3.1. Профилактика инфекционных заболеваний. Организация и проведение мероприятий против Крымской геморрагической лихорадки на территории природных очагов России. Методические рекомендации

(утв. Минздравом России 23.03.2001)

ИСТОРИЯ ИЗМЕНЕНИЙ НОРМАТИВНО-ТЕХНИЧЕСКИХ АКТОВ

flowchart LR
  n0["Методические рекомендации... (от 23.03.2001)"]:::rst
  click n0 "https://bukva.ai/docs/31-profilaktika-infektsionnyh-zabolevaniy" "3.1. Профилактика инфекционных заболеваний. Организация и проведение мероприятий против Крымской геморрагической лихорадки на территории природных очагов России. Методические реком"
  n1["МУ 3.1.3.2488-09"]:::doc
  n0 --> n1
classDef rst fill:#FFEBEB,stroke:#8B0000,color:#000;
classDef doc fill:#EBFFEB,stroke:#006400,color:#000;
classDef notEnt fill:#FFFFEB,stroke:#FF8C00,color:#000;

23 марта 2001 года

3.1 ПРОФИЛАКТИКА ИНФЕКЦИОННЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ

ОРГАНИЗАЦИЯ И ПРОВЕДЕНИЕ МЕРОПРИЯТИЙ ПРОТИВ КРЫМСКОЙ ГЕМОРРАГИЧЕСКОЙ ЛИХОРАДКИ НА ТЕРРИТОРИИ ПРИРОДНЫХ ОЧАГОВ РОССИИ

МЕТОДИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

Методические рекомендации разработаны:

Министерством здравоохранения Российской Федерации (Онищенко Г.Г., Федоров Ю.М., Жилина Н.Я.);

Ставропольским научно-исследовательским противочумным институтом (Ефременко В.И., Евченко Ю.М., Бейер А.П., Шенетц К.В., Афанасьев Е.Н., Василенко Н.Ф., Попов В.А., Руднев С.М., Чумакова И.В., Григорьев М.П., Марчукова Л.Н., Котти Б.К., Емельянов С.А., Емельянова И.Н., Груба А.В.);

Ростовским научно-исследовательским противочумным институтом (Ломов Ю.М., Мишанькин Б.Н., Москвитина Э.А., Пичурина Н.Л., Водопьянов С.О., Терентьев А.Н., Карбышев Г.Л., Наркевич А.Н., Веркина Л.М., Орехов И.В., Водяницкая С.Ю.);

Министерством здравоохранения Ставропольского края (Шибков Н.А., Федосова Г.Н., Исаев В.П.);

ЦГСЭН в Ставропольском крае (Ковалев Н.Г., Балабан О.А., Ковальчук И.В., Черкашин Н.В., Сысолятина Г.В., Тохов Ю.М.);

Институтом вирусологии им. Д.И. Ивановского (Вышемирский О.И., Колобухина Л.В., Аристова В.А.);

Центром специальной лабораторной диагностики и лечения особо опасных и экзотических инфекционных заболеваний (Марков В.И., Меркулов В.А.);

Ставропольской государственной медицинской академией, кафедрой инфекционных болезней (Попов П.Н., Клюшников Ю.И., Санникова И.В.);

Ставропольской научно-исследовательской ветеринарной станцией (Никифоренко В.И., Теплова Е.И.);

ФГУП, Центром дезинфекции в Ставропольском крае (Земцов Е.В., Козлов А.В.).

1. Область применения

1.1. Настоящие Методические рекомендации содержат основные требования к комплексу организационных, профилактических и санитарно-противоэпидемических мероприятий, проведение которых обеспечивает предупреждение возникновения и распространения заболеваний Крымской геморрагической лихорадкой (КГЛ).

1.2. Методические рекомендации разработаны в помощь специалистам санитарно-эпидемиологических и лечебно-профилактических учреждений, которые принимают участие в проведении санитарно-противоэпидемических (профилактических) мероприятий в отношении КГЛ.

1.3. Настоящими Методическими рекомендациями необходимо руководствоваться при осуществлении на территории Российской Федерации государственного санитарно-эпидемиологического надзора и проведении санитарно-противоэпидемических (профилактических) мероприятий при КГЛ.

2. Нормативные ссылки

1. Федеральный закон «О санитарно-эпидемиологическом благополучии населения» № 52-ФЗ от 30 марта 1999 г.

2. Закон Российской Федерации «О государственной границе Российской Федерации», 1993 г., № 4730-1.

3. Федеральный закон Российской Федерации «О ветеринарии», 1993 г., № 4979-1.

4. Сборник санитарных и ветеринарных правил по профилактике и борьбе с заразными болезнями, общими для человека и животных. — М.: 1996.

5. СП 1.2.011-94 «Безопасность работы с микроорганизмами 1 — 2 групп патогенности».

6. СП 1.2.036-95 «Порядок учета, хранения, передачи и транспортирования микроорганизмов 1 — 4 групп патогенности».

7. Доклад Комитета экспертов ВОЗ. Вирусные геморрагические лихорадки. Женева, 1986.

8. Методические рекомендации «Эпидемиология, клиника, лабораторная диагностика, лечение и профилактика Крымской геморрагической лихорадки». Ростов-на-Дону, 1978.

3. Обоснование

3.1. Крымская геморрагическая лихорадка (КГЛ) — природно-очаговая арбовирусная инфекционная болезнь с преимущественно трансмиссивным механизмом заражения, трансмиссивным, контактным и другими путями распространения возбудителя инфекции. Характеризуется различной тяжестью клинического течения заболевания с геморрагическим и без геморрагического синдрома. Инкубационный период — 1 - 14 дней, в среднем — 4 - 6 дней. Возможно инаппарантное течение инфекции.

3.2. В соответствии с «Международной статистической классификацией болезней и проблем, связанных со здоровьем» (МБК-10), болезнь кодируется: А98.0 Крымская геморрагическая лихорадка.

3.3. Возбудителем КГЛ является вирус Крымской геморрагической лихорадки Конго (вирус КГЛ Конго), относящийся к семейству Bunuaviridae, роду Nairovirus. В соответствии с классификацией патогенных для человека микроорганизмов вирус относится ко II группе.

3.4. Природные очаги КГЛ в России приурочены к степным и полупустынным ландшафтам. В природных очагах КГЛ вирус изолирован из клещей Hyalomma marginatum, Dermacentor marginatus, Rhipicephalus rossicus, Rhipicephalus bursa, Boophilus calcaratus (annulatus), Ixodes ricinus, которые являются резервуаром и переносчиками (подтвержденными, потенциальными и подозреваемыми). Основное значение в качестве резервуара и переносчика вируса имеет клещ H. marginatum, который сохраняет вирус пожизненно. У этого вида клеща установлена трансовариальная и трансфазовая передача вируса.

Основными прокормителями имагинальной стадии клещей H. marginatum являются домашние животные (КРС, МРС), личиночной и нимфальной — дикие животные (заяц-русак, еж ушастый и белогрудый, мышь лесная, суслик малый, серая куропатка) и птицы из семейства врановых, преимущественно грачи и другие.

3.5 Источником инфекции при КГЛ являются:

• клещи;
• домашние животные (КРС, МРС);
• дикие мелкие млекопитающие (заяц-русак, еж ушастый и другие);
• человек, больной КГЛ.

Механизм заражения — преимущественно трансмиссивный. Пути распространения возбудителя инфекции: трансмиссивный (через укус переносчиков); контактный (при контакте с кровью больных, при убое и разделке домашних животных возможны случаи внутрилабораторного заражения.

Условия, способствующие заражению:

• нахождение в предшествующие заболеванию КГЛ 14 дней в поле, степи, эндемичных по КГЛ, в период с мая по сентябрь (трудовая деятельность, связанная с животноводством и сельскохозяйственными работами, охота, туризм, отдых на природе);
• уход, тесный контакт и медицинское обслуживание больных КГЛ.

3.6. Спорадические случаи, вспышки КГЛ регистрируются преимущественно в сельской местности. Характерны весенне-летняя сезонность (апрель — август) и определенный профессиональный состав больных (чабаны, доярки, скотники, владельцы индивидуального поголовья, лица, занятые на полеводческих и других сельскохозяйственных работах). При нарушении противоэпидемического режима возможны случаи инфицирования в медицинских учреждениях.

3.7. В целях предупреждения возникновения и распространения КГЛ необходимо своевременно и в полном объеме проводить комплекс организационных, профилактических и противоэпидемических мероприятий.

4. Основные положения организации и проведения мероприятий против КГЛ

4.1. Общие принципы профилактической и санитарно-противоэпидемической работы при КГЛ

4.1.1. Единый подход к организации и проведению профилактических и санитарно-противоэпидемических мероприятий и их комплексное осуществление.

4.1.2. Соответствие содержания и объема санитарно- противоэпидемических мероприятий эпидемиологической обстановке по КГЛ.

4.1.3. Постоянное взаимодействие медицинских учреждений с другими организациями и ведомствами, задействованными в локализации и ликвидации очага КГЛ и профилактике этой инфекции.

4.2. Основные направления санитарно-противоэпидемических и профилактических мероприятий при КГЛ

4.2.1 Работа в возникших очагах КГЛ.

4.2.2. Профилактика заболеваний людей на территории, энзоотичной по КГЛ.

4.3. Основные задачи санитарно-противоэпидемической и профилактической работы

4.3.1. Своевременное выявление больных КГЛ и адекватное их лечение с соблюдением мер личной безопасности медицинского персонала.

4.3.2. Выявление источника инфекции, механизма и условий, способствующих заражению.

4.3.3. Организация и проведение санитарных, акарицидных (противоклещевых) и барьерных дезинсекционных и дезинфекционных обработок для прерывания наиболее вероятных путей распространения возбудителя инфекции.

4.3.4 Осуществление своевременной лабораторной диагностики КГЛ.

4.3.5. Проведение эпизоотологического обследования с целью определения наиболее опасных в эпидемиологическом отношении участков, краткосрочного и долговременного прогнозирования эпизоотологической и эпидемиологической обстановки.

4.3.6. Проведение научных исследований по совершенствованию эпизоотолого-эпидемиологического надзора, лабораторной диагностики, лечения, профилактики, методов проведения акарицидных мероприятий.

5. Организация профилактических и санитарно-противоэпидемических мероприятий

5.1. Организационные мероприятия

5.1.1. Профилактические мероприятия, направленные на предупреждение возникновения спорадических случаев, вспышек КГЛ и распространения возбудителя инфекции на территории Российской Федерации, проводят центры госсанэпиднадзора, учреждения здравоохранения и соответствующие ведомственные службы.

5.1.2. На административных территориях субъектов Российской Федерации (республика, край, область, автономное образование) и местного самоуправления (город, район), где имеются природные очаги и угроза их возникновения, разрабатываются комплексные планы мероприятий по профилактике КГЛ территориальными центрами госсанэпиднадзора, учреждениями здравоохранения, территориальными противочумными учреждениями, учреждениями госветнадзора, унитарными дезинфекционными предприятиями и другими ведомствами.

Планы должны быть согласованы со службами, привлекаемыми к их реализации, утверждены органами исполнительной власти субъектов Российской Федерации, органами местного самоуправления и являются обязательными для выполнения всеми задействованными предприятиями и учреждениями независимо от форм собственности.

Планы подлежат ежегодному корректированию.

Комплексные планы профилактических и санитарно-противоэпидемических мероприятий должны состоять из разделов:

• организационные мероприятия;
• профилактические мероприятия;
• санитарно-противоэпидемические;
• меры в населенных пунктах после ликвидации очага КГЛ.

5.1.3. На случай выявления больного (трупа) с подозрением на КГЛ разрабатываются оперативные планы проведения первичных противоэпидемических мероприятий, которые предусматривают:

• способ и порядок передачи информации (в рабочее и нерабочее время) вышестоящему руководству о выявлении больного (трупа) с подозрением на КГЛ;
• схему оповещения и сбора специалистов (в рабочее и нерабочее время);
• определение функциональных обязанностей и действий каждого специалиста при выявлении больного (трупа);
• определение порядка госпитализации больных в инфекционные стационары (отделения), материально-техническое оснащение и обеспечение средствами лечения, дезинфекции; обеспечение мер противоэпидемической безопасности работы медицинского персонала стационаров, отделений, лабораторий;
• определение порядка передачи биологического материала от больного (трупа) для проведения лабораторной диагностики (серологических, молекулярно-биологических, вирусологических исследований);
• создание на уровне субъектов Российской Федерации (республика, край, область, автономное образование) резерва кадров врачей и среднего медицинского персонала;
• определение источников пополнения автотранспорта для работы в очаге;
• обеспечение проведения эпизоотологического обследования в очаге (по месту жительства, работы, отдыха) и в природном очаге;
• организация и проведение акарицидной обработки сельскохозяйственных животных (по эпидпоказаниям) независимо от форм собственности;
• формирование бригад для проведения эпизоотологического обследования;
• обеспечение взаимодействия органов и учреждений Минздрава России, Управления ветеринарии, службы защиты растений, администраций субъектов Российской Федерации, медицинских учреждений других министерств и ведомств, органов исполнительной власти субъектов Российской Федерации на случай возникновения очага КГЛ.

5.1.4. При неустойчивой санитарно-эпидемиологической обстановке, выявлении антигена, выделении вируса из полевого материала (переносчиков, диких животных), регистрации единичных случаев заболеваний КГЛ вопросы организации и проведения санитарно-противоэпидемических (профилактических) мероприятий выносятся на заседания санитарно-противоэпидемической комиссии административной территории.

При угрозе распространения КГЛ вопросы организации и проведения санитарно-противоэпидемических (профилактических) мероприятий должны выноситься на заседания санитарно-противоэпидемической комиссии местного самоуправления субъекта, регионального, федерального уровня.

5.1.5. На административных территориях субъектов Российской Федерации (республика, край, область, автономное образование) и местного самоуправления (город, район), где имеются природные очаги КГЛ или угроза их возникновения, должны быть сформированы медицинские штабы в составе: консультативной, противоэпидемической, госпитальной, лабораторной, патологоанатомической групп, а также групп по проведению дезинфекционных, дератизационных, дезинсекционных и акарицидных мероприятий.

5.1.6. Санитарно-противоэпидемические и профилактические мероприятия в очаге финансируются за счет средств эпидемиологического фонда в соответствии с положением о порядке расходования ассигнований на мероприятия по борьбе с эпидемиями.

