МУК 4.1.805-99. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Методические указания по измерению концентраций гамма-аминомасляной кислоты в воздухе рабочей зоны методом тонкослойной хроматографии

(утв. Минздравом России 30.12.1999)

4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ИЗМЕРЕНИЮ КОНЦЕНТРАЦИЙ ГАММА-АМИНОМАСЛЯНОЙ КИСЛОТЫ В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ МЕТОДОМ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ

Методические указания подготовлены коллективом специалистов в рамках Проблемной Комиссии «Научные основы гигиены труда и профпатологии». Утверждены Первым заместителем Министра здравоохранения Российской Федерации, Председателем Комиссии по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г.Г. Онищенко в декабре 1999 г.

Методические указания по измерению концентраций вредных веществ в воздухе рабочей зоны (сборник 35) разработаны с целью обеспечения контроля соответствия фактических концентраций вредных веществ их предельно допустимым концентрациям (ПДК) и ориентировочным безопасным уровням воздействия (ОБУВ) — санитарно-гигиеническим нормативам и являются обязательными при осуществлении санитарного контроля.

Методические указания разработаны и подготовлены в соответствии с требованиями ГОСТ 12.1.005-88 ССБТ «Воздух рабочей зоны. Общие санитарно-гигиенические требования».

Методики выполнены с использованием современных методов исследования, метрологически аттестованы и дают возможность контролировать концентрации химических веществ на уровне и меньше их ПДК и ОБУВ в воздухе рабочей зоны, установленных в ГН 2.2.5.686-98 «Предельно допустимые концентрации (ПДК) вредных веществ в воздухе рабочей зоны» и ГН 2.2.5.687-98 «Ориентировочные безопасные уровни воздействия (ОБУВ) вредных веществ в воздухе рабочей зоны».

                                   О
                                  //

NН -СН -СН -СН -С 2 2 2 2
ОН

    С Н NО                                            М. м. 103,12
     4 9  2

Гамма-аминомасляная кислота (аминалон) — белый кристаллический порошок с температурой плавления 200° — 205 °С (с разложением). Легко растворим в воде, растворим в спирте, практически не растворим в эфире и хлороформе.

В воздухе находится в виде аэрозоля.

Обладает общетоксическим действием.

ПДК в воздухе — 2,0 мг/куб. м.

Характеристика метода

Определение основано на хроматографировании вещества в тонком слое на пластинках Сорбфил ПТСХ-II-А с последующим обнаружением хроматограмм раствором нингидрина и денситометрировании окрашенных зон при длине волны 513 нм.

Отбор проб проводят с концентрированием на фильтр.

Нижний предел измерения вещества в анализируемом объеме — 0,5 мкг.

Нижний предел измерения вещества в воздухе — 1,0 мг/куб. м (при отборе 5,0 л воздуха).

Диапазон измеряемых концентраций от 1,0 до 20,0 мг/куб. м.

Определению не мешают декстрамин, треоамин Д(-), треоамин Д.

Суммарная погрешность не превышает +/- 20%.

Время выполнения измерения 2 часа, включая отбор проб.

Приборы, аппаратура, посуда

Спектрофотометр Спекорд М-40 с приставкой для измерения отражения с фотометрическим шаром, денситометр БИАН-170.

Аспирационное устройство, модель 822, ТУ 64-1-86.2-72.

Фильтродержатели.

Хроматографическая камера для ТСХ размером 10 х 20 см, ГОСТ 23932-79Е.

Пластинки для тонкослойной хроматографии Сорбфил ПТСХ-II-А, ТУ 26-11-17-89.

Стаканы химические вместимостью 50 мл, ГОСТ 25336-82Е.

Вакуумная установка.

Колбы грушевидные вместимостью 25 мл, ГОСТ 25336-82Е.

Пипетки вместимостью 1, 2, 5, 10 мл, ГОСТ 20292-74.

Сушильный шкаф.

Реактивы, растворы, материалы

Аминалон, ФС 42-1903-89.

Этиловый спирт, ГОСТ 5963-67.

Метиловый спирт, ГОСТ 6965-77.

Хлороформ, ТУ 6-09-4263-76.

Кислота уксусная ледяная, ТУ 61-65.

Аммиак водный, 25% раствор, ГОСТ 3760-79.

