---
title: "\"МУК 4.2.1071-01. 4.2. Методы контроля. Микробиологические факторы. Метод микробиологического измерения концентрации препарата ЭМ-1 \"Байкал\" по одному из ведущих компонентов (Lactobacillus casei-21) в воздухе рабочей зоны. Методические указания\""
number: "МУК 4.2.1071-01"
status: действует
canonical: "https://bukva.ai/docs/ukazanie-ukazaniya-muk-4-2-1071-01"
---

## "МУК 4.2.1071-01. 4.2. Методы контроля. Микробиологические факторы. Метод микробиологического измерения концентрации препарата ЭМ-1 "Байкал" по одному из ведущих компонентов (Lactobacillus casei-21) в воздухе рабочей зоны. Методические указания"

# "МУК 4.2.1071-01. 4.2. Методы контроля. Микробиологические факторы. Метод микробиологического измерения концентрации препарата ЭМ-1 "Байкал" по одному из ведущих компонентов (Lactobacillus casei-21) в воздухе рабочей зоны. Методические указания"

(утв. Минздравом России 20.09.2001)

> [!IMPORTANT]
> Документ включен в Перечень основных действующих нормативно-методических документов по методам лабораторного и инструментального контроля в системе государственного санитарно-эпидемиологического нормирования (Письмо Роспотребнадзора от 02.12.2008 N 01/14262-8-32).
> Документ [введен](#p100002) в действие с 20 сентября 2001 года.


<div align="right">

<a id="p100001"></a>Утверждаю<br>
Главный государственный<br>
санитарный врач<br>
Российской федерации,<br>
Первый заместитель<br>
Министра здравоохранения<br>
Российской Федерации<br>
**Г.Г.ОНИЩЕНКО**

</div>

<div align="center">

20 сентября 2001 года

</div>



#### <a id="p100003"></a>4.2 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ


<a id="p100004"></a>**МЕТОД МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОГО ИЗМЕРЕНИЯ КОНЦЕНТРАЦИИ**
**ПРЕПАРАТА ЭМ-1 "БАЙКАЛ" ПО ОДНОМУ ИЗ ВЕДУЩИХ КОМПОНЕНТОВ**
**(LACTOBACILLUS CASEI-21) В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ**

<a id="p100005"></a>**МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ**

<div align="center">

**МУК 4.2.1071-01**

</div>


<div align="right">

<a id="p100002"></a>Дата введения:

</div>

<div align="center">

с момента утверждения

</div>


1. <a id="p100006"></a>Разработаны к.м.н. Сергеюк Н.П. (Научно-исследовательский центр "Экос").
2. <a id="p100007"></a>Утверждены и введены в действие Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации - Первым заместителем Министра здравоохранения Российской Федерации 20 сентября 2001 г.

<div align="center">

3. <a id="p100008"></a>Введены впервые.

</div>



## 1. <a id="p100009"></a>Общие положения и область применения


<a id="p100010"></a>Настоящие методические указания устанавливают методику проведения микробиологического количественного анализа концентраций клеток штамма Lactobacillus casei-21, являющегося ведущим компонентом консорциума микроорганизмов (препарат ЭМ-1 "Байкал") в воздухе рабочей зоны в диапазоне концентрации от 100 до 50000 клеток в 1 куб. м воздуха.
<a id="p100011"></a>Методические указания разработаны с целью обеспечения микробиологического контроля концентрации препарата "Байкал ЭМ-1" по одному из ведущих компонентов Lactobacillus casei-21 в воздухе рабочей зоны и производственных помещений и оценки соответствия уровня его содержания гигиеническим нормативам на основе учета требований ГОСТ 12.1.005-88 "ССБТ. Воздух рабочей зоны. Общие санитарно-гигиенические требования", [ГОСТ Р 8.563-96](https://bukva.ai/docs/postanovlenie-329) "ГСИ. Методики выполнения измерений".
<a id="p100012"></a>Методические указания предназначены для центров госсанэпиднадзора, санитарных лабораторий биотехнологических предприятий, микробиологических лабораторий, научно-исследовательских институтов, работающих в области гигиены окружающей среды и аккредитованных в установленном порядке на право проведения микробиологических исследований.


## 2. <a id="p100013"></a>Характеристика штамма Lactobacillus casei-21


<a id="p100014"></a>Семейство: Lactobacillaceae
<a id="p100015"></a>Род: Lactobacillus

<div align="center">

<a id="p100016"></a>Вид: casei

</div>

<a id="p100017"></a>Штамм: 21.
<a id="p100018"></a>На поверхности плотных питательных сред образует мелкие круглые колонии. Глубинные колонии - вогнутые, иногда с выростами. Форма клеток - палочки разной длины, образуют короткие и длинные цепочки, неподвижные, неспорообразующие, грамположительные. Отмечена также тенденция к образованию заметно искривленных (изогнутых) клеток.


