--- title: "\"МУК 4.1.594-96. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Методические указания по хроматографическому (ВЭЖХ) определению D(-)-альфа-аминофенилуксусной кислоты в атмосферном воздухе\"" number: "МУК 4.1.594-96" status: действует canonical: "https://bukva.ai/docs/ukazanie-ukazaniya-muk-4-1-594-96" --- ## "МУК 4.1.594-96. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Методические указания по хроматографическому (ВЭЖХ) определению D(-)-альфа-аминофенилуксусной кислоты в атмосферном воздухе" # "МУК 4.1.594-96. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Методические указания по хроматографическому (ВЭЖХ) определению D(-)-альфа-аминофенилуксусной кислоты в атмосферном воздухе" (утв. Госкомсанэпиднадзором России 31.10.1996) > [!IMPORTANT] > Документ включен в Перечень основных действующих нормативно-методических документов по методам лабораторного и инструментального контроля в системе государственного санитарно-эпидемиологического нормирования (Письмо Роспотребнадзора от 02.12.2008 N 01/14262-8-32). > Документ [введен](#p100002) в действие с 31 октября 1996 года.
Утверждаю
Первый заместитель Председателя
Госкомсанэпиднадзора России,
Заместитель Главного
государственного санитарного
врача Российской Федерации **С.В.СЕМЕНОВ** 31 октября 1996 года #### 4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ **МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ХРОМАТОГРАФИЧЕСКОМУ (ВЭЖХ)**
**ОПРЕДЕЛЕНИЮ D(-)-АЛЬФА-АМИНОФЕНИЛУКСУСНОЙ КИСЛОТЫ**
**В АТМОСФЕРНОМ ВОЗДУХЕ**
**МУК 4.1.594-96** Дата введения - с момента утверждения 1. Подготовлены творческим коллективом специалистов в составе: Малышева А.Г. (руководитель), Зиновьева Н.П., Суворова Ю.Б., Растянников Е.Г., Топорова И.Н., Евстигнеева М.А., Жаворонкова Н.А. (НИИ экологии человека и гигиены окружающей среды им. А.Н. Сысина РАМН), при участии Кучеренко А.И. (Госкомсанэпиднадзор России). 2. Утверждены и введены в действие Первым заместителем Председателя Госкомсанэпиднадзора России - заместителем Главного государственного санитарного врача Российской Федерации Семеновым С.В. 31 октября 1996 года. 3. Введены впервые. Настоящие Методические указания устанавливают высокоэффективную жидкостную хроматографическую методику количественного химического анализа атмосферного воздуха для определения в нем содержания аминофенилуксусной кислоты в диапазоне концентраций 0,05 - 0,6 мг/куб. м. С Н О N Мол. масса 151,17 8 9 2 D(-)-альфа-аминофенилуксусная кислота - кристаллическое вещество белого цвета. Трудно растворима в воде, метиловом и этиловом спиртах. Нерастворима в эфире, хлороформе. Хорошо растворяется в водных растворах кислот и щелочей. Температура плавления - 290 °С (с разложением). В воздухе находится в виде аэрозоля. Обладает общетоксическим действием. ОБУВ в воздухе - 0,05 мг/куб. м. ## 1. Погрешность измерений Методика обеспечивает выполнение измерений с погрешностью, не превышающей +/- 20%, при доверительной вероятности 0,95. ## 2. Метод измерений Измерение концентрации D(-)-альфа-аминофенилуксусной кислоты выполняют методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с ультрафиолетовым детектированием. Концентрирование вещества из воздуха осуществляют на фильтр. Десорбцию проводят элюентом. Нижний предел измерения в анализируемом объеме пробы 0,25 мкг. Определению не мешает присутствие L-фенилаланина. ## 3. Средства измерений, вспомогательные устройства, материалы, реактивы При выполнении измерений применяют следующие средства измерений, вспомогательные устройства, материалы и реактивы. #### 3.1 Средства измерений Микроколоночный хроматограф жидкостный "Милихром" (или другой модели) с УФ-детектором Барометр-анероид М-67 ТУ 2504-1797-75 Весы аналитические ВЛА-200 ГОСТ 24104-80Е Линейка измерительная [ГОСТ 17435-72](https://bukva.ai/docs/gost-17435-72-gosstandart-sssr) Лупа измерительная ГОСТ 8309-75 Меры массы ГОСТ 7328-82Е Посуда стеклянная лабораторная ГОСТ 1770-74Е и [20292-74Е](https://bukva.ai/docs/standart-gost-20292-74) Пробирки с пришлифованными пробками вместимостью 10 куб. см ГОСТ 5072-79 Секундомер СДС пр-1-2-000 ГОСТ 5072-79 Термометр лабораторный шкальный ТЛ-2; пределы 0 - 55 °С, цена деления 1 °С ГОСТ 215-73Е Электроаспиратор ЭА-1, погрешность +/- 10%, Госреестр N 997-77 ТУ 25-11-1414-78 #### 3.2 Вспомогательные устройства Хроматографическая колонка длиной 120 мм и внутренним диаметром 2 мм, заполненная сорбентом "Силасорб Sph С18" с размером зерен 6,0 мкм (Чехия) Дистиллятор ТУ 61-1-721-79 Фильтродержатель, производство ВО "Изотоп" #### 3.3 Материалы Фильтр АФА-ВП-20 ТУ 85-743-80 #### 3.4 Реактивы D(-)-альфа-аминофенилуксусная кислота, ч. ТУ 6-09-4455-77 Дистиллированная вода ГОСТ 6709-72 Калий фосфорнокислый однозамещенный ТУ 4198-75 ## 4. Требования безопасности 4.1. При работе с реактивами соблюдают требования безопасности, установленные для работы с токсичными, едкими и легковоспламеняющимися веществами по ГОСТу 12.1.005-88. 