МУК 4.1.243-96. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение концентрации метиоприла в воздухе рабочей зоны методом ВЭЖХ. Методические указания

(утв. Госкомсанэпиднадзором России 08.06.1996)

8 июня 1996 года

4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

ОПРЕДЕЛЕНИЕ КОНЦЕНТРАЦИИ МЕТИОПРИЛА В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ МЕТОДОМ ВЭЖХ

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

1. Методические указания по измерению концентрации вредных веществ в воздухе рабочей зоны (выпуск 30) разработаны с целью обеспечения контроля соответствия фактических концентраций вредных веществ их предельно допустимым концентрациям (ПДК) и ориентировочно безопасным уровням воздействия (ОБУВ) — санитарно-гигиеническим нормативам и являются обязательными при осуществлении санитарного контроля.

2. Методические указания по измерению концентраций вредных веществ в воздухе рабочей зоны утверждены и.о. Председателя Госкомсанэпиднадзора России — заместителем Главного государственного санитарного врача Российской Федерации 8 июня 1996 г.

3. Введены впервые.

4. Методические указания по контролю вредных веществ в воздухе рабочей зоны разработаны и подготовлены в соответствии с требованиями ГОСТа 12.1.005-88. ССБТ «Воздух рабочей зоны. Общие санитарно-гигиенические требования», ГОСТа 12.1.016-79. ССБТ «Воздух рабочей зоны. Требования к методикам измерения концентраций вредных веществ» и ГОСТа Р 1.5-92, п. 7.3.

Методические указания одобрены на совместном заседании группы Главного эксперта Федеральной комиссии по санитарно-гигиеническому нормированию «Лабораторно-инструментальное дело и метрологическое обеспечение» и методбюро п/секции «Промышленно-санитарная химия» Проблемной комиссии «Научные основы гигиены труда и профпатологии».

Ответственные исполнители: Г.А. Дьякова, С.И. Муравьева.

Исполнители: Г.А. Дьякова, Н.С. Горячев, Л.Г. Макеева, Г.В. Муравьева, Е.М. Малинина, Е.В. Грыжина, Е.Н. Грицун.

Метиоприл-цис-1,3-ацетилмеркаптопропионил-6-метилпипеколиновая кислота.

Структурная формула (не приводится).

    C  H  NO S                                        М. м. 273,35
     12 19  4

Лекарственный препарат с антигипертензивными свойствами.

Твердое кристаллическое вещество белого цвета без запаха.

Т — 97 — 102 °С. Легко растворимо в 95%-ном этаноле, пл. метаноле и хлороформе; плохо растворимо в эфире, почти не растворимо в воде.

Обладает слабо раздражающим действием на слизистую оболочку и кумулятивным эффектом.

ОБУВ в воздухе — 3 мг/куб. м.

Характеристика метода

Определение метиоприла в воздухе рабочей зоны основано на концентрировании аэрозоля метиоприла на фильтре, экстракции метиоприла из фильтра этиловым спиртом и анализе методом жидкостной хроматографии со спектрофотометрическим детектированием.

Нижний предел обнаружения метиоприла в анализируемой пробе (10 мкл) — 0,1 мкг.

Нижний предел обнаружения метиоприла в воздухе рабочей зоны — 0,1 мг/куб. м (при объеме пробы воздуха 100 л).

Диапазон определения концентраций метиоприла — 1 - 5 мг/куб. м.

Длительность анализа, включая пробоотбор, — 50 мин.

Определению мешает диэтиламмониевая соль метиоприла. Не мешают: метилпиколиновая кислота, хлорангидрид метилпипеколиновой кислоты.

Приборы, аппаратура, посуда

Микроколоночный жидкостный хроматограф «Милихром», среднее квадратичное отклонение выходных сигналов которого не превышает 3% во всем диапазоне чувствительности

Колонка типа КАХ-2-64-3 ТУ 25-74-5.003-86

Иономер универсальный типа ЭВ-74 с погрешностью измерения не более 0,05 рН (допускается применение рН-метров с аналогичными метрологическими характеристиками)

Водоструйный насос ГОСТ 25336-82

Электроаспиратор с расходомером ЭА-1            ТУ 25-11.1414-78
Весы лабораторные общего назначения, 2-го       ГОСТ 24104-88

класса точности с наибольшим пределом взвешивания 200 г

Аппарат для встряхивания пробирок АВ-30С

Испаритель вакуумный типа ЭРА-М

Колбы 2(1)-50, 500, 1000-2 ГОСТ 20292-74

Пипетки 4(5)-1-(2); 6(7)-1-5(10) ГОСТ 20292-74

Пробирки П 1-16-150 ХС ГОСТ 25336-82

Цилиндры 1 (2,3,4)-50, 10 ГОСТ 1770-74

Пробирки резиновые конусные по действующей НТД

Фильтр ФКВ-60-ПОР 250 ХС ГОСТ 25336-82

Фильтродержатель с мембранным капроновым фильтром (25 мм, 0,2 мкм, МО КНПО «Диагностикум»).

