---
title: "\"МУК 4.1.1897-04. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Атомно-абсорбционное измерение массовых концентраций свинца, кадмия, цинка и никеля в крови. Методические указания\""
number: "МУК 4.1.1897-04"
status: действует
canonical: "https://bukva.ai/docs/ukazanie-ukazaniya-muk-4-1-1897-04"
---

## "МУК 4.1.1897-04. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Атомно-абсорбционное измерение массовых концентраций свинца, кадмия, цинка и никеля в крови. Методические указания"

# "МУК 4.1.1897-04. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Атомно-абсорбционное измерение массовых концентраций свинца, кадмия, цинка и никеля в крови. Методические указания"

(утв. Минздравом России 03.03.2004)

> [!IMPORTANT]
> Документ включен в Перечень основных действующих нормативно-методических документов по методам лабораторного и инструментального контроля в системе государственного санитарно-эпидемиологического нормирования (Письмо Роспотребнадзора от 02.12.2008 N 01/14262-8-32).
> Документ [введен](#p100002) в действие с 1 мая 2004 года.


<div align="right">

<a id="p100001"></a>Утверждаю<br>
Главный государственный<br>
санитарный врач<br>
Российской Федерации,<br>
Первый заместитель<br>
Министра здравоохранения<br>
Российской Федерации<br>
**Г.Г.ОНИЩЕНКО**

</div>

3 марта 2004 года


#### <a id="p100003"></a>4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ


<a id="p100004"></a>**АТОМНО-АБСОРБЦИОННОЕ ИЗМЕРЕНИЕ МАССОВЫХ КОНЦЕНТРАЦИЙ**
**СВИНЦА, КАДМИЯ, ЦИНКА И НИКЕЛЯ В КРОВИ**

<a id="p100005"></a>**МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ**

<div align="center">

**МУК 4.1.1897-04**

</div>


<div align="right">

<a id="p100002"></a>Дата введения

</div>

1 мая 2004 года

1. <a id="p100006"></a>Разработаны: к.х.н. И.Л. Гринштейн, Л.А. Васильева, Л.П. Полякова (РНЦ "Прикладная химия"), к.х.н. В.П. Ипполитова, к.б.н. Е.А. Комракова (Нижегородский НИИ гигиены и профпатологии).
2. <a id="p100007"></a>Подготовлены творческим коллективом специалистов в составе: Л.М. Безрукавникова, Л.Г. Макеева, Г.В. Муравьева.
3. <a id="p100008"></a>Рекомендованы к утверждению на совместном заседании группы Главного эксперта Комиссии по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию по проблеме "Лабораторно-инструментальное дело и метрологическое обеспечение" и методбюро п/секции "Промышленно-санитарная химия" Проблемной комиссии "Научные основы медицины труда".
4. <a id="p100009"></a>Рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию при Министерстве здравоохранения Российской Федерации.
5. <a id="p100010"></a>Утверждены Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации, Первым заместителем Министра здравоохранения Российской Федерации 3 марта 2004 г.
6. <a id="p100011"></a>Введены в действие с 1 мая 2004 г.

<a id="p100012"></a>Введение

<a id="p100013"></a>Методические указания по определению массовых концентраций химических веществ в биологических средах предназначены для использования в системе Госсанэпиднадзора России, в лечебных и научных учреждениях, работающих в области медицины труда, промышленной экологии и экологии окружающей среды.
<a id="p100014"></a>Методические указания разработаны с целью обеспечения контроля за содержанием металлов и химических соединений в крови и моче людей, подвергающихся неблагоприятному воздействию вредных производственных и экологических факторов.
<a id="p100015"></a>В сборнике представлены 5 методик по измерению концентраций 6 металлов и 3 химических соединений в моче и крови. Методики основаны на использовании атомно-абсорбционных и газохроматографических методов анализа.
<a id="p100016"></a>Включенные в сборник Методические указания разработаны в соответствии с требованиями [ГОСТ Р 8.563-96](https://bukva.ai/docs/postanovlenie-329) "Государственная система единства измерений. Методики выполнения измерений", МИ 2336-95 "Характеристики погрешности и результатов количественного химического анализа. Алгоритмы оценивания", МИ 2336-96 "Внутренний контроль качества результатов количественного химического анализа".

