Методические указания по определению топсина-М и БМК при совместном присутствии в персиках, фейхоа и хурме методом тонкослойной хроматографии

(утв. Минздравом СССР 08.06.1987 № 4337-87)

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ТОПСИНА-М И БМК ПРИ СОВМЕСТНОМ ПРИСУТСТВИИ В ПЕРСИКАХ, ФЕЙХОА И ХУРМЕ МЕТОДОМ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ <*>

---

<*> Разработаны В.М. Григой, Е.Г. Дауровой (НИИЦиГС).

Краткая характеристика препаратов дана в Методических указаниях № 3164-84. Топсин-М, топсин-НФ-44. В процессе метаболизма и при гидролизе образуется биологически активное соединение — системный фунгицид БМК, метил-N-(2-бензимидазолил)-карбамат.

Принцип метода. Метод основан на определении метилтиофаната и БМК методом ТСХ после извлечения из растительного материала раствором азотной кислоты (pH 1) и очистке экстракта путем перераспределения в системе вода-хлороформ и в тонком слое силикагеля.

Метрологическая характеристика метода. Метрологическая характеристика метода приведена в таблице 107. Метод специфичен. Определению метилтиофаната в БМК не мешают другие пестициды, применяемые в сельском хозяйстве для защиты персика и субтропических культур.

Таблица 107

МЕТОДА ОПРЕДЕЛЕНИЯ МЕТИЛТИОФАНАТА И БМК

Параметры	Пестицид	Анализируемый объект
		персики	фейхоа	хурма
Диапазон определяемых	Метилтиофанат	0,04 — 0,20	0,03 — 0,20	0,04 — 0,20
концентраций, мг/кг	БМК	0,06 — 0,20	0,05 — 0,20	0,05 — 0,20
Предел обнаружения,	Метилтиофанат	2,0	0,9	2,0
мкг	БМК	1,5	1,4	1,5
Предел определения,	Метилтиофанат	0,04	0,03	0,03
мг/кг	БМК	0,06	0,05	0,05
Среднее значение	Метилтиофанат	83,0	85,8	84,1
определения, %	БМК	85,1	87,1	86,8
Стандартное отклонение, %	Метилтиофанат БМК	+/- 9,0 +/- 8,8	+/- 8,2 +/- 8,1	+/- 8,4 +/- 8,4
Доверительный интервал среднего (p = 0,95, n = 6), %	Метилтиофанат БМК	+/- 9,5 +/- 9,3	+/- 7,8 +/- 7,7	+/- 8,0 +/- 8,0

Реактивы и материалы. Азотная кислота ч. Вода дистиллированная. Вата обезжиренная гигроскопическая. Ацетон особой чистоты. Аммиак водный ч.д.а. Хлороформ. Бромфеноловый синий ч.д.а. Сульфат натрия безводный ч.д.а. Этилацетат ч. Азотнокислое серебро, ч.д.а., 1-процентный водный раствор. Ледяная уксусная кислота х.ч. Этиловый спирт. Бумага фильтровальная. Стандартные растворы метилтиофаната и БМК в хлороформе (100 мкг/мл). Срок хранения в холодильнике 2 мес. Проявляющий реагент: 50 мл 1-процентного водного раствора азотнокислого серебра смешивают с 50 мл 0,05-процентного раствора бромфенолового синего в ацетоне. Хранят в холодильнике в течение месяца.

Приборы, аппаратура, посуда. Колбы: лабораторные конические на 250 мл; круглодонные для отгонки растворителей на 100 мл. Аппарат для встряхивания.

Воронки  делительные  на  150 мл. Мерные цилиндры на 50 и 100 мл. Пластинки
"Силуфол"  УФ     или "Силуфол". Камера для хроматографирования. Испаритель

         254

ротационный. Воронки химические на 150 мл. Камера для опрыскивания хроматографических пластинок. Пульверизатор стеклянный.

Ход анализа. Экстракция и очистка экстрактов. Навеску пробы 25 г тщательно измельчают, заливают 40 мл водного раствора азотной кислоты (pH 1) и экстрагируют в течение 30 мин. на аппарате для встряхивания. Пробу выдерживают в течение 20 мин. при минус 4 °C и экстракт фильтруют через обезжиренную вату в делительную воронку. Остаток промывают 20 мл охлажденного водного раствора азотной кислоты. Экстракты объединяют, подщелачивают 10-процентным раствором водного аммиака до pH 7, добавляют в пробу 40 мл хлороформа и встряхивают 3 мин. После разделения фаз (10 мин.) хлороформный слой переносят через безводный сульфат натрия в колбу для отгонки растворителя на 100 мл и отгоняют при температуре 40 °C до 0,4 — 0,5 мл.

Определение пестицидов методом ТСХ. Пробу наносят на хроматографическую пластинку «Силуфол» УФ или «Силуфол». Слева от пробы наносят стандартные 254 растворы метилтиофаната и БМК и хроматографируют в системе растворителей хлороформ-этилацетат-ледяная уксусная кислота в объемном соотношении 5:5:1.

Величина  R   метилтиофаната  0,51  +  0,03;  R   БМК  0,37 +/- 0,02. Можно
           f                                   f
использовать    систему   диэтиловый   эфир-гексан   (5:1).   Величина   R

                                                                      f

метилтиофаната 0,40 +/- 0,03; R БМК 0,12 +/- 0,3. После высушивания f пластинки нагревают в течение 10 мин. при 70 °C, затем обрабатывают проявляющим реагентом. Фон пластинки обесцвечивают 2,5-процентным раствором

уксусной кислоты.  Линейность детектирования метилтиофаната  сохраняется  в
пределе  0,3 - 5,0 мкг,  БМК - 1,0 - 5,0 мкг.  Метилтиофанат  проявляется в
виде сиреневых пятен на желтом фоне, БМК - в виде синих пятен.  Обнаружение

пестицидов можно проводить в УФ-свете при использовании пластинок «Силуфол» УФ . Зоны локализации проявляются в виде сиреневых пятен. Нижние пределы 254 обнаружения составляют 1,0 мкг для обоих пестицидов.

Обработка результатов анализа. Количественно метилтиофанат и БМК определяют путем сравнения интенсивности окраски и размеров площади пятен исследуемого вещества в пробе и стандартного раствора. Содержание анализируемого соединения в плодах (X, мг/кг) вычисляют по формуле:

                              100 AS
                                    2

X = -------, S P 1

где:

A — количество фунгицидов в стандартном растворе, мкг;

    S ,  S  -  площади  пятен соответственно стандартного раствора и пробы,
     1    2

кв. мм;

P — масса исследуемой пробы, г.

Требования безопасности. Соблюдать общие правила по технике безопасности, необходимые при работе с химическими реактивами и пестицидами.

---