5.1.7. На эндемичных по КГЛ территориях осуществляется специальная подготовка медицинских работников учреждений здравоохранения и центров госсанэпиднадзора, а также работников ветеринарных учреждений независимо от их ведомственной принадлежности.

Подготовка медицинских работников осуществляется на семинарах, при проведении инструктажей и на тренировочных занятиях. На семинарах и во время инструктажей должны быть подробно изложены вопросы эпидемиологии, клинической и дифференциальной диагностики КГЛ, меры личной безопасности и проведение первичных противоэпидемических мероприятий при выявлении больного с подозрением на КГЛ. При этом особое внимание следует обращать на принципы ведения больных КГЛ, отбора, хранения и транспортировки биологического материала.

Тренировочные занятия с вводом условного больного КГЛ проводят в медицинских учреждениях, куда непосредственно обращаются больные люди: поликлиниках, больницах, фельдшерско-акушерских и фельдшерских пунктах и др. Они должны быть направлены на практическую реализацию теоретической подготовки медицинских работников при проведении первичных противоэпидемических мероприятий от изоляции условного больного по месту его выявления до госпитализации в предусмотренный для этих целей стационар (бокс).

5.1.8. Подготовку всех ветеринарных работников независимо от должности проводят путем проведения семинаров и инструктажей, на которых необходимо подробно изложить материал о возможном ареале возбудителя инфекции, о носителях (прокормителях) и переносчиках возбудителя КГЛ, о механизмах заражения, путях распространения возбудителя среди людей, о мерах личной профилактики КГЛ, объектах для лабораторного исследования. Особое внимание при этом уделяется вопросам содержания сельскохозяйственных животных, проведения систематических противоклещевых обработок скота и пастбищ с целью недопущения их заклещевленности.

5.1.9. Гигиеническое воспитание и обучение населения должны быть направлены на личную и общественную безопасность. С этой целью среди населения энзоотичной территории необходимо формировать сознательное отношение к предупреждению возникновения и распространения заболеваний КГЛ, которое может быть обеспечено обязательным и своевременным обращением всех граждан в медицинские учреждения в случае укуса клеща и при первых признаках заболевания, подозрительного на КГЛ. Гигиеническое воспитание и обучение должны быть направлены на ознакомление населения с основными сведениями о носителях и переносчиках возбудителя болезни, возможных путях заражения, признаках проявления болезни, мерах личной и общественной профилактики.

Эту работу осуществляют специалисты санитарно-эпидемиологических и лечебно-профилактических учреждений. Санитарное просвещение проводят в форме лекций, выступлений по радио и телевидению, распространения популярных брошюр, листовок, плакатов, памяток, а также путем публикации актуальных материалов в местных газетах и специальных выпусках санитарных бюллетеней.

Ежегодно в эндемичных по КГЛ районах следует проводить специальные занятия-инструктажи с доярками, скотниками и другими работниками сельского хозяйства с отработкой мер по личной профилактике. Во всех общеобразовательных школах этих районов необходимо проводить занятия по клиническим признакам КГЛ и способам ее профилактики.

6. Эпизоотолого-эпидемиологический надзор при КГЛ

6.1. Основные принципы эпизоотолого-эпидемиологического надзора

• Комплексный медико-ветеринарный подход к организации надзора.
• Учет эпизоотологических и эпидемиологических особенностей КГЛ.
• Активный, систематический и динамический сбор, анализ и оценка эпизоотологических и эпидемиологических данных, в том числе на сопредельных территориях, по КГЛ и другим природно-очаговым инфекциям.
• Постоянный и оперативный обмен информацией между медицинской, ветеринарной и другими заинтересованными службами.
• Комплексность управленческих решений, принимаемых всеми заинтересованными службами.

6.2. Эпизоотологическое обследование

Задачами эпизоотологического обследования являются определение численности клеща H. marginatum marginatum на различных объектах как косвенного показателя эпизоотологического состояния территории по КГЛ; передача отловленных клещей для лабораторного исследования; составление краткосрочного (на текущий год) и долгосрочного (на следующий год) прогнозов эпизоотологического состояния; выдача рекомендаций по проведению акарицидной обработки скота или отдельных участков местности; контроль качества проводимых акарицидных мероприятий.

Эпизоотологическое обследование на КГЛ является частью комплексного изучения природного очага болезни и подразделяется на разделы:

• эпизоотологическое обследование территории очага;
• многолетние наблюдения на стационарах.

Эпизоотологическое обследование проводится планово или экстренно при эпидемических проявлениях в виде спорадических или групповых заболеваний.

6.3. Организация эпизоотологического обследования (организационный период)

6.3.1. Плановые обследования энзоотичных по КГЛ территорий должны быть включены в комплексные планы профилактических и санитарно-противоэпидемических мероприятий центров госсанэпиднадзора.

6.3.2. Для экспедиционных выездов в очаги КГЛ рекомендуется создавать комплексные бригады в составе: эпидемиолога, паразитолога, зоолога, ветврача, вирусолога, а также помощников эпидемиологов и лаборантов.

6.3.3. В распоряжении бригады должны быть предусмотрены автомашина (походная лаборатория) и необходимый инвентарь для полевых работ, а также средства индивидуальной защиты (комбинезон, сапоги, репелленты, пиретроиды).

6.3.4. Весь персонал бригады проходит предварительную подготовку по мерам личной профилактики и методикам работы.

6.3.5 Началу полевых работ предшествуют:

• составление планов, графика выездов на год (на отдельные сезоны года);
• подготовка картографической основы карт ландшафтных зон и районов (масштаб 1:600000 — 1:750000);
• подготовка почвенных, климатических карт и карто-схем районов (масштаб 1:100000), планов лесничества для использования во время работы в поле.

6.3.6. На карты-основы наносят заранее населенные пункты, дороги, границы растительных зон и ландшафтных районов.

По имеющимся документированным источникам информации или центров госсанэпиднадзора картографируется зоолого-паразитологический материал (видовой состав, размещение и численность доминирующих мелких млекопитающих и иксодовых клещей). В последующем карты-основы дополняют данными эпизоотологического обследования. При картографировании рекомендуется пользоваться точечным или знаковым методом.

6.3.7. На карту-основу накладывают контурную фактографическую карту на кальке, на которую наносят только эпидемиологические данные: заболеваемость людей КГЛ, факты выделения возбудителя КГЛ от людей, животных, клещей, данные серологических исследований сывороток крови людей и животных.

6.3.8. Рекомендуется до начала полевых работ подготовить журналы учета видов работ для внесения данных из бланков рабочих документов (Приложение 1).

Необходимые для картографического анализа материалы получают в административных центрах (районных администрациях, правлениях акционерных обществ). Сведения, полученные из этих документов, уточняются в районных управлениях сельского хозяйства, отделах землеустройства и центрах госсанэпиднадзора.

На основе работы, проведенной в организационный период, намечаются конкретные участки для полевых обследований, сроки и объем работы.

6.3.9 Бланки рабочих документов

Этикетка. Наиболее удобный размер бланка этикетки — 1/4 листа бумаги формата А-4. В ней должны быть предусмотрены графы для внесения следующих сведений: номер этикетки, название административного района, дата и адрес пункта проведения работ в полярных координатах (азимут и расстояние в километрах относительно ближайшего населенного пункта), характеристика биотопа (пастбище, поле, лесополоса и т.п.), проведенная работа и ее результат (например: осмотрены 50 голов крупного рогатого скота, собраны 90 клещей), подпись зоолога.

Бланки отчетов. Дня оперативного информирования организаций, руководящих эпизоотологическим обследованием, следует заготовить бланки текущих отчетов, в которых с максимальной полнотой должна отражаться работа, проводимая эпизоотологической группой. Образец бланка приводится в Приложении 1.

6.4. Эпизоотологическое обследование природного очага КГЛ в различные периоды

В соответствии с фенологией клеща H. marginatum marginatum эпизоотологическое обследование проводится в два этапа: весенне-летний (апрель, май, 1-я декада июня) и летне-осенний (2 — 3-я декады июня, июль — сентябрь).

6.4.1. Начало весенне-летнего этапа эпизоотологического обследования должно совпасть по времени с массовым нападением взрослых клещей H. marginatum marginatum на крупный и мелкий рогатый скот. В зависимости от погодных условий начало массовой активности клещей может наблюдаться в период с середины апреля до первой декады мая.

6.4.2. Регистрацию начала массовой активности H. marginatum marginatum осуществляют по данным, получаемым от ветеринарной службы, и по результатам эпидразведки при обследовании скота на предмет его заклещевленности в наиболее неблагополучных (по данным прошлого года) хозяйствах, а также на стационарных пунктах.

6.4.3. Эпизоотологическое обследование в весенне-летний период следует проводить по двум основным направлениям: обследование крупного и мелкого рогатого скота на заклещевленность и определение численности клещей H. marginatum marginatum в природных биотопах.

6.4.4. Перед началом обследования скота в каждом хозяйстве собирают данные о количестве крупного рогатого скота (КРС) и мелкого рогатого скота (МРС) в общественном и частном секторах. Отдельно для каждого сектора уточняют количество скота стойлового содержания и выпасаемого на пастбищах. Для выпасаемого скота определяют его разбивку на стада, дислокацию и площадь пастбищ для каждого стада. Выясняют в агропромышленном объединении (АПО) и на ветучастках сроки проведения последних акарицидных мероприятий.

6.4.5. Из каждого стада, в зависимости от его численности и наличия загородок, расколов, осматривают не менее 30 — 50 голов обязательно в присутствии пастуха и представителя АПО.

6.4.6. Работник, собирающий клещей со скота, должен быть одет в комбинезон из плотной ткани, резиновые сапоги с голенищами, плотно облегающими ноги, на руках двойные резиновые перчатки, костюм должен быть обработан репеллентом.

6.4.7. Клещей снимают руками в перчатках (при использовании пинцета клещи часто либо соскальзывают, либо повреждаются) и помещают в пробирку с ватно-марлевой пробкой. Заранее в пробирку опускают небольшой зеленый лист растения из семейства злаковых, для поддержания повышенной влажности его можно смочить дистиллированной водой.

6.4.8. Клещей, снятых с каждой головы скота, помещают в отдельную пробирку. Пробирки с клещами, собранными с животных из одного стада, объединяют в одну пробу и снабжают этикеткой, в которой помимо сведений, перечисленных выше, указывают номер животных при их бонитировке, с которых сняты клещи, или название стада и общее количество голов скота в нем.

6.4.9. Собранных клещей сохраняют живыми в прохладном месте не более 2 — 3 дней, после чего доставляют в лабораторию для дальнейшего исследования. Перевозка клещей в лабораторию осуществляется в пробирках, помещенных в закрытые металлические пеналы или ящики, исключающие их расползание.

6.5. Сбор и определение численности клещей в открытых биотопах в весенне-летний этап эпизоотологического обследования

6.5.1. Наиболее вероятно нападение клещей H. marginatum marginatum на пастбищах, краях лесополос, путях скотопрогона и прилегающих к этим стациям нераспаханных участках. На этих стациях в первую очередь проводят определение численности клещей H. marginatum marginatum.

6.5.2. Сбор иксодовых клещей в природных биотопах. Голодных иксодовых клещей на всех стадиях развития можно обнаружить на траве, ветках кустарника, поверхности почвы, где они сосредоточиваются в ожидании прокормителя. Поэтому необходимо организовать сборы клещей в природных биотопах с учетом того, что у клещей существует трансфазовая передача возбудителя.

Сборы клещей надлежит проводить утром (после росы) и при слабом ветре. Пастбища обследуют ранней весной, до начала выпаса, до того, как их вытопчет скот.

В зависимости от характера обследуемой территории и экологических особенностей клещей применяют различные способы их сбора.

На степных участках клещей собирают на «волокушу», т.е. на кусок (1,5 — 2 м длины) однотонной светлой ворсистой ткани (фланель). В швы противоположных узких сторон куска вставляют по рейке. К верхней рейке прикрепляется шнур, за который берется сборщик и медленно протягивает «волокушу» (справа от себя) по участку. Клещи цепляются за ткань, с которой их снимают мягким пинцетом и помещают в пробирку.

На луговых участках с высокой травой и кустарниками клещей собирают на флаг из такой же ткани. Кусок ткани длиной 1 м и шириной 60 см прикрепляют узкой стороной к палке. Развернутый флаг сборщик протаскивает перед собой по дуге слева направо, затем на следующий шаг — в обратном направлении. Осмотр и сбор клещей с обеих сторон флага следует проводить через каждые 2 взмаха.

Для сбора клещей в лесных стациях применяют «пропашник» с «волокушей». Он представляет собой лист фанеры или контур (каркас) толстой проволоки размерами 40 х 60 см, обтянутый вафельной тканью. К нижней стороне «пропашника» (ширина 40 см) пришивается кусок вафельной ткани длиной 50 см, который выполняет роль «волокуши», собирая клещей с подстилки и в прилегающем травянистом ярусе. Держа «пропашник» за ручку и протаскивая его сбоку от себя, собирают активных клещей, находящихся на растениях и поверхности почвы в учетной полосе. Как правило, сбор ведут два человека: один идет с «пропашником», считает шаги и диктует описание биотопов, другой ведет запись, сбор и хранение клещей во время маршрута. Остановки и осмотр делают через каждые 20 м.

В связи с тем, что иксодовые клещи могут нападать на человека, на остановках сборщики внимательно осматривают друг друга, снимая всех прицепившихся на одежду клещей. Кроме того, существует метод учета численности на «учетчика». Для этого «флаг» или «пропашник» надо вести только сбоку от себя, чтобы у учетчика был свой маршрут, а клещей следует собирать в разные пробирки.

В целях защиты от клещей сборщик должен быть одет в комбинезон или брюки и рубашку из светлой плотной (но негладкой) ткани. Верхнюю часть одежды убирают в брюки и плотно подпоясывают. Носки или чулки натягивают поверх брюк и прибинтовывают марлей так же, как и манжеты рубашки. На голову надевают капюшон или косынку; капюшон заправляют под ворот рубашки, а косынку завязывают поверх воротника. На ногах должны быть сапоги.

6.5.3. Клещей H. marginatum marginatum собирают в открытых стациях методом «на наблюдателя». Выполняется этот метод следующим образом: на участке почвы с низкой растительностью расстилается белое полотнище размерами 3 х 4 м. В центр этого полотнища садится «наблюдатель». Периодически он встает и топает ногами. Набегающих клещей собирают с простыни пинцетом в пробирку. Единицей учета клещей при этом является время — 1 час работы одного «наблюдателя».

