МУК 4.1.812-99. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Методические указания по измерению концентрации бис[1(1Н-2-пиридонил)]глиоксаля в воздухе рабочей зоны методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

(утв. Минздравом России 30.12.1999)

4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ИЗМЕРЕНИЮ КОНЦЕНТРАЦИИ БИС[1-(1Н-2-ПИРИДОНИЛ)]ГЛИОКСАЛЯ В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ МЕТОДОМ ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ

Методические указания подготовлены коллективом специалистов в рамках Проблемной Комиссии «Научные основы гигиены труда и профпатологии». Утверждены Первым заместителем Министра здравоохранения Российской Федерации, Председателем Комиссии по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г.Г. Онищенко в декабре 1999 г.

Методические указания по измерению концентраций вредных веществ в воздухе рабочей зоны (сборник 35) разработаны с целью обеспечения контроля соответствия фактических концентраций вредных веществ их предельно допустимым концентрациям (ПДК) и ориентировочным безопасным уровням воздействия (ОБУВ) — санитарно-гигиеническим нормативам и являются обязательными при осуществлении санитарного контроля.

Методические указания разработаны и подготовлены в соответствии с требованиями ГОСТ 12.1.005-88 ССБТ «Воздух рабочей зоны. Общие санитарно-гигиенические требования».

Методики выполнены с использованием современных методов исследования, метрологически аттестованы и дают возможность контролировать концентрации химических веществ на уровне и меньше их ПДК и ОБУВ в воздухе рабочей зоны, установленных в ГН 2.2.5.686-98 «Предельно допустимые концентрации (ПДК) вредных веществ в воздухе рабочей зоны» и ГН 2.2.5.687-98 «Ориентировочные безопасные уровни воздействия (ОБУВ) вредных веществ в воздухе рабочей зоны».

(Структурная формула не приводится)

М. м. 244

С Н № О — белый или светло-желтый кристаллический порошок с 12 8 2 4

температурой плавления 130 - 185  °С  (с разл.).  Не  растворим  в
воде,   неполярных   органических   растворителях,   растворим   в
ацетонитриле,   метаноле   и   этаноле.   Обладает  незначительной

гигроскопичностью.

Относится к амидам щавелевой кислоты, применяется в качестве компонента хемилюминисцентной композиции.

В воздухе <...> находится в виде аэрозоля.

Раздражающим действием на кожные покровы не обладает, слизистые оболочки глаза раздражает только при воздействии порошка. ОБУВ в воздухе — 1 мг/куб. м.

Характеристика метода

Метод основан на использовании высокоэффективной жидкостной хроматографии с применением УФ-детектора. Отбор проб проводят с концентрированием на фильтр.

Нижний предел измерения концентрации вещества в воздухе — 0,5 мг/куб. м (при отборе 50 л воздуха).

Нижний предел измерения — 0,25 мкг в анализируемом объеме пробы.

Диапазон измеряемых концентраций — 0,5 — 8,0 мг/куб. м.

Метод избирателен в присутствии дихлорангидрида щавелевой кислоты, пиридона-2 и ацетата 2-гидроксипиридина.

Суммарная погрешность не превышает +/- 19,5%.

Время выполнения измерений, включая отбор проб, 2 часа.

Приборы, аппаратура, посуда

Хроматограф жидкостной микроколоночный типа «Милихром» с ультрафиолетовым детектором или хроматограф жидкостной другой марки, позволяющий детектировать пробы при 330 нм.

Колонка аналитическая хроматографическая КАХ-2. Длина колонки 80 мм, внутренний диаметр 2 мм.

Аспиратор для отбора проб воздуха, модель 822, ТУ 64-1-862-82.

Испаритель вакуумный, типа ЭРА-М.

Весы аналитические типа ВЛА-200 или ВЛР-200, ГОСТ 24104-80.

Пипетка 6-2-10, ГОСТ 20292-74.

Пипетка 8-2-0,2, ГОСТ 20292-74.

Стаканчик СВ-24/10, ГОСТ 25336-82.

Колба 0-25-14/23-ТС, ГОСТ 25336-82.