1. <a id="p100017"></a>Область применения

<a id="p100018"></a>Методические указания предназначены для определения массовой концентрации свинца, кадмия, никеля и цинка в крови в диапазоне определяемых массовых концентраций:
- <a id="p100019"></a>свинца от 10 до 200 мкг/куб. дм (при разбавлении проб крови в 5 раз), до 800 мкг/куб. дм (при разбавлении проб в 20 раз);
- <a id="p100020"></a>кадмия от 0,4 до 7,5 мкг/куб. дм (при разбавлении проб крови в 5 раз), до 30 мкг/куб. дм (при разбавлении проб в 20 раз);
- <a id="p100021"></a>никеля от 20 до 250 мкг/куб. дм (при разбавлении проб крови в 5 раз);
- <a id="p100022"></a>цинка от 1000 до 30000 мкг/куб. дм (при разбавлении проб крови в 5 раз).
<a id="p100023"></a>Пределы обнаружения:
- <a id="p100024"></a>свинца 10 мкг/куб. дм;
- <a id="p100025"></a>кадмия 0,4 мкг/куб. дм;
- <a id="p100026"></a>никеля 20 мкг/куб. дм;
- <a id="p100027"></a>цинка 1000 мкг/куб. дм.
<a id="p100028"></a>Пределы обнаружения определены по величине утроенного стандартного отклонения десяти измерений холостых проб крови.
<a id="p100029"></a>Данная методика может быть использована центрами госсанэпиднадзора и другими медицинскими и аналитическими центрами, специализирующимися в области определения металлов в биологических объектах и обеспеченных соответствующим атомно-абсорбционным оборудованием.

2. <a id="p100030"></a>Характеристика определяемых элементов


#### <a id="p100031"></a>2.1 Физико-химические свойства элементов


<a id="p100032"></a>Свойства определяемых элементов представлены в табл. 1.

<a id="p100033"></a>Таблица 1

<a id="p100034"></a>**СВОЙСТВА ОПРЕДЕЛЯЕМЫХ ЭЛЕМЕНТОВ**


| Название элемента | Химический символ | Атомный вес | Плотность, г/куб. см | Температура плавления, °С | Температура кипения, °С |
| --- | --- | --- | --- | --- | --- |
| Цинк | Zn | 65,37 | 7,1 | 419,5 | 913 |
| Кадмий | Cd | 112,40 | 8,7 | 321 | 770 |
| Свинец | Pb | 207,19 | 11,3 | 327 | 1751 |
| Никель | Ni | 58,71 | 8,9 | 1455 | 2140 |



#### <a id="p100040"></a>2.2 Токсикологическая характеристика

определяемых элементов

<a id="p100041"></a>2.2.1. Цинк - один из наиболее распространенных необходимых металлов в организме человека. Цинк присутствует во всех видах пищи. Цинк сам по себе не рассматривается как промышленно опасный элемент, но присутствие сопутствующих мышьяка, кадмия, марганца, свинца в воздухе цинковых производств вызывает "металлическую лихорадку" у рабочих при вдыхании паров металлов. Отравления цинком, в основном, происходят при использовании пестицидов, вследствие небрежного применения препаратов цинка, при употреблении напитков, хранящихся в посуде с цинковым гальваническим покрытием.
<a id="p100042"></a>2.2.2. Кадмий не встречается в природе в свободном виде. Его получают как сопутствующий продукт при рафинировании меди и цинка. Отравления кадмием, в основном, связаны с промышленными загрязнениями. Кадмийсодержащие батареи, сплавы, краски загрязняют воду и воздух. Сигаретный дым - еще один источник загрязнения кадмием. Другой источник кадмиевой интоксикации - употребление в пищу продуктов моря, особенно устриц. При поступлении кадмия в организм его абсорбция в кровь происходит быстро и полно. В крови ионы кадмия входят в эритроциты и распределяются в плазме. Кадмий обладает раздражающим и общетоксическим политропным действием.
<a id="p100043"></a>2.2.3. Свинец и его соединения широко применяются в промышленности и в повседневной жизни. Отравления неорганическими соединениями свинца имеют место, как в профессиональной деятельности, так и быту. Поступивший в кровь свинец быстро распределяется по органам. В эритроцитах концентрация свинца в два раза превышает его среднюю концентрацию в крови. Один из симптомов хронического отравления свинцом - анемия. Воздействие свинца на клетки костного мозга вызывает их изменения, в результате которых увеличивается продукция аномальных эритроцитов. Особенно чувствительны к повреждающим воздействиям свинца нейроны центральной и периферической нервной системы. Вследствие свинцового отравления нейронов может развиваться энцефалопатия, особенно у детей.
<a id="p100044"></a>2.2.4. Никель широко распространен в природе. Индустриализация вызывает загрязнение биосферы никелем. Содержание никеля в атмосфере большого города в несколько раз превышает его содержание в сельской местности. Никель и его соединения обладают аллергическим, раздражающим, слабым фиброгенным и канцерогенным действием. Растворимые соли никеля быстро всасываются в кровь. Никель обнаруживают в РНК. Изменяя химические свойства РНК и нуклеопротеинов при комплексообразовании, никель может проявлять канцеротоксичность.
<a id="p100045"></a>Биологические предельно допустимые значения концентраций (БПДЗК), указанных элементов в крови, представлены в табл. 2.