6.5.4. Собранный полевой материал доставляют в лабораторию с оформлением направления, образец которого приведен в Приложении 2.

6.5.5. Места активного нападения клещей обычно хорошо известны местным жителям, результаты опросов которых следует учитывать при эпизоотологическом обследовании.

6.5.6. Определение показателей численности клещей (индекс встречаемости, индекс обилия и др.) осуществляют также в соответствии с действующими методическими документами по паразитологической работе в природных очагах.

6.5.7. В весенне-летний период проводят учет численности грачей как основных прокормителей преимагинальных стадий клеща H. marginatum marginatum. В это время грачи концентрируются на гнездовьях (грачевниках) и относительно легко поддаются учету. Как правило, грачевники располагаются линейно в лесополосах и видны издали по наличию гнезд на деревьях и концентрации птиц особенно в утренние и вечерние часы.

6.5.8 Для подсчета грачей в одной из лесополос определяют следующие параметры:

a — среднее количество жилых гнезд на одном дереве;

b — количество деревьев с гнездами на заселенном участке лесополосы (для этого подсчитывают количество деревьев с гнездами на небольшом отрезке — 20 — 30 м и пересчитывают на общую длину грачевника).

Численность взрослых грачей (P) будет приблизительно равна:

P = 2 a b

Расположение всех обнаруженных грачевников наносят на рабочую карту.

6.6. Определение численности клещей в открытых биотопах в летне-осенний этап эпизоотологического обследования

Начало летне-осеннего этапа эпизоотологического обследования определяется следующим фенологическим периодом клеща H. marginatum marginatum. В сроки с середины июня до 1 декады июля начинаются массовый выплод личинок клещей и последующая их линька в нимфу. Прокормителями преимагинальных стадий H. marginatum marginatum являются дикие животные — млекопитающие и птицы. Численность имаго на домашнем скоте при этом значительно уменьшается и в августе доходит до минимальных значений (единичные клещи на отдельных сельскохозяйственных и домашних животных).

Основное направление эпизоотологического обследования в этот период смещается в сторону обследования диких животных. По-прежнему необходимы выборочный контроль заклещевленности скота в неблагополучных хозяйствах и контроль эффективности проведенных летом акарицидных мероприятий.

6.7. Обследование диких животных, диких и домашних птиц на заклещевленность преимагинальными стадиями клеща Hyalomma marginatum marginatum

6.7.1. Особенностью этого этапа обследования является необходимость организации охоты (отстрела) на диких животных (заяц-русак, еж ушастый) и птиц (грачи, серая ворона, куропатки), необходимо в этот период организовать также обследование индеек. В составе зоогруппы следует иметь опытного охотника с ружьем и документами, разрешающими охоту на перечисленных выше диких животных.

6.7.2. Добытых мелких животных и птиц сразу помещают в мешки из плотной ткани (бязи) с двойными простроченными швами; горловину мешка дважды заворачивают, складывают «гармошкой» и завязывают пришитой к мешку завязкой, чтобы исключить рассеивание членистоногих. Размеры мешков должны соответствовать габаритам животных. Так, для зайцев мешок должен иметь размеры 40 х 60 см, для грачей и других птиц — 30 х 40 см. К мешку привязывается этикетка. Доставка добытых животных в лабораторию для сбора клещей должна осуществляться не позднее 1 суток с момента отстрела.

6.7.3. Ежей добывают ночью, объезжая поля по проселочным дорогам и зернохранилища.

6.7.4. Для определения заклещевленности индеек посещают хозяйства, в которых эти птицы содержатся на свободном выпасе. У индейки осматривают голые участки шеи и ушные раковины. Обнаруженных клещей выбирают пинцетом и помещают в пробирку с ватно-марлевой пробкой и зеленым листом злакового растения внутри, которую затем этикетируют.

6.7.5. Оценку физиологической чувствительности клещей на разных стадиях развития к различным акарицидным препаратам проводят по методике, рекомендованной ВОЗ (Приложение 3), с соблюдением мер биологической безопасности работы с материалом, подозрительным на зараженность микроорганизмами I — II групп патогенности.

6.8. Многолетние наблюдения на стационарах

6.8.1. Участок для организации стационара выбирают в районах, в которых зарегистрировано наибольшее число случаев заболеваний КГЛ. Он должен включать все типы сельскохозяйственных и природных ландшафтов, характерных для очага в целом. Кроме того, территория стационара должна включать населенные пункты, жители которых имеют обычный для очага в целом контакт с окружающей природной средой.

6.8.2. Основными целями и задачами исследований на стационаре являются изучение биоценотической структуры очага и его динамики, носителей, прокормителей и переносчиков; исследование взаимоотношений людей с природным очагом; отработка комплекса профилактических мероприятий; изучение воздействия антропогенных и природных факторов на динамику эпизоотического процесса; составление эпидемиологических и эпизоотологических прогнозов.

6.8.3. Изучение биоценотической структуры очага и его динамики предполагает выявление видового состава, обилия, стадиального распределения основных видов диких животных, предполагаемых носителей вируса КГЛ Конго и прокормителей различных стадий развития пастбищных клещей; наблюдение за сезонными и многолетними изменениями численности животных; отлов, отстрел и доставка в лабораторию для вирусологического, серологического и паразитологического исследований диких млекопитающих и птиц; проведение совместно с паразитологом наблюдений за эффективностью проведенных противоклещевых мероприятий.

6.8.4. В процессе проведения всех этапов эпизоотологического обследования руководитель зоогруппы ведет рабочий дневник и заполняет карту-основу. В дневнике регистрируются результаты проведения этапов работы, а также все сведения, полученные в результате эпизоотологического обследования.

Карта-основа к окончанию сезона обследования должна содержать в виде масштабных и немасштабных обозначений информацию об интенсивности эпизоотологического обследования, распределении и численности диких прокормителей клещей H. marginatum marginatum, размещении пастбищ, овощебахчевых культур, зон отдыха — организованных и неорганизованных, участков, обработанных акарицидными препаратами, о фактах выделения в текущем году возбудителя от клещей и млекопитающих, а также о положительных серологических находках. Бланк текущего отчета дан в Приложении 1.

6.9. Эпизоотолого-эпидемиологическое районирование

6.9.1. Эпизоотолого-эпидемиологическое районирование природных очагов КГЛ является основой планирования и проведения профилактических мероприятий и включает:

• определение границ очага;
• определение пространственной структуры очага;
• изучение биоценотической структуры очага;
• выявление наиболее угрожаемых зон и т.д.;
• дифференциацию природных очагов КГЛ на отдельные участки по степени опасности заражения человека на основании изучения закономерностей эпидемических и эпизоотических проявлений с учетом природно-климатических, географических, социально-экономических и исторических особенностей каждого из них.

6.9.2. В качестве исходных материалов для его проведения используют характеристику природного очага, видовой состав, численность мелких млекопитающих и птиц, места их обитания, видовой состав иксодовых клещей, их стациальное размещение и численность, исследование клещей на вирусоносительство; индексы обилия и встречаемости клещей на крупном рогатом скоте, птицах и мелких млекопитающих. В пределах природного очага КГЛ определяют территориальную приуроченность мест инфицирования человека, выясняют условия и причины, способствовавшие заражению человека (проведение сельскохозяйственных работ, уход за сельскохозяйственными и домашними животными, пребывание в природных биотопах), время (сезон) инфицирования.

6.9.3. По степени эпидемической опасности территорию природного очага делят на зоны: реально опасные, условно опасные и безопасные в эпидемиологическом отношении. При этом рекомендуется использовать следующие критерии дифференциации территории:

• к «реально опасным» относятся зоны, где установлена циркуляция вируса и к началу эпидемиологического сезона индекс обилия имаго одного из видов иксодовых клещей — переносчиков возбудителя КГЛ — составляет 3 и выше экземпляров на 1 голову крупного рогатого скота — основного прокормителя половозрелой стадии клещей;
• к «условно опасным» зонам по КГЛ относится весь ареал иксодовых клещей — переносчиков вируса КГЛ на изучаемой территории;
• «безопасные» зоны территории характеризуются отсутствием клещей H. marginatum marginatum.

6.9.4. При эпидемиологическом районировании используют различные карты природного очага КГЛ или его части, составленные на топографической основе в масштабе 1:100000. На карту наносят данные о территориальной приуроченности эпидемических проявлений КГЛ в прошлом. На ней указывают дислокацию отдельных населенных пунктов, животноводческих ферм, мест отдыха населения (лагеря, туристические стоянки и т.д.). Обозначают участки территории, относящиеся к различным сельскохозяйственным учреждениям, скотопрогонные трассы, территории, отведенные под дачные участки, места заготовки сена, лесополосы, дороги, места расположения учреждений здравоохранения, ветеринарной службы. Показатели плотности и размещения населения также отражают на карте.

6.9.5. В легенде к карте приводят сведения о характеристике эпидемических проявлений в прошлом (эпидемии, вспышки, спорадические случаи), данные об источниках, обстоятельствах и способах заражения, времени инфицирования. Характеризуют современный род занятий и хозяйственной деятельности населения, мощность лечебных и санитарно-профилактических учреждений, их укомплектованность специалистами.

6.9.6. Сравнивая показатели социальных факторов с данными, характеризующими эпизоотологическое состояние районов, выявляют районы с разной степенью эпидемической опасности для проживающего там населения или прибывающих контингентов.

7. Санитарно-противоэпидемические (профилактические) мероприятия по обеспечению эпидемиологического благополучия населения

7.1. Противоэпидемические мероприятия в очаге

7.1.1. Противоэпидемические мероприятия в очаге при выявлении больного КГЛ направлены на локализацию и ликвидацию очага и включают:

• определение времени возникновения и места нахождения очага, определение его границ;
• выявление больных с подозрением на КГЛ по совокупности клинических и эпидемиологических данных;
• выявление лиц, имевших укусы и контакты с клещами (снятие с себя, с животного, раздавливание клещей);
• изучение причин посещения (пребывания) населением природного очага КГЛ;
• эпизоотолого-эпидемиологическое обследование очага со случаем (случаями) заболевания КГЛ осуществляется с заполнением карты эпидемиологического обследования (учетная форма № 257);
• выявление источника возбудителя инфекции (больной человек, животное), факторов передачи (трансмиссия, контакт и другие), непосредственных причин возникновения очага и условий, способствующих заражению людей;
• забор крови от больного и лиц, имевших контакт с клещами, для вирусологического и серологического исследований;
• эпизоотологическое обследование в очаге;
• забор крови от сельскохозяйственных и домашних животных специалистами ветеринарной службы с целью установления иммунной прослойки среди поголовья;
• подворные обходы в очаге;
• составление эпидемиологического прогноза;
• заключение по эпидемиологическому обследованию в очаге.

7.1.2 Эпидемиологические данные, используемые для выявления больного с подозрением на заболевание КГЛ:

• пребывание в эндемичном, эпидемиологически неблагополучном районе (выезды на природу, рыбалку и т.п.) в период, предшествующий инкубационному;
• сезонность (жаркое время года, апрель — сентябрь);
• профессиональные группы риска (доярки, скотники, чабаны, ветеринарные работники, лица, участвующие в полеводческих работах, сенокосах, индивидуальные владельцы скота и птицы, медицинские работники);
• укус клеща или контакт (снятие, раздавливание) с клещами;
• проведение инструментальных манипуляций у больных с подозрением на КГЛ, забор и исследование клинического материала;
• уход за больными с подозрением на КГЛ.

7.1.3. В очагах КГЛ проводят заключительную дезинфекцию с акарицидной обработкой. В квартире производят влажную дезинфекцию 3% раствором хлорамина или 6% раствором перекиси водорода. Обеззараживанию подлежат предметы и вещи, загрязненные кровью больного, в соответствии с режимом биологической безопасности.

Ветеринарные работники должны проводить акарицидную обработку общественного и частного поголовья животных 1 раз в 10 дней с апреля по ноябрь.

В том случае, если имеет место заклещевленность скота, жилых и нежилых зданий у других жителей поселка, такую обработку должны проводить во всех без исключения домовладениях.

7.2. Медицинское наблюдение за населением и подворные обходы

7.2.1. Медицинское наблюдение за населением проводится с целью раннего выявления случаев заболеваний КГЛ и предотвращения дальнейшего распространения инфекции. Осуществляется специалистами территориальных лечебно-профилактических учреждений.

7.2.2. Для эффективного медицинского наблюдения за населением необходимо иметь основные сведения о его численности, плотности распределения по территории, социально-профессиональному составу, полу и возрасту, особенностях местных обычаев. Особое внимание следует уделять контингентам постоянного и временного населения, относящимся к группам повышенного риска заражения Крымской геморрагической лихорадкой: дояркам, скотникам, чабанам, ветеринарным работникам, лицам, участвующим в полеводческих работах, сенокосах, индивидуальным владельцам скота и птицы.

7.2.3. Максимальное внимание медицинских работников (независимо от ведомственной принадлежности) должно быть направлено на раннее выявление больных с геморрагическими проявлениями в весенне-летний период (особенно с июня по август). Особого внимания заслуживают больные, поступающие с кровотечениями к отоларингологам, хирургам, гинекологам, в эпиданамнезе которых имели место укус клеща или контакт с клещами, а также привлекаемые к уходу за больными КГЛ. При регистрации случаев скоропостижной смерти от неизвестных причин труп подлежит обязательному вскрытию с соблюдением мер противоэпидемической и биологической безопасности в присутствии специалиста центра госсанэпиднадзора или территориального противочумного учреждения.

7.2.4. Медицинское наблюдение за очагом и жителями этого населенного пункта осуществляется в течение 14 дней с момента изоляции больного КГЛ.

7.2.5. В населенных пунктах, где имели место случаи заболеваний КГЛ, для раннего выявления больных и лиц, имевших контакты с клещами, проводятся подворные обходы. Медицинский персонал, проводящий подворные обходы в очагах Крымской геморрагической лихорадки, работает в защитном костюме IV типа, в котором тапочки заменены сапогами или ботинками.

При проведении подворных обходов устанавливают:

• места контакта населения с переносчиками Крымской геморрагической лихорадки;
• причину посещения пастбищ и других мест обитания клещей;
• характер контакта с клещами (постоянный или эпизодический);
• возрастной и профессиональный состав контактировавших с переносчиком;
• длительность проживания в данной местности.