Нингидрин, х.ч.

Подвижный растворитель: метанол-25% раствор аммиака (50:3).

Проявляющий реактив: в мерную колбу на 100 мл помещают 0,2 г нингидрина, 20 мл уксусной кислоты и доводят объем до метки этиловым спиртом.

Градуировочный раствор № 1 с концентрацией 200 мкг/мл готовят растворением 0,0200 г вещества в смеси этанол — вода дистиллированная — хлороформ (70:10:20) в мерной колбе вместимостью 100 мл.

Рабочие градуировочные растворы, содержащие 5-10-20-40-60-80-100 мкг/мл вещества, готовят соответствующим разбавлением смесью этанол — вода дистиллированная — хлороформ (70:10:20 мл) градуировочного раствора № 1. Растворы устойчивы в течение недели при хранении в холодильнике.

Фильтры АФА-ВП-10, ТУ 85-743-80.

Отбор пробы воздуха

Воздух с объемным расходом 1,0 л/мин. аспирируют через фильтр АФА-ВП-10. Для измерения 1/2 ОБУВ следует отобрать 5,0 л воздуха. Хранение проб допускается в течение 2 недель.

Подготовка к измерению

    На  линию  старта  пластинки  Сорбфил  наносят  в  виде  точек
(диаметр  пятна  не должен превышать 0,5 см) по 0,1 мл стандартных
растворов,  содержащих  5-10-20-40-60-80-100  мкг/мл вещества, что

соответствует 0,5-1-2-4-6-8-10 мкг аминалона. Пластинку высушивают

на   воздухе   в   течение   3   мин.  и  помещают  в  камеру  для
хроматографирования  со смесью растворителей  метанол-25%  раствор
аммиака   (50:3мл).  Камера   предварительно  насыщается в течение
1   часа,   для   лучшего   насыщения   стенки   камеры    покрыты

фильтровальной бумагой. После того, как фронт растворителя пройдет

10  см,  пластинку  вынимают  из  камеры, подсушивают на воздухе и
помещают  в  сушильный шкаф при температуре 100 °С на 5 мин. Затем

пластинку опрыскивают проявляющим реактивом и помещают в сушильный

шкаф  при температуре 100 °С на 2 мин. Аминалон проявляется в виде
оранжево-коричневых пятен на светлом фоне с R  = 0,25 +/- 0,02.

                                         f

Интенсивность окраски пятен вещества измеряют на спектрофотометре Спекорд М-40 с приставкой для отражения с фотометрическим шаром при длине волны 513 нм по отношению к фону. В качестве фона используется участок исследуемой пластинки без вещества. Для каждой концентрации измеряют отражение (Т) в %. Оптическая плотность (Д) и отражение (Т) связаны между собой соотношением:

Д = -lg Т,

где Т выражено в %, тогда:

                  1

Д = lg — х 100 или Д = 2 — lg Т. Т

По средним результатам из пяти определений строят градуировочный график: на ось ординат наносят значения оптических плотностей градуировочных хроматограмм, на ось абсцисс — соответствующее им количество вещества в мкг в анализируемой пробе.

Проведение измерения

Фильтр с отобранной пробой переносят в химический стакан, добавляют в него 6 мл растворителя (смеси этанол — вода дистиллированная — хлороформ в соотношении 70:10:20 мл) и оставляют на 15 мин., периодически помешивая стеклянной палочкой для лучшего растворения вещества. Степень десорбции вещества с фильтра — 96%.

Раствор переносят в грушевидную колбу и упаривают досуха под вакуумом при температуре 60 — 70 °С. Сухой остаток растворяют в 1,0 мл смеси этанол — вода дистиллированная — хлороформ (70:10:20 мл) и используют полученный раствор для анализа.

Пробу в количестве 0,1 мл наносят на пластинку Сорбфил, одновременно рядом с пробой наносят раствор свидетеля, содержащий 6,0 мкг аминалона. Пластинки обрабатывают так же, как стандарты при построении градуировочного графика. Измеряют отражения пятен вещества на спектрофотометре Спекорд М-40 при длине волны 513 нм. Затем вычисляют значение оптической плотности (Д) и по градуировочному графику находят содержание вещества в пробе.

