---
title: "\"МУК 4.1.3159-14. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Измерение массовой концентрации акрилонитрила в крови методом капиллярной газовой хроматографии. Методические указания\""
number: "МУК 4.1.3159-14"
status: действует
canonical: "https://bukva.ai/docs/ukazanie-ukazaniya-muk-4-1-3159-14"
---

## "МУК 4.1.3159-14. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Измерение массовой концентрации акрилонитрила в крови методом капиллярной газовой хроматографии. Методические указания"

# "МУК 4.1.3159-14. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Измерение массовой концентрации акрилонитрила в крови методом капиллярной газовой хроматографии. Методические указания"

(утв. Роспотребнадзором 24.02.2014)


<div align="right">

<a id="p100001"></a>Утверждаю<br>
Вр.и.о. руководителя<br>
Федеральной службы<br>
по надзору в сфере<br>
защиты прав потребителей<br>
и благополучия человека,<br>
Главного государственного<br>
санитарного врача<br>
Российской Федерации<br>
**А.Ю.ПОПОВА**<br>
24 февраля 2014 года

</div>



#### <a id="p100002"></a>4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ


<a id="p100003"></a>**ИЗМЕРЕНИЕ МАССОВОЙ КОНЦЕНТРАЦИИ АКРИЛОНИТРИЛА В КРОВИ**
**МЕТОДОМ КАПИЛЛЯРНОЙ ГАЗОВОЙ ХРОМАТОГРАФИИ**

<a id="p100004"></a>**МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ**
**МУК 4.1.3159-14**

1. <a id="p100005"></a>Разработаны ФБУН "ФНЦ медико-профилактических технологий управления рисками здоровью населения" (Т.С.Уланова, Н.В.Зайцева, Т.В.Нурисламова, Н.А.Попова, У.С.Бакулина, Г.И.Терентьев); ГБОУ ДПО "Российская медицинская академия последипломного образования" Минздрава России (М.С.Орлов).
2. <a id="p100006"></a>Рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (протокол от 26 декабря 2013 г. N 4).
3. <a id="p100007"></a>Утверждены вр.и.о. руководителя Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главного государственного санитарного врача Российской Федерации А.Ю.Поповой 24 февраля 2014 г.
4. <a id="p100008"></a>Введены впервые.
<a id="p100009"></a>Свидетельство о метрологической аттестации N 88-16374-241-01.00076-2012 от 26.11.2012.

1. <a id="p100010"></a>Назначение и область применения

<a id="p100011"></a>1.1. Настоящие методические указания устанавливают порядок применения метода капиллярной газовой хроматографии для измерения массовой концентрации акрилонитрила в пробах крови в диапазоне от 0,007 до 1 мг/куб. дм.
<a id="p100012"></a>1.2. Методические указания по измерению массовой концентрации акрилонитрила в пробах крови предназначены для использования в санитарно-гигиенических, экологических, лечебных и научных организациях, осуществляющих деятельность в области профпатологии и экологии человека.

#### <a id="p100013"></a>1.3 Методические указания носят рекомендательный характер.


<div align="center">

2. <a id="p100014"></a>Физико-химические и токсикологические свойства

</div>


<a id="p100015"></a>Акрилонитрил (нитрил акриловой кислоты, 2-пропеннитрил, винилцианид) - бесцветная, прозрачная, легко подвижная летучая жидкость со смешанным запахом хлороформа и синильной кислоты. Относится к опасным веществам.
<a id="p100016"></a>Акрилонитрил вызывает снижение артериального давления, атрофические риниты, анемию, лейкопению с наклонностью к лимфоцитозу и моноцитозу.


| <a id="p100017"></a>Регистрационный номер CAS | <a id="p100018"></a>107-13-14 |
| --- | --- |
| <a id="p100019"></a>Формула | <a id="p100020"></a>$CH_{2} = CHCN$ |
| <a id="p100021"></a>Молекулярная масса | <a id="p100022"></a>41,05 |
| <a id="p100023"></a>$\text{Т}_{\text{плавл}.}$ , °С | <a id="p100024"></a>-83,5 +/- 1 |
| <a id="p100025"></a>$\text{Т}_{\text{кип}.}$ , °С | <a id="p100026"></a>77,3 |
| <a id="p100027"></a>Плотность, г/куб. см | <a id="p100028"></a>0,8064 |
| <a id="p100029"></a>Растворимость при Т = 20 °С, % | <a id="p100030"></a>7,3 |
| <a id="p100031"></a>Давление насыщенных паров при Т = 20 °С, кПа | <a id="p100032"></a>11,3 |
| <a id="p100033"></a>Класс опасности | <a id="p100034"></a>2 |


<div align="center">

3. <a id="p100035"></a>Метрологические характеристики методики выполнения измерений

<a id="p100036"></a>При соблюдении всех регламентированных условий и проведения анализа в точном соответствии с данной методикой значения погрешности (и ее составляющих) результатов измерений не превышают значений, приведенных в табл. 1.