7.2.7. Лиц, бывших в контакте с больными, а также отмечавших присасывание клещей, берут на диспансерный учет. Они подлежат медицинскому наблюдению в течение 14 дней с ежедневным двукратным термометрированием.

7.2.8. К работе по выявлению подозрительных на Крымскую геморрагическую лихорадку больных медицинские работники должны широко привлекать население, чтобы о всех случаях появления больного с указанными выше признаками и контакта человека с клещами немедленно становилось известно санитарно-эпидемиологической и лечебно-профилактической службам.

7.3. Ограничительные мероприятия в очаге

В очаге вводятся ограничительные мероприятия:

• запрещается привлечение детей и подростков к уходу за животными и к полевым работам;
• запрещаются прогон и выпас скота около парков и других мест массового отдыха населения, летних оздоровительных учреждений;
• открытие летних оздоровительных учреждений проводится после проведения расчистки территории лагеря и барьерной обработки ее против клещей;
• временное ограничение перемещения сельскохозяйственных животных (КРС, МРС) внутри очага и за его пределы;
• ограничение хозяйственной деятельности человека в очаге и на прилегающей территории до проведения санитарной расчистки и барьерной обработки против клещей.

8. Клиника и лечение КГЛ

8.1. Классификация клинических форм

8.1.1 КГЛ с геморрагическим синдромом:

• тяжелая форма:

а) без полостных кровотечений;

б) с полостными кровотечениями;

• среднетяжелая форма:

а) без полостных кровотечений;

б) с полостными кровотечениями;

• легкая форма.

8.1.2 КГЛ без геморрагического синдрома:

• среднетяжелая форма;
• легкая форма.

8.1.3 Инаппарантная (субклиническая) форма заболевания.

8.2. Инкубационный период

Инкубационный период продолжается от 1 дня до 14 дней. В среднем он составляет 4 — 6 дней, но может быть как более коротким, так и более продолжительным.

8.3. Периоды заболевания

В клиническом течении Крымской геморрагической лихорадки выделяют несколько периодов, последовательно сменяющих друг друга:

• первый период — начальный (предгеморрагический);
• второй — период разгара (геморрагический);
• третий — период реконвалесценции.

8.3.1. Первый период (начальный, предгеморрагический). Продромального периода нет, болезнь начинается остро, внезапным подъемом температуры, часто (70%) предшествует озноб. С первых же часов заболевания появляются интенсивная головная боль, ломота, боль в поясничной области. Часто бывают тошнота и рвота. Высокая температура, как правило, держится от 2 до 4 дней, а затем снижается, иногда до нормы. Однако в течение этих же суток (или через 24 — 36 часов) повышается вновь, затем на 6 — 7 сутки болезни начинает литически снижаться. Такая «двугорбая» температурная кривая отмечается у большинства больных. В целом лихорадочный период может продолжаться до 11 — 12 дней. Иногда после снижения температуры до нормальных значений в течение некоторого времени сохраняются ее подъемы до субфебрильных цифр.

С первых дней заболевания отмечаются гиперемия кожи лица, шеи и верхней половины туловища, резкая инъекция сосудов склер и конъюнктив. Слизистая оболочка ротоглотки гиперемирована, иногда отмечаются энантемы на мягком и твердом небе, а также петехиальные элементы различной интенсивности. Уже в первые два дня могут возникать носовые кровотечения, кровоточивость десен и определяется мелкоточечная петехиальная сыпь на коже туловища и передней стенки живота. Однако в начальном периоде геморрагические проявления развиваются редко и бывают выражены нерезко. Симптомы жгута и щипка редко бывают положительными.

Наблюдается относительная брадикардия, артериальное давление пониженное, тоны сердца приглушены. В периферической крови определяются высокий гемоглобин, увеличение числа эритроцитов, лейкопения с нейтрофильным сдвигом влево. В анализах мочи преобладают незначительная альбуминурия и микрогематурия.

Таким образом, первый (начальный) период заболевания характеризуется острым началом, высокой температурой, симптомами интоксикации, брадикардией и гипотонией, гиперемией кожи лица, шеи и верхней половины туловища, гиперемией слизистых и в ряде случаев первыми признаками геморрагического синдрома, тенденцией к сгущению крови.

8.3.2. Второй период (разгара, геморрагический) болезни начинается со второго подъема температуры, которая держится на высоких цифрах в течение 3 — 4 дней, затем литически снижается. Продолжительность второго периода — от 3 до 9 дней. В этот период у подавляющего большинства больных появляется геморрагический синдром — от петехий на коже до массивных кровотечений.

Появление (усиление) геморрагического синдрома после температурного «вреза» является характерным симптомом при Крымской геморрагической лихорадке.

Мелкоточечная петехиальная сыпь локализуется на коже туловища и боковых поверхностях живота. В ряде случаев сыпь может быть розеолезной.

Часто отмечаются гематомы в местах инъекций. Одновременно с сыпью развиваются и другие проявления геморрагического синдрома: носовые, желудочно-кишечные и маточные кровотечения, кровохарканье, кровянистые выделения из глаз и ушей, гематурия. Могут возникнуть кровотечения в местах инъекций. Продолжительность периода кровотечений варьирует, но, как правило, составляет 3 — 4 дня. Интенсивность и продолжительность геморрагического синдрома определяют тяжесть болезни. Чаще геморрагический синдром наблюдается с 4 — 5 дня болезни или несколько позже.

В период разгара нарастают симптомы интоксикации: усиливаются головная боль, головокружение, отмечаются тошнота и мучительная повторная рвота, нарастает слабость. Со стороны сердечно-сосудистой системы брадикардия становится особенно выраженной, артериальное давление еще более снижается. Появление тахикардии свидетельствует о развитии осложнений. В легких выслушиваются сухие, рассеянные хрипы. В этот период возможно развитие пневмонии вследствие возникновения гемоаспирационных ателектазов.

Аппетит снижен, больных беспокоит жажда, довольно часто возникают боли в животе разлитого характера, дисфункция кишечника. Развитие абдоминального синдрома с картиной перитонита может привести к ошибочному оперативному вмешательству, отягощающему состояние больного.

Характерно поражение печени, гепатомегалия отмечается с 3 — 5 дня болезни, сопровождается повышением активности трансаминаз крови, гипербилирубинемией. Проявление желтухи наблюдается очень редко. Она может быть обусловлена как гемолизом эритроцитов, так, возможно, и гепатотропным действием вируса. Желтушность в разгар болезни в сочетании с другими признаками поражения печени является плохим прогностическим признаком.

Поражение почек при КГЛ не является ведущим. Наблюдаются боли в поясничной области, положительный симптом Пастернацкого. Количество мочи в остром периоде уменьшено, появляются альбуминурия, гематурия, в основном, за счет свежих эритроцитов, цилиндрурия. Однако эти симптомы, как правило, исчезают быстро. Анурия и уремия представляют редкость.

Симптомы со стороны центральной нервной системы в виде вялости, сонливости появляются рано и имеются практически у всех больных. В тяжелых случаях в периоде разгара болезни описаны потеря сознания, бред и галлюцинации. Сухожильные рефлексы у одних больных бывают повышенными, у других — пониженными. Могут наблюдаться быстро преходящая анизокория, нарушение конвергенции, пирамидные патологические рефлексы, понижение брюшных рефлексов. Могут быть кровоизлияния в мозг или субарахноидальные с соответствующей клинической симптоматикой. Такие клинические симптомы, как гиперемия лица и шеи, слизистых оболочек, их сухость, брадикардия, гипотония возникают вследствие поражения вегетативной нервной системы, которое является наиболее ранним и преобладающим в клинической картине заболевания.

В крови наблюдаются анемия, лейкопения с лимфоцитозом и выраженная тромбоцитопения. Наибольшее диагностическое значение имеет лейкопения с резким сдвигом влево. Количество лейкоцитов падает до 800 — 1000, что в сочетании с появлением юных форм, миелоцитов, миелобластов дает основание для дифференциации КГЛ с болезнью крови. Также быстро и резко падает количество тромбоцитов, иногда до нуля. Редкое исключение представляют случаи с летальным исходом, когда лейкопения исчезает и возникает умеренный лейкоцитоз.

Таким образом, период разгара КГЛ характеризуется интоксикацией и геморрагическим синдромом, степень которого в значительной мере обусловливает тяжесть течения болезни.

8.3.3. Период реконвалесценции начинается с нормализации температуры и протекает медленно. После окончания лихорадки прекращаются свежие геморрагические высыпания и другие проявления гемосиндрома, но не менее 2 — 3 недель остаются слабость, головокружение, лабильность пульса, сохраняются инъекция сосудов склер и гиперемия слизистой оболочки ротоглотки. В крови нормализуется число лейкоцитов и тромбоцитов, может наблюдаться значительный рост ретикулоцитов.

8.3.4. При легкой форме КГЛ менее выражены интоксикационный и геморрагический синдромы, лихорадка менее длительная и чаще субфебрильная, но лейкопения остается одним из постоянных симптомов.

8.4. Осложнения

Массивные внутренние кровотечения могут быть отнесены к осложнениям, хотя они являются лишь весьма резко выраженными проявлениями типичного для КГЛ геморрагического синдрома. Ведущее место по частоте занимают инфекционно-токсический шок и очаговая пневмония, которая, как правило, развивается в период разгара болезни, и первыми ее признаками следует считать новое повышение температуры, смену брадикардии на тахикардию, лейкопении — лейкоцитозом, а также появление кровохарканья, кашля, боли в грудной клетке при дыхании.

Изредка наблюдаются другие осложнения: перитонит, сепсис, паротит, абсцессы мягких тканей в области гематом.

Рецидивы заболевания не отмечаются.

8.5. Общие принципы диагностики КГЛ

8.5.1. Клинические данные имеют важное значение и позволяют уже в начальном периоде заподозрить опасное заболевание. Обращают внимание на острое начало заболевания с проявлениями общего токсикоза, высокой двухволновой или одноволновой лихорадки, интенсивных головных болей, тошноты, рвоты, анорексии, миалгий, возможны боли в животе. При осмотре отмечаются гиперемия лица, шейно-воротниковой зоны, инъекция сосудов склер, одутловатость лица, умеренная гиперемия зева, гепатомегалия, брадикардия, гипотония. Место укуса клеща (первичный аффект) — без патологических особенностей. Характерной является апирексия на 5 — 7-й день болезни с последующим развитием геморрагического синдрома.

8.5.2. Эпидемиологический анамнез имеет решающее значение в подтверждении диагноза КГЛ в ранние сроки болезни. Необходимо учитывать сезонность, место пребывания или проживания больного в эпидемиологически неблагополучном регионе, возможный контакт с клещами, профессиональную принадлежность.

8.5.3. Данные лабораторного исследования имеют важное диагностическое значение, а именно лейкопения, лимфоцитоз, тромбоцитопения, нормальная или замедленная СОЭ в гемограмме свидетельствуют в пользу КГЛ.

8.5.4. Иммунологический метод — определение уровня антител с 5 — 7-го дня заболевания методом парных сывороток с помощью ИФА — позволяет окончательно документировать диагноз КГЛ.

8.5.5. Вирусологический метод чаще имеет ретроспективное значение в диагностике заболевания. Арбитражным тестом является ПЦР.

8.6. Дифференциальная диагностика КГЛ

8.6.1. Учитывая острое начало болезни, высокую лихорадку, общеинфекционный синдром, в первом периоде дифференциальный диагноз проводится, прежде всего, с такими острыми инфекционными заболеваниями как грипп, сепсис, сыпной тиф и другие риккетсиозы, менингококцемия. Среди заболеваний, с которыми дифференцируется КГЛ, следует выделить москитные лихорадки, которые кроме сходства клинической картины имеют общую сезонность и территорию распространения. Клинически выделить москитные лихорадки помогают отсутствие геморрагического синдрома, двухволновой температурной реакции и тромбоцитопения в периферической крови. При сравнении с другими геморрагическими лихорадками, регистрируемыми на территории Российской Федерации (омская геморрагическая лихорадка, геморрагическая лихорадка с почечным синдромом), кроме эпидемиологических особенностей, КГЛ отличают выраженный геморрагический синдром на фоне резкой интоксикации, а также отсутствие поражения почек с развитием острой почечной недостаточности, которая характерна для ГЛПС (Приложение 4).

8.6.2. Кроме того, КГЛ необходимо дифференцировать с тромбоцитопенической пурпурой (болезнь Верльгофа), геморрагическим васкулитом (болезнь Шенлейн-Геноха) (Приложение 5), злокачественными болезнями крови.

8.7. Лечение

Общепринятых средств этиотропной терапии в настоящее время нет, однако в ряде случаев на ограниченном количестве больных был получен хороший терапевтический эффект при использовании парентеральных форм рибавирина. Проводится патогенетическая терапия, направленная на борьбу с интоксикацией и геморрагическим синдромом. Дезинтоксикационная терапия включает введение дезинтоксикационных растворов, аскорбиновой кислоты, препаратов калия, дозы и кратность которых определяют высота лихорадки, интоксикация и водноэлектролитные нарушения. При белковых нарушениях целесообразно назначение 10% раствора альбумина.

В комплексном лечении КГЛ необходимо применение препаратов, способствующих уплотнению сосудистой стенки и уменьшению проницаемости капилляров: 10% раствор глюконата кальция, 5% раствор аскорбиновой кислоты.

Гемостатическая терапия предусматривает введение свежезамороженной плазмы, содержащей все факторы свертывания крови (кроме тромбоцитов). Переливают по 600 — 800 мл, повторяют введение каждые 6 — 8 часов в половинной дозе. Объем плазмы определяется выраженностью геморрагического синдрома. Криопреципитат, содержащий 8-й фактор свертывания крови и фибриноген, вводится до 10 доз в сутки (одна доза — 25 мл).

При кровотечениях из желудочно-кишечного тракта назначают андроксон (адозон) по 1 — 4 мл внутримышечно или внутривенно 3 раза в сутки, диценон (дозу увеличивают на 2 — 4 мл каждые 4 — 6 часов). При выраженной тромбоцитопении вводится тромбомасса (внутривенно, капельно, 1 терапевтическая доза массы на 10 кг веса в сутки). Необходимым условием при этом является возможность адекватного времени доставки, правильности хранения тромбомассы.

