МУК 4.1.810-99. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Методические указания по измерению концентрации бикарфена гидрохлорида в воздухе рабочей зоны методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

(утв. Минздравом России 30.12.1999)

4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ИЗМЕРЕНИЮ КОНЦЕНТРАЦИИ БИКАРФЕНА ГИДРОХЛОРИДА В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ МЕТОДОМ ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ

Методические указания подготовлены коллективом специалистов в рамках Проблемной Комиссии «Научные основы гигиены труда и профпатологии». Утверждены Первым заместителем Министра здравоохранения Российской Федерации, Председателем Комиссии по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г.Г. Онищенко в декабре 1999 г.

Методические указания по измерению концентраций вредных веществ в воздухе рабочей зоны (сборник 35) разработаны с целью обеспечения контроля соответствия фактических концентраций вредных веществ их предельно допустимым концентрациям (ПДК) и ориентировочным безопасным уровням воздействия (ОБУВ) — санитарно-гигиеническим нормативам и являются обязательными при осуществлении санитарного контроля.

Методические указания разработаны и подготовлены в соответствии с требованиями ГОСТ 12.1.005-88 ССБТ «Воздух рабочей зоны. Общие санитарно-гигиенические требования».

Методики выполнены с использованием современных методов исследования, метрологически аттестованы и дают возможность контролировать концентрации химических веществ на уровне и меньше их ПДК и ОБУВ в воздухе рабочей зоны, установленных в ГН 2.2.5.686-98 «Предельно допустимые концентрации (ПДК) вредных веществ в воздухе рабочей зоны» и ГН 2.2.5.687-98 «Ориентировочные безопасные уровни воздействия (ОБУВ) вредных веществ в воздухе рабочей зоны».

(Структурная формула не приводится)

М. м. 393,97

Бикарфен гидрохлорид — белое кристаллическое вещество. Не растворим в гексане. Хорошо растворим в этаноле, метаноле, ацетонитриле, воде.

В воздухе находится в виде аэрозоля.

Обладает общетоксическим действием.

ОБУВ в воздухе — 0,5 мг/куб. м.

Характеристика метода

Метод основан на использовании высокоэффективной жидкостной хроматографии с применением УФ-детектора.

Отбор проб проводится с концентрированием на фильтр.

Нижний предел измерения бикарфена гидрохлорида в хроматографируемом объеме (50 мкл) — 1 мкг.

Нижний предел измерения бикарфена гидрохлорида в воздухе — 0,25 мг/куб. м (при отборе 40 л воздуха).

Диапазон измеряемых концентраций бикарфена гидрохлорида в воздухе от 0,25 до 5 мг/куб. м.

Метод специфичен в условиях производства.

Суммарная погрешность определения не превышает +/- 20%.

Время выполнения анализа, включая отбор проб, около 60 мин.

Приборы, аппаратура, посуда

Микроколоночный жидкостной хроматограф «Милихром» или другие модели с УФ-детектором.

    Хроматографическая  колонка  длиной 150 мм, внутренним диаметром
3 мм, заполненная сербентом "Силасорб SpH C  ".

                                       18

Колбы мерные вместимостью 50 и 100 мл, ГОСТ 1770-74.

Пробирки с пришлифованными пробками вместимостью 10 мл, ГОСТ 10515-75.

Пипетки мерные вместимостью 1, 2, 5, 10 мл, ГОСТ 20292-74.

Воронки химические, ТУ 25-11-1061-75.

Ротационный испаритель.

Колбы грушевидные для вакуумной перегонки вместимостью 50 мл.

Реактивы, растворы, материалы

Бикарфена гидрохлорид фармакопейный.

Уксусная кислота, ледяная, ГОСТ 61-75, х.ч.

Ацетонитрил, ТУ 6-09-3534-82, х.ч.

Этиловый спирт, ГОСТ 5963-67.

Додецилсульфат натрия.

Элюент: раствор, содержащий 70% ацетонитрила, 2,5% уксусной кислоты, 0,3% додецилсульфата натрия и 27,2% воды.

Основной стандартный раствор с концентрацией бикарфена гидрохлорида 400 мкг/мл готовят растворением 0,04 г вещества в подвижной фазе в мерной колбе вместимостью 100 мл. Раствор устойчив при хранении в холодильнике в течение недели.

Фильтры АФА-ХА-20, ТУ 95-743-80.

Отбор пробы воздуха

Воздух с объемным расходом 5 л/мин. аспирируют через фильтр АФА-ХА-20. Для измерения 1/2 ОБУВ следует отобрать 40 л воздуха. Пробы могут храниться в холодильнике в течение 3 суток.

Подготовка к измерению

Хроматографическая колонка промышленного изготовления.

Инжектируют в хроматограф от 1 до 20 мкг бикарфена гидрохлорида из основного стандартного раствора при максимальном объеме вводимой пробы 50 мкл.

Условия хроматографирования калибровочных растворов и анализируемых проб:

    Температура термостата колонки                  +20 °С
    Скорость подачи элюента (ацетонитрил - 2,5%     1 мл/мин.

уксусной кислоты и 0,3% додецилсульфата

натрия в воде (70:30))

    Длина волны УФ-детектора                        230 нм
    Чувствительность                                0,04
    Скорость движения ленты самописца               0,5 см/мин.
    Диапазон измерения самописца                    1 мВ
    Максимальный объем вводимой пробы               50 мкл
    Время удерживания                               3 мин. 28 сек.
    Элюирующий объем бикарфена гидрохлорида         3,47 мл
    Эффективность колонки                           1500 т.т.

