---
title: "\"МУК 4.1.2009-05. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств цетилпиридиний хлорида в мясе кур и продуктах его переработки. Методические указания\""
number: "МУК 4.1.2009-05"
status: действует
canonical: "https://bukva.ai/docs/ukazanie-ukazaniya-muk-4-1-2009-05"
---

## "МУК 4.1.2009-05. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств цетилпиридиний хлорида в мясе кур и продуктах его переработки. Методические указания"

# "МУК 4.1.2009-05. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств цетилпиридиний хлорида в мясе кур и продуктах его переработки. Методические указания"

(утв. Роспотребнадзором 17.10.2005)

> [!IMPORTANT]
> Документ включен в Перечень основных действующих нормативно-методических документов по методам лабораторного и инструментального контроля в системе государственного санитарно-эпидемиологического нормирования (Письмо Роспотребнадзора от 02.12.2008 N 01/14262-8-32).
> Документ [введен](#p100002) в действие с 17 октября 2005 года.


<div align="right">

<a id="p100001"></a>Утверждаю<br>
Руководитель<br>
Федеральной службы<br>
по надзору в сфере<br>
защиты прав потребителей<br>
и благополучия человека,<br>
Главный государственный<br>
санитарный врач<br>
Российской Федерации<br>
**Г.Г.ОНИЩЕНКО**

</div>

17 октября 2005 года


#### <a id="p100003"></a>4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ


<a id="p100004"></a>**ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ ЦЕТИЛПИРИДИНИЙ ХЛОРИДА**
**В МЯСЕ КУР И ПРОДУКТАХ ЕГО ПЕРЕРАБОТКИ**

<a id="p100005"></a>**МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ**

<div align="center">

**МУК 4.1.2009-05**

</div>


<div align="right">

<a id="p100002"></a>Дата введения

</div>

с момента утверждения

1. <a id="p100006"></a>Методические указания подготовлены ГУ НИИ питания РАМН.
2. <a id="p100007"></a>Рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию при Федеральной службе по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (протокол N 3 от 6 октября 2005 г.).
3. <a id="p100008"></a>Утверждены руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации, академиком РАМН Г.Г. Онищенко 17 октября 2005 г.
4. <a id="p100009"></a>Введены впервые.

<a id="p100010"></a>Настоящие Методические указания устанавливают хроматографическую методику выполнения измерений массовой концентрации цетилпиридиний хлорида (ЦПХ) в мясе кур и продуктах его переработки и предназначены для проведения лабораторных исследований мяса кур и продуктов его переработки учреждениями Роспотребнадзора Российской Федерации, на предприятиях и в организациях, осуществляющих контроль качества и безопасности продовольственного сырья и продуктов питания в соответствии с СанПиН 2.3.2.1078-01 "Гигиенические требования безопасности и пищевой ценности пищевых продуктов".


## 1. <a id="p100011"></a>Краткая характеристика препарата


<a id="p100012"></a>Общепринятое название: цетилпиридиний хлорид (ЦПХ).
<a id="p100013"></a>Название по номенклатуре ИЮПАК: N-цетилпиридиний хлорид.
<a id="p100014"></a>Структурная формула: (не приводится).
<a id="p100015"></a>    Эмпирическая формула: C  H  NCl, моногидрат        М. м. 339,5
                           21 38
<a id="p100016"></a>Физические свойства: белый порошок, без запаха, температура плавления 77 - 83 °С, рН 1%-ного водного раствора 6,0 - 7,0. Хорошо растворим в воде, спирте и хлороформе, нерастворим в эфире.
<a id="p100017"></a>Торговая марка: технологическое вспомогательное средство "Секур" ("Cecure").
<a id="p100018"></a>Фирма-производитель: "Safe Food Corporation", США.
<a id="p100019"></a>Форма выпуска: водный раствор цетилпиридиний хлорида и пропиленгликоля.
<a id="p100020"></a>Область применения. Технологическое вспомогательное средство "Секур" предназначено для использования в пищевой промышленности для противомикробной обработки поверхности сырых тушек домашней птицы. Средство распыляется на сырые тушки домашней птицы перед погружением в охладитель в количестве не более 0,66 грамм ЦПХ на килограмм тушки.
<a id="p100021"></a>Гигиенические нормативы. Установленное предельно допустимое содержание остатков ЦПХ составляет 4,0 мг на кг птицы.


## 2. <a id="p100022"></a>Методика определения остаточных количеств ЦПХ в мясе кур и продуктах его переработки методом высокоэффективной жидкостной хроматографии



### <a id="p100023"></a>2.1. Основные положения



#### <a id="p100024"></a>2.1.1. Принцип метода


<a id="p100025"></a>Методика основана на определении остаточных количеств ЦПХ в мясе кур и продуктах его переработки методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) с ультрафиолетовым детектированием при длине волны 260 нм после водно-спиртовой экстракции ЦПХ из анализируемых проб и обезжиривании экстракта. Количественное определение проводится методом абсолютной калибровки.