Целесообразно введение ингибиторов протеаз (контрикал, гордокс), десенсибилизирующих средств (димедрол, супрастин), глюкокортикоидов.

При угрозе развития бактериальных осложнений показаны антибиотики широкого спектра действия.

Лечение должно осуществляться под ежедневным контролем коагулограммы и количества тромбоцитов в периферической крови дважды в сутки.

Выписка из стационара определяется индивидуально в зависимости от наличия и тяжести осложнений и производится после полного выздоровления. Больные, перенесшие КГЛ, подлежат диспансерному наблюдению не менее 3 месяцев после выписки. Диспансеризация осуществляется врачом КИЗ в поликлинике по месту жительства.

8.8. Принципы ведения больных КГЛ

8.8.1. Все больные с подозрением на КГЛ или с установленным диагнозом немедленно госпитализируются в инфекционное отделение ТМО, городские инфекционные больницы. Больные помещаются в бокс с соблюдением всех правил противоэпидемического режима для микроорганизмов I группы патогенности.

8.8.2. Немедленно подается экстренное извещение в ЦГСЭН в устной форме (по телефону) и в письменной — учетная форма № 58.

8.8.3. В случае тяжелого течения заболевания обеспечивается в условиях отделения наблюдение реаниматолога с организацией поста интенсивного наблюдения со строгим соблюдением мер индивидуальной защиты и личной безопасности.

8.8.4. Избегать необоснованное назначение медицинских манипуляций, влекущих дополнительную травматизацию кожных покровов и слизистых, а, следовательно, усугубляющих риск развития кровотечения другой локализации.

8.8.5. При угрозе развития геморрагического синдрома использовать единый доступ введения лекарственных средств (подключичный катетер, в/венный катетер).

8.8.6. Лечение больных КГЛ должно быть как можно более ранним и комплексным с индивидуальным подходом, с учетом возраста больного, сопутствующей патологии, тяжести болезни и осложнений.

8.8.7. Лечение должно осуществляться под контролем коагулограммы {ежедневно), определения количества тромбоцитов (2 раза в сутки). При поступлении необходимо немедленное определение группы крови.

8.8.8. Правила выписки. Выписка реконвалесцентов проводится на основании клинических критериев выздоровления: стойкая нормализация температуры, коагулограммы, количества тромбоцитов, отсутствие осложнений. В среднем выписка осуществляется не ранее чем через 21 день с начала заболевания.

8.8.9. Диспансерное наблюдение. Диспансерное наблюдение проводится врачом кабинета инфекционных заболеваний поликлиники. В течение года целесообразно ежеквартальное наблюдение (через 3, 6, 9, 12 месяцев). При этом осуществляются клиническое наблюдение, контроль гемограммы. Реконвалесценты соблюдают соответствующий ограничительный режим, диету. При необходимости назначают витамины группы В, адаптогены растительного происхождения, аскорутин и т.д.

8.9. Требования биологической безопасности

8.9.1. Больных КГЛ помещают в изолированные палаты и боксы, имеющие отдельный вход. При тяжелом течении КГЛ у постели больного следует установить индивидуальный пост.

8.9.2. Перед входом в палату больного в специальном шкафу или на столе должны находиться защитная одежда (костюм I типа) и сосуды с дезинфицирующими средствами (3 — 5% раствор хлорамина или 6% раствор перекиси водорода). Защитная одежда состоит из пижамы, хирургического (противочумного) халата, косынки, ватно-марлевой маски, резиновых перчаток, защитных очков, галош и чулок, а при обильных кровотечениях надевается еще клеенчатый фартук. После осмотра и окончания помощи больному КГЛ одежда медицинского персонала (кроме пижамы) подлежит обеззараживанию.

8.9.3. К уходу за больными КГЛ не допускаются лица, имеющие кожные заболевания или травмы кожи рук.

8.9.4. За каждой палатой закрепляют свои инструменты и предметы ухода. Инструменты следует кипятить в 2% содовом растворе в течение 30 мин.

8.9.5. Для обеззараживания выделений больного, содержащих кровь (рвотные массы, кал, моча), белья, предметов, загрязненных выделениями больных, используют 3 — 5% растворы карболовой кислоты, хлорамина, лизола. Выделения больного засыпают хлорной известью на 2 ч.

8.9.6 Посуду больного обеззараживают кипячением.

8.9.7. В палатах следует постоянно проводить текущую обработку полов, стен, дверей 3% раствором хлорамина или 6% раствором перекиси водорода. Постельные принадлежности (одеяла, матрацы, подушки) подлежат камерной обработке после выписки больного. Вещи, не подлежащие обработке в камере, следует замачивать в 3 — 5% растворе лизола или хлорамина на 2 часа.

8.9.8. За медицинским персоналом устанавливается медицинское наблюдение с ежедневным термометрированием.

8.10. Патологоанатомическое исследование трупа

8.10.1. При наличии анамнеза, клинических данных и серологического исследования сыворотки крови, подтверждающего КГЛ, труп с учетом высокого риска заражения персонала вскрытию не подлежит.

8.10.2. При наличии анамнестических и клинических симптомов КГЛ без подтверждения диагноза лабораторными исследованиями (серологические исследования парных сывороток, вирусологические исследования крови) труп подлежит патологоанатомическому вскрытию с применением средств индивидуальной защиты (противочумный костюм I типа) и мер личной безопасности в соответствии с требованиями «Инструкции по проведению первичных мероприятий при выявлении больного (трупа), подозрительного на заболевание чумой, холерой, контагиозными вирусными геморрагическими лихорадками» (Москва, 1985) под наблюдением специалиста противочумного учреждения или специалиста по особо опасным инфекциям центра госсанэпиднадзора. При этом наиболее отвечает требованиям биологической безопасности метод вскрытия in situ (на месте) без извлечения органов из полостей трупа. В этом случае инфицированная кровь, содержимое органов и полостей стекают в грудную и брюшную полости трупа, уменьшая возможность загрязнения окружающих предметов и персонала.

8.10.3. Для серологического и вирусологического исследований берут кровь из сердца, кусочки легких, печени, селезенки, почек. Направление для исследования секционного материала оформляют в соответствии с образцом (Приложение 6).

8.10.4. Перевозка трупа и его захоронение осуществляются в соответствии с требованиями выше указанной инструкции в присутствии специалиста противочумного учреждения или специалиста по особо опасным инфекциям центра госсанэпиднадзора.

9. Лабораторная диагностика Крымской геморрагической лихорадки

9.1. Отбор проб и транспортировка биологического материала от людей (трупов)

Организация отбора проб и транспортировка биологического материала от людей (трупов) при регистрации спорадических случаев и вспышек Крымской геморрагической лихорадки осуществляются в соответствии с требованиями СП 1.2.011-94 «Безопасность работы с микроорганизмами 1 — 2 групп патогенности» и СП 1.2.036-95 «Порядок учета, хранения, передачи и транспортирования микроорганизмов 1 — 4 групп патогенности».

Лабораторная диагностика КГЛ проводится вирусологическими, серологическими и молекулярно-биологическими методами.

Отбор проб биологического материала от больных и подозрительных на КГЛ осуществляет медицинский персонал с соблюдением требований противоэпидемического режима (во избежание внутрибольничных вспышек). Необходимо использование защитного костюма, перчаток, маски и очков. Кровь, взятая у больных в острой стадии заболевания, может содержать вирус в высоких концентрациях, что диктует необходимость дезинфекции пробирок, шприцев, игл и другого лабораторного оборудования немедленно после использования. Использованные для отбора шприцы, пробирки, стеклянные палочки, пипетки погружают в раствор дезинфектанта: 3% раствор хлорамина или 6% раствор перекиси водорода на 1 час.

9.1.1 Отбор проб для вирусологического исследования

Объектами исследования служат:

• кровь;
• секционный материал: печень, легкие, селезенка, почки, мозг (головной и спинной).

Кровь отбирают, соблюдая правила асептики, из локтевой вены в количестве 5 мл в острый период болезни (первые 5 — 7 дней). Над пламенем спиртовки кровь переносят в пробирку с плотно закрывающейся (завинчивающейся) пробкой. Пробирка этикетируется. Этикетка делается из лейкопластыря и наклеивается на пробирку или ампулу. На этикетке указываются фамилия, имя, отчество больного, вид материала, дата отбора.

Для отбора секционного материала вскрытие умерших от КГЛ, а также подозрительных на данную инфекцию производит патологоанатом или судмедэксперт в присутствии специалиста по этим инфекциям (эпидемиолога или инфекциониста).

Из глубины внутренних органов (сердце, печень, легкие, селезенка, почки, головной мозг) стерильно вырезают кусочек ткани размерами 2 — 3 см. Стерильной пастеровской пипеткой с резиновой грушей забирают 8 — 10 мл крови из сердца. Следует отбирать материал из нескольких участков, подвергшихся изменениям, и из участка рядом расположенной ткани, которая выглядит неизмененной. При наличии распада ткани основное внимание обращают на пограничную зону. Отбор секционного материала необходимо производить как можно быстрее после смерти больного (не более 20 часов нахождения при комнатной температуре).

Секционный материал следует отбирать в соответствии с п. 8.10.2. Отобранный материал помещают в стерильные пробирки с плотно закрывающимися (завинчивающимися) пробками, этикетируют, завязывают и опускают в емкость для транспортировки, оставляя снаружи концы завязок с этикеткой.

Все манипуляции с кровью проводят в ватно-марлевой маске и резиновых перчатках.

Запрещается проводить следующие манипуляции:

• центрифугирование;
• встряхивание;
• пипетирование ртом.

Для вирусологического исследования консерванты не добавляют и инактивация материала не проводится.

Каждая проба сопровождается направлением. Бланки направлений представлены в Приложениях 6 и 7.

9.1.2 Отбор проб для серологической диагностики

Объекты исследования:

• кровь;
• секционный материал.

Кровь отбирают дважды — на 5 — 7 и на 10 — 14 дни от начала заболевания.

Кровь у больного отбирают из локтевой вены в стерильную пробирку в количестве 5 — 10 мл, соблюдая правила асептики. Для предотвращения гемолиза сыворотку следует отделить от сгустка. Для этого пробирку с кровью оставляют в термостате при комнатной температуре в скошенном положении, затем образовавшийся сгусток крови обводят стеклянной палочкой и помещают в холодильник при температуре 4 °С на 10 часов. Полученную сыворотку отсасывают пипеткой с резиновой грушей в пластиковую пробирку, герметично закрывают и направляют в лабораторию для исследования на наличие специфических антител к вирусу КГЛ Конго. Если нет пластиковой пробирки, используют стерильные пенициллиновые флаконы. Сгусток сохраняется в пробирке только при первом заборе и может быть использован для вирусологического и молекулярно-генетического исследований.

Сыворотку крови хранят в стерильных пробирках или в ампулах при температуре +4 °С.

Каждая проба сопровождается направлением. Бланк направления представлен в Приложении 8.

9.1.3 Отбор проб для клинического исследования

Биологический материал для клинического лабораторного исследования у больных с подозрением на КГЛ представляет опасность для лабораторных работников, а многие методики исследования этого материала затрудняют соблюдение надежного противоэпидемического режима. В этих случаях клинические лабораторные исследования следует ограничить. Взятие проб крови в остром периоде должно производиться в необходимом количестве однократно.

9.2. Транспортировка крови и сыворотки в вирусологическую лабораторию

Для передачи в вирусологическую лабораторию в первичной герметично закрывающейся таре пробы помещают во вторичную тару, представляющую собой герметичный металлический или пластиковый пенал.

Транспортировать материал для вирусологического исследования следует в жидком азоте (сосуде Дьюара). Можно пользоваться термосом с сухим льдом.

Биологический материал от первых больных (трупа) с подозрением на КГЛ отправляется в вирусологическую лабораторию в течение 24 часов.

Отобранный материал с направлением доставляется в специализированную лабораторию (в соответствии со схемой доставки материала). Транспортировка материала осуществляется специально выделенным транспортом в сопровождении медицинского работника.

9.3. Подготовка сыворотки для серологического исследования

При исследовании сывороток необходимо соблюдать меры предосторожности и обращаться с ними как с материалом, подозрительным на заражение возбудителями I — II групп патогенности.

При поступлении сывороток в лабораторию работу с ними проводят в боксе в противочумном костюме I типа. Вскрывают бикс, проверяют правильность оформления направления, целостность и герметичность пробирок с сыворотками. Бикс обрабатывают 3% раствором хлорамина или 6% раствором перекиси водорода.

Сыворотки инактивируют на водяной бане в течение 45 мин. при температуре 56 °С с добавлением мертиолата натрия 1:10000. До исследования сыворотки хранят при температуре 4 °С.

Работу проводят в боксе в костюме IV типа, дополненном резиновыми перчатками.

Результаты анализов оформляют в соответствии с образцом (Приложение 9).

9.4. Ранняя диагностика Крымской геморрагической лихорадки методом иммуноферментного анализа (определение IgM антител)

9.4.1 Сокращения в тексте:

ИФА — иммуноферментный анализ;

ФСБ — фосфатно-солевой буфер;

БСА — бычий сывороточный альбумин;

ФСБ-Т — фосфатно-солевой буфер с твином;

КББ — карбонатно-бикарбонатный буфер;

ЦФБ — цитратно-фосфатный буфер;

ОФД — орто-фенилендиамин.

9.4.2 Лабораторное оборудование, реактивы, материалы

9.4.2.1 Оборудование:

• планшеты или стрипы для проведения ИФА из полистирола с плоским дном производства НИИ «Медполимер» (г. Москва);
• пробирки для микропроб объемом 0,5 и 1,5 мл;
• дозаторы пипеточные одноканальные и многоканальные;
• центрифуга лабораторная;
• рН-метр любой марки;
• холодильник бытовой любой марки;
• термостат на 37 °С любой марки;
• весы торзионные;
• лабораторная стеклянная посуда: пробирки, градуированные и пастеровские пипетки, колбы, мерные цилиндры.

9.4.2.2 Реактивы:

• натрий углекислый, х.ч.;
• натрий двууглекислый, х.ч.;
• натрий хлористый, х.ч.;
• натрий фосфат однозамещенный, х.ч.;
• натрий фосфат двузамещенный, х.ч.;
• лимонная кислота, х.ч.;
• орто-фенилендиамин;
• бычий сывороточный альбумин;
• твин-20;
• перекись водорода 30%, х.ч.;
• кислота серная, х.ч.;
• вода дистиллированная.

