МУК 4.1.230-96. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Измерение концентраций 2(пара-изобутилфенил)-пропионовой кислоты (ибупрофена) методом тонкослойной хроматографии в воздухе рабочей зоны. Методические указания

(утв. Госкомсанэпиднадзором России 08.06.1996)

8 июня 1996 года

4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

ИЗМЕРЕНИЕ КОНЦЕНТРАЦИЙ 2(ПАРА-ИЗОБУТИЛФЕНИЛ)-ПРОПИОНОВОЙ КИСЛОТЫ (ИБУПРОФЕНА) МЕТОДОМ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

с момента утверждения

1. Методические указания по измерению концентрации вредных веществ в воздухе рабочей зоны (выпуск 30) разработаны с целью обеспечения контроля соответствия фактических концентраций вредных веществ их предельно допустимым концентрациям (ПДК) и ориентировочно безопасным уровням воздействия (ОБУВ) — санитарно-гигиеническим нормативам и являются обязательными при осуществлении санитарного контроля.

2. Методические указания по измерению концентраций вредных веществ в воздухе рабочей зоны утверждены и.о. Председателя Госкомсанэпиднадзора России — заместителем Главного государственного санитарного врача Российской Федерации 8 июня 1996 г.

3. Введены впервые.

4. Методические указания по контролю вредных веществ в воздухе рабочей зоны разработаны и подготовлены в соответствии с требованиями ГОСТа 12.1.005-88. ССБТ «Воздух рабочей зоны. Общие санитарно-гигиенические требования», ГОСТа 12.1.016-79. ССБТ «Воздух рабочей зоны. Требования к методикам измерения концентраций вредных веществ» и ГОСТа Р 1.5-92, п. 7.3.

Методические указания одобрены на совместном заседании группы Главного эксперта Федеральной комиссии по санитарно-гигиеническому нормированию «Лабораторно-инструментальное дело и метрологическое обеспечение» и методбюро п/секции «Промышленно-санитарная химия» Проблемной комиссии «Научные основы гигиены труда и профпатологии».

Ответственные исполнители: Г.А. Дьякова, С.И. Муравьева.

Исполнители: Г.А. Дьякова, Н.С. Горячев, Л.Г. Макеева, Г.В. Муравьева, Е.М. Малинина, Е.В. Грыжина, Е.Н. Грицун.

Структурная схема (не приводится).

М. м. 206,29

    2(пара-изобутилфенил)  -  пропионовая  кислота  (ибупрофен)  -
белый или белый с кремоватым оттенком порошок с Т    - 74 - 77 °С.

                                             пл.

Практически не растворим в воде, растворим в органических растворителях.

В воздухе находится в виде аэрозоля и паров.

Обладает общетоксическим действием.

Характеристика метода

Методика основана на хроматографировании вещества в тонком слое сорбента на пластинках «Силуфол» с последующим проявлением хроматограмм 10%-ным раствором фосфорно-молибденовой кислоты в этаноле и денситометрировании окрашенных зон.

Отбор проб проводят с концентрированием на фильтр и этанол.

Нижний предел измерения вещества в анализируемом объеме пробы — 2 мкг.

Нижний предел измерения вещества в воздухе — 0,5 мг/куб. м (при отборе 20 л воздуха).

Диапазон измеряемых концентраций в воздухе — от 0,5 до 12,5 мг/куб. м.

Метод специфичен в условиях производства.

Суммарная погрешность измерения не превышает +/- 20%.

Приборы, аппаратура, посуда

Камера хроматографическая ГОСТ 20565-75

Пластинки для тонкослойной хроматографии «Силуфол» UV-254

Аспирационное устройство

Фильтродержатель

Колба грушевидная вместимостью 50 мл              ГОСТ 10394-72
Колбы мерные вместимостью 25 и 100 мл             ГОСТ 1770-74

Микропипетки вместимостью 1, 2, 5, 10 мл ГОСТ 20292-74

Пипетки вместимостью 1, 2, 5 и 10 мл ГОСТ 20292-75

Прибор Гернет

Пульверизатор стеклянный ГОСТ 10391-74

Вакуумная установка

Сушильный шкаф

Денситометр «БИАН-170» или «Спекорд» № 40 с приставкой для измерения отражения с фотометрическим шаром

Стаканы химические вместимостью 50 мл ГОСТ 10394-72.