Реактивы, растворы, материалы

Калий фосфорнокислый двузамещенный, ч.д.а       ГОСТ 2593-75
Метанол, яд, ос.ч.                              ТУ 6-09-14-2192-85

Метиоприл, содержание основного вещества 98,5%

Ортофосфорная кислота, ос.ч., ГОСТ 6552-80 концентрированная

Вода дистиллированная ГОСТ 6709-72

Спирт изопропиловый, х.ч. ТУ 6-09-402-81

Спирт этиловый, ректификованный ГОСТ 18300-87.

Допускается применение импортной лабораторной посуды, аппаратуры и реактивов по качеству не ниже отечественных.

Отбор пробы воздуха

С помощью электроаспиратора через фильтр, закрепленный в фильтродержателе, в течение 10 мин. пропускают 100 л воздуха со скоростью 10 л/мин.

Экспонированный фильтр помещают в бюкс и хранят до анализа в холодильнике не более недели.

Подготовка к измерению

Приготовление 0,05 М раствора калия фосфорнокислого двузамещенного, рН = 4,2.

Для приготовления раствора навеску 11,6 г калия фосфорнокислого двузамещенного переносят в мерную колбу, вместимостью 1000 куб. см, растворяют в небольшом количестве воды и доводят рН раствора до 4,2 добавкой концентрированной ортофосфорной кислоты, добавляют дистиллированную воду до метки. Раствор хранят в холодильнике до полного использования.

Элюент: 40 мл метанола смешивают с 60 мл 0,05 М раствора калия фосфорнокислого двузамещенного, рН = 4,2. Элюент хранят в холодильнике в течение месяца.

Исходный и градуировочный раствор метиоприла: готовится 100 мл исходного раствора метиоприла с массовой концентрацией 0,2 мг/мл. В качестве растворителя используют элюент.

Разбавлением исходного раствора метиоприла готовят калибровочные растворы с массовыми концентрациями 10, 20, 40, 60, 80 и 100 мкг/мл.

Подготовка исследуемого образца к анализу. Фильтр с осажденным на него метиоприлом помещают в пробирку с 3 мл этилового спирта и встряхивают в течение 5 мин. Раствор декантируют, пробирку с фильтром еще 2 раза встряхивают с 2 мл этилового спирта. Экстракты объединяют, фильтруют через стеклянный фильтр и упаривают досуха на вакуумном испарителе. Осадок растворяют в 1 мл элюента и используют для анализа. При необходимости делают разведения для получения удобно обсчитываемых пиков метиоприла на хроматограммах.

Подготовка колонки к проведению анализа. Колонку промывают изопропиловым спиртом (2,5 мл), затем дистиллированной водой (2,5 мл) и элюентом до установления стабильной нулевой линии. Скорость потока — 100 мкл/мин.

Все используемые жидкости должны быть предварительно дегазированы.

Построение градуировочного графика. Для построения градуировочного графика используют свежеприготовленные калибровочные растворы.

10 мкл каждого градуировочного раствора метиоприла вводят в колонку хроматографа и проводят анализ при следующих условиях:

температура колонки                             20 °С;
скорость потока элюента                         10 мкл/мин.;
длина волны детектора                           230 нм;
чувствительность детектора                      0,8 А;
скорость диаграммной ленты                      0,6 см/мин.;
время выхода метиоприла                         6,3 мин.;
объем удерживания                               0,63 мл.

Измеряют площади пика метиоприла на полученных хроматограммах. На основании проведенных измерений строят калибровочный график (для каждой новой колонки) в координатах: по оси абсцисс — концентрация метиоприла в растворе (мг/мл), по оси ординат — площадь пика метиоприла (кв. мм). Каждую точку получают на основании 6 измерений. При использовании одной колонки калибровочный график проверяют не реже 1 раза в квартал.

Проведение измерений

В колонку хроматографа вносят 10 мкл подготовленного раствора анализируемого образца и проводят анализ при условиях, описанных в разделе «калибровка». В случае получения очень большого пика метиоприла, выходящего за пределы шкалы самописца, анализ повторяют, предварительно приготовив разведение анализируемого образца, или наносят на колонку хроматографа меньшее количество неразведенного раствора.