<a id="p100037"></a>Таблица 1

<a id="p100038"></a>Диапазон измерений, значения точности<br>
(правильности и прецизионности) методики

</div>



<table>
<colgroup><col width="11%"><col width="20%"><col width="15%"><col width="17%"><col width="20%"><col width="16%"></colgroup>
<tr><td><a id="p100039"></a>Объект измерения</td><td><a id="p100040"></a>Диапазон измерений массовой концентрации акрилонитрила,<br>мг/куб. дм</td><td><a id="p100041"></a>Показатель точности (границы относительной погрешности при вероятности<br>P = 0,95),<br>+/- $\delta$ , %</td><td><a id="p100042"></a>Показатель повторяемости (относительное среднеквадратическое отклонение повторяемости),<br>$\sigma_{r}$ , %</td><td><a id="p100043"></a>Показатель воспроизводимости (относительное среднеквадратическое отклонение воспроизводимости)<br>$\sigma_{R}$ , %</td><td><a id="p100044"></a>Предел повторяемости (относительное значение допускаемого расхождения между двумя результатами измерений, полученными в одной лаборатории),<br>r, %</td></tr>
<tr><td rowspan="2"><a id="p100045"></a>Кровь</td><td><a id="p100046"></a>От 0,007 до 0,07 вкл.</td><td><a id="p100047"></a>40</td><td><a id="p100048"></a>13</td><td><a id="p100049"></a>20</td><td><a id="p100050"></a>36</td></tr>
<tr><td><a id="p100051"></a>Св. 0,07 до 1 вкл.</td><td><a id="p100052"></a>20</td><td><a id="p100053"></a>5</td><td><a id="p100054"></a>10</td><td><a id="p100055"></a>14</td></tr>
</table>


<a id="p100056"></a>Значения показателя точности используют:
- <a id="p100057"></a>при оформлении результатов измерений, выдаваемых лабораторией;
- <a id="p100058"></a>при оценке деятельности лабораторий на качество проведения измерений;
- <a id="p100059"></a>при оценке возможности использования результатов измерений при реализации методики измерений в конкретной лаборатории.

<div align="center">

4. <a id="p100060"></a>Метод измерения

</div>


<a id="p100061"></a>Выполнение измерений массовой концентрации акрилонитрила в пробе крови проводят методом капиллярной газовой хроматографии с термоионным детектором. Извлечение и концентрирование акрилонитрила из проб крови проводят методом анализа равновесной паровой фазы путем нагревания объекта.
<a id="p100062"></a>Определению не мешают углеводороды, спирты. Длительность измерений - 10 мин.

5. <a id="p100063"></a>Средства измерений, вспомогательные устройства,
материалы и реактивы


#### <a id="p100064"></a>5.1 Средства измерений



| <a id="p100065"></a>Хроматограф газовый с термоионным детектором и капиллярной колонкой |  |
| --- | --- |
| <a id="p100066"></a>Термометр жидкостный стеклянный | <a id="p100067"></a>ГОСТ 28498 |
| <a id="p100068"></a>Секундомер | <a id="p100069"></a>ТУ 25-1894.003-90 |
| <a id="p100070"></a>Микрошприцы серии МШ-10, диапазон дозируемого объема, мкл 1-10 с ценой деления 0,2 мкл, погрешность 1% | <a id="p100071"></a>ТУ 2.833.106-2000 |
| <a id="p100072"></a>Шприц газовый вместимостью 2 куб. см | <a id="p100073"></a>[ГОСТ 22967-90](https://bukva.ai/docs/standart-gost-22967-90) |
| <a id="p100074"></a>Весы лабораторные равноплечные второго класса точности; наибольший предел взвешивания 200 г, диапазон взвешивания по шкале мг от 0 до 100 мг, цена деления делительного устройства - 0,05 мг, погрешность взвешивания по шкале мг +/- 0,15 мг | <a id="p100075"></a>ГОСТ Р 53228-08 |
| <a id="p100076"></a>Меры массы | <a id="p100077"></a>ГОСТ 7328-01 |
| <a id="p100078"></a>Колбы мерные вместимостью 2-100-2, 2-1000-2 куб. см | <a id="p100079"></a>ГОСТ 1770-74 |
| <a id="p100080"></a>Пипетки градуированные 1-го класса точности вместимостью 1-2-1-1, 1-2-1-2, 1-2-2-5 куб. см | <a id="p100081"></a>ГОСТ 29227-91 |
| <a id="p100082"></a>Дозаторы жидкости механические с погрешностью +/- 0,1 куб. мм объемом дозирования 1-5 куб. см, 100-1000 куб. мм, 20-200 куб. мм с одноразовыми наконечниками | <a id="p100083"></a>[ГОСТ 28311-89](https://bukva.ai/docs/gost-28311-89) |


<div align="center">

<a id="p100084"></a>*Примечание.* Допускается использование средств измерения с аналогичными или лучшими характеристиками.

