--- title: "\"МУК 4.2.964-00. 4.2. Методы контроля. Биологические и микробиологические факторы. Санитарно-паразитологическое исследование воды хозяйственного и питьевого использования. Методические указания\"" number: "МУК 4.2.964-00" status: утратил силу canonical: "https://bukva.ai/docs/ukazanie-ukazaniya-muk-4-2-964-00" --- ## "МУК 4.2.964-00. 4.2. Методы контроля. Биологические и микробиологические факторы. Санитарно-паразитологическое исследование воды хозяйственного и питьевого использования. Методические указания" # "МУК 4.2.964-00. 4.2. Методы контроля. Биологические и микробиологические факторы. Санитарно-паразитологическое исследование воды хозяйственного и питьевого использования. Методические указания" (утв. Минздравом России 22.03.2000) > [!WARNING] > Документ утратил силу в связи с изданием Методических указаний МУК 4.2.2314-08, утв. Главным государственным санитарным врачом РФ 18.01.2008. > Документ [введен](#p100002) в действие с 1 июня 2000 года. > Взамен [МУК 4.2.668-97](https://bukva.ai/docs/muk-4-2-668-97). > [!NOTE] > ИСТОРИЯ ИЗМЕНЕНИЙ НОРМАТИВНО-ТЕХНИЧЕСКИХ АКТОВ ```mermaid flowchart LR n0["МУК 4.2.668-97"]:::rst click n0 "https://bukva.ai/docs/muk-4-2-668-97" "МУК 4.2.668-97. 4.2. Методы контроля. Биологические и микробиологические факторы. Санитарно-паразитологическое исследование воды. Методические указания (утв. Минздравом России 19.0" n1["МУК 4.2.964-00"]:::rst click n1 "https://bukva.ai/docs/ukazanie-ukazaniya-muk-4-2-964-00" "МУК 4.2.964-00. 4.2. Методы контроля. Биологические и микробиологические факторы. Санитарно-паразитологическое исследование воды хозяйственного и питьевого использования. Методичес" n2["МУК 4.2.2314-08"]:::doc n1 --> n2 n0 --> n1 classDef rst fill:#FFEBEB,stroke:#8B0000,color:#000; classDef doc fill:#EBFFEB,stroke:#006400,color:#000; classDef notEnt fill:#FFFFEB,stroke:#FF8C00,color:#000; ```
Утверждаю
Главный государственный
санитарный врач Российской
Федерации - Первый заместитель
Министра здравоохранения
Российской Федерации
**Г.Г.ОНИЩЕНКО**
22 марта 2000 года
#### 4.2 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. БИОЛОГИЧЕСКИЕ **И МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ** **САНИТАРНО-ПАРАЗИТОЛОГИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ ВОДЫ** **ХОЗЯЙСТВЕННОГО И ПИТЬЕВОГО ИСПОЛЬЗОВАНИЯ** **МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ** **МУК 4.2.964-00**
Дата введения
1 июня 2000 года
1. Подготовлены коллективом авторов: Г.И. Новосильцев (к.м.н.), Н.А. Романенко (д.м.н., академик РАЕН), В.А. Рябченко (к.б.н.), Г.С. Горяинова, Т.А. Семенова (к.б.н.), М.Е. Батаева (к.м.н.), Ю.А. Рахманин (д.м.н., академик РАМН), Р.Э. Михайлова (д.м.н.) - ИМПиТМ им. Е.И. Марциновского Минздрава России, НИИКВОВ АКХ им. К.Д. Памфилова, НИИЭЧиГОС им. А.Н. Сысина РАМН. Использованы материалы, разработанные Н.А. Русановой (к.м.н.), Г.Л. Медришем (к.т.н.) - НИИКВОВ АКХ им. К.Д. Памфилова. 2. Утверждены и введены в действие Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации 22 марта 2000 г. 3. С введением настоящих Методических указаний утрачивают силу [МУК 4.2.668-97](https://bukva.ai/docs/muk-4-2-668-97) "Санитарно-паразитологическое исследование воды" и раздел "Контроль качества питьевой воды по паразитологическому показателю (содержание цист лямблий)", пункты 4, 5, 6 Информационно - методического письма "О дополнительных мерах по осуществлению контроля качества питьевой воды по микробиологическим и паразитологическим показателям" от 24 июля 1998 г. N 1100/1670-98-11. ## 1. Назначение и область применения 1.1. Настоящие Методические указания устанавливают метод лабораторного исследования качества воды хозяйственно - питьевого и культурно - бытового водопользования по паразитологическим показателям безопасности для здоровья человека, проводимого в порядке государственного санитарно-эпидемиологического надзора. 