9.4.2.3 Материалы:

• антитела козьи, очищенные против мю-цепей иммуноглобулинов М человека фирмы Sigma-Aldrich;
• конъюгат специфических антител мыши против вируса КГЛ Конго с пероксидазой хрена;
• антиген вируса КГЛ сахарозо-ацетоновый или культуральный;
• антиген «нормальный», приготовленный из мозговой ткани незараженных мышей-сосунков или незараженной культуры клеток;
• контрольная положительная сыворотка крови человека;
• контрольная отрицательная сыворотка крови человека.

9.4.3 Методика выполнения иммуноферментного анализа

9.4.3.1 Сенсибилизация планшетов

В лунки полистиролового планшета или стрипов вносят по 0,1 мл раствора козьих антител против мю-цепей IgM человека фирмы Sigma-Aldrich в концентрации 5 — 10 мкг/мл в 0,05 М КББ рН 9,6. Планшеты оставляют во влажной камере на 2 часа при температуре 37 °С или при 4 °С на ночь. Неадсорбированные иммуноглобулины отмывают 3 раза 0,01 М ФСБ рН 7,4 с 0,1% твина-20.

9.4.3.2. «Забивка» альбумином активных центров планшетов

Для предотвращения неспецифического связывания компонентов ИФА-диагностикума или крови больного с полистиролом производят обработку сенсибилизированных планшетов или стрипов 1% раствором БСА на ФСБ-твине. Для этого в каждую лунку вносят по 0,2 мл раствора БСА и выдерживают планшеты (стрипы) 1 час при 37 °С. После чего раствор БСА вытряхивают, и планшеты подсушивают постукиванием по сложенной в несколько слоев фильтровальной бумаге, помешают в полиэтиленовый пакет и хранят до использования при 4 °С не более 2 недель. Возможно более длительное хранение при -20 °С до 3-х месяцев.

9.4.3.3 Внесение контрольных и исследуемых сывороток

Для этого перед исследованием делают разведения сывороток, начиная с разведения 1:100 на ФСБ-Т-БСА, и вносят в соседние лунки сенсибилизированного планшета по 0,1 мл, по две лунки на каждое разведение сыворотки. Контрольные положительную и отрицательную сыворотки разводят ФСБ-Т-БСА до титра, указанного на этикетке, и вносят по 0,1 мл в соседние лунки планшета: две лунки для положительной сыворотки и две лунки для отрицательной сыворотки. Положительные и отрицательные контроли необходимо делать на каждом планшете! Инкубацию сывороток проводят во влажной камере 1,5 — 2 часа при 37 °С. Несвязавшиеся компоненты сывороток удаляют из лунок и трехкратно промывают ФСБ-Т.

9.4.3.4 Внесение антигенов

Делают рабочие разведения (указаны на этикетке) антигена вируса КГЛ и «нормального» антигена на ФСБ-Т-БСА и вносят по 0,1 мл антигена вируса КГЛ в нечетные ряды планшета и по 0,1 мл «нормального» антигена в четные ряды планшета. Инкубацию антигенов проводят 1 час при 37 °С или в ночь при 4 °С. Несвязавшийся антиген удаляют, лунки планшета промывают 3 раза ФСБ-Т.

9.4.3.5 Внесение конъюгата специфических антител мыши против вируса КГЛ Конго с пероксидазой хрена (конъюгат)

Делают рабочее разведение конъюгата (указано на этикетке) на ФСБ-Т-БСА и вносят по 0,1 мл во все лунки планшета. Инкубацию конъюгата проводят при 37 °С в течение часа. Несвязавшийся конъюгат удаляют встряхиванием, лунки планшета промывают 5 раз.

9.4.3.6 Внесение субстрат-индикаторного раствора

Для приготовления субстрат-индикаторного раствора в готовом ЦФБ растворяют 6 мг ОФД и добавляют 20 мкл 3% раствора перекиси водорода.

Приготовленный раствор немедленно вносят по 0,1 мл в каждую лунку планшета и оставляют при комнатной температуре в темноте. Через 5 — 20 минут ферментную реакцию останавливают добавлением в лунки по 0,05 мл 2 Н раствора серной кислоты.

9.4.4 Учет результатов реакции

Учет результатов реакции проводят спектрофотометрически на приборе мультискан при длине волны 492 нм или визуально. Положительной считается сыворотка, имеющая оптическую плотность, превышающую в 2,1 раза в лунке с антигеном КГЛ по отношению к оптической плотности в лунке с «нормальным» антигеном. При этом оптическая плотность в лунках с «нормальным» антигеном не должна превышать 100 оптических единиц (показатель прибора 0,1). При визуальном учете лунки с антигеном КГЛ должны четко отличаться от лунок с «нормальным» антигеном. При этом лунки с «нормальным» антигеном должны иметь едва заметное желтое окрашивание.

9.5. Оценка результатов лабораторной диагностики КГЛ на основании обнаружения специфических антител классов М и G в сыворотках крови больных и выздоравливающих

9.5.1. Для постановки диагноза КГЛ на основе выявления специфических антител класса М достаточно обнаружить в одной сыворотке IgM в титре не менее 1:800. Если в ранней сыворотке крови IgM определены в титре менее чем 1:800, то ставят диагноз КГЛ под вопросом и исследуют повторную сыворотку крови. При этом больного «ведут» с соблюдением всех мер предосторожности. IgM появляются на 5 — 7 день от начала заболевания, максимальные титры (1:20000 и более) выявляются на 2 — 3 неделе, а к 90 дню IgM, как правило, обнаруживаются в невысоких титрах или не определяются совсем.

9.5.2. Для постановки диагноза КГЛ на основе выявления антител класса G необходимо исследовать одновременно парные сыворотки крови.

Например, в 1-й сыворотке крови, взятой на 2-й день заболевания, титр антител менее 1:100, а во 2-й сыворотке, взятой на 10-й день заболевания, титр антител 1:200. Это означает, во-первых, появление антител, а во-вторых, увеличение титра. Диагноз подтверждается.

Если в первой сыворотке крови титр антител 1:100, то диагноз можно поставить только при обнаружении во второй сыворотке титра антител 1:400 и более.

Если титр антител во второй сыворотке не изменился, то можно предположить наличие анамнестических антител. Чтобы окончательно снять диагноз, в этом случае необходимо провести поиск IgM-антител.

Специфические IgG появляются на 7 — 10 день от начала заболевания, достигают пика к концу второго месяца, держатся в высоких титрах 6 — 8 месяцев. К концу первого года титр IgG снижается, и невысокие титры у некоторых больных держатся годами. У части больных к концу первого года G антитела исчезают из периферической крови совсем.

9.5.3. При обнаружении IgM в титре 1:800 и более и IgG в любом титре диагноз считается подтвержденным.

При необходимости в научно-исследовательских учреждениях создается банк положительных и отрицательных сывороток.

9.6. Реакция объемной агломерации (РАО) с полимерным диагностикумом сухим для обнаружения антител к вирусу КГЛ Конго

Тест-система для выявления антител к вирусу КГЛ Конго геморрагической лихорадки представляет комплект, состоящий из 96-луночной планшеты для иммунологических реакций, флаконов с лиофильно высушенным диагностикумом КГЛ Конго антигенным полимерным, позитивной сывороткой 1:10, нормальной кроличьей сывороткой и флакона с 0,9%-ным раствором хлорида натрия (рН 7,0 — 7,2) для разведения лиофильно высушенных реагентов.

9.6.1 Приготовление ингредиентов для РАО

Нормальную кроличью сыворотку из флакона с одноименным наименованием в количества 50 мкл (0,05 мл) разливают в лунки 96-луночной планшеты для иммунологических реакций.

Для приготовления рабочего разведения диагностикума полимерного антигенного КГЛ Конго содержимое флакона с одноименной маркировкой растворяют в 2,5 мл 0,9%-ного раствора хлорида натрия (рН 7,0 — 7,2) из прилагаемого флакона.

Для постановки положительного контроля из флакона с маркировкой «Контрольная позитивная сыворотка» (в ампуле сыворотка в разведении 1:10) берут 50 мкл и титруют в разведениях 1:20, 1:40, 1:80, 1:160, 1:320, 1:640, 1:1280.

9.6.2 Подготовка исследуемых сывороток

Исследуемую сыворотку обеззараживают раствором мертиолата натрия в разведении 1:1000. Для этого к сыворотке добавляют раствор мертиолата натрия до конечной концентрации 1:10000. Исследуемую сыворотку человека перед определением уровня антител разводят 0,9%-ным свежеприготовленным раствором хлорида натрия в 20 раз следующим образом: берут 0,1 мл исследуемой сыворотки и 1,9 мл 0,9%-ного раствора хлорида натрия.

Разведенную сыворотку прогревают в течение 30 мин. в водяной бане или инактиваторе при температуре 56 °С. После этого сыворотку оставляют при 20 (+/- 2) °С на 10 мин. и затем исследуют в РАО.

9.6.3 Методика проведения РАО

В «U»-образные лунки планшета для иммунологических реакций разливают по 50 мкл приготовленной разводящей жидкости автоматической пипеткой или пипеткой-капельницей из микротитратора типа Такачи. Исследуемую сыворотку в количестве 50 мкл вносят в первую лунку ряда пипеткой-дозатором и готовят двукратные последовательные разведения. Рекомендуется титровать каждую исследуемую пробу в разведениях 1:80, 1:160, 1:320. Затем в каждую лунку добавляют пипеткой-капельницей по 25 мкл суспензии диагностикума в рабочем разведении. После добавления диагностикума содержимое лунок перемешивают покачиванием планшета в течение 1 мин. и оставляют при температуре не выше 25 (+/- 2) °С на 1,5 — 2 ч.

Для контроля диагностикума на спонтанную агломерацию в 2 — 3 лунки вносят только разводящую жидкость и диагностикум.

9.6.4 Оценка результатов лабораторной диагностики КГЛ на основании обнаружения специфических антител в крови больных

За положительный результат принимают цветной ярко-розовый агломерат, выстилающий все дно лунки равномерно, или агломерат, выстилающий дно лунки, с четко очерченными краями. Предварительный учет — через 3 часа, окончательный — через сутки.

В отрицательных случаях в контроле образуется компактное колечко или «точка» в центре лунки. Специфическая активность диагностикума в РАО с позитивной сывороткой контрольной должна быть не ниже 1:320.

Диагностический титр — 1:160. Для подтверждения положительного результата рекомендуется исследование в динамике с целью выявления сохранения или нарастания титра.

9.7. Реакция объемной агломерации (РАО) с антительным полимерным диагностикумом сухим для обнаружения антигена КГЛ Конго

Тест-система для выявления антигена вируса КГЛ Конго представляет комплект, состоящий из 96-луночной планшеты для иммунологических реакций и следующих флаконов: с лиофильно высушенными диагностикумом КГЛ Конго антительным полимерным, позитивным контролем, рабочим раствором и флакона с 0,9%-ным раствором хлорида натрия (рН 7,0 — 7,2) для разведения лиофильно высушенных реагентов.

9.7.1 Приготовление ингредиентов для РАО

Разводящую жидкость из флакона с одноименным наименованием в количестве 50 мкл (0,05 мл) разливают в лунки 96-луночной планшеты для иммунологических реакций.

Для приготовления рабочего разведения диагностикума полимерного антительного КГЛ Конго содержимое флакона с одноименной маркировкой растворяют в 2,5 мл 0,9%-ного раствора хлорида натрия (рН 7,0 — 7,2) из прилагаемого флакона.

9.7.2 Подготовка исследуемого материала

Исследуемый материал (суспензии клещей) прогревают в течение 30 мин. в водяной бане или инактиваторе при температуре 56 (+/- 1) °С. После этого суспензии оставляют при температуре 20 (+/- 2) °С на 10 мин. и затем исследуют в РАО.

9.7.3 Методика проведения РАО

В «U»-образные лунки планшета для иммунологических реакций разливают по 50 мкл приготовленной разводящей жидкости автоматической пипеткой или пипеткой-капельницей из микротитратора типа Такачи. Исследуемый материал в количестве 50 мкл вносят в первую лунку ряда пипеткой-дозатором и готовят двукратные последовательные разведения. Рекомендуется титровать каждую пробу в 3 — 4 лунках. Затем в каждую лунку добавляют пипеткой-капельницей по 25 мкл суспензии диагностикума в рабочем разведении. После добавления диагностикума содержимое лунок перемешивают покачиванием планшета в течение 1 мин. и оставляют при температуре не выше 25 °С на 1,5 — 2 ч.

Для контроля диагностикума на спонтанную агломерацию в 2 — 3 лунки вносят только разводящую жидкость и диагностикум. Предварительный учет — через 3 ч, окончательный — через сутки.

9.7.4 Оценка результатов реакции

    За  положительный  результат  принимают  цветной  ярко-розовый
агломерат,  выстилающий  все  дно лунки равномерно, или агломерат,
выстилающий    дно    лунки,   с   четко    очерченными    краями.
Чувствительность  антительного КГЛ Конго геморрагической лихорадки

                                          5

полимерного диагностикума сухого составляет 10 БОЕ/мл.

В отрицательных случаях в контроле образуется компактное колечко или «точка» в центре лунки.

9.8. Выявление РНК вируса КГЛ Конго методом полимеразной цепной реакции с обратной транскрипцией (RT-PCR)

Для проведения реакции обратной транскрипции (RT), заключающейся в достраивании однонитевой комплементарной цепи ДНК (кДНК) при использовании в качестве матрицы РНК вируса, используют RT-полимеразу и готовую буферную систему, предоставленную НПФ «ДНК-технология» (Москва), в строгом соответствии с прилагаемой инструкцией. Всю работу для предотвращения возможной контаминации проводят в строгом соответствии с требованиями противоэпидемического режима, используя одноразовую пластиковую посуду в ламинарном укрытии 3 типа с воздушной завесой. Деионизированную воду, свободную от РНК-аз, можно получить от НПФ «Литех» (Москва).

В качестве праймеров используют следующие олигонуклеотиды:

    Прямой     -   L26  (20-39)        gga ctg gag tgg ttc gaa aa;
    Обратные   -   R107 (102-82)       tgg gaa cct caa ctt tca gc;
                   R137 (131-112)      cct gct ggt agt tgg aaa gc;
                   R180 (174-155)      gca ttg aca cgg aag cct at.

