Методические указания по определению суми-альфа в воде, плодовых и овощных культурах хроматографическими методами

(утв. Минздравом СССР 08.06.1989 № 5007-89)

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ СУМИ-АЛЬФА В ВОДЕ, ПЛОДОВЫХ И ОВОЩНЫХ КУЛЬТУРАХ ХРОМАТОГРАФИЧЕСКИМИ МЕТОДАМИ <*>

---

<*> Разработаны Д.Б. Гиренко, Л.Е. Морару (ВНИИГИНТОКС).

Дополнение к № 2473-81 от 22.10.81.

Краткая характеристика препарата. Суми-альфа — фенвалерат-RS-альфа-циано-3-феноксибензил-(RS)-2-(4-хлорфенил)-3-метилбутират. Активный изомер рацемического фенвалерата (см. с. 297). Жидкость светло-желтого цвета. Растворим в ксилоле, ацетоне, циклогексаноне, этилацетате, спирте, хлороформе.

Принцип метода. Метод основан на определении суми-альфа газожидкостной и тонкослойной хроматографией после извлечения его из исследуемой пробы органическим растворителем, очистки от коэкстрактивных веществ в системе жидкость-жидкость.

Метрологическая характеристика методов. Диапазон определяемых концентраций 0,005 — 0,1 мг/кг (мг/л). Остальные параметры приведены в таблице 81.

Таблица 81

ОПРЕДЕЛЕНИЯ СУМИ-АЛЬФА

Анализируемый объект	Среднее значение определения, %	Стандартное отклонение, %	Доверительный интервал среднего, %
ГЖХ
Вода	95,7	+/- 4,3	+/- 5,4
Яблоки	80,0	+/- 5,2	+/- 6,0
Картофель	85,6	+/- 3,2	+/- 4,9
ТСХ
Вода	80,0	+/- 5,0	+/- 7,1
Яблоки	65,0	+/- 6,0	+/- 9,0
Картофель	65,0	+/- 5,0	+/- 7,1

Избирательность метода. При определении методом ГЖХ могут мешать препараты из группы синтетических пиретроидов; при использовании метода ТСХ могут мешать препараты, обнаруживаемые с помощью аммиаката серебра.

Реактивы и растворы. Для экстракции. Ацетон х.ч. Гексан ч. Сульфат натрия ч.

Для ГЖХ. 5% SE-30 на хроматоне N-AW (0,16 — 0,20 мм). Азот газообразный особой чистоты. Стандартный раствор суми-альфа (2 мкг/мл). Хранят в холодильнике не более 5 дней.

Для ТСХ. Нитрат серебра. Пластинки «Силуфол». Подвижная фаза гексан-ацетон (4:1). Проявляющий реагент — раствор аммиаката серебра (0,5 г AgNO растворяют в 5 мл дистиллированной воды, прибавляют 7 — 10 мл 3

22,5-процентного  аммиака  и  доводят  объем  раствора до 200 мл ацетоном).
Основной  стандартный  раствор  суми-альфа (200 мкг/мл) в ацетоне. Хранят в

холодильнике не более 2 мес.

Приборы и посуда. Посуда мерная (колбы конические, пипетки, цилиндры и др.). Воронки делительные и конические. Колбы грушевидные, круглодонные на 25; 50 и 250 мл. Аппарат для встряхивания. Лампа ртутно-кварцевая. Камера хроматографическая. Пульверизаторы стеклянные. Испаритель ротационный ИР-1М. Хроматограф «Цвет» или другой марки, снабженный ДПР. Микрошприц МШ-10М на 10 мкл. Колонка стеклянная длиной 1 м с внутренним диаметром 3 мм (заполненная носителем на 0,5 — 0,6 м).

Ход анализа. Экстракция и очистка экстрактов. Пробу воды (500 мл) помещают в делительную воронку и дважды экстрагируют суми-альфа гексаном порциями по 30 мл. Объединенный гексановый экстракт сушат безводным сульфатом натрия, концентрируют на ротационном испарителе при температуре бани 40 °C до объема 0,3 — 0,5 мл. Досуха отгоняют на воздухе. Остаток в колбе растворяют в 1 мл ацетона и хроматографируют.

Навеску растительного материала (яблоки, картофель) массой 25 г помещают в коническую колбу, приливают 50 мл смеси ацетон-вода (7:3), встряхивают 30 мин. Экстракцию повторяют дважды, объединяют ацетоновые экстракты, фильтруют и переносят в делительную воронку. Прибавляют 300 мл дистиллированной воды, хорошо перемешивают и реэкстрагируют суми-альфа гексаном дважды порциями по 30 мл. Объединяют гексан, сушат безводным сульфатом натрия, концентрируют на ротационном испарителе. Сухой остаток в колбе растворяют в 1 мл ацетона и далее хроматографируют.

Газожидкостная хроматография. Применяют носитель хроматон N-AW (0,16 — 0,20 мм). Неподвижная фаза 5% SE-30. Колонка стеклянная длиной 1 м, заполненная носителем на 0,5 — 0,6 м. Скорость газа-носителя (азота) -12

50 мл/мин. Шкала электрометра 20 x 10     А.  Температура  (°C):  колонки -
220,  испарителя - 240,  детектора - 250.  Вводимый  объем  5  мкл.   Время
удерживания  15 мин.  18 с,  линейный  диапазон  детектирования  2 - 50 нг.

Минимально детектируемое количество 2 нг.

Тонкослойная хроматография. Пробу, сконцентрированную до объема 0,1 — 0,2 мл, количественно наносят на пластинки «Силуфол». Параллельно наносят серию стандартных растворов с содержанием суми-альфа 3; 5 и 10 мкг.

    Хроматографируют  в  смеси  растворителей  гексан-ацетон  (4:1).  После
высушивания пластинку обрабатывают  раствором  аммиаката серебра и облучают
УФ-светом  30  мин.  Суми-альфа  обнаруживается  в  виде пятна серо-черного
цвета. Величина R  0,4 +/- 0,05.

             f

Обработка результатов анализа. При использовании метода ГЖХ для количественного определения измеряют площадь основного пика в пробе в стандартном растворе (при условии, что пики близки по величине и определение ведется в диапазоне линейности детектора). Содержание суми-альфа в пробе (X, мг/кг или мг/л) рассчитывают по формуле:

                               C  V S
                                ст 2 пр

X = --------, S V P ст 1

где:

C — количество препарата во введенном в хроматограф стандартном ст растворе, мкг;

S — площадь пика исследуемого раствора, кв. мм; пр

S — площадь пика стандартного раствора препарата, введенного в ст хроматограф, кв. мм;

V — объем экстракта, введенный в хроматограф, мл; 1

V — общий объем экстракта после упаривания, мл; 2

P — масса анализируемой пробы, г.

При использовании метода ТСХ содержание суми-альфа в пробе вычисляют по формуле:

                                  A

X = -, P

где:

---