1.2. Методические указания предназначены для применения в лабораториях учреждений, осуществляющих государственный санитарно-эпидемиологический надзор, а также ведомственный лабораторный контроль качества окружающей среды на соответствие: - [СанПиН 2.1.4.559-96](https://bukva.ai/docs/postanovlenie-26-goskomsanepidnadzor-rossii) "Питьевая вода. Гигиенические требования к качеству воды централизованных систем питьевого водоснабжения. Контроль качества"; - СанПиН 2.1.2.568-96 "Гигиенические требования к устройству, эксплуатации и качеству воды плавательных бассейнов"; - СанПиН 3.2.563-96 "Профилактика паразитарных болезней на территории Российской Федерации"; - действующим санитарным правилам по охране поверхностных вод от загрязнения. ## 2. Методика санитарно-паразитологического исследования воды хозяйственного и питьевого использования Методика предназначена для обнаружения в воде цист патогенных простейших кишечника (лямблий, амебы дизентерийной, балантидия) и яиц гельминтов, представляющих непосредственную угрозу для здоровья человека при их заглатывании, при осуществлении контроля качества воды по паразитологическим показателям в источниках хозяйственно - питьевого водоснабжения (поверхностных водоемах, ручьях, каптажах, колодцах, артезианских скважинах), в распределительной сети систем централизованного хозяйственно - питьевого водоснабжения, а также в водоемах рекреационного назначения <*>. --- <*> Настоящая Методика не предназначена для индикации в воде ооцист криптоспоридий, т.к. для их определения требуются более сложная подготовка диагностического материала и использование дорогостоящих специальных тест - систем, не выпускаемых в настоящее время отечественными производителями. ### 2.1. Принцип методики Цисты патогенных простейших кишечника и яйца гельминтов обнаруживаются при микроскопическом исследовании осадка, получаемого после центрифугирования не менее 4-кратно разведенного раствора флотанта с плотностью 1,26, в который искомые паразитарные агенты попадают из осадка, смываемого с мембранных фильтров после фильтрации через них исследуемой воды. Осаждение цист простейших и яиц гельминтов происходит за счет резкого снижения плотности флотанта, которая после разведения достигает 1,03 и менее, что ниже плотности паразитарных агентов. Плотность их приводится в [разделе 7.](#p100120) ### 2.2. Чувствительность метода Метод обладает чувствительностью с пределом обнаружения, равным единичным цистам лямблий на 1 л. Эффективность выделения цист лямблий данным методом зависит от исходной концентрации паразитарных патогенов в пробе, объема пробы, мутности, обилия фитопланктона и квалификации исполнителя. ## 3. Оборудование и материалы ### 3.1. Оборудование 3.1.1. Устройство для вакуумной фильтрации через мембранные фильтры: стационарное устройство, используемое для бактериологических и химических исследований в лабораториях водоочистных станций и центров госсанэпиднадзора: фильтровальный аппарат АФ или "Прибор вакуумного фильтрования" ПВФ-142/ЭМ. При отсутствии указанных стационарных установок может быть использован аппарат Гольдмана, состоящий из воронки Гольдмана, колбы для фильтрования под вакуумом номинальной вместимостью 2000 - 5000 мл (ГОСТ 6514-63), водоструйного насоса (ГОСТ 10696-75) или насоса Комовского, а в полевых условиях - ручного велосипедного насоса или других установок, прошедших гигиеническую оценку и имеющих гигиеническое заключение. 3.1.2. Мембранные фильтры с порами размером 3 - 5 мк и диаметром мембранного диска, соответствующим размерам фильтровальной ячейки фильтрующего устройства, - от 35 +/- 2 мм и более. В качестве мембранных фильтров могут быть применены фильтрующие мембраны "Владипор" марки МФАС-СПА ТУ 6-55-221-15-18-98 (предназначены для использования в приборе ПВФ-142/ЭМ), "Миллипор", "Прагопор", "Сарториус" или другие с аналогичными свойствами, прошедшие гигиеническую оценку и имеющие гигиеническое заключение. 