Реактивы, растворы, материалы

Этиловый спирт                                    ГОСТ 5963-67
Гексан, ч.                                        ТУ 6-09-3375-78

Этилацетат х.ч. ГОСТ 22300-76

Кислота уксусная ледяная, х.ч. ГОСТ 61-75.

Подвижный растворитель: гексан-этилацетат — ледяная уксусная кислота (15:2, 5:1).

Проявляющий реактив: 10%-ный раствор фосфорно-молибденовой кислоты в этаноле.

Стандартный раствор № 1 с концентрацией 1000 мкг/мл готовят растворением точной навески 0,1000 г вещества в этаноле в мерной колбе, вместимостью 100 мл. Раствор устойчив в течение месяца при хранении в холодильнике.

Стандартные растворы с концентрацией ибупрофена 20 — 50 — 100 — 200 — 400 — 500 мкг/мл готовят соответствующим разбавлением этанола стандартного раствора № 1. Растворы устойчивы в течение 2-х недель при хранении в холодильнике.

АФА-ВП-10 ТУ 95-743-80.

Отбор пробы воздуха

Воздух с объемным расходом 2 л/мин. аспирируют через последовательно соединенные фильтр АФА-ВП-10 и прибор Гернет с 8 мл этанола при охлаждении (лед + вода).

Для измерения 1/2 ОБУВ следует отобрать 20 л воздуха.

Срок хранения отобранных проб — сутки.

Проведение измерения

Фильтр с отобранной пробой и раствор из поглотительного сосуда Гернет переносят в химический стакан, доводят объем до 10 мл этанолом и оставляют на 15 мин., периодически помешивая стеклянной палочкой. Степень десорбции вещества с фильтра — 96%. Полученный раствор сливают в остродонную колбу и упаривают досуха под вакуумом при температуре 50 — 60 °С. Сухой остаток растворяют в 0,5 мл растворителя и используют полученный раствор для анализа.

На линию старта (от края 1,5 см) наносят при помощи микропипетки по 0,1 мл растворов пробы и стандартных растворов с концентрациями вещества от 20 до 500 мкг/мл (размер пятен не должен превышать 0,5 см). Пластинку высушивают на воздухе в течение 3 мин. и помещают в камеру для хроматографирования с системой растворителей: гексан-этилацетат — ледяная уксусная кислота (15:2, 5:1).

После того, как подвижный растворитель поднимается на 10 см, пластинку вынимают из камеры и помещают в сушильный шкаф при температуре 120 °С на 15 мин., затем опрыскивают раствором фосфорно-молибденовой кислоты и нагревают в сушильном шкафу при 120 °С 15 мин. Вещество проявляется в виде темно-синего пятна с Rf = 0,41 +/- 0,02. Окраска пятна устойчива в течение суток.

Количественное измерение содержания ибупрофена в пробе проводят путем измерения пятен проб и стандартов с помощью планиметра или денситометра.

Интенсивность окраски пятен ибупрофена измеряют на спекорде № 40 с приставкой для измерения отражения с фотометрическим шаром при длине волны 794 нм по отношению к поверхности фона. В качестве фона используется участок исследуемой пластинки без ибупрофена. Для каждой концентрации измеряют Т в %. Оптическая плотность Д и отражение Т связаны между собой следующим образом:

Д = — lg Т,

где Т - выражен в процентах, отсюда:

                                  1

Д = лямбда гамма — х 100 Т

или

Д = 2 — lg Т.

Строят градуировочный график: на ось ординат наносят значения оптических плотностей градуировочных хроматограмм, на ось абсцисс — соответствующие им концентрации вещества (мкг) в анализируемом объеме пробы.

Обработка результатов и расчет концентрации

При использовании планиметра количество вещества (С) в анализируемом объеме пробы (мкг) находят по формуле:

                           м х S
                                х

С = ------, S ст

где:
м - содержание ибупрофена на пятне стандарта, мкг;
S  - площадь пятна пробы, кв. мм;
 х
S   - площадь пятна стандарта, кв. мм.
 ст

При использовании денситометра содержание ибупрофена в анализируемом объеме находят по градуировочному графику.

