Методические указания по определению дроппа в воде, почве, семенах хлопчатника, волокне, хлопковом масле, шроте методом газожидкостной хроматографии
(утв. Минздравом СССР 27.04.1984 № 3008-84)
27 апреля 1984 г. № 3008-84
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ДРОППА В ВОДЕ, ПОЧВЕ, СЕМЕНАХ ХЛОПЧАТНИКА, ВОЛОКНЕ, ХЛОПКОВОМ МАСЛЕ, ШРОТЕ МЕТОДОМ ГАЗОЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ <*>
<*> Разработаны А.В. Ченкуновым, М.М. Умаровым (УзНИИСГиПЗ).
Краткая характеристика препарата дана в Методических указаниях № 2807-83.
Принцип метода. Метод основан на гидролизе пестицида с последующей экстракцией изооктаном продукта гидролиза — анилина, его бромированием и определении полученного триброманилина методом ГЖХ с ДЭЗ.
Метрологическая характеристика. Метрологические данные показаны в таблице 126.
МЕТРОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА МЕТОДА
| Анализируемая проба | Предел определения, мг/л или мг/кг | Среднее значение определения, % | Стандартное отклонение, % | Доверительный интервал при p = 0,95, n = 5, % |
|---|---|---|---|---|
| Вода Почва Семена хлопчатника Волокна Хлопковое масло Шрот | 0,15 1,2 1,2 3 6 1,2 | 93,4 88,1 87,9 91,4 88,3 88,3 | +/- 4,8 +/- 8,2 +/- 5,3 +/- 6,0 +/- 7,9 +/- 6,2 | +/- 5,76 +/- 9,84 +/- 6,36 +/- 7,2 +/- 9,38 +/- 7,44 |
Избирательность метода. Метод специфичен. Определению не мешают ДДТ, изомеры ГХЦГ, бутифос, базудин, фосфамид, фозалон, болстар, прометрин, карбофос.
Реактивы и растворы. Дропп х.ч. Стандартный раствор дроппа (100 мкг дроппа помещают в круглодонную колбу на 0,5 л, проводят гидролиз и бромирование, как указано ниже; в результате получают 2,4,6-триброманилин в 10,0 мл толуола; 2 мкл раствора соответствует 20 нг дроппа). Из этого раствора делают разведения толуолом в 10; 100 и 1000 раз. Бромид калия х.ч. Бромат калия х.ч., 0,2-процентный раствор. Гидроксид натрия х.ч., 5 н раствор. Сульфит натрия ч.д.а. Хлороводородная кислота х.ч., 1 н раствор. Толуол особой чистоты. Изооктан х.ч. Твердый носитель — хроматон N-AW-DMCS (0,16 — 0,20 мм). Жидкая фаза SE-30 — 5% от массы носителя. Азот особой чистоты.
Приборы, аппаратура, посуда. Газовый хроматограф с ДЭЗ. Хроматографическая стеклянная колонка длиной 1 м, внутренним диаметром 3,5 мм. Микрошприц на 10 мкл. Посуда лабораторная.
Ход анализа. Экстракция. Пробу воды (200 мл), почвы (25,0 г), хлопкового масла (50 г), хлопковых семян, освобожденных от волокон и измельченных (25 г), шрота (25 г), волокон хлопка (10 г) помещают в круглодонную колбу на 0,5 л, прибавляют 25 г гидроксида натрия и 250 мл дистиллированной воды (в случае, когда проба — вода, добавляют 50 мл воды). В течение 30 мин. при кипячении с обратным холодильником проводят гидролиз препарата. Образовавшийся в результате гидролиза анилин экстрагируют изооктаном порциями по 50; 30 и 30 мл. Изооктановый экстракт помещают в делительную воронку, откуда анилин экстрагируют 1 н раствором хлороводородной кислоты порциями по 10; 5 и 5 мл. Кислотный экстракт количественно переносится в коническую колбу на 100 мл. Далее проводят бромирование. К водному экстракту добавляют 10 г бромида калия. Встряхивают до полного растворения, затем добавляют 0,5 мл 0,2-процентного бромата калия. Реакционная смесь становится желтой. Если происходит обесцвечивание, добавляют еще 0,5 мл 0,2-процентного бромата калия, пока не установится стабильный желтый цвет. Через 30 мин. реакцию бромирования прекращают, добавляя сульфит натрия (около 100 г) до тех пор, пока раствор не обесцветится. Реакционную смесь оставляют на 15 мин. Затем в раствор добавляют 5 мл 5 н гидроокиси натрия. В реакционную смесь прибавляют 10 мл толуола. Колбу энергично встряхивают в течение 2 мин. Дают возможность разделиться на слои, шприцем набирают толуоловый слой и 2 мкл вводят в испаритель хроматографа.
Условия хроматографирования. Колонка стеклянная длиной 1 м и внутренним диаметром 0,35 м, заполненная хроматоном N-AW-DMCS с 5% SE-30. Температура, °C: термостата колонок — 180, испарителя — 250, термостата детектора — 290. -10 Газ-носитель азот особой чистоты, 3 л/ч. Шкала усилителя 0,25 x 10 А. Объем вводимой пробы 2 мкл. Время удерживания 4 мин. 50 с.
Обработка результатов анализа. Количественное определение проводят двумя методами. Первый — метод расчета по соотношению площади пика — концентрация при вводе до анализа проб и после анализа стандартного раствора дроппа. Вычисляют среднее арифметическое площадей пиков из 5 определений.
Концентрацию дроппа (X, мг/кг) вычисляют по формуле:
A S V
ст пр 2
где:
A — количество препарата в стандарте, введенном в хроматограф, нг; ст
S , S - площади пиков соответственно анализируемой пробы и пр ст
стандартной, кв. мм;
V — объем пробы, взятый для хроматографирования, мкл; 1
P — навеска пробы, взятая для анализа, г.
Второй метод — метод абсолютной калибровки по площадям пиков. Для построения градуировочного графика в хроматограф вводят последовательно по 2 мкл стандартного раствора концентрацией 20; 2; 0,2; 0,02 нг в 2 мкл, что соответствует 10; 1; 0,1; 0,01 мкг/мл. Затем строят график зависимости площади пика от концентрации из пяти параллельных определений.
Содержание дроппа (X, мг/кг) вычисляют по формуле:
AV
1
где:
A — количество дроппа, найденного по градуировочному графику, нг;
V — общий объем раствора, мл; 1
V — объем пробы, вводимый в хроматограф, мкл;
Требования безопасности. Соблюдать все требования техники безопасности, рекомендуемые для работы с органическими растворителями и пестицидами.