Колба 4-10-2, ГОСТ 1770-74.

Колба 4-50-2, ГОСТ 1770-74.

Цилиндр 4-100, ГОСТ 1770-74.

Цилиндр 1-10, ГОСТ 1770-74.

Воронка фильтрующая ВФ-ПОР 3,0 ХС, ГОСТ 25336-82.

Пробирка П40-17-100-14/23 ХС, ГОСТ 25336-82.

Реактивы, растворы и материалы

Бис[1-(1Н-2-пиридонил)]глиоксаль, 98%-ный.

Ацетонитрил, х.ч. ТУ 6-09-3534-87, подвергают дистилляции и фильтруют перед приготовлением подвижной фазы.

Метанол, х.ч., ГОСТ 6995-67, подвергают дистилляции и фильтруют перед приготовлением подвижной фазы.

Вода дистиллированная, ГОСТ 6709-72, подвергают дистилляции и фильтруют перед приготовлением подвижной фазы.

Подвижная фаза для ВЭЖХ состоит из смеси ацетонитрила, метанола и воды в объемном соотношении 20:25:55. Перед использованием подвижную фазу фильтруют и дегазируют.

Аналитический аэрозольный фильтр АФА-ВП-20, ТУ 957181-76.

Стандартный раствор бис[1-(1Н-2-пиридонил)]глиоксаля, содержащий 2 мг/мл препарата. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 0,1 г бис[1-(1Н-2-пиридонил)]глиоксаля и растворяют навеску в ацетонитриле. Раствор устойчив в течение 5 суток при хранении в темном месте.

Насадка хроматографической колонки — Сепарон SGS RP С18-супер (размер частиц 7 мкм) или подобного типа.

Отбор проб воздуха

Воздух с объемным расходом 10 л/мин. аспирируется через фильтр АФА-ВП-20. Для определения 1/2 ОБУВ следует отобрать 50 л воздуха.

Срок хранения фильтра в темном месте — 5 суток.

Подготовка к измерению

Хроматографическую колонку, заполненную в заводских условиях, производства НПО «Научприбор» или МНПП «Элсико», имеющую эффективность не менее 5000 теоретических тарелок, подсоединяют к хроматографу.

Для количественного определения используют метод абсолютной калибровки. В хроматографическую колонку вводят по 2 мкл градуировочного раствора, приготовленного соответствующим разбавлением стандартного раствора, с концентрацией 0,125; 0,50; 1,0; 1,50 и 2 мг/мл.

На основании полученных данных строят градуировочный график, выражающий зависимость высоты пика от концентрации вещества. Построение градуировочного графика проводят из 5 параллельных определений для каждого раствора.

Условия хроматографирования градуировочных смесей и анализируемых проб:

Скорость потока подвижной фазы — 50 мкл/мин.;

Длина волны УФ-детектора — 330 нм;

Диапазон чувствительности — 0,4 ед. опт. плотности;

Время сканирования — 0,6 с;

Диапазон измерений самописца — 10 мв;

Скорость диаграммной ленты — 180 мм/час;

Объем вводимой пробы — 2 мкл;

Время удерживания — 9 мин.

Проведение измерения

Фильтры с отобранными пробами помещают в стаканчик, вносят 10 мл ацетонитрила, выдерживают при комнатной температуре 1 ч, раствор декантируют в колбу для упаривания, отжимают фильтр стеклянной палочкой о стенки стаканчика, фильтр удаляют, отжатый с фильтра раствор выливают в колбу для упаривания. Стаканчик промывают 5 мл ацетонитрила и растворитель переносят в колбу для упаривания. Объединенный экстракт фильтруют, упаривают досуха на роторном испарителе, сухой остаток растворяют в 0,2 мл ацетонитрила.

Вводят в хроматографическую колонку 2 мкл пробы, записывают хроматограмму, измерят высоту пика и по градуировочному графику находят концентрацию определяемого вещества.

Расчет концентрации

Концентрацию вещества «С» в мг/куб. м в воздухе вычисляют по формуле:

                            а х в

С = -----, б х V

где:

а — количество вещества в хроматографируемом объеме пробы, найденное по градуировочному графику, мкг;

в — общий объем раствора пробы, мл;

б — объем раствора пробы, взятый для анализа, мл;

V — объем воздуха, отобранный для анализа и приведенный к стандартным условиям, л (см. Приложение 1).

