Методические указания по ускоренному определению фенурона, которана, дикурана в воде и почве методом газожидкостной хроматографии
(утв. Минздравом СССР 08.06.1987 № 4337-87)
8 июня 1987 г. № 4337-87
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО УСКОРЕННОМУ ОПРЕДЕЛЕНИЮ ФЕНУРОНА, КОТОРАНА, ДИКУРАНА В ВОДЕ И ПОЧВЕ МЕТОДОМ ГАЗОЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ <*>
<*> Разработаны Г.С. Куликовой, В.Е. Кириченко, К.И. Пашкевичем (Отдел ТОС ИХ БНЦ УрО АН СССР, Свердловск).
Краткая характеристика препаратов указана в Методических указаниях № 2365-81, № 2839-83, № 3187-85, № 4710-88.
Принцип метода. Метод основан на экстракции препаратов из анализируемых проб органическим растворителем, очистке экстракта перераспределением и количественном определении методом ГЖХ с ДЭЗ в виде соответствующих N-гептафторбутирильных производных после обработки гептафтормасляным ангидридом.
Метрологическая характеристика метода. Метрологические данные приведены в таблице 110.
ФЕНУРОНА, КОТОРАНА, ДИКУРАНА (n = 5, p = 0,95)
| Пестицид | Анализируемый объект | Предел определения, мг/л, мг/кг | Среднее значение определения, % | Стандартное отклонение, % |
|---|---|---|---|---|
| Фенурон Которан Дикуран | Вода Почва Вода Почва Вода Почва | 0,004 0,04 0,002 0,04 0,006 0,06 | 103 83 98 85 103 92 | +/- 5,6 +/- 2,3 +/- 3,6 +/- 1,4 +/- 2,1 +/- 2,3 |
Избирательность метода. Метод специфичен. Другие фенилмочевины определению не мешают.
Реактивы и растворы. Хлороформ х.ч., перегнанный. Ацетон ч. Бензол х.ч.
Гептафтормасляный ангидрид (C F CO) O ч. Сульфат натрия безводный, ч.
3 7 2
Хлорид кальция ч., 1-процентный в.р. Серная кислота ч. Азот особой чистоты
или аргон ч. Хроматон N-AW-DMCS (0,16 - 0,20 мм) с 5% XE-60. Стандартные
растворы фенурона, которана, дикурана в бензоле концентрацией 100 мкг/мл.
Стандартные растворы фенурона, которана, дикурана в бензоле концентрациями
0,25; 0,50; 0,75 и 1,00 мкг/мл (готовят из раствора концентрацией
100 мкг/мл).
Приборы и посуда. Хроматограф «Цвет-164» или аналогичный с ДЭЗ. Колонка стеклянная размером 1 м x 3 мм. Встряхиватель любого типа. Ротационный испаритель вакуумный любого типа. Баня глицериновая. Термометры электроконтактные до 100 °C. Воронки: химические; делительные на 100 мл; фильтрующие. Колбы: круглодонные на 100 мл; плоскодонные конические на 25 и 100 мл; мерные на 50 мл. Пробирки градуированные на 10 мл. Пипетки на 1; 5 и 10 мл. Микрошприцы на 10 мкл МШ-10. Фильтры бумажные.
Ход анализа. Экстракция. Пробу воды 50 мл помещают в делительную воронку, добавляют 1 мл концентрированной серной кислоты и трижды экстрагируют хлороформом по 10; 5 и 5 мл. Хлороформные экстракты осушают, пропуская через фильтрующую воронку с сантиметровым слоем безводного сульфата натрия, собирают в круглодонной колбе, смывают сульфат натрия 2 мл хлороформа и отгоняют растворитель на ротационном испарителе при 40 — 50 °C до нескольких капель, которые затем выдувают в токе воздуха.
Пробу почвы 5 г помещают в плоскодонную колбу, добавляют 10 мл экстрагента — смесь равных объемов ацетона и 1-процентного водного раствора хлорида кальция. Колбу встряхивают на аппарате для встряхивания 30 мин. и отфильтровывают экстракт через бумажный фильтр. Операцию повторяют дважды и смывают колбу и фильтр 5 мл смеси. Из объединенного экстракта на ротационном испарителе отгоняют ацетон при 50 °C. Водный остаток переносят в делительную воронку, добавляют 0,5 мл концентрированной серной кислоты. Колбу для отгонки споласкивают 10 мл хлороформа, переносят его в делительную воронку и экстрагируют гербициды хлороформом. Разделяют слои. Экстракцию хлороформом повторяют еще 2 раза порциями по 5 мл при встряхивании в течение 2 мин. Хлороформные экстракты осушают, пропуская через фильтрующую воронку с сантиметровым слоем безводного сульфата натрия, который затем промывают 2 мл хлороформа. Экстракты собирают в круглодонную колбу, отгоняют растворитель на ротационном испарителе при 40 — 50 °C до нескольких капель, которые затем выдувают в токе воздуха.
Получение производных для ГЖХ. В колбу для отгонки растворителя приливают 2 мл бензола, тщательно встряхивают, прибавляют микрошприцем 20 мкл гептафтормасляного ангидрида, переносят реакционную смесь в градуированную пробирку, закрывают притертой пробкой и выдерживают на глицериновой бане при 50 — 60 °C в течение 15 мин. Затем в пробирку приливают 5 мл дистиллированной воды, встряхивают 30 с, сразу после расслоения отбирают из верхнего слоя микрошприцем 5 мкл раствора и вводят в хроматограф.
Условия хроматографирования. Хроматограф типа "Цвет" с ДЭЗ. Колонка стеклянная длиной 1 м, диаметром 3 мм, заполненная хроматоном N-AW-DMCS с
5% XE-60. Температура, °C: испарителя — 200, детектора — 250, колонки — 140 или 160. Расход газа-носителя через колонку 45 мл/мин., на продувку -11
детектора 150 мл/мин. Рабочая шкала электрометра 2 x 10 А. Скорость диаграммной ленты 200 мм/ч. Время удерживания производных: фенурона - 6 мин. 4 с, которана - 4 мин. 48 с при 140 °C, дикурана - 10 мин. 26 с при 160 °C, гексанхлорбензола - 4 мин. 45 с при 140 °C и 3 мин. 24 с при 160 °C. Линейность детектирования: для фенурона - 0,2 - 2,5 нг, которана -
0,1 — 2,5 нг, дикурана — 0,4 — 4,0 нг.
Обработка результатов анализа. Количественное определение проводят по градуировочному графику. Для построения градуировочного графика в градуированные пробирки вносят по 1 мл стандартного раствора гербицидов в бензоле, содержащего 0,25; 0,50; 0,75 и 1,00 мкг гербицида, приливают микрошприцем по 20 мкл гептафтормасляного ангидрида и проводят ацилирование и анализ ГЖХ так, как описано выше. Строят график зависимости высоты пика от количества гербицида, введенного в хроматограф.
Содержание гербицида в анализируемой пробе (X, мг/л или мг/кг) рассчитывают по формуле:
AV
1
где:
A — количество гербицида, найденное по градуировочному графику, нг;
V — общий объем бензольного раствора, мл; 1
V — объем аликвоты, взятой для хроматографирования, мкл; 2
P — масса анализируемой пробы, г или мл.