Методические указания по определению топсина-М в персиках, фейхоа, хурме и зеленой растительности методом газожидкостной хроматографии

(утв. Минздравом СССР 14.07.1988 № 4655-88)

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ТОПСИНА-М В ПЕРСИКАХ, ФЕЙХОА, ХУРМЕ И ЗЕЛЕНОЙ РАСТИТЕЛЬНОСТИ МЕТОДОМ ГАЗОЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ <*>

---

<*> Разработаны Е.Г. Дауровой, В.М. Григой (НИИЦиГС).

Краткая характеристика препаратов дана в Методических указаниях № 3164-84.

Принцип метода. Метод основан на газохроматографическом определении метилтиофаната с ДПР на неподвижной фазе карбовакс 20 М после экстракции смесью хлороформ-ацетон и очистке экстракта путем перераспределения в системе водный этанол-хлороформ.

Метрологическая характеристика метода. Метрологическая характеристика метода приведена в таблице 108.

Таблица 108

МЕТРОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА МЕТОДА

Параметры	Анализируемый объект
	персики, хурма, фейхоа	зеленая растительность
Диапазон определяемых концентраций, мг/кг Предел определения, мг/кг Предел обнаружения, мкг Среднее значение определений, % Стандартное отклонение, % Доверительный интервал среднего (p = 0,95, n = 5), %	0,02 — 0,12 0,02 0,5 83,1 +/- 4,6 +/- 5,7	0,20 — 0,60 0,20 1,0 73,6 +/- 7,7 +/- 9,4

Избирательность метода. Метод специфичен. Определению метилтиофаната не мешают другие соединения, применяемые для защиты персика и субтропических культур.

Реактивы и материалы. Хлороформ. Ацетон особой чистоты. Сульфат натрия безводный, ч.д.а. Этиловый спирт 60-процентный. Бумага фильтровальная. Вода дистиллированная. Стандартный раствор метилтиофаната в ацетоне (1 мкг/мл) — срок хранения в холодильнике 2 мес. Азот особой чистоты, газообразный. Карбовакс 20 М 15-процентный на хроматоне N-AW-DMCS (0,16 — 0,20 мм). Алиезон-L 15-процентный на хроматоне N-AW-DMCS (0,20 — 0,25 мм). Вата обезжиренная.

Приборы, аппаратура, посуда. Хроматограф «Цвет-100 М», модель 164 с ДПР. Ротационный вакуумный испаритель. Колбы: лабораторные конические на 250 мл; круглодонные для отгонки растворителей на 100 мл. Аппарат для встряхивания. Мерные цилиндры вместимостью 1 и 10 мл. Пробирки на 5 мл с притертыми пробками. Воронки делительные на 150 мл. Микрошприц на 10 мкл. Колонка спиральная стеклянная размером 100 x 0,3 см.

Ход анализа. Экстракция и очистка экстрактов. Навеску пробы плодов (25 г) измельчают, заливают 50 мл смеси растворителей хлороформ-ацетон в объемном соотношении 9:1 и экстрагируют в течение 30 мин. на аппарате для встряхивания. Экстракт фильтруют в круглодонную колбу на 250 мл через слой безводного сульфата натрия, нанесенного на вату. В остаток добавляют 25 мл смеси хлороформ-ацетон (9:1) и встряхивают еще раз в течение 15 мин. Экстракты объединяют, отгоняют на ротационном испарителе при температуре 40 °C до объема 0,2 — 0,4 мл и высушивают на воздухе досуха. Остаток тщательно растворяют в 0,40 — 0,45 мл хлороформа, вносят в колбу 5 мл охлажденного 60-процентного этилового спирта и перемешивают содержимое. Пробу фильтруют через смоченный водой фильтр в делительную воронку, а остаток в колбе последовательно промывают 3 мл 60-процентного этилового спирта, 10 мл дистиллированной воды, переносят через фильтр в ту же делительную воронку. В пробу добавляют 12 мл воды, 30 мл хлороформа и интенсивно встряхивают 3 мин. После разделения фаз (10 мин.) хлороформный экстракт сушат безводным сульфатом натрия и переносят его в колбу перегонного аппарата. Пробу концентрируют под вакуумом до 0,2 — 0,4 мл, а затем на воздухе досуха, добавляют 2 мл ацетона, перемешивают и вводят в хроматограф аликвоту объемом 2 — 5 мкл.

Пробу измельченной ножницами зеленой растительности (5 г) заливают 40 мл смеси растворителей хлороформ-ацетон (9:1) и далее анализ проводят по схеме описанной экстракции из плодов.

Хроматографирование. Условия хроматографирования приведены в таблице 109.

Таблица 109

УСЛОВИЯ ХРОМАТОГРАФИРОВАНИЯ

Параметры	Фаза
	карбовакс 20 М 15-процентный	апиезон-L 15-процентный
Расход азота, мл/мин.	60	60
Температура, °C:
испарителя	220	220
термостата колонок	100	80
детектора	230	230
Объем пробы, мкл	1 — 5	1 — 5
Время удерживания, с	130	91
Линейный динамический диапазон, нг	0,5 — 3,0 -9	1,0 — 5,0 -9
Рабочая шкала электрометра, А	4 x 10	4 x 10

Обработка результатов анализа. Количественно пестицид определяют сравнением высот пиков исследуемого вещества и стандартного раствора. Содержание метилтиофаната (X, мг/кг) в анализируемой пробе вычисляют по формуле:

                                AH V
                                  2 2

X = ------, H V P 1 1

где:

A — содержание препарата в объеме стандартного раствора, введенном в хроматограф, нг;

    H ,   H  - высоты   пиков   соответственно   стандартного   раствора  и
     1     2

анализируемой пробы, мм;

V — объем аликвоты экстракта, введенный в хроматограф, мкл; 1

V — конечный объем экстракта пробы, мл; 2

P — навеска анализируемого образца, г.

Требования безопасности. Необходимо соблюдать общепринятые правила техники безопасности при работе с органическими растворителями, токсичными веществами, электронагревательными приборами и сжатыми газами.

---