3.1.3. Лабораторная центрифуга типа ОПН-3, ОПН-8, ЦЛС-31М со сменным ротором или другие с аналогичными параметрами, обеспечивающие 1500 - 2500 об/мин. (600 - 650 g), позволяющие центрифугировать пробы воды в центрифужных пробирках объемом 10 - 250 мл. 3.1.4. Холодильник электрический или газовый, поддерживающий температуру 4 - 6 град. C. 3.1.5. Термостат электрический типа ТС-80 или аналогичный с автоматическим терморегулятором и термометром с ценой деления 0,2 град. C. 3.1.6. Микроскоп биологический (типа МБИ, "Биолам" и др.), снабженный бинокулярной насадкой (АУ-12 и др.), препаратоводителем (типа СТ-12 и др.), имеющий объективы 10, 20, 40 и объектив 90 - 100x масляной иммерсии, а также желательно объектив 40 - 65x водной иммерсии, обеспечивающий увеличение от 100 до 1000 крат, имеющий объектив и укомплектованный окуляр - микрометром и объект - микрометром для калибровки первого, а также имеющий оптику фазового контраста, расширяющую возможности дифференциации цист от фитопланктона. 3.1.7. Осветитель ОИ-19 для микроскопа или другой аналогичный с мощностью лампы не менее 50 ватт. 3.1.8. Весы лабораторные для взвешивания в диапазоне 50 мг - 200 г равноплечные ручные (аптекарские) с разновесами, ВЛР-200 и др. 3.1.9. Денсиметры (ареометры) типа 1 (А1) с пределами измерения от 1,000 до 1,400 кг/куб. м ГОСТ 1300-74. 3.1.10. Дозаторы пипеточные П1-0,1, П1-0,5, П1-1,0 мл ТУ 64-339-81 или аналогичные. ##### 3.1.11 Пинцет анатомический. 3.1.12. Кисти мягкие из волоса белки, колонка или соболя для живописи N 12 - 18. 3.1.13. Стаканы стеклянные высокие с носиком (ВН) номинальной вместимостью 50 - 100 мл ГОСТ 10394-63. 3.1.14. Пробирки центрифужные градуированные (ПЦГ) емкостью 10 мл ГОСТ 1770-64. ##### 3.1.15 Стекла предметные 25 x 75 мм. ##### 3.1.16 Стекла покровные 18 x 18, 24 x 24 мм ГОСТ 6672-59. ##### 3.1.17 Чашки биологические (Петри) ГОСТ 25336-82. ##### 3.1.18 Часы песочные на 3 - 5 мин. или часы сигнальные. ##### 3.1.19 Штативы лабораторные для пробирок ТУ 64-1-707-80. 3.1.20. Емкости для отбора проб воды из нейтрального материала, пригодные для обеззараживания принятыми методами: канистры пластмассовые емкостью 5 - 10 - 20 - 25 л, стеклянные бутыли, фляги молочные металлические емкостью 30 - 35 л, эмалированные бидоны. 3.1.21. Цилиндры измерительные с носиком 1 - 100, 1 - 250, 1 - 500 ГОСТ 1770-74. ##### 3.1.22 Колба 2-50-2, 2-100-2, 1-1000 ГОСТ 1770-74. ##### 3.1.23 Капельница для многократной дозировки по Манну ГОСТ 9876-61. 3.1.24. Широкогорлые стеклянные или пластиковые флаконы емкостью 100 - 500 мл с притертыми или завинчивающимися крышками. ##### 3.1.25 Спиртовка. ##### 3.1.26 Иглы препаровальные. ##### 3.1.27 Ножницы с прямыми браншами. ### 3.2. Реактивы ##### 3.2.1 Формальдегид 40%-ный (продажный). ##### 3.2.2 Сульфат цинка семиводный (ZnSO4 x 7H2O) х.ч. ##### 3.2.3 Сахароза ч.д.а. ##### 3.2.4 Сульфат магния (MgSO4) ч.д.а. ##### 3.2.5 Тиосульфат натрия [ГОСТ 244-76](https://bukva.ai/docs/postanovlenie-gost-244-76). ##### 3.2.6 Вода дистиллированная ГОСТ 6709-72. ##### 3.2.7 Натрий хлористый х.ч. ГОСТ 4233-77. ##### 3.2.8 Йод кристаллический х.ч. ##### 3.2.9 Калий йодистый (KI) х.ч. ##### 3.2.10 Эозин сухой х.ч. ##### 3.2.11 Метиленовый синий сухой х.ч. ##### 3.2.12 Кислота хлористоводородная (HCl) 30% х.ч. ##### 3.2.13 Сульфат аммония [(NH4)2SO4] х.ч. ##### 3.2.14 Сульфат железа [Fe2(SO4)3] х.ч. ##### 3.2.15 Сульфат меди (CuSO4) х.ч. ##### 3.2.16 Панкреатин сухой. ##### 3.2.17 Сода двууглекислая (Na2CO3). ### 3.3. Приготовление рабочих растворов реактивов ##### 3.3.1 Флотанты - любой из трех ниже названных: - 33%-ный водный раствор семиводного сульфата цинка: 331 г семиводного сульфата цинка растворяют в 1 куб. дм кипящей дистиллированной воды; - 30%-ный водный раствор сахарозы: 300 г сахарозы ч.д.