Методические указания по определению топсина-М в яблоках, персиках, фейхоа и хурме тонкослойной хроматографией

(утв. Минздравом СССР 27.11.1984 № 3164-84)

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ТОПСИНА-М В ЯБЛОКАХ, ПЕРСИКАХ, ФЕЙХОА И ХУРМЕ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИЕЙ

(Дополнение к № 1760-77)

1. Краткая характеристика препарата

Топсин-М, топсин ИФ-44.

Действующее вещество — метилтиофанат — 1,2-бис(3-карбометоксилурендо)бензол.

         S     O

/ \\ NH-		C -NH-	C -OCH
\ /	3 Мол. масса 342,4. / NH-C -NH-C -OCH
			2 C H O № S .

             S     O                              12 14 4 4 2

    Чистый  фунгицид - белый порошок с температурой плавления 177 - 178 °C,
плавится   с  разложением.  Хорошо  растворим  в  хлороформе,  этилацетате,

ацетоне, низкомолекулярных спиртах, мало растворим в воде.

    Медленно  гидролизуется  в  щелочной среде. При метаболизме и гидролизе
образуется   системный   фунгицид   ВМК.  Топсин-М   выпускается  в   форме
70-процентного с.п. ЛД   для крыс - 6600 мг/кг.

                  50

МДУ в персиках — 1,0 мг/кг; яблоках — 0,5 мг/кг, в фейхоа и хурме содержание метилтиофаната не нормировано.

2. Методика определения метилтиофаната

2.1. Основные положения

2.1.1 Принцип метода

Метод основан на определении фунгицида методом ТСХ после извлечения из растительной пробы хлороформом и очистки экстракта путем перераспределения в системе водный этанол — хлороформ.

2.1.2 Метрологическая характеристика метода

Метрологические параметры	Анализируемый объект
	яблоки	персики	фейхоа	хурма
1. Предел обнаружения, мг/кг	0,08	0,08	0,06	0,07
2. Число параллельных определений	6	6	6	6
3. Среднее значение определения, %	78,2	80,2	85,5	83,8
4. Стандартное отклонение, %	8,9	8,2	7,9	8,0
5. Доверительный интервал среднего при альфа = 0,95%	78,2 +/- 9,3	80,2 +/- 8,6	85,5 +/- 8,3	89,8 +/- 8,4

2.1.3 Избирательность метода

Метод специфичен. Определению метилтиофаната не мешают другие фунгициды, применяемые в сельском хозяйстве для защиты субтропических плодовых культур.

2.2. Реактивы и материалы

Хлороформ, ГОСТ 2603-71, хч.

Гексан ч, ТУ 6-09-3375-78.

Этилацетат ч, ГОСТ 22300-76.

Ацетон осч, ТУ 6-09-3513-82.

Натрий сернокислый безводный чда, ГОСТ 4166-76.

Серебро азотнокислое чда, ГОСТ 1277-75.

Бромфеноловый синий чда, ТУ 6-09-13-70.

Спирт этиловый, ТУ 6-09-17-10-77, 96%.

Кислота уксусная ледяная хч, ГОСТ 61-75.

Бумага фильтровальная, ТУ 6-09-1678-77.

Пластинки «Силуфол — UV » или «Силуфол». 254

Вата обезжиренная гигроскопическая.

Вода дистиллированная.

Проявляющий реактив: 0,5 г азотнокислого серебра растворяют в 22,5 мл дистиллированной воды, доводят до 100 мл ацетоном и добавляют в раствор 0,05 г бромфенолового синего.

Стандартный раствор метилтиофаната в хлороформе (100 мкг/мл).

2.3. Приборы, аппаратура, посуда

Испаритель ротационный ИР-1, ТУ 25-11-917-74.

Камера для хроматографирования, ГОСТ 10565-75.

Камера для опрыскивания хроматографических пластинок.

Пульверизатор стеклянный, ГОСТ 10391-74.

Воронки делительные емкостью 150 мл, ГОСТ 8613-72.

Колбы лабораторные конические емкостью 250 мл, ГОСТ 10394-72.

