МУК 4.1.837-99. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Методические указания по измерению концентраций 1-метил-2-фенилтиометил-3-карбэтокси-5-окси-6-броминдола (тиоидола) и 1,2-диметил-3-карбэтокси-5-ацетоксииндола (ацетоксииндола) в воздухе рабочей зоны методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

(утв. Минздравом России 31.12.1999)

4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ИЗМЕРЕНИЮ КОНЦЕНТРАЦИЙ 1-МЕТИЛ-2-ФЕНИЛТИОМЕТИЛ-3- КАРБЭТОКСИ-5-ОКСИ-6-БРОМИНДОЛА (ТИОИДОЛА) И 1,2-ДИМЕТИЛ-3- КАРБЭТОКСИ-5-АЦЕТОКСИИНДОЛА (АЦЕТОКСИИНДОЛА) В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ МЕТОДОМ ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ

Методические указания подготовлены коллективом специалистов в рамках Проблемной Комиссии «Научные основы гигиены труда и профпатологии». Утверждены Первым заместителем Министра здравоохранения Российской Федерации, Председателем Комиссии по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г.Г. Онищенко в декабре 1999 г.

Методические указания по измерению концентраций вредных веществ в воздухе рабочей зоны (сборник 35) разработаны с целью обеспечения контроля соответствия фактических концентраций вредных веществ их предельно допустимым концентрациям (ПДК) и ориентировочным безопасным уровням воздействия (ОБУВ) — санитарно-гигиеническим нормативам и являются обязательными при осуществлении санитарного контроля.

Методические указания разработаны и подготовлены в соответствии с требованиями ГОСТ 12.1.005-88 ССБТ «Воздух рабочей зоны. Общие санитарно-гигиенические требования».

Методики выполнены с использованием современных методов исследования, метрологически аттестованы и дают возможность контролировать концентрации химических веществ на уровне и меньше их ПДК и ОБУВ в воздухе рабочей зоны, установленных в ГН 2.2.5.686-98 «Предельно допустимые концентрации (ПДК) вредных веществ в воздухе рабочей зоны» и ГН 2.2.5.687-98 «Ориентировочные безопасные уровни воздействия (ОБУВ) вредных веществ в воздухе рабочей зоны».

(Структурная формула не приводится)

М. м. 275,33

Ацетоксииндол — 1,2-диметил-3-карбэтокси-5-ацетоксииндол.

(Структурная формула не приводится)

М. м. 420,33

Тиоиндол — 1-метил-2-фенилтиометил-3-карбэтокси-5-окси-6-броминдол.

№ п/п	Название вещества	Агрегатное состояние	Т , пл °С	Растворимость	В воздухе находится в виде
1.	Ацетоксииндол	Кристаллический гранулированный порошок кремового цвета	128 — 129	В воде не растворим, растворим в органических растворителях	Аэрозоль
2.	Тиоиндол	Кристаллический порошок густого кремового цвета	185	Не растворим в воде, растворим в спирте, ацетоне	Аэрозоль

Обладают общетоксическим действием.

ОБУВ в воздухе — 5,0 мг/куб. м.

Характеристика метода

Определение основано на применении высокоэффективной жидкостной хроматографии с применением УФ-детектора.

Отбор проб проводят с концентрированием на фильтр.

Нижний предел измерения вещества в хроматографируемом объеме (10 мкл) — 0,06 мкг.

Нижний предел измерения вещества в воздухе — 2,4 мг/куб. м (при отборе 2,5 л воздуха).

Диапазон измеряемых концентраций вещества в воздухе от 2,4 до 36,0 мг/куб. м.

Измерению не мешают метанол, уксусная кислота.

Суммарная погрешность измерения не превышает +/- 20%.

Время выполнения измерения 2 часа, включая отбор проб.

Приборы, аппаратура, посуда

Микроколоночный жидкостной хроматограф с УФ-детектором.

Хроматографическая колонка из нержавеющей стали длиной 80 мм, внутренним диаметром 2,0 мм, заполненная сорбентом «Силасорб-Диол».

Фильтродержатель.

Аспирационное устройство, модель 822, ТУ 64-1-862-72.

Колбы мерные вместимостью 25,0, 100 мл, ГОСТ 1770-74.