</div>



#### <a id="p100085"></a>5.2 Реактивы



| <a id="p100086"></a>Вода для лабораторного анализа (бидистиллированная) | <a id="p100087"></a>ГОСТ 52501-05 |
| --- | --- |
| <a id="p100088"></a>Спирт этиловый ректифицированный | <a id="p100089"></a>[ГОСТ Р 51652-2000](https://bukva.ai/docs/gost-r-51652-2000) |
| <a id="p100090"></a>Калий двухромовокислый (бихромат калия), чда | <a id="p100091"></a>ГОСТ 4220-75 |
| <a id="p100092"></a>Серная кислота концентрированная, осч | <a id="p100093"></a>[ГОСТ 14262-78](https://bukva.ai/docs/standart-gost-14262-78) |
| <a id="p100094"></a>Акрилонитрил, хч, для хроматографии, содержание основного вещества не менее 99.9% |  |


<a id="p100095"></a>*Примечание.* Допускается использование реактивов с более высокой квалификацией.


#### <a id="p100096"></a>5.3 Вспомогательные устройства и материалы



| <a id="p100097"></a>Колонка хроматографическая капиллярная из кварцевого стекла с внутренним диаметром 0,32 мм длиной 30 м и толщиной пленки 1,8 мкм |  |
| --- | --- |
| <a id="p100098"></a>Редуктор кислородный | <a id="p100099"></a>ТУ 3645-032-00220531-97 |
| <a id="p100100"></a>Сушильный шкаф, обеспечивающий нагрев до 150 °С с погрешностью +/- 5 °С | <a id="p100101"></a>ТУ 16.531.743-83 |
| <a id="p100102"></a>Азот газообразный | <a id="p100103"></a>ГОСТ 9293-74 |
| <a id="p100104"></a>Водород технический | <a id="p100105"></a>ГОСТ 3022-80 |
| <a id="p100106"></a>Бумага фильтровальная лабораторная | <a id="p100107"></a>ГОСТ 12026-76 |
| <a id="p100108"></a>Пробирки вакуумные для забора крови с напылением гепарина вместимостью 6 куб. см |  |
| <a id="p100109"></a>Пробирки из полипропилена конические градуированные на 15 куб. см, ТС 15А |  |


<a id="p100110"></a>*Примечание.* Допускается использование других вспомогательных устройств и материалов аналогичного назначения, технические характеристики которых не уступают указанным.

<div align="center">

6. <a id="p100111"></a>Требования безопасности и охраны окружающей среды

</div>


<a id="p100112"></a>6.1. При выполнении работ необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007-76.
<a id="p100113"></a>6.2. Помещение лаборатории должно быть оборудовано приточно-вытяжной вентиляцией и соответствовать требованиям пожарной безопасности по ГОСТ 12.1.004-91 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009-83.
<a id="p100114"></a>6.3. При выполнении измерений с использованием газового хроматографа соблюдают правила электробезопасности при работе с электроустановками по ГОСТ Р 12.1.019-2009 и инструкцией по эксплуатации прибора.
<a id="p100115"></a>6.4. При работе с сосудами, работающими под давлением, необходимо соблюдать правила их устройства и безопасной эксплуатации в соответствии с ПБ 03-576-03.
<a id="p100116"></a>6.5. Содержание вредных веществ в воздухе рабочей зоны не должно превышать допустимых значений по ГОСТ 12.1.005-88, ПДК (ОБУВ), установленных ГН 2.2.5.1313-03 и 2.2.5.2308-07.
<a id="p100117"></a>6.6. Организуют обучение работающих безопасности труда по ГОСТ 12.0.004-90.
<a id="p100118"></a>6.7. При работе с биологическими средами соблюдают санитарно-эпидемиологические правила СП 1.3.2322-08.

7. <a id="p100119"></a>Требования к квалификации операторов

<a id="p100120"></a>К выполнению измерений и обработке их результатов допускаются специалисты, имеющие квалификацию не ниже инженера-химика и опыт работы в химической лаборатории, прошедшие обучение и владеющие техникой проведения работ на газовом хроматографе.

<div align="center">

8. <a id="p100121"></a>Условия измерений

</div>


<a id="p100122"></a>При выполнении измерений в лаборатории соблюдают следующие условия:
- <a id="p100123"></a>температура окружающего воздуха (20 +/- 5) °С;
- <a id="p100124"></a>атмосферное давление от 84,0 до 106,7 кПа (630-800 мм рт. ст.);

<div align="center">

- <a id="p100125"></a>относительная влажность воздуха от 30 до 80%;<br>
- <a id="p100126"></a>напряжение в сети (220 +/- 10) В;

</div>

- <a id="p100127"></a>частота переменного тока (50 +/- 10) Гц.
<a id="p100128"></a>Выполнение измерений на газовом хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.