Концентрацию ибупрофена (С) в воздухе (мг/куб. м) вычисляют по формуле:

                           а х в

С = -----, б х V

где:

а — содержание ибупрофена, найденное в анализируемом объеме пробы, мкг;

в — общий объем пробы, мл;

б — объем пробы, взятой для анализа, мл;

V — объем воздуха, отобранного для анализа и приведенного к нормальным условиям, л (см. Приложение 1).

Методические указания разработаны ВНЦ БАВ, НИО «Экотокс», г. Москва.

Приведение объема воздуха к стандартным условиям проводят по формуле:

                       V  х (273 + 20) х Р
                        t

                     V   = -------------------,
                      ст    (273 + t°) х 760

где:
V  - объем воздуха, отобранного для анализа, л;
 t
Р  -  барометрическое  давление,  мм рт. ст. (760 мм рт. ст. =

101,33 кПа); t° — температура воздуха в месте отбора пробы, °С.

Для удобства расчета V следует пользоваться таблицей ст коэффициентов (Приложение 2). Для приведения объема воздуха к

температуре  20  °С  и  давлению  760 мм рт. ст. (101,33 кПа) надо
умножить V  на соответствующий коэффициент.

      t

Давление Р, кПа/мм рт. ст.
°С	730	734	738	742	746	750	754	758	760	764
-30	1,1582	1,1646	1,1709	1,1772	1,1836	1,1899	1,1963	1,2026	1,2058	1,2122
-26	1,1393	1,1456	1,1519	1,1581	1,1644	1,1705	1,1768	1,1831	1,1862	1,1925
-22	1,1212	1,1274	1,1336	1,1396	1,1458	1,1519	1,1581	1,1643	1,1673	1,1735
-18	1,1036	1,1097	1,1158	1,1218	1,1278	1,1338	1,1399	1,1400	1,1490	1,1551
-14	1,0866	1,0926	1,0986	1,1045	1,1105	1,1164	1,1224	1,1284	1,1313	1,1373
-10	1,0701	1,0760	1,0819	1,0877	1,0986	1,0994	1,1053	1,1112	1,1141	1,1200
-6	1,0540	1,0599	1,0657	1,0714	1,0772	1,0829	1,0887	1,0945	1,0974	1,1032
-2	1,0385	1,0442	1,0499	1,0556	1,0613	1,0669	1,0726	1,0784	1,0812	1,0869
0	1,0309	1,0366	1,0423	1,0477	1,0535	1,0591	1,0648	1,0705	1,0733	1,0789
+2	1,0234	1,0291	1,0347	1,0402	1,0459	1,0514	1,0571	1,0627	1,0655	1,0712
+6	1,0087	1,0143	1,0198	1,0253	1,0309	1,0363	1,0419	1,0475	1,0502	1,0557
+10	0,9944	0,9999	1,0054	1,0108	1,0162	1,0216	1,0272	1,0326	1,0353	1,0407
+14	0,9806	0,9860	0,9914	0,9967	1,0027	1,0074	1,0128	1,0183	1,0209	1,0263
+18	0,9671	0,9725	0,9778	0,9880	0,9884	0,9936	0,9989	1,0043	1,0069	1,0122
+20	0,9605	0,9658	0,9711	0,9783	0,9816	0,9868	0,9921	0,9974	1,0000	1,0053
+22	0,9539	0,9592	0,9645	0,9696	0,9749	0,9800	0,9853	0,9906	0,9932	0,9985
+24	0,9475	0,9527	0,9579	0,9631	0,9683	0,9735	0,9787	0,9839	0,9865	0,9917
+26	0,9412	0,9464	0,9516	0,9566	0,9618	0,9669	0,9721	0,9773	0,9799	0,9851
+28	0,9349	0,9401	0,9453	0,9503	0,9655	0,9605	0,9657	0,9708	0,9734	0,9785
+30	0,9288	0,9339	0,9891	0,9440	0,9432	0,9542	0,9594	0,9645	0,9670	0,9723
+34	0,9167	0,9218	0,9268	0,9318	0,9368	0,9418	0,9468	0,9519	0,9544	0,9595
+38	0,9049	0,9099	0,9149	0,9198	0,9248	0,9297	0,9347	0,9397	0,9421	0,9471

---