#### <a id="p100026"></a>2.1.2. Метрологические характеристики метода


<a id="p100027"></a>Таблица 1

<a id="p100028"></a>**МЕТРОЛОГИЧЕСКИЕ ПАРАМЕТРЫ**


<table>
<colgroup><col width="14%"><col width="14%"><col width="22%"><col width="15%"><col width="15%"><col width="20%"></colgroup>
<tr><td>Анализируемый</td><td colspan="5">Метрологические параметры, Р = 0,95, n = 10</td></tr>
<tr><td>объект</td><td>предел обнаружения, мг/кг</td><td>диапазон определяемых концентраций, мг/кг</td><td>среднее значение определения, %</td><td>стандарт. отклон., S</td><td>доверит. интервал среднего результата, %, +/-</td></tr>
<tr><td>Кожа и мясо кур</td><td>0,02</td><td>0,08 - 5</td><td>86,6</td><td>3,4</td><td>86,6 +/- 2,1</td></tr>
</table>


<a id="p100031"></a>Таблица 2

<div align="center">

<a id="p100032"></a>**ПОЛНОТА ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЦЕТИЛПЕРИДИНИЙ ХЛОРИДА**

</div>

**В КОЖЕ И МЯСЕ КУР (5 ПОВТОРНОСТЕЙ ДЛЯ КАЖДОЙ КОНЦЕНТРАЦИИ)**


<table>
<colgroup><col width="22%"><col width="17%"><col width="17%"><col width="22%"><col width="23%"></colgroup>
<tr><td>Анализируемый объект</td><td>Добавлено ЦПХ, мг/кг</td><td>Обнаружено ЦПХ, мг/кг</td><td>Доверительный интервал, +/-</td><td>Полнота определения, %</td></tr>
<tr><td rowspan="5">Кожа кур</td><td>5</td><td>4,63</td><td>0,05</td><td>92,6</td></tr>
<tr><td>2</td><td>1,67</td><td>0,04</td><td>83,5</td></tr>
<tr><td>0,8</td><td>0,70</td><td>0,01</td><td>87,5</td></tr>
<tr><td>0,2</td><td>0,16</td><td>0,01</td><td>80,0</td></tr>
<tr><td colspan="3">Среднее:</td><td>85,9</td></tr>
<tr><td rowspan="5">Мясо кур</td><td>5</td><td>4,83</td><td>0,04</td><td>96,6</td></tr>
<tr><td>2</td><td>1,69</td><td>0,04</td><td>84,5</td></tr>
<tr><td>0,8</td><td>0,66</td><td>0,01</td><td>82,5</td></tr>
<tr><td>0,2</td><td>0,17</td><td>0,02</td><td>85,0</td></tr>
<tr><td colspan="3">Среднее:</td><td>87,2</td></tr>
</table>



### <a id="p100036"></a>2.2. Реактивы


<a id="p100037"></a>Спирт этиловый ректификованный технический, ГОСТ 18300;
<a id="p100038"></a>Ацетонитрил, ч., ТУ 6-09-3534-74;
<a id="p100039"></a>Н-Гексан, х.ч., по ТУ 6-09-4521-84;
<a id="p100040"></a>Вода дистиллированная, ГОСТ 6709;
<a id="p100041"></a>Кислота трифторуксусная > 99,8%, х.ч., [ГОСТ 18270-72](https://bukva.ai/docs/gost-18270-72);
<a id="p100042"></a>Цетилпиридиний хлорид моногидрат, Zeeland Chemicals Inc., (США).