РНК из проб клинического материала выделяют с помощью коммерческого набора для выделения РНК/ДНК производства НПФ «Литех» (Москва). С этой целью пробу клинического материала 50 — 100 мкл сыворотки (спинномозговой жидкости) или участок соответствующей ткани (мозг, печень, селеэенка, почки) размером 2 — 5 куб. мм помещают в микропробирку типа «эппендорф» с 0,45 мл лизирующего раствора (на основе 50% фенола), 3 мкл раствора носителя и инкубируют 1 ч при 65 °С. Далее в пробирку добавляют 0,1 мл хлороформа и после осторожного перемешивания центрифугируют 10 мин. при 14000 об./мин. Надосадочную жидкость переносят в новую пробирку, содержащую равный объем изопропанола, после перемешивания для формирования преципитата РНК пробирку инкубируют при -20 °С в течение ночи. После центрифугирования в течение 10 мин. при 14000 об./мин. супернатант крайне осторожно отбирают, пробирку промывают 70% этанолом и повторно центрифугируют, как описано выше. Супернатант осторожно отбирают, пробирку, содержащую осадок РНК (часто не видимый глазом), высушивают при комнатной температуре и при необходимости хранят при -20 °С в закрытом виде.

Непосредственно перед постановкой реакции обратной транскрипции (RT) осадок растворяют в 15 мкл деионизированной воды, пробирку прогревают при 65 °С 15 мин. и полученный таким образом раствор денатурированной РНК немедленно используют в RT для получения кДНК.

Объем реакционной смеси составляет 25 мкл, температурный режим реакции (амплификатор «Терцик», НПФ «ДНК-технология», Москва) — 42 °С 60 мин., для инактивации обратной транскриптазы пробу прогревают при <...>.

В качестве негативных контролей можно использовать деионизированную воду и препарат тотальной ДНК человека.

При проведении RT в качестве «наружных» праймеров используют сочетание следующих олигонуклеотидов: L26-R180. Аликвоту полученной ДНК (1 мкл) анализируют в ПЦР с использованием пар «внутренних» праймеров: L26-R137; L26-R107. Ориентировочный режим 40 циклов амплификации: 94 °С — 30 сек., 58 °С — 30 сек., 72 °С — 30 сек.

Полученные амплификаты анализируют электрофорезом в 10% или 15% геле полиакриламида. В качестве маркеров низкого молекулярного веса можно использовать маркеры молекулярного веса «Promega» (США).

Положительный результат реакции с использованием пары праймеров L26-R180 характеризуется появлением фрагмента амплифицированной ДНК с молекулярной массой около 150 нп, а при использовании другой внутренней пары праймеров L26-R107 регистрируют появление фрагмента массой порядка 85 нп. В контрольных пробах, содержащих суммарную контрольную ДНК, указанные амплификаты должны отсутствовать. Полученный результат свидетельствует о присутствии РНК вируса КГЛ Конго в исследуемой пробе.

Результаты исследования оформляются в соответствии с образцом (Приложение 10).

10. Акарицидные мероприятия, имеющие значение в борьбе с клещами H. marginatum marginatum

10.1. Морфология и биология клеща H. marginatum marginatum

10.1.1. H. marginatum marginatum имеет морфологические признаки, по которым его легко отличить от других клещей, питающихся одновременно на животных. Это крупный 5 — 7 мм длиной и 4 — 5 мм шириной клещ в тощем состоянии и до 20 мм в сытом. На спинной поверхности у самок и самцов имеется темно-коричневый, почти черный щиток. У самцов он занимает всю спинную поверхность, у голодных самок — ее переднюю треть. По бокам щитка, в самой широкой его части, клещи имеют выпуклые глаза, их хорошо видно даже невооруженным глазом. Хоботок у голодных клещей довольно длинный и хорошо заметен. Ноги у клещей длинные, мощные, с просветлениями хитина (как бы кольцами).

10.1.2. H. marginatum marginatum — двуххозяинный клещ. Его биотопы — нераспахиваемые пастбища и особенно лесные полосы с колониями врановых. Взрослые клещи активно ищут прокормителя и паразитируют на сельскохозяйственных животных. Преимагинальные стадии (личинка и нимфа) питаются на ежах, зайцах и особенно на птицах, кормящихся на земле: вороны, грачи, на куриных — куры, куропатки и особенно индейки, гуси, в меньшей степени — на мелких грызунах.

10.1.3. Взрослые клещи паразитируют на сельскохозяйственных животных с апреля по сентябрь. Пик численности имаго клещей на животных наблюдается в мае — июне, со второй половины июля их количество снижается до 1 и менее. Перезимовавшие взрослые клещи активизируются весной при температуре 9 — 10 °С и нападают на животных. Несколько позже к этой популяции присоединяются имаго, отродившиеся из перезимовавших нимф.

10.1.4. Места локализации имаго на теле крупного рогатого скота: подгрудок, грудина, локтевая складка кожи, предвымянная ямка, вымя, пах, внутренняя сторона бедер, мошонка, молочное зеркало, промежность, гениталии, перианальные и хвостовые складки, хвост; у лошадей — под гривой на шее, на хвосте, в перианальных складках, на гениталиях; у овец и коз — наиболее часто на вымени, на сосках, на внутренней стороне коленной складки кожи, с внутренней стороны бедра, на гениталиях.

10.1.5. Самки насыщаются кровью за 12 — 15, максимум за 22 дня и отпадают в местах выпаса скота. Растянутость сроков весенне-летнего нападения клещей на животных, различное время их насыщения, отпадения и эмбриогенеза обусловливают растянутость появления в природе их новой генерации.

10.1.6. Яйцекладку самка начинает через 5 — 11 дней после отпадения. Она откладывает до 20 тыс. яиц. Развитие яиц — эмбриогенез — при температуре 26 — 28 °С проходит за 23 — 28 суток, то есть от отпадения сытой самки до появления в природе личинок новой генерации проходит 28 — 40 дней. При внешней температуре, ниже указанной, эмбриогенез задерживается.

10.1.7. Личинки новой генерации появляются в природе во второй половине июня — начале июля. Они находятся на пастбище, где отпали сытые самки. Для дальнейшего развития личинки нападают на ежей, зайцев и особенно на птиц, кормящихся на земле (грачи, вороны, куропатки, домашние птицы — куры, гуси и особенно индейки). У птиц они расселяются на голове и шее, в ушах. Особенно велика заклещевленность индеек. У них голова и шея становятся черными от обилия напитавшихся личинок и нимф. Максимум заклещевленности птиц наблюдается в июле — начале августа. К концу августа на птицах обнаруживаются единичные напитавшиеся личинки и нимфы. За 12 — 15, максимум 28 дней личинки насыщаются, здесь же линяют в нимф, и уже напитавшиеся нимфы отпадают в природных биотопах в местах обитания прокормителей. Напитавшиеся нимфы через 18 — 32 дня линяют в имаго. Сытые нимфы, отпавшие от прокормителей осенью и не успевшие перелинять в имаго, зимуют в природе и линяют в имаго весной следующего года. От отпадения сытой самки до появления в природе голодных имаго новой генерации проходит от 90 до 130 дней.

10.1.8. Появившиеся осенью имаго не представляют ни эпизоотологической, ни эпидемиологической опасности, т.к. большинство из них до весны находятся в неактивном состоянии, не обладают агрессивностью и не нападают на животных. Таким образом, зимуют напитавшиеся нимфы и «голодные» имаго.

10.1.9. Популяция клещей H. marginatum marginatum сохраняет жизнеспособность, если среднемесячные температуры в зимние месяцы не опускаются ниже -10 °С. При понижении температуры клещи зарываются в землю.

10.1.10. Ареал обитания клеща ограничен местностью, где переход через 0° весной не позже середины марта, а средние температуры апреля бывают не ниже 9 — 10 °С. Неблагоприятна для клещей высокая сухость воздуха в июне — июле, когда отмечается внехозяинный период жизни клеща, в природе имеются яйцекладки и идет эмбриогенез. Росы, туманы губительно действуют на преимагинальные стадии клещей.

10.2. Морфология и биология клеща Dermacentor marginatus

10.2.1. Клещи Dermacentor marginatus имеют один специфический морфологический признак, резко отличающий их от других родов семейства иксодовых клещей, — белый эмалевый пигмент на спинных щитках у самцов и самок. Этот пигмент легко различим невооруженным глазом. Сам щиток занимает всю спинную поверхность тела у самцов, а у самок — лишь ее переднюю треть. Размеры имаго (самцов и самок) D. marginatus в голодном состоянии составляют 5 — 7 мм в длину, 4 — 5 мм в ширину (как и у клещей H. marginatum marginatum). Насосавшиеся (сытые) самки достигают 18 — 20 мм в длину. Цвет тела голодных клещей варьирует от темно-желтого до темно-коричневого. По бокам спинного щитка расположены плоские глаза, трудно различимые невооруженным глазом. Хоботок у D. marginatus короткий, с прямоугольным основанием.

10.2.2. D. marginatus — треххозяинный клещ. Он обитает преимущественно в степных и луговых стациях. Имаго (взрослые самцы и самки) активно нападают на прокормителей — крупных диких млекопитающих (копытных, хищных) и сельскохозяйственных животных. Личинки и нимфы паразитируют преимущественно на грызунах и насекомоядных (землеройках, ежах), а также на зайцах и других мелких млекопитающих.

10.2.3. Сезон паразитирования имаго D. marginatus — с конца марта по сентябрь. Как правило, наблюдаются два пика численности взрослых клещей — весной — летом (конец марта — первая половина июля) и осенью (сентябрь). Осенний пик активности имаго наблюдается не всегда, а лишь при благоприятных погодных условиях. Зимуют имаго клещей в природных стациях или на прокормителях (диких млекопитающих и сельскохозяйственных животных, в том числе КРС).

10.2.4. Места локализации имаго D. marginatus на теле крупного рогатого скота, лошадей, овец и коз аналогичны таковым у H. marginatum marginatum (см. выше - п. 10.1.4.).

10.2.5. Самки D. marginatus насыщаются кровью за 7 — 10 дней, максимум до 12-ти, отпадают, как правило, в местах выпаса скота. У этих клещей также наблюдается разновременность сроков появления новой генерации в зависимости от условий внешней среды (в основном от температуры и влажности воздуха), обуславливающих различную длительность питания и отпадения напитавшихся самок, а также продолжительность эмбриогенеза.

10.2.6. Напитавшаяся самка начинает яйцекладку через 7 дней после отпадения (в среднем). При неблагоприятных метеоусловиях (жаркая и сухая погода) у них может развиваться так называемая диапауза — задержка яйцекладки до наступления благоприятных климатических параметров среды. Всего одна самка откладывает 3 — 6 тыс. яиц, развитие которых проходит за 20 — 30 и более дней. При понижении температуры воздуха до 18 — 20 °С развитие яиц растягивается до 40 — 45 дней (экспериментальные данные). Таким образом, личинки новой генерации появляются через 27 — 50 дней после отпадения сытой самки.

10.2.7. Личинки D. marginatus начинают массово нападать на прокормителей (грызунов, насекомоядных и др. мелких млекопитающих) в июне. Насыщение личинок кровью проходит в среднем за 3 — 5 дней, после чего они отпадают и линяют на нимф. Массовое появление нимф D. marginatus происходит, как правило, в июле. Они вновь нападают на хозяев (мелких млекопитающих), питаются на них 5 — 8 дней, а затем отпадают в природные стации. Сытая нимфа становится неактивной на относительно длительный срок (20 — 30 дней) и линяет в имаго (самца или самку). Таким образом, от отпадения сытой самки до появления взрослых клещей D. marginatus новой генерации проходит 100 — 130 дней и более (при наличии диапаузы).

10.2.8. В большинстве случаев вновь появившиеся имаго уходят на перезимовку в голодном состоянии, но иногда наблюдается осенняя волна паразитирования их на крупном рогатом скоте. В этом случае откладка яиц происходит только у перезимовавших особей.

10.2.9. Зимовка имаго D. marginatus проходит как в природных стациях (как правило, клеши зарываются в субстрат), так и на хозяевах. При отсутствии прокормителей взрослые формы могут выживать в природе в течение 3 — 4 лет.

10.2.10. Ареал обитания D. marginatus ограничен равнинно-степной и горно-степной зонами. Неблагоприятными условиями для жизни клещей является жаркая и сухая погода, а для преимагинальных стадий клещей — продолжительное воздействие влаги (дожди, росы).

10.3. Морфология и биология клеща Rhipicephalus rossicus

10.3.1. Клещи Rhipicephalus rossicus имеют следующие морфологические признаки: тело коричневого или темно-коричневого цвета, суженное кверху; хоботок короткий, с шестиугольным основанием. Глаза расположены по краям спинного щитка. Размеры имаго: самцы — около 2 мм в длину, самки в голодном состоянии составляют 3 — 5 мм в длину, насосавшиеся (сытые) самки достигают 12 — 15 мм в длину.

10.3.2. Rh. rossicus — треххозяинный клещ. Стации обитания и прокормители аналогичны таковым у D. marginatus.

<...>стациях.

10.3.4. Места локализации имаго Rh. rossicus на теле крупного рогатого скота, лошадей, овец и коз аналогичны таковым у H. marginatum marginatum (см. выше - п. 10.1.4).

10.3.5 — 10.3.10. Продолжительность питания имаго Rh. rossicus, сроки отпадения напитавшихся самок, длительность эмбриогенеза и развития преимагинальных стадий в целом аналогичны соответствующим параметрам D. marginatus (см. выше, пп. 10.2.5 - 10.2.10). Но у Rh. rossicus есть и свои отличительные черты. Так, при наличии определенных (неблагоприятных) условий внешней среды цикл развития Rh. rossicus (от голодных имаго до появления следующей взрослой генерации) может растягиваться до двух лет (двухгодичный цикл развития). Кроме того, для этих клещей нехарактерна зимовка на хозяевах.

10.4. Борьба с клещами H. marginatum marginatum

10.4.1. Борьба с клещами носит комплексный характер и охватывает весь жизненный цикл клеща. Она включает меры экологического, хозяйственного и химического воздействий на популяцию клещей на всех стадиях его развития.

10.4.2. Полностью уничтожить популяцию двуххозяинного клеща, имеющего многочисленных прокормителей, в том числе в дикой фауне, невозможно. Задача борьбы — снизить численность популяции клеща H. marginatum, при которой можно практически исключить возможные эпидосложнения.