9. <a id="p100129"></a>Подготовка к выполнению измерений

<a id="p100130"></a>При подготовке к выполнению измерений проводят следующие работы:
- <a id="p100131"></a>подготовка стеклянной посуды;
- <a id="p100132"></a>подготовка хроматографической системы;
- <a id="p100133"></a>приготовление градуировочных растворов;
- <a id="p100134"></a>построение градуировочной характеристики;
- <a id="p100135"></a>отбор проб.


#### <a id="p100136"></a>9.1 Подготовка стеклянной посуды


<a id="p100137"></a>В термостойкий стакан вместимостью 2 куб. дм помещают 50 г бихромата калия, осторожно приливают по палочке частями, тщательно перемешивая, 1 куб. дм концентрированной серной кислоты. Срок хранения 1 год.
<a id="p100138"></a>Используемую посуду необходимо замочить в свежеприготовленном 3%-м растворе бихромата калия в серной кислоте, промыть проточной водопроводной водой, ополоснуть дистиллированной водой и высушить в сушильном шкафу при температуре 105 °С.


#### <a id="p100139"></a>9.2 Подготовка хроматографической системы


<a id="p100140"></a>Подготовку хроматографа к работе осуществляют в соответствии с инструкцией по эксплуатации хроматографа.


##### <a id="p100141"></a>9.2.1 Подготовка хроматографической колонки


<div align="center">

<a id="p100142"></a>Хроматографическую колонку перед эксплуатацией устанавливают в хроматограф и, не подключая к детектору, кондиционируют в токе газа-носителя (азота) с расходом 4 куб. см/мин. при температуре 240 °С в течение 2 ч. После охлаждения колонку подключают к детектору и проверяют стабильность нулевой линии при рабочей температуре термостата колонок. При отсутствии мешающих влияний колонка готова к работе.

</div>



##### <a id="p100143"></a>9.2.2 Условия хроматографирования


<div align="center">

<a id="p100144"></a>Устанавливают режим работы газового хроматографа в соответствии со следующими условиями:<br>
<a id="p100145"></a>температурный режим термостата колонки: 50 °С с выдержкой 1 мин., подъем со скоростью 5 °С/мин. до 80 °С, подъем со скоростью 25 °С/мин. до 200 °С;<br>
<a id="p100146"></a>поддув азота 20 куб. см/мин.;<br>
<a id="p100147"></a>режим испарителя: температура 200 °С; деление потока 1:14,3;<br>
<a id="p100148"></a>режим детектора: температура 320 °С; поддув азота 60 куб. см/мин.;<br>
<a id="p100149"></a>режим расхода газа-носителя (азота): постоянный поток - 1,4 куб. см/мин.;<br>
<a id="p100150"></a>время удерживания акрилонитрила: (6,17 +/- 0,17) мин.<br>
<a id="p100151"></a>Записывают нулевую линию при установленных режимных параметрах. При отсутствии флуктуации приступают к работе.

</div>



#### <a id="p100152"></a>9.3 Приготовление растворов для градуировки


<a id="p100153"></a>9.3.1. Приготовление исходного раствора акрилонитрила (35,5 мг/куб. дм). В мерную колбу вместимостью 50 куб. см вносят 25 куб. см бидистиллированной воды, микрошприцем вводят 2,2 куб. мм (эквивалентно 1,773 мг) акрилонитрила, перемешивают, доводят до метки бидистиллированной водой и снова тщательно перемешивают. Массовую концентрацию акрилонитрила в основном растворе рассчитывают по формуле:

<a id="p100154"></a> $C_{\text{исх}} = \frac{m_{\text{ан}} \cdot P \cdot 1000}{V_{\text{мк}}}$ , где: (1)

<a id="p100155"></a> $\text{С}_{\text{исх}}$ - концентрация акрилонитрила в исходном растворе, мг/куб. дм;
<a id="p100156"></a> $m_{\text{ан}}$ - масса акрилонитрила, мг;
<a id="p100157"></a>Р - содержание основного вещества (1,001);

<div align="center">

<a id="p100158"></a> $V_{\text{мк}}$ - объем мерной колбы, куб. см.