Пипетки вместимостью 1, 5, 10 мл, ГОСТ 23932-79.

Пробирки с пришлифованными пробками вместимостью 10 мл, ГОСТ 10515-75.

Стаканы химические вместимостью 50 мл, ГОСТ 10394-72.

Колбы грушевидные вместимостью 25 мл, ГОСТ 1770-74.

Фильтры нейлоновые с диаметром пор 0,45 мкм.

Вакуумная установка.

Реактивы, растворы, материалы

Ацетоксииндол.

Тиоиндол.

Спирт метиловый, ГОСТ 6995-77.

Элюент: метиловый спирт, дегазируют пропусканием гелия в течение 10 мин.

Стандартный раствор № 1 с концентрацией 100 мкг/мл ацетоксииндола готовят растворением 0,01 г вещества в спирте метиловом в мерной колбе вместимостью 100 мл. Раствор устойчив в течение недели при хранении в холодильнике.

Стандартный раствор № 1 с концентрацией 100 мкг/мл тиоиндола готовят растворением 0,01 г вещества в спирте метиловом в мерной колбе вместимостью 100 мл. Раствор устойчив в течение недели при хранении в холодильнике.

Градуировочные растворы с концентрацией в сумме 6,0-10,0-15,0-30,0-60,0-90,0 мкг/мл ацетоксииндола и тиоиндола готовят соответствующим разбавлением стандартных растворов № 1 спиртом метиловом в одной мерной колбе вместимостью 25 мл.

Растворы устойчивы в течение недели при хранении в холодильнике.

Фильтры АФА-ВП-10, ТУ 85-743-80.

Отбор пробы воздуха

Воздух с объемным расходом 1 л/мин. аспирируют через фильтр АФА-ВП-10, помещенный в фильтродержатель. Для измерения 0,5 ОБУВ достаточно отобрать 2,5 л воздуха.

Подготовка к измерению

Инжектируют в колонку хроматографа по 10 мкл градуировочных растворов, что соответствует 0,06-0,1-0,15-0,3-0,6-0,9 мкг веществ.

Условия хроматографирования градуировочных смесей и анализируемых проб:

    Температура термостата колонки             +20 °С
    Скорость подачи элюента                    50 мкл/мин.
    Длина волны УФ-детектора                   220 нм
    Чувствительность определения               3,2 ед. опт. плотн.

УФ-детектора

    Время удерживания веществ                  4,7 мин.
    Максимальный объем вводимой пробы          10 мкл
    Скорость движения диаграммной ленты        180 мм/час.

На полученной хроматограмме измеряют площади пиков и строят градуировочную кривую, выражающую зависимость площади пиков (кв. мм) от содержания вещества в хроматографируемом объеме пробы (мкг).

Построение градуировочного графика необходимо проводить не менее чем по 6 точкам, выполняя 5 параллельных измерений для каждой концентрации. Проверку градуировочного графика следует проводить при изменении условий анализа, но не реже 1 раза в месяц.

Проведение измерения

Фильтр с отобранной пробой помещают в химический стакан, заливают 6 мл метанола. Отставляют на 10 — 15 мин., периодически помешивая стеклянной палочкой для лучшего растворения веществ. Степень десорбции веществ с фильтра составляет 98%. Полученный раствор сливают в грушевидную колбу и упаривают под вакуумом при температуре 50 — 60 °С до сухого остатка. Сухой остаток растворяют в 1,0 мл метанола, фильтруют через фильтр в пробирку или центрифугируют для освобождения от механических частиц и анализируют на хроматографе аналогично градуировочным растворам, инжектируя пробу 10 мкл. Если высота пика вещества находится вне пределов градуировочного графика, то экстракт разбавляют растворителем до такой концентрации раствора, при которой высота пика анализируемого соединения будет находиться примерно на середине градуировочного графика. Определение проводят 3 — 5 раз и полученные данные усредняют.

Количественное определение содержания веществ в анализируемой пробе проводят по предварительно построенному градуировочному графику.