<a id="p100046"></a>Таблица 2

<div align="center">

<a id="p100047"></a>**БИОЛОГИЧЕСКИЕ ПРЕДЕЛЬНО ДОПУСТИМЫЕ ЗНАЧЕНИЯ**

</div>

**КОНЦЕНТРАЦИИ ОПРЕДЕЛЯЕМЫХ ЭЛЕМЕНТОВ**


| Элемент | Pb | Cd | Ni | Zn |
| --- | --- | --- | --- | --- |
| БПДЗ, мкг/куб. дм | 500 | 5 | 28 | 9000 |


3. <a id="p100050"></a>Погрешность измерения

<a id="p100051"></a>Методика обеспечивает выполнение измерений с погрешностью, не превышающей значений, представленных в табл. 3 для указанных концентраций.

<a id="p100052"></a>Таблица 3

<div align="center">

<a id="p100053"></a>**ЗНАЧЕНИЯ ХАРАКТЕРИСТИКИ ПОГРЕШНОСТИ, НОРМАТИВА ОПЕРАТИВНОГО**<br>
**КОНТРОЛЯ ПОГРЕШНОСТИ И НОРМАТИВА ОПЕРАТИВНОГО КОНТРОЛЯ**

</div>

**ВОСПРОИЗВОДИМОСТИ ИЗМЕРЕНИЙ**


<table>
<colgroup><col width="12%"><col width="32%"><col width="18%"><col width="20%"><col width="17%"></colgroup>
<tr><td rowspan="2">Определяемый элемент</td><td>Диапазон определяемых концентраций,</td><td colspan="3">Название метрологической характеристики</td></tr>
<tr><td>мкг/куб. дм</td><td>характеристика погрешности дельта, %, (P = 0,95)</td><td>норматив оперативного контроля погрешности k, %, (P = 0,95)</td><td>норматив контроля воспроизводимости D, %, (P = 0,95)</td></tr>
<tr><td>Pb</td><td>от 10 до 250 свыше 230 до 625 свыше 625 до 800</td><td>45 25 20</td><td>50 30 25</td><td>45 20 20</td></tr>
<tr><td>Cd</td><td>от 0,4 до 2,5 свыше 2,5 до 10 свыше 10 до 30</td><td>85 60 50</td><td>95 60 55</td><td>85 60 50</td></tr>
<tr><td>Ni</td><td>от 20 до 100 свыше 100 до 200 свыше 200 до 250</td><td>55 25 15</td><td>60 25 15</td><td>75 25 15</td></tr>
<tr><td>Zn</td><td>от 1000 до 1800 свыше 1800 до 2600 свыше 2600 до 30000</td><td>30 15 10</td><td>30 15 10</td><td>25 15 10</td></tr>
</table>


4. <a id="p100067"></a>Метод измерений

<a id="p100068"></a>Метод анализа - атомно-абсорбционный.
<a id="p100069"></a>Метод основан на атомизации определяемых элементов за счет нагрева пробы до высокой температуры в графитовой печи или при распылении в пламя и измерении величины поглощения характеристического излучения.
<a id="p100070"></a>Свинец, кадмий и никель определяют с помощью многоканального атомно-абсорбционного спектрометра Hitachi Z-9000 с электротермической атомизацией пробы, импульсным нагревом атомизатора и Зееман-корректором фона. При определении никеля пробу атомизируют в графитовой печи с пиропокрытием. Свинец и кадмий определяют одновременно в пиропечи с платформой, при этом используют палладиевый модификатор.
<a id="p100071"></a>Цинк определяют с помощью атомно-абсорбционного спектрометра AAS-3 с пламенным способом атомизации пробы и дейтериевым корректором фона.

<div align="center">

5. <a id="p100072"></a>Средства измерений, вспомогательные устройства,

</div>

материалы и реактивы


#### <a id="p100073"></a>5.1 Средства измерений,

вспомогательные устройства и материалы

<a id="p100074"></a>5.1.1. Спектрометр атомно-абсорбционный типа "Hitachi Z-9000" с Зееман-корректором фона (допускается использование атомно-абсорбционных спектрометров других моделей, классом не ниже указанного).
<a id="p100075"></a>5.1.2. Спектрометр атомно-абсорбционный типа AAS-3 с дейтериевым корректором фона (допускается использование других моделей, классом не ниже указанного).
<a id="p100076"></a>5.1.3. Колбы мерные по ГОСТ 1770, 2 класса точности, вместимостью 100 куб. см с погрешностью +/- 0,2 куб. см.
<a id="p100077"></a>5.1.4. Колбы мерные по ГОСТ 1770, 2 класса точности, вместимостью 1000 куб. см с погрешностью +/- 2,0 куб. см.

