно-оранжевого цвета.
5 мл настойки выпаривают на водяной бане до 1 мл, переносят с помощью 3 мл воды очищенной в делительную воронку вместимостью 50 мл, прибавляют 0,5 мл аммиака раствора 10%, 15 мл хлороформа и взбалтывают в течение 3 мин. Затем добавляют 2 г натрия сульфата безводного и снова взбалтывают в течение 3 мин. Хлороформное извлечение фильтруют через бумажный фильтр с 2 алюминия окиси безводной в фарфоровую чашку. Фильтр промывают 5 мл хлороформа. Хлороформ выпаривают на водяной бане, к остатку добавляют 1 мл азотной кислоты концентрированной и выпаривают на водяной бане досуха. Сухой остаток охлаждают и смачивают 1 мл ацетона и 4 каплями калия гидроксида 0,5 М раствора спиртового; должно наблюдаться быстро исчезающее фиолетовое окрашивание (алкалоиды).
Спирт этиловый. Не менее 35%. В соответствии с требованиями ОФС «Определение спирта этилового в лекарственных средствах».
*Метанол и 2-пропанол. Не более 0,05% метанола и не более 0,05% 2-пропанола. В соответствии с требованиями ОФС «Определение метанола и 2-пропанола» (контролируется в течение технологического процесса).
Сухой остаток. Не менее 0,5%. В соответствии с требованиями ОФС «Настойки».
Тяжелые металлы. Не более 0,001%. В соответствии с требованиями ОФС «Настойки».
«Объем содержимого упаковки». В соответствии с требованиями ОФС «Настойки».
Микробиологическая чистота. В соответствии с требованиями ОФС «Микробиологическая чистота».
Количественное определение. Содержание суммы алкалоидов в пересчете на гиосциамин должно быть от 0,027 до 0,033%.
Раствор стандартного образца (СО) атропина сульфата. Около 0,1160 г (точная навеска) СО атропина сульфата растворяют в 5 мл воды и переносят в делительную воронку. Бюкс, в котором взвешивали навеску атропина сульфата, дважды промывают по 2,5 мл воды и переносят в делительную воронку, прибавляют 0,5 мл аммиака раствора концентрированного 25% и извлекают последовательно 20 мл; 15 мл; 15 мл хлороформа в течение 3 мин. Хлороформные извлечения фильтруют через фильтр с 2 г натрия сульфата безводного, смоченного 5 мл хлороформа, в мерную колбу вместимостью 100 мл, доводят объем раствора хлороформом до метки и перемешивают (раствор А).
Срок годности раствора 6 месяцев.
10 мл полученного раствора А переносят в мерную колбу вместимостью 100 мл, доводят объем раствора хлороформом до метки и перемешивают (раствор Б). 1 мл раствора содержит 0,0001 г атропина основания.
Срок годности раствора 1 месяц.
3 мл раствора Б стандартного образца атропина помещают в делительную воронку, прибавляют 12 мл хлороформа, 2 мл 0,1% раствора метиленового оранжевого, 2 мл фосфатного буферного раствора pH 6,0 (2) и далее проводят определение аналогично определению испытуемого раствора.
Смесь спирт 95%-серная кислота концентрированная (50:1). К 50 мл спирта 95% осторожно прибавляют 1 мл серной кислоты концентрированной.
К 2,0 мл настойки прибавляют 8 мл спирта 95% и фильтруют через бумажный фильтр, смоченный спиртом 95%, в коническую колбу. 5,0 мл полученного фильтрата помещают в фарфоровую чашку и выпаривают на водяной бане досуха. Сухой остаток количественно переносят 10 мл воды (частями по 2,5 мл), фильтруя через бумажный фильтр, смоченный водой, в делительную воронку. Фарфоровую чашку и осадок на фильтре промывают дважды по 2,5 мл воды. Водный раствор в делительной воронке подщелачивают 0,5 мл аммиака раствора 10% и взбалтывают с 25 мл хлороформа в течение 15 мин.
Хлороформное извлечение фильтруют через бумажный фильтр с 3 г натрия сульфата безводного, смоченного 5 мл хлороформа, в фарфоровую чашку. Водный раствор в делительной воронке взбалтывают еще дважды с 10 мл хлороформа в течение 5 мин. Объединенные хлороформные извлечения выпаривают на водяной бане приблизительно до 2 мл, остаток растворителя удаляют продуванием воздуха.
Остаток из фарфоровой чашки количественно переносят 15 мл хлороформа в делительную воронку, прибавляют 2 мл раствора метилового оранжевого спиртового раствора 0,1%, добавляют 2 мл буферного раствора с pH 6,0 и взбалтывают в течение 2 мин. После расслаивания хлороформное извлечение фильтруют через бумажный фильтр, содержащий 2 г натрия сульфата безводного, смоченного хлороформом, в мерную колбу вместимостью 50 мл. Операцию извлечения повторяют еще дважды с 10 мл хлороформа, собирая хлороформные извлечения в ту же мерную колбу. К хлороформным извлечениям прибавляют 5 мл смеси спирт 95%-кислота серная концентрированная (50:1), доводят объем раствора спиртом 95% до метки и перемешивают (испытуемый раствор).
Измеряют оптическую плотность полученного раствора на спектрофотометре при длине волны 521 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм относительно раствора сравнения. В качестве раствора сравнения используют хлороформ.
Параллельно измеряют оптическую плотность раствора стандартного образца атропина сульфата.
Содержание суммы алкалоидов в пересчете на гиосциамин в настойке в процентах (X) вычисляют по формуле:
X = \frac{A \cdot a_{o} \cdot 10 \cdot 3 \cdot 10 \cdot 50 \cdot 100}{A_{o} \cdot 100 \cdot 100 \cdot 50 \cdot 2 \cdot 5 \cdot 1,169} = \frac{A \cdot a_{o} \cdot 0,3}{A_{o} \cdot 1,169} ,
где A — оптическая плотность испытуемого раствора;
Aо — оптическая плотность раствора СО атропина сульфата;
a — объем настойки, взятый для определения, мл;
aо — навеска стандартного образца атропина сульфата, г;
k — коэффициент пересчета атропина сульфата на гиосциамин основание, равный 1,169.
Хранение. В защищенном от света месте при температуре от 8 до 15 °C.