Методические указания по определению ТМТД и продукта его превращения ТМТМ в воде, зерновых культурах и растительном материале методом тонкослойной хроматографии
(утв. Минздравом СССР 21.06.1987 № 4334-87)
21 июня 1987 г. № 4334-87
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ТМТД И ПРОДУКТА ЕГО ПРЕВРАЩЕНИЯ ТМТМ В ВОДЕ, ЗЕРНОВЫХ КУЛЬТУРАХ И РАСТИТЕЛЬНОМ МАТЕРИАЛЕ МЕТОДОМ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ
1. Краткая характеристика препаратов приведена в таблице 1.
ФИЗИКО-ХИМИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА ДИТИОКАРБАМАТОВ
| № п/п | Препарат | Структурная формула | Мол. масса | T , °C пл | Растворимость |
|---|---|---|---|---|---|
| 1. | ТМТД (тетраметилтиурамдисульфид) | Не приводится | 240,4 | 146 — 148 | Хлороформ, ацетон, н.р. в воде |
| 2. | ТМТМ (тетраметилтиомочевина | Не приводится | 130,4 | - | Хлороформ, н.р. в воде |
2. Методика определения ТМТД и продуктов его превращения в различных средах животного и растительного происхождения.
2.1 Основные положения
2.1.1 Принцип метода
Метод основан на хроматографировании исследуемых соединений в слое сорбента (силикагель, пластинки силуфол) после извлечения их органическим растворителем из анализируемой пробы.
2.1.2 Метрологическая характеристика метода
Диапазон определяемых концентраций 0,01 — 0,5 мг/кг. Чувствительность метода (ТМТД): вода — 0,01 мг/л, доверительный интервал среднего 81,3 +/- 7,1%; зерновые, растения — 0,1 — 0,5 мг/кг, доверительный интервал среднего 74,8 +/- 7,9%.
2.1.3 Избирательность метода
Определению не мешают хлор и фосфорорганические пестициды, могут мешать азотсодержащие соединения.
2.2 Реактивы, растворы
Хлороформ, х.ч., ТУ 6-09-788-76.
Гидроокись натрия, ч.д.а., 0,5% водный раствор.
Сульфат натрия безводный, ч.д.а., ГОСТ 4166-76.
Серная кислота, х.ч., ГОСТ 4204-77, 10% раствор.
Нитрат висмута основной, ч.д.а., ГОСТ 4110-75.
Иодид калия, х.ч., ГОСТ 4232-74.
Сульфат меди, ч., ГОСТ 4165-78.
Уксусная кислота ледяная, х.ч., ГОСТ 18290-72.
Стандартный раствор препарата (готовят отдельно каждый раствор).
10 мг вещества растворяют в 100 мл хлороформа. Хранят в холодильнике. Срок хранения до 6 мес.
Проявляющие реактивы: № 1 — реактив Драгендорфа. Основной раствор:
А) — 3,85 г основного нитрата висмута растворяют в 55 мл дистиллированной воды и прибавляют 25 мл ледяной уксусной кислоты;
Б) — 8 г иодида калия растворяют в 20 мл дистиллированной воды.
Растворы А и Б сливают вместе. Срок хранения в темном месте до 6 месяцев.
Рабочий раствор (для обработки пластинок). К 7 мл основного раствора прибавляют 50 мл дистиллированной воды и 10 мл ледяной уксусной кислоты. Срок хранения в темном месте до 10 дней.
Проявляющий реактив № 2 — 1% водный раствор сульфата меди.
2.3 Приборы, посуда
Посуда мерная по ГОСТ 1770-74.
Колбы конические емкостью 100 мл, ГОСТ 10384-72.
Колбы грушевидные для отгонки растворителей, ГОСТ 23932-79.
Воронки делительные емкостью 250 мл, ГОСТ 25336-82.
Воронки химические, ГОСТ 8613-75.
Испаритель ротационный для отгонки растворителей ИР-1М, ТУ 25-11-917-79.
Камера хроматографическая, ГОСТ 23932-79.
Пульверизатор стеклянный, ГОСТ 10391-79.
2.4 Подготовка проб к анализу
Отбор проб производится в соответствии с «Унифицированными правилами отбора проб», утвержденными Зам. Главного государственного санитарного врача СССР № 2051-79.
Отобранные пробы хранят в холодильнике. Срок хранения 5 — 7 дней после отбора.
2.5 Проведение определения
2.5.1 Экстракция
Вода. К 200 мл воды прибавляют 30 мл хлороформа, встряхивают 15 минут в делительной воронке. Экстракцию повторяют дважды. Объединяют хлороформные экстракты, сушат безводным сульфатом натрия, концентрируют до объема 0,2 — 0,3 мл и остаток количественно наносят на хроматографическую пластинку.
Зерновые, растительные культуры. К 25 г пробы прибавляют 2 мл серной кислоты (1:1), перемешивают. Пробу заливают 30 — 40 мл смеси хлороформ-ацетон (2:1), встряхивают 30 минут. Отделяют раствор, экстракцию повторяют дважды. Объединяют экстракт фильтрат, сушат безводным сульфатом натрия, концентрируют до объема 0,2 — 0,3 мл.
При анализе проб с величиной pH клеточного сока ниже 4 (томаты, вишня и др.) пробу без прибавления серной кислоты экстрагируют смесью хлороформ-ацетон (2:1). Далее поступают так, как описано выше.
2.5.2 Определение методом ТСХ
Пробу, сконцентрированную до объема 0,2 — 0,3 мл, количественно наносят на пластинку «силуфол», смывая остаток в колбе смесью хлороформ-ацетон (2:1). Рядом наносят 2 — 10 мкг стандартного раствора препаратов. Пластинку хроматографируют в системе бензол-ацетон (49:0,5). После того, как фронт растворителя поднимется на 10 см, пластинку вынимают, высушивают на воздухе. Для обнаружения препаратов пластинку обрабатывают проявляющими реактивами либо № 1, либо № 2.
При обработке реактивом № 1 (реактив Драгендорфа) препараты обнаруживаются: ТМТД — пятно синего цвета, ТМТМ — пятно оранжевого цвета на светло-коричневом фоне. Окраска устойчива в течение 15 — 20 минут.
При обработке реактивом № 2 (раствор сульфата меди) препараты обнаруживаются: ТМТД — пятно ярко-зеленого цвета, ТМТМ — пятно красно-черного цвета (окраска быстро исчезает).
Величина Rf составляет: ТМТД — 0,7, ТМТМ — 0,8.
2.6 Количественное определение
Содержание препарата в пробе вычисляют по формуле:
A
X — содержание препарата в пробе, мг/кг (мг/л);
A — количество препарата, найденное путем сравнения размера и интенсивности пятен пробы и стандартного раствора, мкг;
2.7 Требования безопасности
Выполняются в соответствии с «Правилами устройства, техники безопасности, производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в лабораториях (отделениях, отделах) санэпидучреждений системы МЗ СССР», № 2455-81 от 20.10.81.