Колбы круглодонные для отгонки растворителей емкостью 100 и 250 мл, ГОСТ 10394-72.

Воронки химические емкостью 150 мл, ГОСТ 8613-75.

Пипетки емкостью 0,1, 1, 5 мл, ГОСТ 20292-74.

Аппарат для встряхивания АВУ-1, ТУ 64-1-2451-72.

Мерные цилиндры емкостью 50, 100 мл, ГОСТ 1770-74.

Шприц медицинский стеклянный емкостью 1 мл.

Хроматоскоп.

2.4. Отбор проб

Пробы для анализа отбираются в соответствии с «Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, продуктов питания и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов», утвержденными Зам. Главного государственного санитарного врача СССР за № 2051-79, 21.08.1979.

2.5. Проведение определения

2.5.1 Экстракция и очистка экстрактов

Навеску пробы 25 г тщательно измельчают, заливают 50 мл хлороформа и экстрагируют в течение 30 минут на аппарате для встряхивания. Экстракт фильтруют через обезжиренную вату в колбу перегонного аппарата емкостью 250 мл, в остаток добавляют 25 мл хлороформа и встряхивают еще раз в течение 15 минут. Экстракты объединяют и отгоняют на ротационном испарителе при температуре 40 °C досуха. Остаток тщательно растворяют в 0,40 — 0,45 мл хлороформа, затем в колбу вносят 5 мл охлажденного 60-процентного этилового спирта и перемешивают содержимое. Пробу фильтруют через смоченный водой фильтр в делительную воронку, а остаток в колбе последовательно промывают 3 мл 60-процентного этилового спирта, 10 мл дистиллированной воды и переносят через фильтр в ту же делительную воронку. В пробу добавляют 12 мл воды, 30 мл хлороформа и интенсивно встряхивают в течение 3 минут. После разделения фаз (10 минут) хлороформенный экстракт сушат безводным сульфатом натрия, переносят его в колбу перегонного аппарата емкостью 100 мл и отгоняют на ротационном испарителе при температуре 40 °C до 1 мл.

2.5.2 Хроматографирование

    1/5   часть   пробы   наносят   медицинским   стеклянным   шприцем   на
хроматографическую  пластинку  "Силуфол"  или  "Силуфол  - UV   ". Слева  и

                                                         254

справа наносят стандартные растворы метилтиофаната и хроматографируют в системе растворителей н-гексан — этилацетат — ацетон в объемном соотношении 7:4:4, R метилтиофаната — 0,70 +/- 0,03. Можно использовать систему f

хлороформ - этилацетат - ледяная  уксусная  кислота в объемном  соотношении
50:50:10, R  метилтиофаната - 0,85 +/- 0,03, R  БМК - 0,38 +/- 0,02.
           f                                  f
    После  высушивания  пластинок  на  воздухе  обнаружение  метилтиофаната

проводят проявляющим реактивом и через минуту обесцвечивают фон пластинки 5 мл уксусной кислоты. Линейность детектирования сохраняется в пределах 0,3

• 5,0 мкг. Метилтиофанат проявляется в виде сиреневых, БМК — в виде синих

пятен.   Обнаружение   метилтиофаната   можно   проводить  в  УФ-свете  при
использовании  пластинок  "Силуфол  -  UV   ".  Зоны локализации пестицидов

                                     254

проявляются в виде сиреневых пятен. Нижний предел обнаружений

2.6. Обработка результатов анализа

Количественное определение метилтиофаната проводят сравнением размеров площадей и интенсивности окраски пятен исследуемого вещества в пробе и стандартного раствора. Содержание анализируемого соединения в плодах вычисляют по формуле:

                         A x P  x 100
                              2

X = ------------ мг/кг, P x M x D 1

где:

A — количество метилтиофаната в стандартном растворе, мкг;

P — площадь пятна стандартного раствора, кв. мм; 1

P — площадь пятна пробы, кв. мм; 2

M — масса исследуемой пробы, г;

2.7. Требования безопасности

Соблюдаются общие правила по технике безопасности, необходимые при работе с химическими реактивами и пестицидами (ядохимикатами).

---