а. растворяют в 1 куб. дм горячей (70 - 80 град. C) дистиллированной воды; - раствор, состоящий из смеси насыщенных растворов сульфата магния (250 г соли растворяют в 1 л воды при температуре 80 град. C), тиосульфата натрия (300 г соли растворяют в 1 л кипящей воды) и дистиллированной воды, соотношение компонентов 3:3:1. После приготовления флотанта и снижения его температуры до 18 град. C контролируют его удельную плотность ареометром. Для выделения цист простейших и яиц гельминтов, представляющих непосредственную опасность заражения человека при заглатывании с водой, удельная плотность флотанта должна быть 1,25 - 1,26. Если величина этого показателя ниже, ее нужно откорректировать, добавляя более концентрированные растворы соответствующих веществ. 3.3.2. 3%-ный раствор Люголя: 1,5 г йода кристаллического и 3 г калия йодистого растворяют в 100 мл дистиллированной воды (первым растворяют калий йодистый), выдерживают в темноте при 37 град. C в течение 3 суток, после чего используют в работе. 3.3.3. 2%-ный водный раствор формалина: 1 часть 40%-ного формальдегида растворяют в 20 частях дистиллированной воды. 3.3.4. Жидкость Барбагалло: 3%-ный формалин на физиологическом растворе (0,85% хлорида натрия). 3.3.5. 1%-ный водный раствор эозина. 3.3.6. Раствор, состоящий из 1 части метиленового синего и 50000 частей дистиллированной воды, готовят путем последовательных разведений. 3.3.7.Смесь (искусственный дуоденальный сок), состоящая из 0,5 г панкреатина, 0,9 г двууглекислой соды и 5 мл дистиллированной воды. ##### 3.3.8 Раствор хлористоводородной кислоты 1%-ный. ## 4. Отбор и хранение проб Отбор проб питьевой воды и воды плавательных бассейнов по количеству и кратности проводят в соответствии с [СанПиН 2.1.4.559-96](https://bukva.ai/docs/postanovlenie-26-goskomsanepidnadzor-rossii) "Питьевая вода. Гигиенические требования к качеству воды централизованных систем питьевого водоснабжения. Контроль качества" и СанПиН 2.1.2.568-96 "Гигиенические требования к устройству, эксплуатации и качеству воды плавательных бассейнов". Контроль воды подземных водоисточников по паразитологическим показателям может быть рекомендован при условии неоднократных неудовлетворительных микробиологических результатов исследования. Количество проб и точек забора в распределительной сети утверждается по согласованию с санитарно-эпидемиологической службой при разработке рабочей программы с учетом численности водопотребителей. Отбор проб воды производится в чистые емкости. Сосуды больших объемов - молочные фляги, металлические и пластмассовые ведра и т.п., которые тщательно промываются кипяченой водой и ополаскиваются отбираемой для анализа водой. Пробы воды могут доставляться в лабораторию без обработки или, в целях облегчения их транспортирования, после предварительной обработки (концентрирования материала путем фильтрования на месте отбора проб, в лаборатории водопроводной станции и др.). С этой же целью может быть использована методика первичной концентрации паразитарных патогенов с помощью таких коагулянтов, как сульфат аммония, сульфат железа, сульфат меди в дозе 0,1 - 0,3 г/л. В пробу воды на месте отбора добавляют коагулянт, затем тщательно перемешивают и отстаивают 1 - 2 ч. После этого надосадочную жидкость удаляют, а осадок переносят в сосуд объемом 1 л и доставляют в лабораторию. Содержимое сосуда вновь отстаивают 1 - 2 ч, а осадок после удаления надосадочной жидкости переносят в центрифужные пробирки 10 - 50 мл (в зависимости от объема осадка) и центрифугируют в течение 5 мин. при 1500 об/мин. Надосадочную жидкость сливают, а к осадку добавляют 3 мл 1%-ного раствора хлористоводородной кислоты для растворения хлопьев коагулянта, перемешивают и центрифугируют в таком же режиме. Надосадочную жидкость удаляют, а осадок обрабатывают по нижеописанной методике. Пробы, не прошедшие предварительную обработку, могут храниться при температуре 15 - 20 град. C не более двух суток. В случае если первичная