Методические указания по определению дефолианта дроппа в волокнах, листьях и почве методом тонкослойной хроматографии
(утв. Минздравом СССР 12.05.1983 № 2807-83)
12 мая 1983 г. № 2807-83
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ДЕФОЛИАНТА ДРОППА В ВОЛОКНАХ, ЛИСТЬЯХ И ПОЧВЕ МЕТОДОМ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ <*>
<*> Разработаны Ш. Сирожиддиновым, С. Мусамухамедовым (ТашМИ).
Краткая характеристика пестицида. Дропп - N-(1,2,3-тиадиазолил-5)- N'-фенилмочевина. Брутто-формула C H ON S. Молекулярная масса 212,1. 9 8 4 Общепринятое название - тидиазурон. ДСД 0,006 мг/кг. Содержание в семенах хлопчатника, хлопковом масле не допускается. Препарат - светло-желтый порошок со слабым специфическим запахом. Т. пл. 213 °C. Растворимость в воде до 20, ацетоне - 8000, метаноле - 4500 мг/л при 20 °C. Препарат
применяется в качестве дефолианта в хлопководстве.
Принцип метода. Метод основан на извлечении дроппа из исследуемой пробы органическим растворителем и хроматографировании в тонком слое силикагеля с последующей термической обработкой. Препарат проявляется в виде светло-коричневых пятен на белом фоне. Метрологическая характеристика метода приведена в таблице 125.
МЕТРОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА МЕТОДА
| Параметры | Анализируемая проба | |||
| почва | листья | волокна | семена | |
| Предел определения, мг/кг Число параллельных определений Среднее значение определения, % Стандартное отклонение, % Доверительный интервал среднего, % | 0,025 8 87 +/- 6,82 +/- 8,13 | 0,05 10 88,7 +/- 8,93 +/- 9,87 | 0,1 9 90,2 +/- 3,86 +/- 4,12 | 0,05 8 87,3 +/- 5,66 +/- 6,08 |
Избирательность метода. Метод избирателен для дроппа, присутствие пестицидов, близких по химическому строению, определению не мешает.
Реактивы и растворы. Дропп х.ч. Ацетон ч. Гексан х.ч. Хлороформ ч. Концентрированная серная кислота х.ч. Едкий натр х.ч. Сульфат натрия безводный ч.д.а. Оксид алюминия дли хроматографии II степени активности. Едкий натр, 50-процентный раствор. Стандартный раствор А (навеску 10 мг химически чистого дроппа растворяют в мерной колбе в 100 мл ацетона; в 1 мл данного раствора содержится 0,1 мг препарата). Стандартный раствор Б (раствор А разводят ацетоном в 100 раз).
Приборы и посуда. Хроматографическая камера. Ротационный вакуумный испаритель. Сушильный шкаф. Аппарат для встряхивания. Колонки для адсорбционной хроматографии (300 x 15 мм). Фильтры бумажные. Бумага универсальная индикаторная. Денситометр «БИАН-170». Пластинки «Силуфол» размером 150 x 150 мм. Колбы: конические на 50 и 250 мл; мерные на 50 и 100 мл. Пипетки на 0,1; 1 и 10 мл. Микрошприцы на 10 и 100 мкл. Пробирки центрифужные на 10 мл. Делительная воронка на 250 мл. Стаканы химические.
Приготовление хроматографической колонки. В хромагографическую колонку помещают ватный тампон, последовательно 3 г сульфата натрия, 5 г оксида алюминия, сверху снова 3 г безводного сульфата натрия.
Ход анализа. Экстракция. Пробу измельченных листьев хлопчатника (20 г) помещают в коническую колбу на 250 мл и заливают 7,5 мл концентрированной серной кислоты. Осторожно взбалтывают в течение 10 — 15 мин. и оставляют на 10 — 12 ч. После выдержки в колбу по стенке наливают 50 мл дистиллированной воды, затем при помощи 50-процентного раствора едкого натра доводят pH до 8 (по индикаторной бумаге). Все содержимое колбы переносят в делительную воронку и препарат трижды экстрагируют гексаном по 15 мин. путем встряхивания порциями по 30 мл. Экстракты объединяют, сушат над безводным сернокислым натрием (5 — 7 г) и фильтруют через бумажный фильтр. Затем экстракт упаривают на водяной бане до объема 2 — 3 мл.
Пробу хлопкового волокна (10 г) заливают 50 мл ацетона на 2 ч. Встряхивают в течение 10 мин. Фильтруют и еще 2 раза экстрагируют препарат ацетоном по 20 мл. Фильтраты объединяют в колбу и упаривают растворитель до объема 2 — 3 мл.
Пробу почвы (40 г) 20-процентной влажности заливают на 10 — 12 ч 50 мл хлороформа. Далее встряхивают в течение 30 мин. и отфильтровывают растворитель. Экстракцию повторяют трижды. Объединенные экстракты сушат безводным сернокислым натрием (5 — 7 г). Растворитель упаривают до объема 2 — 3 мл.
Примечание. Если экстракты недостаточно чистые, то проводят дополнительную очистку экстракта путем пропускания его через хроматографическую колонку. Сначала колонку дважды промывают по 25 мл хлороформа, элюат отбрасывают. После этого экстракт вносят и колонку и препарат элюируют 50 мл гексана. Элюат собирают в колбу, упаривают до объема 2 — 3 мл.
Хроматографирование. Все экстракты исследуемой пробы (листья, волокна, почва) объемом 2 - 3 мл количественно переносят в конические пробирки
растворителем-экстрагентом. Растворитель упаривают до объема 0,1 — 0,2 мл и
оставшиеся экстракты количественно переносят на пластинку. Параллельно, рядом с пробами, микрошприцем или пипеткой наносят стандартный раствор Б с содержанием препарата 1; 3; 5 и 10 мкг. Пластинку помещают в хроматографическую камеру, в которую заранее, за 30 мин., налита смесь растворителей гексан-ацетон (3:2). После поднятия фронта растворителей на 10 - 12 см пластинку вынимают из камеры и высушивают на воздухе. Затем пластинку помещают в сушильный шкаф, нагретый до 200 +/- 5 °C, на 5 - 7 мин. Препарат проявляется в виде светло-коричневых пятен. Величина R 0,33 +/- 0,02 на белом фоне.
f
Обработка результатов анализа. Количественно дропп в анализируемой пробе определяют путем денситометрирования пятен проб и стандартов на денситометре «БИАН-170» или же путем визуального сравнения интенсивности окрашивания и площадей пятен проб и стандартов. При денситометрировании содержание препарата (X, мг/кг) рассчитывают по формуле:
A
A — количество препарата, найденное путем денситометрирования, мкг;
При визуальной оценке концентрацию дроппа (X, мг/кг) вычисляют по формуле:
AV
где:
A — количество вещества, найденное в анализируемом объеме экстракта, мкг;
V — объем экстракта, взятый для анализа, мл;
V — объем экстракта всей пробы, мл; 1
P — масса пробы почвы, листьев, волокон и семян, г.
Требования безопасности. Соблюдаются общие правила по технике безопасности, необходимые при работе с пестицидами и химическими реактивами.