</div>


<a id="p100159"></a>Концентрация исходного раствора акрилонитрила составляет 35,5 мг/куб. дм. Срок хранения исходного раствора акрилонитрила - 12 ч.
<a id="p100160"></a>9.3.2. Приготовление 1%-го раствора серной кислоты. В термостойкий химический стакан помещают 99 куб. см бидистиллированной воды, при непрерывном помешивании приливают 1 куб. см концентрированной серной кислоты. Раствор охлаждают. Срок хранения неограничен.
<a id="p100161"></a>9.3.3. Приготовление градуировочных растворов. Перед приготовлением градуировочных растворов необходимо удостовериться, что применяемая кровь не содержит акрилонитрил.
<a id="p100162"></a>Серию образцов для градуировки, состоящую из 5 аттестованных смесей, готовят в мерных пробирках вместимостью 5 куб. см. Для этого в каждую мерную пробирку микрошприцем вводят исходный раствор акрилонитрила в соответствии с табл. 2 и доводят до метки 5 куб. см крови, не содержащей определяемый компонент. Кровь подкисляют 1 куб. см 1%-го раствора серной кислоты Срок хранения градуировочных растворов - 12 ч.

<div align="center">

<a id="p100163"></a>Таблица 2

</div>


<a id="p100164"></a>Растворы для установления градуировочной характеристики


| <a id="p100165"></a>Градуировочный раствор | <a id="p100166"></a>1 | <a id="p100167"></a>2 | <a id="p100168"></a>3 | <a id="p100169"></a>4 | <a id="p100170"></a>5 |
| --- | --- | --- | --- | --- | --- |
| <a id="p100171"></a>Объем исходного стандартного раствора (35,5 мг/куб. дм), куб. мм | <a id="p100172"></a>1 | <a id="p100173"></a>10 | <a id="p100174"></a>20 | <a id="p100175"></a>30 | <a id="p100176"></a>150 |
| <a id="p100177"></a>Массовая концентрация акрилонитрила в градуировочном растворе, мг/куб. дм | <a id="p100178"></a>0,0071 | <a id="p100179"></a>0,071 | <a id="p100180"></a>0,142 | <a id="p100181"></a>0,213 | <a id="p100182"></a>1,065 |



#### <a id="p100183"></a>9.4 Построение градуировочной характеристики


<a id="p100184"></a>Градуировочную характеристику, выражающую зависимость площади хроматографического пика (Гц $\cdot$ с) от массовой концентрации акрилонитрила (мг/куб. дм) в крови, устанавливают по 5 сериям измерений по 5 концентрациям вещества в каждой серии для каждого диапазона в соответствии с [табл. 2](#p100164).
<a id="p100185"></a>Во флаконы из-под пенициллина помещают по 5 куб. см образца крови (акрилонитрил в исходной пробе крови отсутствует) с градуировочным раствором [(табл. 2)](#p100164). Кровь подкисляют 1 куб. см 1%-го раствора серной кислоты. Флаконы закрывают резиновыми пробками и ставят в металлические цилиндры с просверленными в стенках отверстиями и навинчивающейся крышкой. Первый цилиндр с флаконом погружают на 2/3 высоты в кипящую водяную баню. По истечении 5 мин. отбирают нагретым в термостате при t = 60 °С шприцем из флакона 2 куб. см парогазовой пробы и вводят ее в хроматографическую колонку через испаритель. Процедуру повторяют аналогично для каждого градуировочного раствора.
<a id="p100186"></a>На полученных хроматограммах проводят идентификацию акрилонитрила по абсолютному времени удерживания и измеряют площади пика определяемого компонента. Каждый флакон хроматографируют 1 раз. По средним результатам параллельных определений (между двумя флаконами) серии образцов для градуировки строят градуировочную характеристику.


#### <a id="p100187"></a>9.5 Контроль стабильности градуировочной характеристики


<a id="p100188"></a>Контроль стабильности градуировочной характеристики проводят не реже одного раза в квартал или при смене партии реактивов. Средствами контроля являются вновь приготовленные образцы для градуировки (не менее 2 образцов из приведенных в [п. 9.3](#p100152)).
<a id="p100189"></a>Градуировочную характеристику считают стабильной при выполнении для каждого образца для градуировки следующего условия:

<a id="p100190"></a> $|C_{m} - C| \leq 0,13 \cdot C$ , где: (2)

<div align="center">

<a id="p100191"></a>C - заданная массовая концентрация акрилонитрила в градуировочном растворе;

</div>

<a id="p100192"></a> $C_{m}$ - результат измерения массовой концентрации акрилонитрила в образце для градуировки.

<a id="p100193"></a>Если условие стабильности градуировочной характеристики не выполняется только для одного образца для градуировки, необходимо выполнить повторное измерение этого образца для исключения результата, содержащего грубую погрешность.
<a id="p100194"></a>При невыполнении условия стабильности градуировочной характеристики эксперимент повторяют с другим градуировочным раствором. При повторном невыполнении условия стабильности градуировочной характеристики выясняют и устраняют причины нестабильности градуировочной характеристики.


