Методические указания по фотометрическому измерению концентраций апрамицина в воздухе рабочей зоны

(утв. Минздравом СССР 10.10.1991 № 5943-91)

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ФОТОМЕТРИЧЕСКОМУ ИЗМЕРЕНИЮ КОНЦЕНТРАЦИЙ АПРАМИЦИНА В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ

Предисловие

Методические указания по измерению концентраций вредных веществ в воздухе рабочей зоны предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и санитарных лабораторий промышленных предприятий при осуществлении контроля за содержанием вредных веществ в воздухе рабочей зоны, а также научно-исследовательских институтов системы здравоохранения России и других заинтересованных министерств и ведомств.

Методические указания разрабатываются и утверждаются с целью обеспечения контроля соответствия фактических концентраций вредных веществ в воздухе рабочей зоны их предельно допустимым концентрациям (ПДК) — санитарно-гигиеническим нормативам, утвержденным Министерством здравоохранения СССР, оценки эффективности внедренных санитарно-гигиенических мероприятий, установления необходимости использования средств индивидуальной защиты органов дыхания, оценки влияния вредных веществ на состояние здоровья работающих и др.

Включенные в данный выпуск Методические указания подготовлены в соответствии с требованиями ГОСТ 12.1.005-88 «ССБТ. Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху рабочей зоны» и ГОСТ 12.1.016-79 «ССБТ. Воздух рабочей зоны. Требования к методикам измерения концентраций вредных веществ» и обеспечивают избирательное измерение концентраций вредных веществ в воздухе рабочей зоны в присутствии сопутствующих компонентов на уровне 0,5 ПДК. Погрешность измерений концентраций вредного вещества, состоящая из суммы неисключенных систематической и случайной погрешностей, не превышает 25%.

Методические указания одобрены Проблемной комиссии «Научные основы гигиены труда и профессиональной патологии» и являются обязательными при осуществлении вышеуказанного контроля.

Ответственные за выпуск: С.И. Муравьева, Г.А. Дьякова, К.М. Грачева.

Апрамицина сульфат — 4-0-/3-альфа-амино-6 альфа//(4-амино-4-дезокси-альфа-D-глюкопиранозил)окси/-2,3,4,4,альфа,бета,6,7,8 альфа альфа-октагидро-8 бета-гидрокси-7 бета(метиламино)пирано-(3,2-в)пиран-2 альфа-ИЛ)-2-дезокси-D-стрептамина сульфат.

Аморфный порошок кремового цвета, без вкуса и запаха, гигроскопичен, легко растворим в воде, практически нерастворим в 95% спирте, хлороформе, эфире. Температура плавления 225 °C (с разложением).

Устойчив при хранении в растворах и в твердом виде.

В воздухе находится в виде аэрозоля.

Обладает ото- и нефротоксическим действием. Слабый аллерген.

Характеристика метода

Метод основан на измерении оптической плотности окрашенного в желтый цвет дигидролютидинового производного, образующегося в результате конденсации аминогрупп молекулы апрамицина с ацетил-ацетоном и формальдегидом при 370 нм.

Отбор проб производится с концентрированием на фильтр.

Нижний предел измерения содержания вещества в анализируемом объеме раствора 5 мкг.

Нижний предел измерения содержания вещества в воздухе — 0,05 мг/куб. м (при отборе 200 л воздуха).

Диапазон измеряемых концентраций в воздухе от 0,05 до 2,0 мг/куб. м.

Определению не мешает присутствие стрептомицина, мешает присутствие канамицина, гентамицина, сизомицина, амикацина, мономицина, неомицина, тобрамицина.

Суммарная погрешность измерения не превышает 15%.

Приборы, аппаратура, посуда

Спектрофотометр.

Аспирационное устройство.

Фильтродержатели, ТУ 95.72-05-77.

Водяная баня.

Секундомер, ГОСТ 5072-79.

Колбы мерные, ГОСТ 1770-74, вместимостью 50, 100, 500 и 1000 мл.

Пробирки с пришлифованными пробками, ГОСТ 10515-75, вместимостью 10 мл.

Цилиндры мерные, ГОСТ 1770-74, вместимостью 50, 250 мл.

