Временные методические указания по определению модауна в воде и почве газожидкостной хроматографией
(утв. Минздравом СССР 21.11.1985 № 4030-85)
21 ноября 1985 г. № 4030-85
ВРЕМЕННЫЕ МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ МОДАУНА В ВОДЕ И ПОЧВЕ ГАЗОЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИЕЙ
Настоящие Методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-исследовательских учреждений Минздрава СССР, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Агропрома СССР и лабораторий других министерств и ведомств, занимающихся анализом остаточных количеств пестицидов и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней среде.
Срок действия временных методических указаний устанавливается до утверждения гигиенических регламентов.
Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками Госагропрома СССР.
Методические указания согласованы и одобрены отделом перспективного планирования санэпидслужбы ИМПиТМ им. Марциновского Е.И. и Лабораторным советом при Главном санитарно-эпидемиологическом управлении Минздрава СССР.
1. Краткая характеристика препарата
1.1 Модаун, бифенокс.
1.1.1. 2-Нитро-5-(2,4-дихлофенокси)бензойной кислоты метиловый эфир.
1.2 Структурная формула:
// \\ // \\
<pre class="legal-pre"> Cl─\ ___ /─O─\ ___ /─NO Мол. масса 342,1.
─── \ ─── \ 2</pre>
Cl COOCH
3
1.3. Желтое кристаллическое вещество, Т пл. 84 — 86 °С. Растворимость в воде 0,35 мг/л, в ацетоне 400 г/кг, в ксилоле 30%, хлорбензоле 40%, в алифатических углеводородах менее 1%.
Выпускается в виде 80-процентного с.п. с содержанием в концентрате эмульсии по д.в. 200 г/л и 10% гранул.
ЛД для крыс более 6400 мг/кг. Не раздражает кожу. Практически не 50 токсичен для пчел и других насекомых. Мало токсичен для рыб. Предложен для борьбы с сорняками растений в посевах риса.
2. Методика определения
2.1. Основные положения
2.1.1 Принцип метода
Метод основан на извлечении препарата из воды и почвы органическими растворителями. Почвенные экстракты очищаются от коэкстрактивных веществ перераспределением с концентрированной серной кислотой и хроматографированием в тонком слое силикагеля. Количественное определение производят с помощью газовой хроматографии.
2.1.2 Метрологическая характеристика метода
Предел обнаружения в воде — 0,001 мг/л, в почве — 0,002 мг/кг.
Размах варьирования, Р, %, в воде — 86 — 89, в почве — 65 — 77. _
Среднее значение определения, с, %, в воде — 88,6, в почве — 69,8.
Стандартное отклонение, S, %, в воде — 2,3, в почве — 4,6.
2.1.3. Определению в воде мешают гербициды группы нитродифениловых эфиров, имеющие близкие параметры удерживания ГЖХ. Применение очистки на пластинке ТСХ позволяет разделить соединения этой группы.
2.2. Реактивы и растворы
Гексан, х.ч., ТУ 6-09-3375-78.
Кислота серная, х.ч., уд. вес 1,84, ГОСТ 4204-76.
Натрий сернокислый безводный, ч., ГОСТ 4166-76.
Алюминий сернокислый, ч.д.а., ГОСТ 3758-75.
Стандартный раствор модауна с концентрацией 1 — 100 мкг в мл.
2.3. Приборы и посуда
Газовый хроматограф серии Цвет-100, оснащенный детектором постоянной скорости рекомбинации, или аналог.
Колбы грушевидные на шлифах КШ 50 29/32 ТС, ГОСТ 10394-72.
Колбы конические на шлифах КШ 50 29/32 ТС, ГОСТ 10394-72.
Воронки делительные ВД-3-500, ГОСТ 9613-75.
Воронки конические, диаметр 5 см.
Колбы мерные 100 мл, ГОСТ 1770-74.
Аппарат для встряхивания АВУ-1, ТУ 64-1-1081-73.
Ротационный испаритель ИР-1М, ТУ 25211-917-74.
Микрошприцы МШ-10М, ТУ 2.833.106.