Расчет концентрации

Концентрацию аминалона в воздухе «С» (мг/куб. м) вычисляют по формуле:

                            а х в

С = -----, б х V

где:

а — масса вещества, найденная в пробе, мкг;

в — общий объем раствора пробы, мл;

б — объем раствора пробы, используемый для анализа, мл;

V — объем воздуха (в л), отобранный для анализа и приведенный к нормальным условиям (см. Приложение 1).

Приложение 1

Приведение объема воздуха к стандартным условиям (температура 20 °С и давление 760 мм рт. ст.) проводят по формуле:

                       V  (273 + 20) х Р
                        t

                     V   = ------------------,
                      20   (273 + t) х 101,33

где:
V  - объем воздуха, отобранный для анализа, л;
 t
Р  -  барометрическое   давление,   кПа  (101,33   кПа   = 760

мм рт. ст.); t — температура воздуха в месте отбора пробы, °С.

Для удобства расчета V следует пользоваться таблицей 20 коэффициентов (Приложение 2). Для приведения воздуха к стандартным условиям надо умножить V на соответствующий коэффициент. t

°С	Давление Р, кПа/мм рт. ст.
	97,33/ 730	97,86/ 734	98,4/ 738	98,93/ 742	99,46/ 746	100/750	100,53/ 754	101,06/ 758	101,33/ 760	101,86/ 764
-30	1,1582	1,1646	1,1709	1,1772	1,1836	1,1899	1,1963	1,2026	1,2058	1,2122
-26	1,1393	1,1456	1,1519	1,1581	1,1644	1,1705	1,1768	1,1831	1,1862	1,1925
-22	1,1212	1,1274	1,1336	1,1396	1,1458	1,1519	1,1581	1,1643	1,1673	1,1735
-18	1,1036	1,1097	1,1158	1,1218	1,1278	1,1338	1,1399	1,1460	1,1490	1,1551
-14	1,0866	1,0926	1,0986	1,1045	1,1105	1,1164	1,1224	1,1284	1,1313	1,1373
-10	1,0701	1,0760	1,0819	1,0877	1,0986	1,0994	1,1053	1,1112	1,1141	1,1200
-6	1,0540	1,0599	1,0657	1,0714	1,0772	1,0829	1,0887	1,0945	1,0974	1,1032
-2	1,0385	1,0442	1,0499	1,0556	1,0613	1,0669	1,0726	1,0784	1,0812	1,0869
0	1,0309	1,0366	1,0423	1,0477	1,0535	1,0591	1,0648	1,0705	1,0733	1,0789
+2	1,0234	1,0291	1,0347	1,0402	1,0459	1,0514	1,0571	1,0627	1,0655	1,0712
+6	1,0087	1,0143	1,0198	1,0253	1,0309	1,0363	1,0419	1,0475	1,0502	1,0557
+10	0,9944	0,9999	1,0054	1,0108	1,0162	1,0216	1,0272	1,0326	1,0353	1,0407
+14	0,9806	0,9860	0,9914	0,9967	1,0027	1,0074	1,0128	1,0183	1,0209	1,0263
+18	0,9671	0,9725	0,9878	0,9880	0,9884	0,9936	0,9989	1,0043	1,0069	1,0122
+20	0,9605	0,9658	0,9711	0,9783	0,9816	0,9868	0,9921	0,9974	1,0000	1,0053
+22	0,9539	0,9592	0,9645	0,9696	0,9749	0,9800	0,9853	0,9906	0,9932	0,9985
+24	0,9475	0,9527	0,9579	0,9631	0,9683	0,9735	0,9787	0,9839	0,9865	0,9917
+26	0,9412	0,9464	0,9516	0,9566	0,9618	0,9669	0,9721	0,9773	0,9799	0,9851
+28	0,9349	0,9401	0,9453	0,9503	0,9555	0,9605	0,9657	0,9708	0,9734	0,9785
+30	0,9288	0,9339	0,9391	0,9440	0,9432	0,9542	0,9594	0,9645	0,9670	0,9723
+34	0,9167	0,9218	0,9268	0,9318	0,9368	0,9418	0,9468	0,9519	0,9544	0,9595
+38	0,9049	0,9099	0,9149	0,9199	0,9248	0,9297	0,9347	0,9397	0,9421	0,9471

Приложение 3

---