#### <a id="p100195"></a>9.6 Отбор проб


<a id="p100196"></a>Отбор проб крови в объеме не менее 5 куб. см производится в вакуумные пробирки для забора крови с голубой крышкой. Анализ проб крови проводят непосредственно после отбора проб. Допускается хранение проб в морозильной камере не более 5 дней.

<div align="center">

10. <a id="p100197"></a>Выполнение измерений

<a id="p100198"></a>В два флакона из-под пенициллина помещают по 5 куб. см крови и подкисляют 1 куб. см 1%-го раствора серной кислоты до рН = 2-3, флаконы закрывают резиновыми пробками и ставят в металлические цилиндры с просверленными в стенках отверстиями и навинчивающейся крышкой. Первый цилиндр с флаконом погружают в кипящую водяную баню. По истечении 5 мин. отбирают нагретым в термостате при t = 60 °С шприцем из флакона 2 куб. см парогазовой пробы и вводят ее в хроматографическую колонку через испаритель. Процедуру повторяют аналогично для второго образца и проводят выполнение измерений двух параллельных проб крови. Хроматографирование проводят в условиях в соответствии с [п. 9.2.2](#p100143). Определяемый компонент идентифицируют по абсолютному времени удерживания.<br>
<a id="p100199"></a>Для количественного расчета хроматограмм применяют метод абсолютной градуировки.

</div>


11. <a id="p100200"></a>Обработка результатов измерений

<a id="p100201"></a>11.1. На хроматограмме рассчитывают площадь пика и по градуировочному графику определяют массовую концентрацию акрилонитрила в крови (С, мг/куб. дм).
<a id="p100202"></a>11.2. За окончательный результат измерений массовой концентрации определяемого компонента в пробе (С, мг/куб. дм) принимают среднее арифметическое значение двух результатов двух параллельных определений $\text{С}_{1}$ и $\text{С}_{2}$ , полученных в условиях повторяемости:

<div align="right">

<a id="p100203"></a> $\overline{C} = \frac{C_{1} + C_{2}}{2}$ , (3)

</div>


<div align="center">

<a id="p100204"></a>для которых выполняется условие:

<a id="p100205"></a> $|C_{1} - C_{2}| \leq 0,01 \cdot r \cdot \frac{C_{1} + C_{2}}{2}$ , где: (4)

</div>


<a id="p100206"></a>r - предел повторяемости. Значения предела повторяемости приведены в [табл. 3](#p100217).
<a id="p100207"></a>При невыполнении условия (4) необходимо получить еще два результата параллельных определений. За результат измерений принимают среднее арифметическое четырех результатов измерений, полученных в условиях повторяемости, для которых выполняется условие:

<div align="center">

<a id="p100208"></a> $|C_{max,4} - C_{min,4}| \leq 0,01 \cdot CR_{0,95}(4) \cdot \frac{C_{1} + C_{2} + C_{3} + C_{4}}{4}$ , где: (5)

<a id="p100209"></a> $CR_{0,95}(4)$ - критический диапазон. Значения критического диапазона приведены в [табл. 3](#p100217).<br>
<a id="p100210"></a>Если при этом расхождение $(C_{max} - C_{min})$ результатов четырех параллельных определений равно или меньше критического диапазона $CR_{0,95}(4)$ , то в качестве окончательного результата принимают среднее арифметическое значение результатов четырех параллельных определений. Значение критического диапазона для четырех результатов параллельных определений рассчитано по формуле (4) и значение в относительных единицах приведено в [табл. 3](#p100217)

<a id="p100211"></a> $CR_{0,95}(4) = Q(0,95;4) \cdot \sigma_{r}$ , где: (6)

<a id="p100212"></a>Q(0,95;4) - коэффициент, зависящий от числа результатов единичных определений, полученных в условиях повторяемости и доверительной вероятности 0,95;

<a id="p100213"></a>Q(0,95;4) = 3,63;

<a id="p100214"></a> $\sigma_{r}$ - среднеквадратическое отклонение повторяемости, % [(табл. 1)](#p100038).

</div>

<a id="p100215"></a>Если расхождение $(C_{max} - C_{min})$ больше $CR_{0,95}(4)$ , в качестве окончательного результата измерений может быть принята медиана четырех результатов параллельных определений. Кроме того, целесообразно выяснить причины появления неприемлемых результатов параллельных определений и устранить их.