На полученной хроматограмме измеряют площади пиков и строят градуировочную кривую, выражающую зависимость площади пика бикарфена гидрохлорида (кв. мм) от количества компонента (мкг) в хроматографируемом объеме.

Построение градуировочного графика проводят не менее чем по 6 точкам, производя 5 параллельных измерений для каждой концентрации. Проверка градуировочного графика проводится при изменении условий анализа, но не реже 1 раза в месяц.

Проведение измерения

Фильтр с отобранной пробой переносят в пробирку с пришлифованной пробкой, добавляют 10 мл этанола. Оставляют при комнатной температуре, периодически энергично встряхивая. Степень десорбции с фильтра — 96%. Раствор переносят в колбу для вакуумной перегонки. Колбу присоединяют к ротационному испарителю и упаривают этанол досуха при 7 — 10 мм ртутного столба при комнатной температуре. Сухой остаток в колбе растворяют в 0,5 мл элюента.

Хроматографирование раствора ведут в тех же условиях и с тем же элюентом, что и при построении градуировочного графика.

Количественное содержание бикарфена гидрохлорида в мкг в хроматографируемом объеме проводят по предварительно построенному графику.

Расчет концентрации

Концентрацию бикарфена гидрохлорида «С» в воздухе (в мг/куб. м) вычисляют по формуле:

                          а х в

С = -----, б х V

где:

а — содержание бикарфена гидрохлорида в хроматографируемом объеме, найденное по градуировочному графику, мкг;

б — объем пробы, взятой для хроматографирования, мл;

в — общий объем анализируемого раствора, мл;

V — объем воздуха, отобранный для анализа и приведенный к стандартным условиям, л (см. Приложение 1).

Приложение 1

Приведение объема воздуха к стандартным условиям (температура 20 °С и давление 760 мм рт. ст.) проводят по формуле:

                        V  (273 + 20) х Р
                         t

                     V   = ------------------,
                      20   (273 + t) х 101,33

где:
V  - объем воздуха, отобранный для анализа, л;
 t
Р  -   барометрическое   давление,   кПа  (101,33  кПа  =  760

мм рт. ст.); t — температура воздуха в месте отбора пробы, °С.

Для удобства расчета V следует пользоваться таблицей 20 коэффициентов (Приложение 2). Для приведения воздуха к стандартным условиям надо умножить V на соответствующий коэффициент. t

°С	Давление Р, кПа/мм рт. ст.
	97,33/ 730	97,86/ 734	98,4/ 738	98,93/ 742	99,46/ 746	100/750	100,53/ 754	101,06/ 758	101,33/ 760	101,86/ 764
-30	1,1582	1,1646	1,1709	1,1772	1,1836	1,1899	1,1963	1,2026	1,2058	1,2122
-26	1,1393	1,1456	1,1519	1,1581	1,1644	1,1705	1,1768	1,1831	1,1862	1,1925
-22	1,1212	1,1274	1,1336	1,1396	1,1458	1,1519	1,1581	1,1643	1,1673	1,1735
-18	1,1036	1,1097	1,1158	1,1218	1,1278	1,1338	1,1399	1,1460	1,1490	1,1551
-14	1,0866	1,0926	1,0986	1,1045	1,1105	1,1164	1,1224	1,1284	1,1313	1,1373
-10	1,0701	1,0760	1,0819	1,0877	1,0986	1,0994	1,1053	1,1112	1,1141	1,1200
-6	1,0540	1,0599	1,0657	1,0714	1,0772	1,0829	1,0887	1,0945	1,0974	1,1032
-2	1,0385	1,0442	1,0499	1,0556	1,0613	1,0669	1,0726	1,0784	1,0812	1,0869
0	1,0309	1,0366	1,0423	1,0477	1,0535	1,0591	1,0648	1,0705	1,0733	1,0789
+2	1,0234	1,0291	1,0347	1,0402	1,0459	1,0514	1,0571	1,0627	1,0655	1,0712
+6	1,0087	1,0143	1,0198	1,0253	1,0309	1,0363	1,0419	1,0475	1,0502	1,0557
+10	0,9944	0,9999	1,0054	1,0108	1,0162	1,0216	1,0272	1,0326	1,0353	1,0407
+14	0,9806	0,9860	0,9914	0,9967	1,0027	1,0074	1,0128	1,0183	1,0209	1,0263
+18	0,9671	0,9725	0,9878	0,9880	0,9884	0,9936	0,9989	1,0043	1,0069	1,0122
+20	0,9605	0,9658	0,9711	0,9783	0,9816	0,9868	0,9921	0,9974	1,0000	1,0053
+22	0,9539	0,9592	0,9645	0,9696	0,9749	0,9800	0,9853	0,9906	0,9932	0,9985
+24	0,9475	0,9527	0,9579	0,9631	0,9683	0,9735	0,9787	0,9839	0,9865	0,9917
+26	0,9412	0,9464	0,9516	0,9566	0,9618	0,9669	0,9721	0,9773	0,9799	0,9851
+28	0,9349	0,9401	0,9453	0,9503	0,9555	0,9605	0,9657	0,9708	0,9734	0,9785
+30	0,9288	0,9339	0,9391	0,9440	0,9432	0,9542	0,9594	0,9645	0,9670	0,9723
+34	0,9167	0,9218	0,9268	0,9318	0,9368	0,9418	0,9468	0,9519	0,9544	0,9595
+38	0,9049	0,9099	0,9149	0,9199	0,9248	0,9297	0,9347	0,9397	0,9421	0,9471

Приложение 3

---