ФС.2.1.0689. Фармакопейная статья. Эпирубицина гидрохлорид. Эпирубицин

(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 13.03.2024 № 120)

(«Государственная фармакопея Российской Федерации. XV издание»)

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

Эпирубицина гидрохлорид	ФС.2.1.0689
Эпирубицин
Epirubicini hydrochloridum	Вводится впервые

C27H29NO11·HCl [56390-09-1]	М.м. 579,98

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

(8S,10S)-10-[(3-Амино-2,3,6-тридезокси- \alpha -L-арабино-гексопиранозил)окси]-6,8,11-тригидрокси-8-(гидроксиацетил)-1-метокси-7,8,9,10-тетрагидротетрацен-5,12-диона гидрохлорид.

Полусинтетический продукт из продукта ферментации. Содержит не менее 97,0% и не более 102,0% эпирубицина гидрохлорида C27H29NO11·HCl в пересчете на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

СВОЙСТВА

Описание. Оранжево-красный порошок.

Растворимость. Растворим в воде и метаноле, мало растворим в этаноле, практически нерастворим в ацетоне.

ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца эпирубицина гидрохлорида.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика эпирубицина на хроматограмме раствора стандартного образца эпирубицина гидрохлорида (раздел «Количественное определение»).

3. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию А на хлориды (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

ИСПЫТАНИЯ

Прозрачность раствора. Раствор 50 мг субстанции в 10 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

pH раствора. От 4,0 до 5,5 (0,5% раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Растворы после приготовления оставляют на 3 ч до начала испытания.

Раствор натрия лаурилсульфата. Растворяют 3,7 г натрия лаурилсульфата в 950 мл воды, прибавляют 28 мл фосфорной кислоты разведенной и доводят объем раствора водой до 1000 мл.

Подвижная фаза (ПФ). Метанол — ацетонитрил — раствор натрия лаурилсульфата 170:290:540.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 25 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в ПФ и доводят объем раствора ПФ до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объем раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10,0 мг фармакопейного стандартного образца эпирубицина гидрохлорида и 10,0 мг фармакопейного стандартного образца доксорубицина гидрохлорида (примесь C), растворяют в ПФ и доводят объем раствора ПФ до метки.

Раствор для идентификации примеси A. Растворяют 10 мг фармакопейного стандартного образца доксорубицина гидрохлорида в смеси 5,0 мл воды и 5,0 мл фосфорной кислоты концентрированной и оставляют стоять в течение 30 мин. Доводят значение pH раствора до 2,6 с помощью натрия гидроксида раствора 2 М, прибавляют 15 мл ацетонитрила и 10 мл метанола.

Примечание

Примесь A (доксорубицинон): (8S,10S)-6,8,10,11-тетрагидрокси-8-(гидроксиацетил)-1-метокси-7,8,9,10-тетрагидротетрацен-5,12-дион [24385-10-2].

Примесь C (доксорубицин): (8S,10S)-10-[(3-амино-2,3,6-тридезокси- \alpha -L-ликсо-гексопиранозил)окси]-6,8,11-тригидрокси-8-(гидроксиацетил)-1-метокси-7,8,9,10-тетрагидротетрацен-5,12-дион [23214-92-8].

Хроматографические условия

Колонка	250 x 4,6 мм, силикагель триметилсилильный для хроматографии, 5 мкм;
Температура колонки	35 °C;
Скорость потока	2,5 мл/мин;
Детектор	спектрофотометрический, 254 нм;
Объем пробы	10 мкл;
Время хроматографирования	3,5-кратное от времени удерживания основного пика.

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической системы, раствор для идентификации примеси A, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Эпирубицин — 1 (около 10 мин); примесь A — около 0,3; примесь C — около 0,8.

Идентификация примесей. Для идентификации примеси A используют хроматограмму раствора для идентификации примеси A (второй по площади пик). Для идентификации примеси C используют хроматограмму раствора для проверки пригодности хроматографической системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси C и эпирубицина должно быть не менее 2,0.

Поправочный коэффициент. Для расчета содержания площади пика примеси A умножают на поправочный коэффициент 0,7.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

• площадь пика каждой из примесей A и C не должна превышать площадь пика эпирубицина на хроматограмме раствора сравнения (не более 1,0%);
• площадь пика любой другой примеси не должна превышать половины площади пика эпирубицина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5%);
• сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать двукратную площадь пика эпирубицина на хроматограмме раствора сравнения (не более 2,0%).

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее 0,05 площади пика эпирубицина на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05%).

Вода. Не более 4,0% (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,1 г (точная навеска) субстанции.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Аномальная токсичность. Субстанция должна быть нетоксичной (ОФС «Аномальная токсичность»). Тест-доза — 0,1 мг эпирубицина гидрохлорида в 0,5 мл воды для инъекций на мышь, внутривенно. Срок наблюдения 10 сут.

Бактериальные эндотоксины. Не более 0,7 ЕЭ/мг (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Стерильность. Стерильная субстанция должна быть стерильной (ОФС «Стерильность»).

Микробиологическая чистота. Нестерильная субстанция должна соответствовать ОФС «Микробиологическая чистота».

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси».

Раствор стандартного образца эпирубицина гидрохлорида. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 25 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца эпирубицина гидрохлорида, растворяют в ПФ и доводят объем раствора ПФ до метки.

Хроматографируют раствор стандартного образца эпирубицина гидрохлорида и испытуемый раствор.

Содержание эпирубицина гидрохлорида C27H29NO11·HCl в субстанции в пересчете на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:

X = \frac{S_{1} \cdot a_{0} \cdot P \cdot 25 \cdot 100}{S_{0} \cdot a \cdot 25 \cdot (100 - W)} ,

где S1 — площадь пика эпирубицина на хроматограмме испытуемого раствора;

S0 — площадь пика эпирубицина на хроматограмме раствора стандартного образца эпирубицина гидрохлорида;

a1 — навеска субстанции, мг;

a0 — навеска фармакопейного стандартного образца эпирубицина гидрохлорида, мг;

W — суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции, %;

P — содержание эпирубицина гидрохлорида в фармакопейном стандартном образце эпирубицина гидрохлорида, %.

ХРАНЕНИЕ

В герметично укупоренной упаковке, в защищенном от света месте, при температуре от 2 до 8 °C. Стерильную субстанцию хранить в стерильной упаковке, защищенной от вскрытия.

---