<a id="p100216"></a>Таблица 3

<a id="p100217"></a>Значения пределов повторяемости, воспроизводимости и критического

<div align="center">

диапазона при доверительной вероятности Р = 0,95

</div>



| <a id="p100218"></a>Диапазон измерений,<br>мг/куб. дм | <a id="p100219"></a>Предел повторяемости (относительное значение допускаемого расхождения между двумя результатами измерений, полученными в одной лаборатории в условиях повторяемости), r, % | <a id="p100220"></a>Критический диапазон (относительное значение допускаемого расхождения между наибольшим и наименьшим четырех результатов измерений, полученных в одной лаборатории в условиях повторяемости), $CR_{0,95}(4)$ , % | <a id="p100221"></a>Предел воспроизводимости (относительное значение допускаемого расхождения между двумя результатами измерений, полученными в разных лабораториях), R, % |
| --- | --- | --- | --- |
| <a id="p100222"></a>От 0,007 до 0,07 вкл. | <a id="p100223"></a>36 | <a id="p100224"></a>47 | <a id="p100225"></a>56 |
| <a id="p100226"></a>Св. 0,07 до 1 вкл. | <a id="p100227"></a>14 | <a id="p100228"></a>18 | <a id="p100229"></a>28 |


<a id="p100230"></a>11.3. Расхождение между результатами измерений, полученными в двух лабораториях, не должно превышать предела воспроизводимости. При выполнении этого условия приемлемы оба результата измерений и в качестве окончательного может быть использовано их общее среднее значение. Значения предела воспроизводимости приведены в [табл. 3](#p100217).
<a id="p100231"></a>При превышении предела воспроизводимости могут быть использованы методы оценки приемлемости результатов измерений согласно раздела 5 ГОСТ Р ИСО 5725-6-2002 и МИ 2881-2004.

<div align="center">

12. <a id="p100232"></a>Оформление результатов измерений

</div>


<a id="p100233"></a>Результат измерений представляют в виде $(\overline{\text{С}} + / - \Delta)$ мг/куб. дм, где:
<a id="p100234"></a> $\overline{\text{С}}$ - результат измерений массовой концентрации акрилонитрила, мг/куб. дм, полученный в соответствии с процедурами [раздела 9.4](#p100183);
<a id="p100235"></a> $\Delta$ - абсолютная характеристика погрешности измерений массовой концентрации акрилонитрила, мг/куб. дм при Р = 0,95, вычисляемая по формуле:

<div align="right">

<a id="p100236"></a> $\Delta = \frac{\delta \cdot C}{100}$ , где:

</div>


<a id="p100237"></a> $\delta$ - относительное значение характеристики погрешности измерений массовой концентрации акрилонитрила по [табл. 1](#p100038), %.

<div align="center">

13. <a id="p100238"></a>Контроль качества результатов измерений

<a id="p100239"></a>13.1. Обеспечение достоверности измерений в пределах лаборатории организуют и проводят путем проведения проверки приемлемости результатов измерений, получаемых в условиях повторяемости, внутрилабораторной прецизионности, воспроизводимости, оперативного контроля процедуры измерений и контроля стабильности результатов измерений в соответствии с ГОСТ Р ИСО 5725-6.

</div>

<a id="p100240"></a>13.2. Проверка приемлемости результатов измерений, получаемых в условиях внутрилабораторной прецизионности.
<a id="p100241"></a>Проверку приемлемости результатов измерений, получаемых в условиях внутрилабораторной прецизионности (в пределах одной лаборатории, разными операторами, в разное время), проводят по результатам измерений массовых концентраций акрилонитрила из образцов крови с одинаковым содержанием акрилонитрила. Результаты измерений признают приемлемыми при выполнении условия

<a id="p100242"></a> $\frac{|C_{1} - C_{2}|}{(C_{1} + C_{2})/2} \cdot 100\% \leq R_{\text{л}}$ , где: (7)

<a id="p100243"></a> $\text{С}_{1}$ и $\text{С}_{2}$ - результаты измерений массовых концентраций акрилонитрила, полученные в условиях внутрилабораторной прецизионности, т.е. в одной лаборатории в разное время, разными операторами;
<a id="p100244"></a> $R_{\text{л}}$ - предел внутрилабораторной прецизионности.
<a id="p100245"></a>При невыполнении [условия (7)](#p100242) процедуру повторяют. При повторном превышении предела внутрилабораторной прецизионности выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и принимают меры по их устранению. Значения предела внутрилабораторной прецизионности при доверительной вероятности Р = 0,95 приведены в табл. 4.

<div align="center">

<a id="p100246"></a>Таблица 4

</div>



| <a id="p100247"></a>Диапазон измерений, мг/куб. дм | <a id="p100248"></a>Предел внутрилабораторной прецизионности (относительное значение допускаемого расхождения между двумя результатами измерений, полученными в одной лаборатории в разное время, разными операторами), $R_{\text{л}}$ , % |
| --- | --- |
| <a id="p100249"></a>От 0,007 до 0,07 вкл. | <a id="p100250"></a>30 |
| <a id="p100251"></a>Св. 0,07 до 1 вкл. | <a id="p100252"></a>20 |


<a id="p100253"></a>13.3. Контроль процедуры измерений с использованием образцов для контроля.
<a id="p100254"></a>Образцами для контроля процедуры измерений являются образцы крови с внесенными в них добавками аттестованного раствора акрилонитрила, подготовленные в соответствии с [п. 9.3.3](#p100161). Образцы готовят таким образом, чтобы массовая концентрация акрилонитрила соответствовала нижней, верхней границам и середине диапазона измерений.
<a id="p100255"></a>Измерения массовых концентраций акрилонитрила в образцах для контроля проводят в соответствии с прописью методики измерений.
<a id="p100256"></a>Оперативный контроль процедуры измерений проводят путем сравнения результата отдельно взятой контрольной процедуры $K_{k}$ с нормативом контроля точности K.