Расчет концентрации

Концентрацию веществ в воздухе «С» (мг/куб. м) вычисляют по формуле:

                            а х В

С = -----, б х V

где:

а — содержание веществ в хроматографируемом объеме пробы, найденное по градуировочному графику, мкг;

В — общий объем раствора пробы, мл;

б — объем раствора пробы, взятый для хроматографирования, мл;

V — объем воздуха, отобранный для анализа и приведенный к стандартным условиям, л (см. Приложение 1).

Приложение 1

Приведение объема воздуха к стандартным условиям (температура 20 °С и давление 760 мм рт. ст.) проводят по формуле:

                       V  (273 + 20) х Р
                        t

                     V   = ------------------,
                      20   (273 + t) х 101,33

где:
V  - объем воздуха, отобранный для анализа, л;
 t
Р  -  барометрическое   давление,   кПа  (101,33   кПа   = 760

мм рт. ст.); t — температура воздуха в месте отбора пробы, °С.

Для удобства расчета V следует пользоваться таблицей 20 коэффициентов (Приложение 2). Для приведения воздуха к стандартным условиям надо умножить V на соответствующий коэффициент. t

°С	Давление Р, кПа/мм рт. ст.
	97,33/ 730	97,86/ 734	98,4/ 738	98,93/ 742	99,46/ 746	100/750	100,53/ 754	101,06/ 758	101,33/ 760	101,86/ 764
-30	1,1582	1,1646	1,1709	1,1772	1,1836	1,1899	1,1963	1,2026	1,2058	1,2122
-26	1,1393	1,1456	1,1519	1,1581	1,1644	1,1705	1,1768	1,1831	1,1862	1,1925
-22	1,1212	1,1274	1,1336	1,1396	1,1458	1,1519	1,1581	1,1643	1,1673	1,1735
-18	1,1036	1,1097	1,1158	1,1218	1,1278	1,1338	1,1399	1,1460	1,1490	1,1551
-14	1,0866	1,0926	1,0986	1,1045	1,1105	1,1164	1,1224	1,1284	1,1313	1,1373
-10	1,0701	1,0760	1,0819	1,0877	1,0986	1,0994	1,1053	1,1112	1,1141	1,1200
-6	1,0540	1,0599	1,0657	1,0714	1,0772	1,0829	1,0887	1,0945	1,0974	1,1032
-2	1,0385	1,0442	1,0499	1,0556	1,0613	1,0669	1,0726	1,0784	1,0812	1,0869
0	1,0309	1,0366	1,0423	1,0477	1,0535	1,0591	1,0648	1,0705	1,0733	1,0789
+2	1,0234	1,0291	1,0347	1,0402	1,0459	1,0514	1,0571	1,0627	1,0655	1,0712
+6	1,0087	1,0143	1,0198	1,0253	1,0309	1,0363	1,0419	1,0475	1,0502	1,0557
+10	0,9944	0,9999	1,0054	1,0108	1,0162	1,0216	1,0272	1,0326	1,0353	1,0407
+14	0,9806	0,9860	0,9914	0,9967	1,0027	1,0074	1,0128	1,0183	1,0209	1,0263
+18	0,9671	0,9725	0,9878	0,9880	0,9884	0,9936	0,9989	1,0043	1,0069	1,0122
+20	0,9605	0,9658	0,9711	0,9783	0,9816	0,9868	0,9921	0,9974	1,0000	1,0053
+22	0,9539	0,9592	0,9645	0,9696	0,9749	0,9800	0,9853	0,9906	0,9932	0,9985
+24	0,9475	0,9527	0,9579	0,9631	0,9683	0,9735	0,9787	0,9839	0,9865	0,9917
+26	0,9412	0,9464	0,9516	0,9566	0,9618	0,9669	0,9721	0,9773	0,9799	0,9851
+28	0,9349	0,9401	0,9453	0,9503	0,9555	0,9605	0,9657	0,9708	0,9734	0,9785
+30	0,9288	0,9339	0,9391	0,9440	0,9432	0,9542	0,9594	0,9645	0,9670	0,9723
+34	0,9167	0,9218	0,9268	0,9318	0,9368	0,9418	0,9468	0,9519	0,9544	0,9595
+38	0,9049	0,9099	0,9149	0,9199	0,9248	0,9297	0,9347	0,9397	0,9421	0,9471

Приложение 3

---