обработка пробы воды (фильтрование) проводилась вне лаборатории, использованные фильтры помещают в широкогорлый флакон или стеклянную банку, добавляют 30 - 50 мл исходной воды; закрывают флакон или банку завинчивающейся или притертой крышкой, маркируют, указывают дату, место отбора, количество профильтрованной воды и транспортируют в лабораторию для дальнейшего исследования. При невозможности исследования в день отбора материал хранят при 4 град. C не более суток; при отсутствии необходимости определения жизнеспособности цист кишечных простейших и яиц гельминтов материал хранят при 4 град. C не более 3 - 4 суток после добавления в него формальдегида с таким расчетом, чтобы концентрация его в суспензии составила 2%. ## 5. Ход исследования Перед началом фильтрации мембранные фильтры должны быть подвергнуты 10-минутному кипячению в дистиллированной воде для удаления посторонних частиц из пор фильтров, препятствующих оптимальному проведению процесса фильтрации. Питьевая вода исследуется в объеме не менее 50 л, вода водоисточников - в объеме не менее 25 л. Исследуемый объем воды с помощью фильтровального устройства пропускают через мембранные фильтры (см. [раздел](#p100024) "Оборудование и материалы"). По мере замедления процесса фильтрации из-за загрязнения фильтра его заменяют новым, а использованные фильтры с осадком помещают в широкогорлую емкость (стаканчики ВН) с помощью чистого пинцета (предварительно прокипяченного или обработанного спиртом) и заливают исследуемой водой в количестве 30 - 50 мл для сохранения их во влажном состоянии. По окончании фильтрации всей пробы осуществляется смыв осадка с фильтров. Каждый фильтр чистым пинцетом опускается в стаканчик с дистиллированной водой; придерживая пинцетом фильтр, осторожно смывают осадок при помощи чистой мягкой кисточки, затем фильтр еще раз прополаскивают в другой порции дистиллированной воды. При использовании фильтров с диаметром диска более 35 мм рекомендуется разрезать их чистыми ножницами на несколько частей для удобства и более эффективной отмывки. Данную операцию удобнее проводить в чашках Петри. По окончании отмывки всех фильтров кисточку также тщательно прополаскивают в небольшом объеме дистиллированной воды (5 - 10 мл). Процедура отмывки фильтров и кисточки требует особой тщательности во избежание возможных потерь цист простейших и яиц гельминтов. Весь полученный смыв центрифугируют в пробирках емкостью 10 мл или более в течение 5 мин. при 1500 об/мин. (600 g). Надосадочную жидкость сливают. При отсутствии необходимости определения жизнеспособных цист и яиц гельминтов осадок помещают в 6 - 8 мл 2%-ного водного раствора формалина и размешивают. Если предполагается определение жизнеспособности паразитарных патогенов, к осадку добавляют воду для отмывания его. Суспензии вновь центрифугируют в прежнем режиме, после чего удаляют надосадочную жидкость, а к осадку добавляют 3 мл одного из флотантов и тщательно перемешивают чистой стеклянной палочкой. Центрифугируют 5 мин. при 2000 об/мин., или 10 мин. при 1500 об/мин., после чего надосадочную жидкость переносят пипеткой в центрифужную пробирку, разбавляют не менее чем в 4 раза дистиллированной водой. Центрифугируют в прежнем режиме, удаляют надосадочную жидкость, а из осадка готовят препараты на предметных стеклах. В зависимости от задач исследования препарат не окрашивают или подвергают окраске. Если нужно провести только подсчет паразитарных агентов без определения их жизнеспособности, препарат не окрашивается или его окрашивают 1 каплей 3%-ного раствора Люголя. Вероятную жизнеспособность цист лямблий можно определять, окрашивая препарат 1 каплей 1%-ного водного эозина. Готовые препараты накрывают покровным стеклом и микроскопируют, сканируя всю площадь покровного стекла, с использованием 100 - 600-кратного увеличения (объективы - 10x, 40x, окуляры - 10x, 15x) сухой оптической системы. Для