Пипетки, ГОСТ 20292-74, вместимостью 1,0; 2,0; 5,0 мл.

Стаканы химические, ГОСТ 19908-80, вместимостью 50 мл.

Воронки с пористой пластинкой № 1-ПС-1.

Реактивы, растворы и материалы

Апрамицин.

Ацетил-ацетон, ГОСТ 10259-78, ч.д.а., перегнанный при температуре 135,5 — 138 °C.

Формалин, ГОСТ 1625-75, технический, 30% раствор в воде.

Кислота фосфорная, концентрированная, ГОСТ 5653-75, х.ч.

Кислота уксусная, ледяная, ГОСТ 61-75, х.ч.

Кислота борная, ГОСТ 9656-75, ч.д.а.

Смесь фосфорной, уксусной и борной кислот (раствор А) готовят в мерной колбе на 1000 мл, помещая последовательно такие количества перечисленных кислот, чтобы содержание каждой составляло 0,2 М концентрацию, и доводят до метки водой.

Натрия гидроксид, ГОСТ 4328-77, х.ч. Готовят 1,0 М раствор (раствор Б).

Буферная смесь pH 2,56. Готовят, смешивая 1000 мл раствора А и 150 мл раствора Б.

Реактив С: к 50 мл буферной смеси добавляют 4,0 мл ацетил-ацетона, 10 мл раствора формальдегида, перемешивают, доводят до 150 мл добавлением буферной смеси. Устойчив 7 дней.

Стандартный раствор № 1 с концентрацией апрамицина 100 мкг/мл. Готовят, растворяя точную навеску стандартного образца антибиотика в воде. Устойчив 10 дней.

Стандартный раствор № 2 с концентрацией апрамицина 10 мкг/мл. Готовят путем соответствующего разбавления стандартного раствора № 1. Устойчив 10 дней.

Отбор пробы воздуха

Воздух с объемным расходом 20 л/мин. аспирируют через фильтр АФА-ВП-20. Для измерения 1/2 ПДК следует отобрать 200 л воздуха. Срок хранения отобранных проб 2 недели.

Подготовка к измерению

Градуировочные растворы (устойчивы 4 часа) готовят согласно таблице 4.

№ стандарта	Стандартный раствор № 2, мл	Стандартный раствор № 1, мл	Дистиллированная вода, мл	Содержание апрамицина, мкг
1	-	-	2,5	0
2	0,5	-	2,0	5
3	2,5	-	-	25
4	-	0,5	2,0	50
5	-	1,0	1,5	100
6	-	1,5	1,0	150
7	-	2,0	0,5	200

Во все пробирки шкалы добавляют по 2,5 мл реактива С и нагревают в кипящей водяной бане 20 минут. Охлаждают при комнатной температуре. Измеряют на спектрофотометре оптическую плотность растворов при длине волны 370 нм. Измерения проводят в кюветах с толщиной поглощающего слоя 10 мм по отношению к раствору сравнения, не содержащему определяемого вещества (раствор № 1 по таблице).

Строят градуировочный график: на ось ординат наносят значение оптической плотности градуировочных растворов, на ось абсцисс — соответствующие величины содержания вещества в градуировочных растворах (в мкг).

Проверку градуировочного графика проводят 1 раз в 3 месяца или в случае использования новой партии реактивов.

Проведение измерения

Фильтр с отобранной пробой помещают в химический стакан, заливают 5 мл дистиллированной воды, выдерживают при перемешивании 40 минут. При необходимости раствор фильтруют через воронку с пористой пластинкой. Для анализа в пробирку с пришлифованной пробкой отбирают 2,5 мл раствора антибиотика и обрабатывают аналогично градуировочным растворам. Оптическую плотность полученного анализируемого раствора измеряют по отношению к контрольному раствору, который готовят одновременно и аналогично пробам.

Количественное измерение содержания апрамицина в мкг во взятой аликвоте проводят по предварительно построенному градуировочному графику.