### <a id="p100043"></a>2.3. Приборы, аппаратура, посуда


<a id="p100044"></a>Жидкостной хроматограф высокого давления с подачей растворителя от 0,1 до 5,0 куб. см/мин., оборудованный спектрофотометрическим детектором с переменной длиной волны (Jasco) и системой для сбора и обработки хроматографических данных Мультифром 1.5х (Амперсенд, Россия).
<a id="p100045"></a>Колонка для ВЭЖХ PLRP-S (Polymer Labs, США) с размером частиц 5 мкм; длина колонки - 25 см, внутренний диаметр колонки - 0,46 см.
<a id="p100046"></a>Микрошприцы объемом 10 и 25 мкл для жидкостной хроматографии (Hamilton, США).
<a id="p100047"></a>Спектрофотометр СФ-26 или подобный, позволяющий проводить измерения при длинах волн 200 - 350 нм, с допустимой абсолютной погрешностью измерений коэффициента пропускания не более 1%.
<a id="p100048"></a>Аппарат для встряхивания проб типа АВУ-6С, ТУ 64-1-2451-78.
<a id="p100049"></a>Весы лабораторные общего назначения по ГОСТ 24104 с наибольшим пределом взвешивания 200 г и погрешностью +/- 0,0001 г.
<a id="p100050"></a>Ротационный испаритель ИР-1М или аналогичный, ТУ 25-11-917.
<a id="p100051"></a>Дистиллятор.
<a id="p100052"></a>Блендер.
<a id="p100053"></a>Баллон с сжатым азотом квалификации ПНГ.
<a id="p100054"></a>Воронка делительная на 250 куб. см по ГОСТ 10054.
<a id="p100055"></a>Колбы мерные наливные 2-50-2, 2-100-2, 2-250-2, 1-1000-2 по ГОСТ 1770.
<a id="p100056"></a>Колбы грушевидные по ГОСТ 25336 с конусом 14/23 вместимостью 100 куб. см.
<a id="p100057"></a>Цилиндры по ГОСТ 1770 вместимостью 100 куб. см.
<a id="p100058"></a>Пипетки 4-1-2 или 5-1-2, 4-2-10 или 5-2-10, 4-2-25 или 5-2-25 по ГОСТ 29227.
<a id="p100059"></a>Фильтры обеззольные ФО-ФС-15 "Красная лента" и "Синяя лента" по ТУ 2642-001-42624157-98.
<a id="p100060"></a>Допускается использование приборов и посуды с метрологическими характеристиками и реактивов квалификацией не ниже указанных в МУК.


### <a id="p100061"></a>2.4. Отбор проб


<a id="p100062"></a>Отбор проб производится в соответствии с ГОСТ 6687.0. Для длительного хранения пробы мяса и кожи птицы замораживаются и хранятся при -18 °С.
<a id="p100063"></a>Перед анализом снятую кожу или отделенное мясо кур перемалывают на мясорубке и тщательно перемешивают в блендере.


### <a id="p100064"></a>2.5. Подготовка к определению



#### <a id="p100065"></a>2.5.1. Приготовление стандартных растворов ЦПХ и калибровка хроматографа


<a id="p100066"></a>0,025 г кристаллического ЦПХ количественно переносят в мерную колбу вместимостью 250 куб. см, растворяют в 150 куб. см 95%-ного этанола, доводят 95%-ным этанолом до метки и тщательно перемешивают. Получают основной стандартный раствор в 95%-ном этаноле с массовой долей ЦПХ 0,1 мг/куб. см.
<a id="p100067"></a>Для построения градуировочной кривой методом последовательного разбавления подвижной фазой готовят рабочие стандартные растворы с содержанием ЦПХ 0,01; 0,002; 0,0005 и 0,0002 мг/куб. см. Хроматографируют по 10 - 20 мкл каждого полученного раствора. Хроматографирование проводят трижды и строят график зависимости средних площадей пиков от концентрации ЦПХ в мкг/мл.
<a id="p100068"></a>Основной и рабочие стандартные растворы ЦПХ хранят в стеклянной посуде (мерной колбе) с притертой пробкой в прохладном месте (при температуре около 0 °С). Сроки годности основного раствора полгода, рабочего - 2 недели.


#### <a id="p100069"></a>2.5.2. Приготовление подвижной фазы и кондиционирование хроматографической колонки


<a id="p100070"></a>Навеску 1 г +/- 0,1 г трифторуксусной кислоты (взвешивание производят в закрытой посуде) помещают в мерную колбу вместимостью 1000 куб. см, содержащую около 200 мл дистиллированной воды, доводят дистиллированной водой до метки и перемешивают. Концентрация полученного раствора - 0,1%.
<a id="p100071"></a>В мерную колбу вместимостью 1000 куб. см помещают 700 куб. см ацетонитрила, примерно 250 куб. см 0,1%-ного раствора трифторуксусной кислоты, перемешивают и выдерживают до комнатной температуры. Затем доводят до метки 0,1%-ным раствором трифторуксусной кислоты, тщательно перемешивают. Раствор дегазируют.
<a id="p100072"></a>Хроматографическую колонку кондиционируют до минимального дрейфа базовой линии.


