Методические указания по хроматографическому измерению концентраций бензоилпропэтила и этилового эфира N-3,4-дихлорфенилаланина в воздухе рабочей зоны
(утв. Минздравом СССР 24.08.1983 № 2872-83)
24 августа 1983 г. № 2872-83
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ХРОМАТОГРАФИЧЕСКОМУ ИЗМЕРЕНИЮ КОНЦЕНТРАЦИЙ БЕНЗОИЛПРОПЭТИЛА И ЭТИЛОВОГО ЭФИРА N-3,4-ДИХЛОРФЕНИЛАЛАНИНА В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ
Настоящие Методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-исследовательских учреждений Минздрава СССР, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхоза СССР и лабораторий других министерств и ведомств, занимающихся анализом остаточных количеств пестицидов и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней среде.
Срок действия временных методических указаний устанавливается до утверждения гигиенических регламентов.
Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных группой экспертов при Госкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками при МСХ.
Методические указания согласованы и одобрены отделом перспективного планирования санэпидслужбы ИМПиТМ им. Марциновского Е.И. и Лабораторным советом при Главном санитарно-эпидемиологическом управлении Минздрава СССР.
COC H
/ 6 5
N
│\CH(CH )COOC H М.м. 366,3.
│ 3 2 5
// \
\\ / Cl
Cl
Бензоилпропэтил (синоним — карахол) действующее начало — N-бензоил-N-(3,4-дихлорфенил) аланин-этиловый эфир — белое кристаллическое вещество с Т. плавления 65 — 67 °С; растворимость при 20 °С в % масс.: в этиловом спирте — 6, метиловом спирте — 16, толуоле — 15, хлороформе — 40, ацетоне — 26.
При производстве в воздухе рабочей зоны может находиться в виде паров и аэрозоли.
NH-CH(CH )COOC H
│ 3 2 5
// \
| _ М.м. 262,0. |
|---|
\\ / Cl
Cl
Этиловый эфир N-3,4-дихлорфенилаланина — белое кристаллическое вещество с т. плавления 36 — 38 °С; при температуре выше 300 °С разлагается. Растворяется в спиртах, толуоле, м-ксилоле. Является полупродуктом в производстве бензоилпропэтила. В воздухе может находиться в виде паров и аэрозоли.
I. Характеристика метода
1. Определение основано на хроматографическом разделении бензоилпропэтила и этилового эфира N-3,4-дихлорфенилаланина в тонком слое силикагеля с последующим обнаружением зон локализации веществ с помощью раствора марганцовокислого калия и реактива Драгендорфа.
2. Отбор проб проводится с концентрированием (фильтр «синяя лента» и этиловый спирт).
3. Предел измерения в анализируемом объеме пробы — 5 мкг (для обоих веществ).
4. Предел измерения в воздухе — 1 мг/куб. м (при отборе 5 л воздуха).
5. Диапазон измеряемых концентраций — 1 - 8 мг/куб. м.
6. Определению не мешают все сопутствующие в производстве вещества.
7. Граница суммарной погрешности измерения для бензоилпропэтила — +/- 15%, для этилового эфира N-3,4-дихлорфенилаланина — +/- 10%.
8. Предельно допустимая концентрация в воздухе рабочей зоны: бензоилпропэтила — 5 мг/куб. м, этилового эфира N-3,4-дихлорфенилаланина — 4 - 5 мг/куб. м (ориентировочная, расчетная).
II. Реактивы, растворы, материалы
Бензоилпропэтил, 99,5-процентный
Этиловый эфир N-3,4-дихлорфенилаланина, 99,5-процентный
Аммиак, ч.д.а., ГОСТ 3760-79, 25-процентный водный раствор
Эфир диэтиловый, х.ч., ГОСТ 6262-79
Спирт этиловый, ТУ 6-09-17-10-77, 96-процентный
Калий марганцовокислый, х.ч., ГОСТ 20490-75
Висмут азотнокислый основной, ч., ГОСТ 4110-75
Кислота серная, х.ч., ГОСТ 4204-77
Кислота уксусная ледяная, о.с.ч., ГОСТ 18270-72
Калий йодистый, х.ч., ГОСТ 4232-74
Кальций сернокислый, ГОСТ 3210-77, ч.д.а.
Фильтры бумажные «синяя лента», ТУ 6-09-1678-77
Подвижная фаза: гексан — ацетон — водный аммиак (10:5:0,8)
Проявляющий реактив № 1: 0,5 г марганцовокислого калия растворяют в 47,5 мл воды и добавляют 2,5 мл серной кислоты. Реактив должен быть свежеприготовленным.
Проявляющий реактив № 2 (реактив Драгендорфа): к раствору 850 мг основного азотнокислого висмута в 40 мл воды и 10 мл уксусной кислоты прибавляют раствор 8 г калия йодистого в 20 мл воды. Этот раствор устойчив в течение 10 суток. Для проявления хроматограммы 1 мл этого раствора разбавляют 2 мл уксусной кислоты и 10 мл воды. Реактив должен быть свежеприготовленным.
Стандартные растворы бензоилпропэтила и этилового эфира N-3,4-дихлорфенилаланина концентрации 1000 мкг/мл готовят растворением соответствующих навесок (в пересчете на действующее начало) в 10 мл этилового спирта. Устойчивы в течение трех суток.