Расчет концентрации

Концентрацию апрамицина «C» в воздухе (в мг/куб. м) вычисляют по формуле:

где:

а — содержание апрамицина в анализируемом объеме раствора пробы, найденное по градуировочному графику, мкг;

в — общий объем раствора пробы, мл;

б — объем раствора пробы, взятый для анализа, мл;

V — объем воздуха, отобранный для анализа и приведенный к стандартным условиям, л (см. Приложение 1).

Приложение 1

Приведение объема воздуха к условиям по ГОСТ 12.1.016-79 (температура 20 °С, давление 760 мм рт. ст.) проводят по следующей формуле:

                         V  х (273 + 20) х Р
                          t

С = -------------------, (273 + t°) х 101,33

где:

V — объем воздуха, отобранный для анализа, л; t

Р — барометрическое давление, кПа; (101,33 кПа = 760 мм рт. ст.);

t° — температура воздуха в месте отбора пробы, °С.

Для удобства расчета V следует пользоваться таблицей коэффициентов (Приложение 2). Для приведения объема воздуха к температуре 20 °С и к давлению 760 мм рт. ст. надо умножить V на соответствующий коэффициент. t

°С	Давление Р, кПа (мм рт. ст.)
	97,33 (730)	97,86 (734)	98,4 (738)	98,93 (742)	99,46 (746)	100 (750)	100,53 (754)	101,06 (758)	101,33 (760)	101,86 (764)
-30	1,1582	1,1646	1,1709	1,1772	1,1836	1,1899	1,1963	1,2026	1,2058	1,2122
-26	1,1393	1,1456	1,1519	1,1581	1,1644	1,1705	1,1763	1,1831	1,1862	1,1925
-22	1,1212	1,1274	1,1336	1,1396	1,1458	1,1519	1,1581	1,1643	1,1673	1,1735
-18	1,1036	1,1097	1,1159	1,1218	1,1278	1,1338	1,1399	1,1460	1,1490	1,1551
-14	1,0866	1,0926	1,0986	1,1045	1,1105	1,1164	1,1224	1,1284	1,1313	1,1373
-10	1,0701	1,0760	1,0819	1,0877	1,0986	1,0994	1,1053	1,1112	1,1141	1,1200
-06	1,0640	1,0599	1,0657	1,0714	1,0772	1,0829	1,0887	1,0945	1,0974	1,1032
-02	1,0385	1,0442	1,0499	1,0556	1,0613	1,0669	1,0726	1,0784	1,0812	1,0869
0	1,0309	1,0366	1,0423	1,0477	1,0535	1,0591	1,0648	1,0705	1,0733	1,0789
+02	1,0234	1,0291	1,0347	1,0402	1,0459	1,0514	1,0571	1,0627	1,0655	1,0712
+06	1,0087	1,0143	1,0198	1,0253	1,0309	1,0363	1,0419	1,0475	1,0502	1,0557
+10	0,9944	0,9990	1,0054	1,0108	1,0162	1,0216	1,0272	1,0326	1,0353	1,0407
+14	0,9806	0,9860	0,9914	0,9967	1,0027	1,0074	1,0128	1,0183	1,0209	1,0263
+18	0,9671	0,9725	0,9778	0,9880	0,9884	0,9936	0,9989	1,0043	1,0069	1,0122
+20	0,9605	0,9658	0,9711	0,9783	0,9816	0,9868	0,9921	0,9974	1,0000	1,0053
+22	0,9539	0,9592	0,9645	0,9696	0,9749	0,9800	0,9853	0,9906	0,9932	0,9985
+24	0,9475	0,9527	0,9579	0,9631	0,9683	0,9735	0,9787	0,9839	0,9865	0,9917
+26	0,9412	0,9464	0,9516	0,9566	0,9618	0,9669	0,9721	0,9773	0,9755	0,9851
+28	0,9349	0,9401	0,9453	0,9503	0,9955	0,9605	0,9657	0,9708	0,9734	0,9785
+30	0,9288	0,9339	0,9391	0,9440	0,9432	0,9542	0,9594	0,9646	0,9670	0,9723
+34	0,9167	0,9218	0,9268	0,9318	0,9368	0,9418	0,9468	0,9519	0,9544	0,9595
+38	0,9049	0,9099	0,9149	0,9198	0,9248	0,9297	0,9347	0,9397	0,9421	0,9471

Приложение 3

---