4.2. При выполнении измерений с использованием жидкостного хроматографа соблюдают правила электробезопасности в соответствии с ГОСТом 12.1.019-79 и инструкцией по эксплуатации прибора. ## 5. Требования к квалификации операторов К выполнению измерений допускают лиц, имеющих квалификацию не ниже инженера-химика, с опытом работы на жидкостном хроматографе. ## 6. Условия измерений При выполнении измерений соблюдают следующие условия: - процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят в нормальных условиях согласно ГОСТу 15150-69 при температуре воздуха (20 +/- 10) °С, атмосферном давлении 630 - 800 мм рт. ст. и влажности воздуха не более 80%. - выполнение измерений на жидкостном хроматографе проводят в условиях, рекомендуемых технической документацией к прибору. ## 7. Подготовка к выполнению измерений Перед выполнением измерений проводят следующие работы: приготовление растворов, установление градуировочной характеристики, отбор проб. ### 7.1. Приготовление растворов Элюент: 0,015 М фосфатный буферный раствор (рН = 4,6). Готовят растворением 2,05 г калия фосфорного однозамещенного в дистиллированной воде в мерной колбе вместимостью 1,0 куб. дм. Исходный раствор аминофенилуксусной кислоты для градуировки (р = 0,5 мг/куб. см). 50 мг вещества вносят в мерную колбу вместимостью 100 куб. см, доводят до метки элюентом и тщательно перемешивают. Раствор устойчив в течение недели при хранении в холодильнике. ### 7.2. Установление градуировочной характеристики Градуировочную характеристику устанавливают на градуировочных растворах аминофенилуксусной кислоты. Она выражает зависимость площади пика на хроматограмме (кв. мм) от массы аминофенилуксусной кислоты (мкг) и строится по 5-ти сериям растворов для градуировки. Каждую серию, состоящую из 5-ти растворов, готовят в мерных колбах вместимостью 50 куб. см. Для этого в каждую колбу вносят исходный раствор для градуировки в соответствии с табл. 1, доводят объем элюентом до метки и тщательно перемешивают.
Таблица 1
**РАСТВОРЫ ДЛЯ УСТАНОВЛЕНИЯ ГРАДУИРОВОЧНОЙ**
**ХАРАКТЕРИСТИКИ ПРИ ОПРЕДЕЛЕНИИ КОНЦЕНТРАЦИИ**
**D(-)-АЛЬФА-АМИНОФЕНИЛУКСУСНОЙ КИСЛОТЫ**
| Номер раствора для градуировки | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | | --- | --- | --- | --- | --- | --- | | Объем исходного раствора (с = 0,5 мг/куб. см), куб. см | 0,5 | 1,0 | 2,0 | 4,0 | 6,0 | | Содержание аминофенилуксусной кислоты в 50 куб. мм, мкг | 0,25 | 0,5 | 1,0 | 2,0 | 3,0 | В колонку хроматографа последовательно инжектируют по 50 куб. мм каждого градуировочного раствора и анализируют в следующих условиях: температура термостата колонки +20 °С скорость подачи элюента 200 куб. мм/мин. длина волны УФ-детектора 202 нм диапазон чувствительности детектора 0,8 скорость движения диаграммной ленты 6 мм/мин. время удерживания D(-)-альфа-аминофенилуксусной кислоты 2 мин. 30 сек. элюирующий объем 500 куб. мм. На полученной хроматограмме рассчитывают площади пиков аминофенилуксусной кислоты и по средним результатам из 5-ти измерений строят градуировочную характеристику. Проверку градуировочной характеристики проводят 1 раз в квартал и при смене партии реактивов. ### 7.3. Отбор проб Отбор проб воздуха проводят согласно ГОСТу 17.2.3.01-86. Воздух со скоростью 15 куб. дм/мин. аспирируют через фильтр АФА-ВП-10, закрепленный в фильтродержателе. Продолжительность отбора 20 минут. Срок хранения проб - 5 суток. ## 8. Выполнение измерений Фильтр с отобранной пробой помещают в пробирку с пришлифованной пробкой, добавляют 3 куб. см элюента и оставляют на 15 минут при комнатной температуре и периодическом перемешивании. Степень десорбции с фильтра 97%. Хроматографирование полученного раствора проводят в тех же условиях, что и при построении градуировочной характеристики по [п. 7.2](#p100045). Количественное определение содержания D(-)-альфа-аминофенилуксусной кислоты в хроматографируемом объеме проводят по градуировочной характеристике. ## 9. Вычисление результатов измерений Концентрацию D(-)-альфа-аминофенилуксусной кислоты в атмосферном воздухе (мг/куб. м) вычисляют по формуле: m х V 1 С = -------, V х V 2 0 где: m - масса D(-)-альфа-аминофенилуксусной кислоты в пробе, найденная по градуировочной характеристике, мкг; V - общий объем пробы, куб. см; 1 V - хроматографируемый объем пробы, куб. см; 2 V - объем отобранного воздуха, приведенный к нормальным 0 условиям, куб. дм; V х 273 х P t V = ---------------, 0 (273 + t) х 760 где: V - объем воздуха, отобранный для анализа, куб. дм; t Р - атмосферное давление в месте отбора пробы, мм рт. ст.; t - температура воздуха в месте отбора пробы, °С. Методические указания разработаны Бернштейном Л.А., Пичужкиной Е.И. (НИО "Экотокс" г. Москва). ---