#### <a id="p100073"></a>2.5.3. Подготовка образца


<a id="p100074"></a>Навеску 10 г +/- 0,01 измельченного и перемешанного в блендере образца кожи или мяса птицы помещают в коническую колбу вместимостью 250 куб. см, добавляют 100 куб. см 95%-ного этанола, встряхивают на аппарате для встряхивания в течение 30 минут.
<a id="p100075"></a>Экстракт фильтруют через бумажный складчатый фильтр "красная лента" в мерный цилиндр вместимостью 100 куб. см, замеряют полученный объем. Фильтрат количественно порциями переносят в круглодонную колбу для упаривания, смывая остатки экстракта из цилиндра 95%-ным спиртом. Спирт упаривают в вакууме на ротационном испарителе при температуре 40 - 45 °С. К остатку добавляют 25 мл ацетонитрила и 20 мл гексана. После встряхивания содержимое колбы количественно переносят в делительную воронку. Колбу для упаривания ополаскивают 5 мл ацетонитрила и 5 мл гексана и жидкость также переносят в делительную воронку. Содержимое делительной воронки встряхивают, после разделения слоев отбрасывают верхний гексановый слой. Обезжиривание ацетонитрильного слоя повторяют дважды, встряхивая его в делительной воронке с 10 мл гексана, насыщенного ацетонитрилом, каждый раз отбрасывая верхний гексановый слой. Если жидкости расслаиваются с трудом, в воронку добавляют немного сухого хлорида натрия и содержимое повторно встряхивают. Обезжиренный ацетонитрильный экстракт помещают в круглодонную колбу, упаривают в вакууме на ротационном испарителе при температуре 40 - 45 °С и отдувают в токе азота досуха на теплой водяной бане. Остаток растворяют в 3 куб. см подвижной фазы, переносят в пикнометр вместимостью 5 куб. см, ополаскивают колбу для упаривания еще 1 куб. см подвижной фазы и доводят объем до метки подвижной фазой. Содержимое пикнометра перемешивают и фильтруют через бумажный складчатый фильтр "синяя лента". При необходимости фильтруют через нейлоновый фильтр. При анализе используют аликвоты 0,005 - 0,020 куб. см.


## 3. <a id="p100076"></a>Описание определения



### <a id="p100077"></a>3.1. Условия хроматографирования


<a id="p100078"></a>Хроматографическая колонка: PLRP-S (Polymer Labs), с размером пор 100 ангстрем, размером частиц 5 мкм; параметры колонки 250 x 4,6 мм ID.
<a id="p100079"></a>Подвижная фаза: ацетонитрил - 0,1% раствор трифторуксусной кислоты 80:20% об., скорость подачи подвижной фазы 1,0 мл/мин.
<a id="p100080"></a>Детектирование: УФ, лямбда = 260 нм. Чувствительность 0,01 е. а.
<a id="p100081"></a>Объем вводимой пробы 5 - 20 мкл.
<a id="p100082"></a>Линейность детектирования сохраняется в пределах 2 - 200 нг ЦПХ.
<a id="p100083"></a>Абсолютное время удерживания ЦПХ в приведенных условиях - 8,7 +/- 0,1 минут.
<a id="p100084"></a>Каждую анализируемую пробу вводят 3 раза, вычисляют среднюю площадь пика, соответствующего ЦПХ.
<a id="p100085"></a>Альтернативные условия хроматографического разделения: Колонка с силикагелем, химически связанным с цианпропилом (например, Nucleosil-CN) с размером частиц 5 мкм; параметры колонки 250 x 4,6 мм ID. Подвижная фаза: метанол - водный 8 mМ раствор тетрабутиламмоний бромида (45:55% об.), скорость подачи подвижной фазы 1,0 мл/мин. Условия детектирования аналогичны вышеприведенным. Время удерживания ЦПХ - около 6 минут.


### <a id="p100086"></a>3.2. Обработка результатов анализа


<a id="p100087"></a>Концентрацию ЦПХ в анализируемом экстракте образца определяют либо методом градуировочного графика, либо сравнением площадей пиков ЦПХ стандартного раствора и раствора образца, т.е. методом внешнего стандарта.
<a id="p100088"></a>Для расчета используют стандартный раствор, площадь пика которого наиболее близка к площади пика ЦПХ в образце.

<a id="p100089"></a>                      Х = С  х 1000 х S  x V / m x S  ,
                           ст          х            ст

    где:
    Х - содержание ЦПХ в пробе мяса или кожи птицы, мг/кг;
    C   - содержание ЦПХ в стандартном растворе, мг/мл;
     ст
    S  - площадь пика ЦПХ в анализируемом образце;
     x
    S   - площадь пика стандарта;
     ст
    V - объем очищенного экстракта (5 мл), мл;

<div align="center">

    М - навеска образца, г.

</div>



## 4. <a id="p100090"></a>Требования техники безопасности


<a id="p100091"></a>Необходимо соблюдать общепринятые правила безопасности при работе с органическими растворителями, токсичными веществами и электроприборами.



<a id="p100092"></a>

---