ФС.2.1.0226.22. Фармакопейная статья. Дактиномицин

(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 11.04.2022 № 246)

(«Государственная фармакопея Российской Федерации. XIV издание»)

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

Дактиномицин	ФС.2.1.0226.22
Дактиномицин
Dactinomycin	Взамен ФС 42-1554-87

Акриноцинил-бис(L-треонил-D-валинил-L-пролинил-саркозил-N-метил-L-валинил)-лактон

C62H86N12O16	М.м. 1255,4

Содержит не менее 95,0% и не более 103,0% дактиномицина C62H86N12O16 в пересчете на сухое вещество.

Описание. Оранжево-красный порошок.

<*> Чувствителен к свету. Гигроскопичен.

---

<*> Приводится для информации.

Растворимость. Растворим в ацетоне, мало растворим в спирте 96%, очень мало растворим в воде при температуре от 8 до 10 °C, практически нерастворим в воде при температуре 20 °C.

Подлинность

1. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика дактиномицина на хроматограмме раствора стандартного образца дактиномицина (раздел «Родственные примеси»).

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»). Оптическая плотность испытуемого раствора при длине волны 445 нм в пересчете на сухое вещество должна быть не менее 95,0% и не более 103,0% по отношению к раствору стандартного образца дактиномицина.

Отношение оптических плотностей испытуемого раствора и раствора стандартного образца дактиномицина A240/A445 должно составлять от 1,30 до 1,50.

Растворы используют непосредственно после приготовления.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2,5 мг субстанции, растворяют в метаноле и доводят объем раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца дактиномицина. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2,5 мг стандартного образца дактиномицина, растворяют в метаноле и доводят объем раствора тем же растворителем до метки.

Угол вращения. От -293° до -329° (0,1% раствор субстанции в метаноле, ОФС «Поляриметрия»).

Прозрачность раствора. Раствор 1 мг субстанции в 1 мл воды выдерживают в течение 30 мин при температуре от -5 до -7 °C и доводят до комнатной температуры; полученный раствор должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень мутности жидкостей»).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Растворы защищают от света и используются свежеприготовленными.

Подвижная фаза (ПФ). Вода-ацетонитрил 400:600.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают около 25 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в ПФ и доводят объем раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца дактиномицина. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают около 25 мг (точная навеска) стандартного образца дактиномицина, растворяют в ПФ и доводят объем раствора тем же растворителем до метки.

Раствор феноксазина. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 25 мг феноксазина, растворяют в ПФ и доводят объем раствора тем же растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. Смешивают раствор стандартного образца дактиномицина и раствор феноксазина 2:1.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца дактиномицина и доводят объем раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора ПФ до метки.

Хроматографические условия

Колонка	250 x 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, деактивированный по отношению к основаниям, эндкепированный, для хроматографии, 5 мкм;
Температура колонки	20 °C;
Скорость потока	1,7 мл/мин;
Детектор	спектрофотометрический, 254 нм;
Объем пробы	5 мкл;
Время хроматографирования	3-кратное от времени удерживания пика дактиномицина.

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор стандартного образца дактиномицина и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Дактиномицин-1 (около 7 мин); феноксазин — около 0,7.

Пригодность хроматографической системы

На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика дактиномицина должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками феноксазина и дактиномицина должно быть не менее 2,0.

На хроматограмме раствора стандартного образца дактиномицина:

• фактор асимметрии пика (AS) дактиномицина должен быть не более 1,5;
• относительное стандартное отклонение площади пика дактиномицина должно быть не более 2,0% (6 введений);
• эффективность хроматографической колонки (N), рассчитанная по пику дактиномицина, должна составлять не менее 2000 теоретических тарелок.

Допустимое содержание примесей. Содержание каждой из примесей в препарате в процентах вычисляют согласно методу нормирования (ОФС «Хроматография»):

• любая примесь — не более 0,5%;
• сумма примесей — не более 3,0%.

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,1 площади основного пика на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05%).

Потеря в массе при высушивании. Не более 5,0% (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 3). Около 0,1 г (точная навеска) субстанции сушат в вакууме при температуре 60 °C и остаточном давлении 5 мм рт. ст. в течение 3 ч.

Аномальная токсичность. Субстанция должна быть нетоксичной (ОФС «Аномальная токсичность»). Тест-доза — 7 мкг дактиномицина субстанции в 0,5 мл воды на мышь, внутривенно со скоростью 0,1 мл/с (время введения 5 с). Срок наблюдения 14 сут.

Бактериальные эндотоксины. Не более 80 ЕЭ на 1 мг дактиномицина (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

Количественное определение. Определение проводят методом ВЭЖХ одновременно с испытанием «Родственные примеси».

Содержание дактиномицина C62H86N12O16 в субстанции в процентах в пересчете на сухое вещество (X) вычисляют по формуле:

X = \frac{S_{1} \cdot a_{0} \cdot P \cdot 100 \cdot 100}{S_{0} \cdot a_{1} \cdot 100 \cdot (100 - W)} = \frac{S_{1} \cdot a_{0} \cdot P \cdot 100}{S_{0} \cdot a_{1} \cdot (100 - W)} ,

где S1 — площадь пика дактиномицина на хроматограмме испытуемого раствора;

S0 — площадь пика дактиномицина на хроматограмме раствора стандартного образца дактиномицина;

a1 — навеска субстанции, мг;

a0 — навеска стандартного образца дактиномицина, мг;

P — содержание дактиномицина в стандартном образце дактиномицина, %;

W — потеря в массе при высушивании, %.

Хранение. В герметично закрытой упаковке, в защищенном от света месте.

---