## 3. <a id="p100019"></a>Пределы измерений


<a id="p100020"></a>    Методика  обеспечивает  выполнение измерений количества клеток

<div align="center">

Lactobacillus  casei-21 в воздушной среде в диапазоне концентраций

</div>

от  100  до  50000  клеток  в  1  куб. м воздуха при доверительной
вероятности 0,95. ПДК     - 2000 кл./куб. м.
                     р.з.


## 4. <a id="p100021"></a>Метод измерений


<a id="p100022"></a>Метод основан на аспирации из воздуха клеток Lactobacillus casei-21 на поверхность плотной питательной среды и подсчете выросших колоний по типичным морфологическим признакам.


## 5. <a id="p100023"></a>Средства измерений, вспомогательные устройства, реактивы и материалы


<a id="p100024"></a>При выполнении измерений применяют следующие средства измерений, вспомогательные устройства и материалы.


### <a id="p100025"></a>5.1. Средства измерений, вспомогательные устройства, материалы


<a id="p100026"></a>Прибор для бактериологического анализа воздуха,    ТУ 64-12791-77
модель 818 (щелевой прибор Кротова)
<a id="p100027"></a>Термостаты электрические суховоздушные или
водяные
<a id="p100028"></a>Автоклав электрический ГОСТ 9586-75
<a id="p100029"></a>Бокс, оборудованный бактерицидными лампами
<a id="p100030"></a>Холодильник бытовой
<a id="p100031"></a>Весы лабораторные аналитические типа
**ВЛА-200**
<a id="p100032"></a>Микроскоп биологический с иммерсионной системой
типа "Биолам" Л-211
<a id="p100033"></a>Лупа с увеличением х10 ГОСТ 25706-83
<a id="p100034"></a>Чашки Петри бактериологические плоскодонные
диаметром 100 мм
<a id="p100035"></a>Пробирки биологические вместимостью 20 и 35 мл     ГОСТ 10515-75
<a id="p100036"></a>Пипетки мерные на 1, 5 и 10 мл                     ГОСТ 10515-75
<a id="p100037"></a>Колбы конические вместимостью 250 и 500 мл         ГОСТ 1770-74
<a id="p100038"></a>Секундомер                                         ГОСТ 9586-75
<a id="p100039"></a>Барометр                                           ГОСТ 24696-79
<a id="p100040"></a>Марля медицинская ГОСТ 9412-77
<a id="p100041"></a>Вата медицинская гигроскопическая                  ГОСТ 25556-81.


### <a id="p100042"></a>5.2. Реактивы, растворы


<a id="p100043"></a>Агар микробиологический [ГОСТ 17206-96](https://bukva.ai/docs/postanovlenie-gost-17206-96)
<a id="p100044"></a>Селективная среда для молочнокислых палочек
Lactobacillus casei-21
<a id="p100045"></a>Среда Рогозы (состав питательной среды %):
<a id="p100046"></a>дрожжевой экстракт - 0,5;
<a id="p100047"></a>триптический гидролизат казеина - 1,0;
<a id="p100048"></a>твин-80 - 0,1;
<a id="p100049"></a>глюкоза - 2,0;
<a id="p100050"></a>натрий уксуснокислый - 2,5;
<a id="p100051"></a>лимоннокислый аммоний - 0,2;
<a id="p100052"></a>ледяная уксусная кислота - 0,132;
<a id="p100053"></a>соль Б - (магний сернокислый - 11,5 г; марганец
сернокислый - 2,86 г; железо сернокислое -
0,58 г; вода 100 мл) - 0,5;
<a id="p100054"></a>калий фосфорнокислый однозамещенный - 0,6,
<a id="p100055"></a>рН среды 0,6;
<a id="p100056"></a>вода водопроводная - 100 мл;
<a id="p100057"></a>агар-агар - 1,5.
<a id="p100058"></a>Стерилизация при 3/4 атмосферы 20 мин. После остывания раствора добавляют 9 мл этилового спирта для подавления посторонней микрофлоры и разливают данный раствор асептично по 20 мл в чашки Петри.


## 6. <a id="p100059"></a>Требования безопасности


<a id="p100060"></a>При выполнении измерений концентрации клеток Lactobacillus casei-21 в воздушной среде соблюдают:
- <a id="p100061"></a>правила техники безопасности при работе с химическими реактивами в соответствии с ГОСТ 12.1.005-88;
- <a id="p100062"></a>правила электробезопасности при работе с электроустановками в соответствии с ГОСТ 12.1.019-79 и инструкцию по эксплуатации прибора;
- <a id="p100063"></a>требования, изложенные в руководстве "Положение об организации работы по технике безопасности в микробиологической промышленности" (1980);
- <a id="p100064"></a>положения "Инструкций по устройству, требованиям безопасности и личной гигиены при работе в микробиологических лабораториях предприятий микробиологической промышленности" (1977).