<div align="center">

<a id="p100257"></a>Результат контрольной процедуры $K_{k}$ рассчитывают по формуле

<a id="p100258"></a> $K_{k} = |\overline{C_{i}} - C_{am}|$ , где: (8)

</div>


<a id="p100259"></a> $\overline{C_{i}}$ - результат контрольного измерения массовой концентрации акрилонитрила в образце для контроля - среднее арифметическое результатов параллельных определений, для которых выполняется [условие (1)](#p100154);
<a id="p100260"></a> $C_{am}$ - аттестованное значение массовых концентраций акрилонитрила в образце для контроля.

<div align="center">

<a id="p100261"></a>Норматив контроля К рассчитывают по формуле

</div>


<a id="p100262"></a> $K = \pm \Delta_{\text{л}}$ , где: (9)

<a id="p100263"></a> $\pm \Delta_{\text{л}}$ - границы абсолютной погрешности результатов измерений, установленные в лаборатории при реализации методики, и соответствующие аттестованному значению акрилонитрила в образце для контроля, рассчитывают по формуле:

<a id="p100264"></a> $\Delta_{\text{л}} = 0,01 \cdot \delta_{\text{л}} \cdot C_{am}$ , где:

<a id="p100265"></a> $\pm \delta_{\text{л}}$ - границы относительной погрешности результатов измерений при реализации методики измерений в лаборатории.
<a id="p100266"></a>Качество контрольной процедуры признают удовлетворительным при выполнении условия:

<div align="center">

<a id="p100267"></a> $K_{k} \leq K$ (10)

</div>


<a id="p100268"></a>При невыполнении условия (10) эксперимент повторяют. При повторном невыполнении условия (10) выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам.
<a id="p100269"></a>*Примечание.* Допустимо характеристику погрешности результатов измерений при внедрении методики в лаборатории устанавливать на основе выражения: $\Delta_{\text{л}} = 0,84 \cdot \Delta$ , с последующим уточнением по мере накопления информации в процессе контроля стабильности результатов измерений.

<a id="p100270"></a>13.4. Проверка приемлемости результатов измерений, получаемых в условиях воспроизводимости.
<a id="p100271"></a>Образцами для проверки приемлемости результатов измерений, получаемых в условиях воспроизводимости, являются образцы крови с внесенными в них добавками аттестованного раствора акрилонитрила, подготовленные в соответствии с [п. 9.3.3](#p100161).
<a id="p100272"></a>Проверку приемлемости результатов измерений, получаемых в условиях воспроизводимости, проводят по результатам измерений массовых концентраций акрилонитрила из образцов крови (специально подготовленные образцы крови с внесенными добавками аттестованного раствора акрилонитрила) с одинаковым содержанием акрилонитрила.
<a id="p100273"></a>Результаты измерений признают приемлемыми при выполнении условия

<a id="p100274"></a> $\frac{|\overline{C_{1}} - \overline{C_{2}}|}{(\overline{C_{1}} - \overline{C_{2}})/2} \cdot 100\% \leq R$ , где: (11)

<div align="center">

<a id="p100275"></a> $\overline{C_{1}}$ и $\overline{\text{С}_{2}}$ - результаты измерений массовых концентраций акрилонитрила (средние арифметические параллельных определений), полученные в условиях воспроизводимости, т.е. в разных лабораториях;<br>
<a id="p100276"></a>R - предел воспроизводимости, значения предела воспроизводимости приведены в [табл. 3](#p100217).<br>
<a id="p100277"></a>При выполнении [условия (11)](#p100274) результаты измерений, полученные в двух лабораториях, являются совместимыми и может быть рассчитано общее среднее арифметическое результатов измерений, полученных в двух лабораториях.<br>
<a id="p100278"></a>При невыполнении [условия (11)](#p100274) могут быть проведены процедуры проверки приемлемости согласно раздела 5 ГОСТ Р ИСО 5725-6.<br>
<a id="p100279"></a>13.5. Периодичность контроля исполнителем процедуры выполнения измерений, а также реализуемые процедуры контроля стабильности результатов выполняемых измерений регламентируют во внутренних документах лаборатории.

</div>




<a id="p100280"></a>

---