2.4. Подготовка к определению
Органические растворители необходимо перегнать, сульфат натрия безводный прокалить при температуре 300 °С.
2.4.1 Отбор проб
Отбор проб для анализа проводят в соответствии с «Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, продуктов питания и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов», утвержденными Заместителем Главного государственного санитарного врача СССР, № 2051-79 от 21.08.79.
Для анализа отбирают 200 мл воды и 100 г почвы.
2.5. Ход определения
2.5.1. К 200 мл воды прибавляют 50 мл 5-процентного водного раствора сульфата алюминия и препарат экстрагируют трижды по 25 мл гексана. Объединенный гексановый экстракт осушают сульфатом натрия безводным и упаривают на ротационном испарителе досуха. Прибавляют 0,5 мл гексана и аликвоту хроматографируют.
2.5.2. Почва. 100 г воздушно-сухой почвы растирают в ступке и просеивают через сито. Пробу помещают в коническую колбу на 500 мл с притертой пробкой и экстрагируют препарат на аппарате для встряхивания в течение 3 — 5 часов 150 мл смеси гексан — ацетон (1:1). Растворитель отфильтровывают, колбу промывают трижды по 30 мл смеси гексан — ацетон (1:1).
Объединенный фильтрат переносят в делительную воронку, добавляют 500 мл воды и собирают верхний гексановый слой. Нижний водный слой дважды экстрагируют по 30 мл гексана. Объединенный гексановый экстракт концентрируют до 20 — 25 мл на ротационном испарителе и переносят в делительную воронку. Добавляют 5 мл концентрированной серной кислоты и встряхивают в течение 2 — 3 мин. (не более!). Кислотный слой переносят в другую делительную воронку, содержащую 150 мл воды. Гексановый экстракт еще дважды обрабатывают по 3 — 4 мл серной кислоты, которую также переносят в воду. Из кислого водного раствора гербицид извлекают 3 раза по 15 мл гексана. Объединенный гексановый экстракт очищают от остатков кислоты промыванием водой (трижды по 40 мл), осушают над безводным сульфатом натрия и упаривают досуха на ротационном испарителе. Сухой остаток растворяют в 0,1 — 0,2 мл ацетона и количественно наносят на хроматографические пластинки «Силуфол» в полосу длиной 5 см. Рядом для идентификации местоположения модауна наносят 2 — 3 мкг гербицида. Хроматографируют в системе гексан — ацетон (2:1), устанавливают дислокацию модауна под УФ-лампой и снимают слой сорбента в месте возможного нахождения гербицида. Элюируют с сорбента ацетоном, упаривают ацетон в грушевидной колбе досуха и остаток растворяют в 0,1 — 1,0 мл гексана. Аликвоту вводят в хроматограф.
2.5.3 Условия хроматографического разделения:
- стеклянная колонка 1 м х 3 мм с 5% SE-30 на Хроматоне Супер (0,16 — 0,20 мм);
- температура: термостата колонок — 220 °С;
термостата детекторов — 250 °С;
- расход газа-носителя (аргон ОСЧ) — 60 мл/мин. через колонку и 150 мл/мин. на поддувку; -12
- рабочая шкала ИМТ-05 — 10 х 10 А;
- линейный динамический диапазон — 0,5 — 100 нг;
- время удерживания — 7,2 мин.
2.6. Обработка результатов анализа
Содержание гербицида вычисляется по формуле:
Н х V
где:
Х — содержание гербицида, мг/кг или мг/л;
К — калибровочный коэффициент, мм/нг;
V — объем анализируемой пробы, мл;
V — объем, вводимый в хроматограф, мкл; a
3. Требования безопасности
Необходимо соблюдать правила работы с токсическими соединениями II-го класса токсичности (гербициды), ЛВЖ (органические растворители), сжатыми газами (аргон под давлением).
4. Разработчики
Настоящие Методические указания подготовлены И.Ш. Кофманом и М.Я. Авиновицкой, Институт физиологии растений АН УССР, г. Киев.
Методические указания апробированы в институтах ВНИИГИНТОКС (т. Гиренко Д.Б.) и ВНИИЭМК (т. Баранов Ю.С.).