определения более тонких внутренних структур цист простейших, имеющих значение для их идентификации, используют масляно - иммерсионный 90 - 100-кратный объектив или фазово - контрастное микроскопирование. Таким образом микроскопируется весь объем полученного осадка. При необходимости проводят визуальную оценку вероятной жизнеспособности цист лямблий и других простейших, а также яиц гельминтов. Микроскопирование и идентификация паразитарных патогенов в пробах воды должны выполняться специалистом, умеющим отличать их от фитопланктона и яиц гидробионтов. На обработку одной пробы требуется не менее 10 человеко-часов. Результат анализа может быть получен не ранее чем на следующий рабочий день после доставки пробы. ## 6. Оценка результатов исследования При микроскопировании подсчитывают число паразитарных патогенов во всем объеме осадка, что соответствует их числу во всей исследованной пробе. Одновременно определяют систематическую принадлежность обнаруживаемых паразитических организмов; идентификация их проводится по следующим признакам. Цисты лямблий - овальная форма, размеры 10 - 14 мк в длину и 6 - 10 мк в ширину; незрелые цисты содержат 2 ядра, зрелые - 4; ядра находятся у переднего полюса цисты. Оболочка цисты отчетливо выражена и большей частью отстает от протоплазмы, что является одним из характерных отличий цист лямблий от цист других простейших. Внутри цисты вдоль по средней линии проходят две опорные нити - аксостили; в косом или поперечном направлении лежат характерные парабазальные тела (2 - в незрелых и 4 - в зрелых цистах), нередко заметен сложно свернутый жгутиковый аппарат. Плотность 1,06 - 1,09. Цисты амебы дизентерийной - округлая, редко овальная форма, размеры от 10 до 16 мк; молодые цисты содержат 1 - 2 ядра с центрально расположенной звездчатой кариосомой, зрелые цисты содержат 4 ядра, в зрелых четырехъядерных и незрелых двухъядерных цистах ядра расположены в различных плоскостях; оболочка цист двухконтурная в виде светлого прозрачного ободка. Одноядерные цисты почти всегда содержат в большом количестве гликоген, который в виде крупной вакуоли с нерезкими очертаниями занимает обычно больше половины цисты и раствором Люголя окрашивается в темно - коричневый цвет. Плотность 1,08 - 1,1. Следует иметь в виду, что в природной воде могут встречаться цисты Entamoeba dispar, идентичные цистам дизентерийной амебы, но не обладающие патогенными свойствами для человека. В этом случае следует в протоколе исследования отмечать находки без указания видовой принадлежности таких цист. Для идентификации их необходимы дополнительные специальные исследования. Однако и в данной ситуации должна быть настороженность в отношении эпидемического неблагополучия. Цисты балантидия кишечного - правильная круглая форма, плотная двухконтурная оболочка, средний размер около 50 мк. Внутри цист имеется крупное бобовидное ядро. Протоплазма однородна, гликоген в ней распылен равномерно. Под оболочкой в некоторых цистах заметно углубление, представляющее собой редуцированный цитостом - органеллу, соответствующую началу пищеварительной трубки многоклеточных. Ресничный покров отсутствует. Плотность 1,1. Яйца аскариды человеческой (свиной) - оплодотворенные яйца овальной или шаровидной формы. Наружная оболочка крупнобугристая, толстая, коричневого цвета (иногда встречаются яйца без наружной бугристой оболочки). Размеры яиц 50 - 70 x 40 - 50 мк. Яйцеклетка мелкозернистая и шаровидная, расположена в центре яйца. Плотность 1,10 - 1,14. Зрелое яйцо (способное заразить при заглатывании) содержит внутри подвижную личинку, свернувшуюся кольцевидно или перекрестно. Яйца токсокары (аскариды собачьей) - почти круглые, 65 - 75 мк в диаметре, с нежноячеистой наружной толстой оболочкой темно - коричневого цвета, внутри яйца видна округлая зародышевая клетка. Зрелые инвазионные яйца содержат внутри подвижную свернувшуюся кольцом или перекрестно