Приложение 1

Приведение объема воздуха к стандартным условиям (температура 20 °С и давление 760 мм рт. ст.) проводят по формуле:

                        V  (273 + 20) х Р
                         t

                     V   = ------------------,
                      20   (273 + t) х 101,33

где:
V  - объем воздуха, отобранный для анализа, л;
 t
Р  -   барометрическое   давление,   кПа  (101,33  кПа  =  760

мм рт. ст.); t — температура воздуха в месте отбора пробы, °С.

Для удобства расчета V следует пользоваться таблицей 20 коэффициентов (Приложение 2). Для приведения воздуха к стандартным условиям надо умножить V на соответствующий коэффициент. t

°С	Давление Р, кПа/мм рт. ст.
	97,33/ 730	97,86/ 734	98,4/ 738	98,93/ 742	99,46/ 746	100/750	100,53/ 754	101,06/ 758	101,33/ 760	101,86/ 764
-30	1,1582	1,1646	1,1709	1,1772	1,1836	1,1899	1,1963	1,2026	1,2058	1,2122
-26	1,1393	1,1456	1,1519	1,1581	1,1644	1,1705	1,1768	1,1831	1,1862	1,1925
-22	1,1212	1,1274	1,1336	1,1396	1,1458	1,1519	1,1581	1,1643	1,1673	1,1735
-18	1,1036	1,1097	1,1158	1,1218	1,1278	1,1338	1,1399	1,1460	1,1490	1,1551
-14	1,0866	1,0926	1,0986	1,1045	1,1105	1,1164	1,1224	1,1284	1,1313	1,1373
-10	1,0701	1,0760	1,0819	1,0877	1,0986	1,0994	1,1053	1,1112	1,1141	1,1200
-6	1,0540	1,0599	1,0657	1,0714	1,0772	1,0829	1,0887	1,0945	1,0974	1,1032
-2	1,0385	1,0442	1,0499	1,0556	1,0613	1,0669	1,0726	1,0784	1,0812	1,0869
0	1,0309	1,0366	1,0423	1,0477	1,0535	1,0591	1,0648	1,0705	1,0733	1,0789
+2	1,0234	1,0291	1,0347	1,0402	1,0459	1,0514	1,0571	1,0627	1,0655	1,0712
+6	1,0087	1,0143	1,0198	1,0253	1,0309	1,0363	1,0419	1,0475	1,0502	1,0557
+10	0,9944	0,9999	1,0054	1,0108	1,0162	1,0216	1,0272	1,0326	1,0353	1,0407
+14	0,9806	0,9860	0,9914	0,9967	1,0027	1,0074	1,0128	1,0183	1,0209	1,0263
+18	0,9671	0,9725	0,9878	0,9880	0,9884	0,9936	0,9989	1,0043	1,0069	1,0122
+20	0,9605	0,9658	0,9711	0,9783	0,9816	0,9868	0,9921	0,9974	1,0000	1,0053
+22	0,9539	0,9592	0,9645	0,9696	0,9749	0,9800	0,9853	0,9906	0,9932	0,9985
+24	0,9475	0,9527	0,9579	0,9631	0,9683	0,9735	0,9787	0,9839	0,9865	0,9917
+26	0,9412	0,9464	0,9516	0,9566	0,9618	0,9669	0,9721	0,9773	0,9799	0,9851
+28	0,9349	0,9401	0,9453	0,9503	0,9555	0,9605	0,9657	0,9708	0,9734	0,9785
+30	0,9288	0,9339	0,9391	0,9440	0,9432	0,9542	0,9594	0,9645	0,9670	0,9723
+34	0,9167	0,9218	0,9268	0,9318	0,9368	0,9418	0,9468	0,9519	0,9544	0,9595
+38	0,9049	0,9099	0,9149	0,9199	0,9248	0,9297	0,9347	0,9397	0,9421	0,9471

Приложение 3

---