## 7. <a id="p100065"></a>Требования к квалификации операторов


<a id="p100066"></a>К выполнению измерений и обработке их результатов допускаются лица с высшим или средним специальным образованием, прошедшие соответствующую подготовку и имеющие навыки работы в области микробиологических исследований.


## 8. <a id="p100067"></a>Условия измерений


<a id="p100068"></a>Процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят в нормальных условиях в соответствии с ГОСТ 15150-69 при температуре воздуха (20 +/- 5) °С, атмосферном давлении 630 - 800 мм рт. ст. и влажности воздуха не более 80%.


## 9. <a id="p100069"></a>Проведение измерений



### <a id="p100070"></a>9.1. Условия отбора проб воздуха


<a id="p100071"></a>Для определения микроорганизма воздух аспирируют при помощи аппарата Кротова со скоростью 10 л/мин. на поверхность плотной питательной среды. Время аспирации воздуха 20 мин. Аппарат Кротова перед каждым отбором пробы воздуха тщательно протирают спиртом. Особенно тщательно обрабатывают поверхность подвижного диска и внутреннюю стенку прибора, наружную и внутреннюю стенку крышки. На подвижный диск устанавливают подготовленную чашку Петри со средой, одновременно снимая с нее крышку. Прибор закрывают. Соприкосновение крышки прибора со средой недопустимо. После отбора пробы воздуха и остановки диска прибор открывают, быстро снимают чашку Петри и закрывают крышкой от данной чашки. На дне чашки Петри стеклографом отмечают точку контроля, время аспирации и дату отбора пробы.


### <a id="p100072"></a>9.2. Выполнение анализа


<a id="p100073"></a>Метод предполагает учет количества типичных по морфологическим признакам колоний, выросших на 3 - 4 сутки после посева воздуха. Прямой метод позволяет учитывать на чашке до 200 колоний.
<a id="p100074"></a>Селективную среду тщательно перемешивают и разливают по 20 мл в стеклянные чашки Петри на горизонтальной поверхности. Чашки с застывшей средой помещают в термостат на сутки при температуре 37 °С, после чего проросшие чашки бракуют, стерильные чашки используют для контроля воздуха.
<a id="p100075"></a>После отбора проб воздуха чашки Петри инкубируют в термостате при 36 °С, через 72 ч производят подсчет выросших типичных колоний. При необходимости культуру подвергают микрокопированию.


## 10. <a id="p100076"></a>Вычисление результатов измерений


<a id="p100077"></a>Расчет концентрации клеток в 1 куб. м воздуха производят по формуле:

                         N х 1000
<a id="p100078"></a>                     X = --------, кл./куб. м,
                            V

<a id="p100079"></a>где:
<a id="p100080"></a>Х - концентрация клеток в воздухе;
<a id="p100081"></a>N - количество колоний, выросших на чашке;
<a id="p100082"></a>1000 - коэффициент перерасчета на 1 куб. м воздуха;
<a id="p100083"></a>V - объем воздуха, л (произведение скорости на время аспирации).
<a id="p100084"></a>Препарат "Байкал ЭМ-1" представляет собой консорциум микроорганизмов, в котором Lactobacillus casei-21 составляют 30% от общего числа микроорганизмов, Streptococcus lactis - 30%, бактерии фотосинтеза Phodopseudomonas palistris - 30%, сахаромицеты - Saccaromyces cerevisial - 10%. Концентрацию препарата "Байкал ЭМ-1" рассчитывают исходя из процентного отношения микроорганизмов, входящих в его состав, по формуле:

<a id="p100085"></a>                         А = 100 х N / d,

<a id="p100086"></a>где:
<a id="p100087"></a>А - концентрация консорциума (кл./куб. м);
<a id="p100088"></a>N - концентрация контрольного микроорганизма (кл/куб. м);

<div align="center">

<a id="p100089"></a>d - содержание контрольного микроорганизма в консорциуме (%).

</div>

<a id="p100090"></a>Контрольным микроорганизмом для данной методики является Lactobacillus casei-21.


## 11. <a id="p100091"></a>Оформление результатов измерений


<div align="center">

<a id="p100092"></a>Результаты измерений оформляют протоколом по форме.

</div>


<a id="p100093"></a>Протокол N ____
количественного микробиологического анализа препарата
ЭМ-1 "Байкал" в воздухе рабочей зоны

<a id="p100094"></a>Дата проведения анализа ____________________________
<a id="p100095"></a>Место отбора пробы _________________________________

<div align="center">

<a id="p100096"></a>Название лаборатории _______________________________

</div>

<a id="p100097"></a>Юридический адрес организации ______________________

<a id="p100098"></a>Результаты микробиологического анализа


| Шифр или N пробы | Определяемый микроорганизм | Концентрация, кл./куб. м |
| --- | --- | --- |


<a id="p100100"></a>Ответственный исполнитель

<div align="center">

<a id="p100101"></a>Научный руководитель

</div>




<a id="p100102"></a>

---