III. Приборы и посуда
Поглотительные приборы Рихтера, ТУ 25-21-1081-75
Ротационный испаритель ИР-IМ, ТУ 25-11-944-74
Камера стеклянная хроматографическая, ГОСТ 10565-75
Пульверизатор стеклянный, ГОСТ 10391-74
Микропипетка или стеклянный капилляр
Колбы грушевидные для отгонки растворителя, ГОСТ 10894-72
Стаканы химические емкостью 50 мл, ТУ 25-11-917-74
Колбы мерные, цилиндры, мензурки, ГОСТ 1770-74
Пипетки различной емкости, ГОСТ 20292-74
Пробирки с притертыми пробками емкостью 5 мл, ГОСТ 10515-75
Пластинки для хроматографии «Силуфол», 150 х 150 мм
Пластинки для хроматографии стеклянные, 90 х 120 мм.
Стеклянную пластинку, промытую содой, хромовой смесью и дистиллированной водой сушат и протирают этиловым спиртом. Компоненты сорбционной массы обрабатывают следующим образом. Сернокислый кальций сушат при температуре 150 °С в течение 6 ч и просеивают через сито 100 мкг. Хранят в банке с притертой пробкой. Силикагель размалывают на шаровой мельнице. Суспензию 250 г измельченного силикагеля в 2,5 л дистиллированной воды помещают в химический стакан (h = 20 см, d = 14 см). Тщательно перемешивают содержимое стакана и оставляют на 16 мин. После этого надосадочную жидкость переливают во второй стакан такого же размера и доливают воду до уровня 19 см. В этом стакане суспензию отстаивают 30 мин., надосадочную жидкость сливают в третий стакан и оставляют на 60 мин., затем переливают в четвертый стакан и отстаивают жидкость 120 мин. Надосадочную жидкость выливают, осадок высушивают при 130 — 140 °С в течение суток. Стеклянные пластинки покрывают сорбционной массой. Для приготовления сорбционной массы на 8 — 9 пластинок смешивают 14 г силикагеля, 2 г сернокислого кальция, 60 мл дистиллированной воды и перемешивают до образования однородной массы. 2 — 3 чайных ложки массы наливают по пластинку и, покачивая, распределяют равномерно на поверхности. Пластинки сушат 12 ч в сухом шкафу при 100 — 110 °С. Хранят пластинки в эксикаторе.
IV. Условия отбора проб воздуха
Воздух со скоростью 1 л/мин. аспирируют через последовательно соединенные фильтродержатель с бумажным фильтром и поглотительный прибор, содержащий 15 мл этилового спирта. Для определения 1/2 ПДК отбирают не более 5 л воздуха. Пробы можно хранить в течение трех суток.
V. Условия анализа
Бумажный фильтр извлекают из патрона (фильтродержателя) и помещают в химический стаканчик. Промывают бумажный фильтр тремя порциями этилового спирта по 5 мл, собирают смыв в отгонной колбе. Туда же сливают содержимое поглотительного прибора. Этиловый спирт отгоняют (ротационный испаритель, ток воздуха) досуха. Сухой остаток растворяют в 0,5 мл диэтилового эфира, тщательно обмывая стенки колбы. На стартовую линию хроматографической пластинки количественно наносят пробу, слева и справа от нее наносят смеси стандартных растворов бензоилпропэтила и этилового эфира
N-3,4-дихлорфенилаланина, содержащие по 5; 10; 20; 40 мкг каждого вещества.
Размер пятна должен быть не более 1 см. Пластинку помещают в наклонном положении в хроматографическую камеру, в которую за 30 мин. до
хроматографирования был налит подвижный растворитель — гексан:ацетон:водный
аммиак (10:5:0,8) в таком количестве, чтобы пластинка погружалась не более чем на 0,5 см. Когда фронт растворителя поднимается на 10 см, пластинку вынимают из камеры и подсушивают на воздухе в вытяжном шкафу. Затем пластинку опрыскивают проявляющим реактивом N 1, при этом обнаруживают желтые пятна этилового эфира N-3,4-дихлорфенилаланина (R 0,7). Для
f
количественного определения измеряют площадь пятна пробы и соответствующего
ему по размеру и интенсивности окраски пятна стандартной шкалы. Затем пластинку опрыскивают проявляющим реактивом N 2. При этом проявляются коричневые пятна бензоилпропэтила (R 0,6). Окраска пятен устойчива в
f
течение нескольких минут. Для количественного определения также измеряют площадь соответствующего по размеру и интенсивности окраски пятна
стандартной шкалы.
Концентрацию бензоилпропэтила или N-3,4-дихлорфенилаланина этилового эфира в воздухе (Х) в мг/куб. м вычисляют по формуле:
G х S
ст пр
S х V
ст 20
где:
G — количество вещества в пятне стандарта, мкг;
S — площадь пятна пробы, кв. мм; пр
S — площадь пятна стандарта, кв. мм; ст
V — объем воздуха, отобранный для анализа и приведенный к стандартным 20 условиям, л.
VI. Требования безопасности
Соблюдать все необходимые требования техники безопасности при работе в химических лабораториях.
VII. Разработчики
Всесоюзный научно-исследовательский технологический институт гербицидов и регуляторов роста растений (ВНИТИГ), г. Уфа.