личинку. Плотность 1,22. Яйца власоглава - симметричные, имеют лимонообразную или бочонковидную форму. Оболочка темно - коричневая, толстая. На обоих полюсах имеются светлоокрашенные пробковидные образования. Размеры яиц 50 - 54 x 23 - 26 мк. В зрелых инвазионных яйцах видна подвижная личинка. Плотность 1,16 - 1,22. Яйца острицы - асимметричные. Одна сторона заметно уплощена, другая выпукла. Размеры яиц 50 - 60 x 30 - 32 мк. Оболочка тонкая, гладкая и бесцветная. Яйца могут быть на различных стадиях созревания, до головастикоподобной личинки включительно. Плотность 1,14. Яйца цепня карликового - оболочка яйца бесцветная, тонкая, гладкая. Форма овальная. Размер яиц 40 x 50 мк, эмбриофора (зародыш) почти шаровидная (29 x 30 мк), с длинными нитевидными придатками на полюсах. Плотность 1,12. Онкосферы тениид (цепня свиного и эхинококков) - овальная форма, размеры 31 - 40 x 2 - 30 мк; имеют тонкую наружную оболочку и толстую радиально - исчерченную внутреннюю оболочку темно - коричневого цвета. Внутри онкосферы находится зародыш - эмбриофора с шестью зародышевыми крючьями. Плотность 1,24. Отрицательный результат анализа не гарантирует отсутствия паразитарных патогенов в пробе, поэтому результат исследования должен представляться в протоколе термином "не обнаружены". Обнаружение даже одного экземпляра паразитарных патогенов в 1 пробе питьевой воды указывает на эпидемиологическое неблагополучие в системе питьевого водоснабжения. ## 7. Визуальная оценка вероятной жизнеспособности цист патогенных простейших кишечника и яиц гельминтов Оценка вероятной жизнеспособности цист патогенных простейших и яиц гельминтов визуально проводится по следующим критериям, подтверждающим жизнеспособность: - целостность наружной оболочки (отсутствие ее разрывов, вдавлений, выбухания, сморщивания); - четкая внутренняя структура цисты или яйца: у цист - четко видны ядра, отсутствует зернистость. У цист лямблий, кроме того, видны аксостили, жгутиковый аппарат, медиальное тело. Для яиц гельминтов (аскарид, токсокар, власоглавов, остриц) характерно наличие дробящейся зародышевой клетки или подвижной личинки. У живых онкосфер тениид и карликового цепня зародышевые крючья расположены попарно, а у мертвых - беспорядочно; - при окраске препарата 1%-ным водным раствором эозина жизнеспособные цисты лямблий не воспринимают окраску в течение первых 5 мин., мертвые окрашиваются сразу же в розовый цвет. Поэтому указанную окраску следует использовать до микроскопии только в том случае, когда на изучение препарата потребуется не более 5 мин. Часто просмотр мазка длится 15 - 30 мин., тогда 1%-ный водный эозин можно вводить аккуратно, не сдвигая препарат, под покровное стекло пипеткой в точке, где при предварительном просмотре уже обнаружены цисты лямблий; - жизнеспособность онкосфер тениид и яиц аскарид, содержащих личинку, определяют путем окрашивания препарата смесью, содержащей метиленовый синий (см. [п. 3.3.6).](#p100081) Живые онкосферы тениид, а также личинки, находящиеся внутри яиц аскарид, не окрашиваются в течение первых 15 мин. Мертвые окрашиваются сразу в синий цвет; - жизнеспособность онкосфер тениид можно также определить по движению зародышей при воздействии на них пищеварительными ферментами. Для этого исследуемый осадок, содержащий онкосферы, помещают на часовое стекло в искусственный дуоденальный сок (см. [п. 3.3.7).](#p100082) Стекло ставят в термостат при 36 - 38 град. C на 4 ч. Живые зародыши освобождаются от оболочек, а мертвые - нет; - оболочки жизнеспособных онкосфер растворяются также в подкисленном пепсине (pH 5 - 6) и в щелочном растворе трипсина (pH 8 - 8,5) через 6 - 8 ч при температуре 38 град. C. Схема выполнения методики санитарно-паразитологического исследования воды и изображения определяемых с ее помощью цист кишечных простейших и яиц гельминтов представлены в приложениях 1, 2, 3 <*>. --- <*> Не приводятся. ---