Вычисляют площадь пика метиоприла для каждого анализа (не менее 5) и находят среднеарифметическую величину, по которой определяют массовую концентрацию метиоприла в растворе по градуировочному графику.

Обработка результатов

Концентрацию метиоприла (С) в воздухе рабочей зоны (мг/куб. м) определяют по формуле:

                           А х V
                                1

С = ------, V

где:

    А  - концентрация метиоприла в анализируемой пробе; определяют
по  калибровочному  графику  на основании площади пика метиоприла,

мкг; V — общий объем раствора, мл; 1 V — объем воздуха, пропущенного через фильтр и приведенного к нормальным условиям, куб. м (см. Приложение 1).

Методические указания разработаны НИИ медицины труда, г. Москва.

Приведение объема воздуха к стандартным условиям проводят по формуле:

                       V  х (273 + 20) х Р
                        t

                     V   = -------------------,
                      ст    (273 + t°) х 760

где:
V  - объем воздуха, отобранного для анализа, л;
 t
Р  -  барометрическое  давление,  мм рт. ст. (760 мм рт. ст. =

101,33 кПа); t° — температура воздуха в месте отбора пробы, °С.

Для удобства расчета V следует пользоваться таблицей ст коэффициентов (Приложение 2). Для приведения объема воздуха к

температуре  20  °С  и  давлению  760 мм рт. ст. (101,33 кПа) надо
умножить V  на соответствующий коэффициент.

      t

Давление Р, кПа/мм рт. ст.
°C	730	734	738	742	746	750	754	758	760	764
-30	1,1582	1,1646	1,1709	1,1772	1,1836	1,1899	1,1963	1,2026	1,2058	1,2122
-26	1,1393	1,1456	1,1519	1,1581	1,1644	1,1705	1,1768	1,1831	1,1862	1,1925
-22	1,1212	1,1274	1,1336	1,1396	1,1458	1,1519	1,1581	1,1643	1,1673	1,1735
-18	1,1036	1,1097	1,1158	1,1218	1,1278	1,1338	1,1399	1,1400	1,1490	1,1551
-14	1,0866	1,0926	1,0986	1,1045	1,1105	1,1164	1,1224	1,1284	1,1313	1,1373
-10	1,0701	1,0760	1,0819	1,0877	1,0986	1,0994	1,1053	1,1112	1,1141	1,1200
-6	1,0540	1,0599	1,0657	1,0714	1,0772	1,0829	1,0887	1,0945	1,0974	1,1032
-2	1,0385	1,0442	1,0499	1,0556	1,0613	1,0669	1,0726	1,0784	1,0812	1,0869
0	1,0309	1,0366	1,0423	1,0477	1,0535	1,0591	1,0648	1,0705	1,0733	1,0789
+2	1,0234	1,0291	1,0347	1,0402	1,0459	1,0514	1,0571	1,0627	1,0655	1,0712
+6	1,0087	1,0143	1,0198	1,0253	1,0309	1,0363	1,0419	1,0475	1,0502	1,0557
+10	0,9944	0,9999	1,0054	1,0108	1,0162	1,0216	1,0272	1,0326	1,0353	1,0407
+14	0,9806	0,9860	0,9914	0,9967	1,0027	1,0074	1,0128	1,0183	1,0209	1,0263
+18	0,9671	0,9725	0,9778	0,9880	0,9884	0,9936	0,9989	1,0043	1,0069	1,0122
+20	0,9605	0,9658	0,9711	0,9783	0,9816	0,9868	0,9921	0,9974	1,0000	1,0053
+22	0,9539	0,9592	0,9645	0,9696	0,9749	0,9800	0,9853	0,9906	0,9932	0,9985
+24	0,9475	0,9527	0,9579	0,9631	0,9683	0,9735	0,9787	0,9839	0,9865	0,9917
+26	0,9412	0,9464	0,9516	0,9566	0,9618	0,9669	0,9721	0,9773	0,9799	0,9851
+28	0,9349	0,9401	0,9453	0,9503	0,9655	0,9605	0,9657	0,9708	0,9734	0,9785
+30	0,9288	0,9339	0,9891	0,9440	0,9432	0,9542	0,9594	0,9645	0,9670	0,9723
+34	0,9167	0,9218	0,9268	0,9318	0,9368	0,9418	0,9468	0,9519	0,9544	0,9595
+38	0,9049	0,9099	0,9149	0,9198	0,9248	0,9297	0,9347	0,9397	0,9421	0,9471

---