10.4.3. Хозяйственные меры осуществляются местными администрациями и владельцами животных. В соответствии с жизненным циклом клеща они включают смену пастбищ для каждого гурта (стада) по окончании периода массового паразитирования клещей на сельскохозяйственных животных — не позже второй половины июня, сразу же поверхностную обработку использованных в мае — июне пастбищ (используются культиваторы) с целью уничтожения сытых самок и их яйцекладок. Это приведет к снижению численности новой генерации клещей, к уменьшению количества вновь отродившихся личинок.

10.4.4. Уничтожение врановых и их колонии в лесонасаждениях всеми доступными экологически оправданными средствами и способами, включая обработку пестицидами местности под колониями и прилегающей территории. Такая мера уменьшит количество вновь отрождающихся имаго и соответственно степень заклещевленности сельскохозяйственных животных весной следующего года. Эту работу следует выполнить в конце июля и повторить в конце августа, по показаниям заклещевленности местности — в сентябре.

10.4.5. Наиболее доступной и эффективной мерой является уничтожение клещей на сельскохозяйственных животных. Эта часть работы выполняется ветеринарной службой. Клещей на животных уничтожают акарицидами. Стратегия борьбы с клещами на животных строится с учетом жизненного цикла клеща, погодных условий года, эффективности акарицидов против клещей различной степени насыщения и экологической безопасности применяемых акарицидов.

10.4.6 Методы и способы аппликации пестицидов на животных разные:

• крупный рогатый скот купают в ваннах, опрыскивают или обтирают акарицидными жидкостями;
• лошадей обрабатывают индивидуально, в соответствии с местами локализации клещей, опрыскиванием или обтиранием акарицидами;
• овец либо купают в проходной ванне, либо используют метод локальной обработки мест прикрепления клещей (т.н. забанивание);
• домашних птиц (кур, гусей, индеек) либо купают путем многократного кратковременного погружения головы и шеи в раствор акарицида, либо голову и шею обильно обтирают растительным маслом.

Календарь работ по борьбе с клещами H. marginatum marginatum и средства борьбы даны в Приложениях 11 и 12.

10.4.7. Уничтожение клещей на местности проводится в течение эпидсезона в неблагополучных по КГЛ хозяйствах. Целесообразно проведение барьерных обработок территории, мест общего пользования (летние оздоровительные учреждения, полевые станы, тока, летние стоянки скота) с использованием ядохимикатов.

В борьбе с иксодовыми клещами рекомендуется использование:

• байтекса 40% СП в дозировке 0,75 — 1,00 кг/га по техническому препарату в зависимости от густоты растительного покрова. Расход рабочего раствора 90 л/га;
• фьюри 10% к.э. в дозировке 0,05 — 0,25% водной эмульсии с расходом 100 л/га;
• фуфанона 57% к.э. в дозировке 1% водной эмульсии с расходом 100 л/га;
• сипаза 25% в дозировке 0,05 — 0,1% водной эмульсии с расходом 100 л/га.

При использовании сипаза, фьюри в борьбе с клещами применяются минимальные дозировки. При их неэффективности дозировки постепенно увеличиваются. Нормы расхода и дозировки для приготовления рабочих растворов приведены в Приложении 13.

10.4.8. Одновременно с прямым истреблением клещей на животных и на местности во всех хозяйствах эндемичных и угрожаемых районов в плановом порядке проводятся санитарно-оздоровительные мероприятия, создающие неблагоприятные условия для существования клещей: благоустройство хозяйственной территории, регулярная очистка от навоза животноводческих ферм, выкашивание и сжигание сорной растительности, расчистка лесополос, применение комплекса агротехнических мероприятий.

10.5. Меры личной предосторожности от заражения вирусом КГЛ Конго

10.5.1. При сборе клещей пользоваться перчатками, не допускать раздавливание их руками; собранных клещей следует поместить в любую губительную для них жидкость (керосин, соляровое масло и любой ядохимикат). После сбора клещей необходимо вымыть руки с мылом.

10.5.2. Для предотвращения нападения клещей на пастбище необходимо быть одетым в плотную матерчатую ткань. Брюки должны быть заправлены в носки и в сапоги. По окончании работы надо внимательно осмотреть себя и свою одежду на предмет выявления клещей.

10.5.3. В случае присасывания клеща не надо пытаться его вытащить, на него следует накапать растительным маслом и через 10 — 15 минут снять, осторожно поворачивая то в одну, то в другую сторону.

10.5.4 Для отпугивания клещей рекомендуется использовать репелленты.

Приложение 1

БЛАНК ТЕКУЩЕГО ОТЧЕТА (образец)

Приложение 2

НАПРАВЛЕНИЕ НА ИССЛЕДОВАНИЕ ПОЛЕВОГО МАТЕРИАЛА

В лабораторию ____________________________________________________ (наименование учреждения) Дата забора материала ____________________________________________ Место сбора ______________________________________________________ Вид собранного полевого материала ________________________________

Количество объектов в пробе ______________________________________

Дополнительные сведения __________________________________________

материал для исследования ________________________________________ Ф.И.О. лица, доставившего материал в лабораторию _________________ Дата и время отправки материала __________________________________

Приложение 3 (справочное)

ОПРЕДЕЛЕНИЕ ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТИ КЛЕЩЕЙ К ИНСЕКТИЦИДАМ

В качестве поверхности для нанесения инсектицидов используются

диски фильтровальной бумаги,  в соответствии с размерами дна чашки
Петри,  на  которые  наносятся   растворы   инсектицидов   четырех
определенных   концентраций  из  расчета  г/кв. м по ДВ препарата.
Серия  этих  четырех  концентраций  должна обеспечивать смертность
клещей  (100%-ную  смертность  или  не менее 50%-ную  смертность);
с  этими  концентрациями   испытания   проводятся   четырехкратно.
Контролем служат те же диски,  пропитанные водой или органическими
растворителями,   в   зависимости   от  того,   чем   растворяется
инсектицид.   На  подготовленные   диски   фильтровальной   бумаги
выпускают  клещей  на  10 мин.  После контакта с препаратом клещей
переносят  во  влажные   камеры,  где  содержат  3 - 5  суток  при
температуре  20 °С.  Результаты  гибели клещей учитывают в течение
3 - 5 суток.  Мертвыми  считаются  клещи,   которые  не  проявляют
признаков  жизни при подогреве под лампой. В опыт необходимо брать
40 - 50  имаго  и  нимф клещей и до 50 - 60 личинок.  На основании
полученных  данных  определяют  ЛК    или  ЛК  .  При смертности в
                                  50         90

контроле от 10 до 20% вносят поправку по формуле:

                        (В - В )
                              1

А = ------- х 100,

                           В<br>
где:

А - истинная смертность, выраженная в процентах;

В - процент живых особей в контроле;<br>
В  - процент живых особей в опыте.

 1

Если гибель клещей через трое суток составляет 50%, а через пять суток — 100%, то препарат можно рекомендовать для дезинсекции.

Приложение 4 (справочное)

ДИФФЕРЕНЦИАЛЬНАЯ ДИАГНОСТИКА ГЕМОРРАГИЧЕСКИХ ЛИХОРАДОК, РЕГИСТРИРУЕМЫХ НА ТЕРРИТОРИИ РОССИИ

Приложение 5 (справочное)

ДИФФЕРЕНЦИАЛЬНАЯ ДИАГНОСТИКА КГЛ

Приложение 6

НАПРАВЛЕНИЕ НА ИССЛЕДОВАНИЕ СЕКЦИОННОГО МАТЕРИАЛА

В лабораторию ____________________________________________________ (наименование учреждения) Фамилия _____________________________ Имя ________________________ Отчество ____________________________ Возраст ____________________ Место жительства _________________________________________________ (область, город, район, населенный пункт) Место работы (учебы) _____________________________________________ Номер истории болезни ________________ Дата заболевания __________ Дата смерти ______________________________________________________ Клинический диагноз ______________________________________________

Патологоанатомический диагноз ____________________________________

Вид материала ____________________________________________________

Дата и время отбора материала ____________________________________ Дата и время отправки материала __________________________________

Ф.И.О. патологоанатома (судмедэксперта), направившего материал для исследования _____________________________________________________ Ф.И.О. эпидемиолога (инфекциониста), присутствовавшего при вскрытии _________________________________________________________ Ф.И.О. лица, доставившего материал в лабораторию _________________

Дата и время доставки материала в лабораторию ____________________

Приложение 7 (обязательное)

НАПРАВЛЕНИЕ

В вирусологическую лабораторию ___________________________________

Направляется кровь на выделение вируса КГЛ Конго Ф.И.О. ___________________________________________________________

Место работы (учебы) _____________________________________________ Дата заболевания _________________________________________________ Дата взятия крови ________________________________________________ Диагноз __________________________________________________________ Наименование направившего учреждения _____________________________

Ф.И.О. врача _____________________________________________________ Дата отправления материала _______________________________________ Дата и время доставки материала в лабораторию ____________________

Приложение 8 (обязательное)

НАПРАВЛЕНИЕ

В вирусологическую лабораторию ___________________________________

Направляется сыворотка крови для исследования на антитела против вируса КГЛ Конго _________________________________________________ Ф.И.О. ___________________________________________________________

Домашний адрес ___________________________________________________

Место работы (учебы) _____________________________________________ Дата заболевания _________________________________________________ Дата взятия крови ________________________________________________ Диагноз __________________________________________________________ Наименование направившего учреждения _____________________________ Ф.И.О. врача _____________________________________________________ Дата отправления материала _______________________________________ Дата и время доставки материала в лабораторию ____________________

Приложение 9 (обязательное)

Ф.И.О. ___________________________________________________________ Адрес ____________________________________________________________ Материал для исследования — сыворотка крови ______________________ Дата взятия крови ________________________________________________ Дата поступления сыворотки _______________________________________ Метод исследования _______________________________________________ Результат исследования ___________________________________________ Титр антител _____________________________________________________

Дата _______________________ Подпись __________________________

Приложение 10

            НА ВЫЯВЛЕНИЕ РНК ВИРУСА КГЛ КОНГО

Ф.И.О. ___________________________________________________________ Материал для исследования ________________________________________ Дата забора материала ____________________________________________ Дата поступления материала _______________________________________ Результат исследования: Специфическая РНК вируса КГЛ Конго

Дата _____________________

Подпись __________________

Приложение 11 (обязательное)

КАЛЕНДАРЬ РАБОТ ПО БОРЬБЕ С КЛЕЩОМ H. MARGINATUM MARGINATUM

Примечание: при аномально складывающихся климатических условиях график проведения акарицидных обработок сдвигается.

Приложение 12 (справочное)

Технические средства

Проплывная ванна (проект — Ветеринарная энциклопедия, Т. 1, 1968, С. 819) (ванну можно сделать меньшего объема), проходная ванна для овец (Ветеринарное законодательство, Т. 3, М., 1981, С. 120) объемом 1,4 м с параметрами: длина 6 м, ширина в нижней части 0,3 м, в верхней части 0,5 м, высота (глубина) 0,6 м; ДУК, ЛСД, ЕМОК, ОВТ, душевые камеры и др. Для индивидуальной обработки применяют ранцевые и другие ручные опрыскиватели, дающие факел распыления жидкости каплями средней, малой и ультрамалой величины. Единичных животных можно обтирать вручную с обязательным использованием соответствующих средств индивидуальной защиты.

Животных можно также обрабатывать инсектицидными аэрозолями, направляя факел аэрозоля на клещей в течение нескольких долей секунды.

Химические средства борьбы с клещами

Рынок акарицидов весьма обширен и предлагает хлорорганические, фосфорорганические, пиретроидные и препараты других групп. Для борьбы с клещом H. marginatum marginatum испытано немного акарицидов, поскольку клещ имеет ограниченное ветеринарное значение. Испытания акарицидов проводились преимущественно на лошадях.

Согласно письмам Департамента ветеринарии МСХ и П РФ № 1100/3423-99-115 от 24.12.99 и № 1100/24-0-115 от 01.02.2000 к применению в ветеринарии разрешены:

1. Блотик 20% к.э. (опрыскивание только механизированным способом).

2. Бутофлин 2,5% к.э. фирмы «Руссель Уклав».

3. Бутокс 5% к.э. фирмы «Руссель Уклав».

4. Ренегейд 5% к.э. фирмы «Цианамид» — кроме обработок дойного стада. Убой животных разрешается не ранее чем через 35 дней после обработки.

5. Себацил 50% к.э. (кроме дойного стада) и себацил ПУР-он.

6. Бовисан 57% к.э. (кроме обработок дойного стада).

7. Неоцидол 60% к.э. (кроме обработок дойного стада).

8. Неостомазан 5,5% к.э. (обработка дойных животных не допускается).

9. Негувон 10% (обработка дойных животных не допускается).

10. Суминак 5% ФЛО.

11. Мустанг (письмо Центра госсанэпиднадзора РФ № 01-6/751-11 от 26.12.96).

14. Циодрин 25 — 50% к.э. (кроме дойных коров).

16. Дурсбан 40,8% к.э.

Все химические препараты используются согласно наставлениям по их применению, утвержденным ДВ МСХ и П РФ.

Обычно в наставлениях по применению акарицидов указываются параметры для борьбы с клещами Боофилус. Указанные концентрации акарицидов, как правило, убивают голодных имаго H. marginatum marginatum или начавших питание.

Приложение 13 (обязательное)

ПРИГОТОВЛЕНИЕ РАБОЧИХ РАСТВОРОВ ДЛЯ ПРОВЕДЕНИЯ АКАРИЦИДНЫХ ОБРАБОТОК МЕСТНОСТИ

Приложение 14 (справочное)

РЕКОМЕНДУЕМАЯ БИБЛИОГРАФИЯ

1. Абуладзе К.И., Демидов Н.В., Непоклонов А.А. и др.//Паразитология и инвазионные болезни сельскохозяйственных животных/Под редакцией К.И. Абуладзе. — 3-е изд. — М: Агропромиздат, 1990. — С. 366 — 379.

2. Арбовирусные инфекции на Юго-Востоке Европейской части РСФСР (КГЛ): Сборник научных трудов. — Ленинград, 1973. — С. 14 — 117.

3. Балашов Ю.С. Иксодовые клещи — паразиты и переносчики инфекций. — СПб.: Наука, 1998. — 287 с.