##### <a id="p100078"></a>5.1.5 Пипетки градуированные по ГОСТ 29227:

<a id="p100079"></a>1-1-2-1 <*> с погрешностью +/- 0,01 куб. см;
<a id="p100080"></a>1-1-2-2 <*> с погрешностью +/- 0,02 куб. см;
<a id="p100081"></a>1-1-2-5 <*> с погрешностью +/- 0,05 куб. см;
<a id="p100082"></a>1-1-2-10 <*> с погрешностью +/- 0,10 куб. см.

<a id="p100083"></a>

---

<a id="p100084"></a><*> Первая цифра обозначает тип пипетки, вторая - исполнение, третья - класс точности, четвертая - вместимость (куб. см).


##### <a id="p100085"></a>5.1.6 Пипетки с одной отметкой по ГОСТ 29169:

<a id="p100086"></a>1-2-1 <**> с погрешностью +/- 0,015 куб. см;
<a id="p100087"></a>1-2-2 <**> с погрешностью +/- 0,02 куб. см;
<a id="p100088"></a>2-2-5 <**> с погрешностью +/- 0,03 куб. см;
<a id="p100089"></a>2-2-10 <**> с погрешностью +/- 0,04 куб. см.

<a id="p100090"></a>

---

<a id="p100091"></a><**> Первая цифра обозначает исполнение, вторая - класс точности, третья - вместимость (куб. см).

<a id="p100092"></a>5.1.7. Микродозатор жидкости ДП-1-1000 вместимостью 1 куб. см с относительной погрешностью соответственно +/- 0,6%.
<a id="p100093"></a>5.1.8. Микродозатор жидкости Eppendorf вместимостью 10 куб. мм с относительной погрешностью соответственно +/- 1%.
<a id="p100094"></a>5.1.9. Микродозатор жидкости Eppendorf вместимостью 100 куб. мм с относительной погрешностью соответственно +/- 0,6%.
<a id="p100095"></a>5.1.10. Микродозатор жидкости Eppendorf вместимостью 200 куб. мм с относительной погрешностью соответственно +/- 0,6%.

##### <a id="p100096"></a>5.1.11 Счетчик частиц типа ПК.ГТА 0.3-002.

<a id="p100097"></a>5.1.12. Установка для перегонки кислот без кипения, кварцевая (А. Мицуике. Методы концентрирования микроэлементов в неорганическом анализе: Химия. М., 1986).
<a id="p100098"></a>5.1.13. Установка для получения бидистиллята воды без кипения, кварцевая (А. Мицуике. Методы концентрирования микроэлементов в неорганическом анализе: Химия. М., 1996). Допускается применение установки для получения деионизованной воды с удельным сопротивлением не менее 1 МОм х см.
<a id="p100099"></a>5.1.14. Лампы с полым катодом на свинец, кадмий и никель типа "HLA-4S" и на цинк типа "HCL" (допускается использование ламп с полым катодом аналогичных конструкций, а также высокочастотных безэлектродных ламп).

##### <a id="p100100"></a>5.1.15 Флаконы полиэтиленовые вместимостью 50 и 100 куб. см.


##### <a id="p100101"></a>5.1.16 Стаканчики пластиковые вместимостью 2 куб. см.

<a id="p100102"></a>5.1.17. Пробирки пластиковые одноразовые вместимостью не менее 5 куб. см.

##### <a id="p100103"></a>5.1.18 Пробирки пластиковые вместимостью не менее 20 куб. см.

<a id="p100104"></a>5.1.19. Флаконы полиэтиленовые с двойной пробкой емкостью 1000 куб. см.

##### <a id="p100105"></a>5.1.20 Иглы одноразовые.

<a id="p100106"></a>5.1.21. Холодильник типа "Атлант" с морозильной камерой, обеспечивающей температуру -20 °С.


#### <a id="p100107"></a>5.2 Реактивы


<a id="p100108"></a>5.2.1. Многоэлементный стандартный раствор IV фирмы Merk с массовой концентрацией никеля и цинка 1000 +/- 5 мг/куб. дм или ГСО 5230-90 с массовой концентрацией никеля 1000 +/- 10 мг/куб. дм и ГСО 5237-90 с массовой концентрацией цинка 1000 +/- 10 мг/куб. дм.
<a id="p100109"></a>5.2.2. Стандартный раствор фирмы Merk 1.19776.0500 с массовой концентрацией свинца 1000 +/- 5 мг/куб. дм или ГСО 5232-90 с массовой концентрацией свинца 1000 +/- 10 мг/куб. дм.
<a id="p100110"></a>5.2.3. Стандартный раствор фирмы Merk 1.19777.0500 с массовой концентрацией кадмия 1000 +/- 5 мг/куб. дм или ГСО 5222-90 с массовой концентрацией кадмия 1000 +/- 10 мг/куб. дм.
<a id="p100111"></a>5.2.4. Стандартный образец крови Seronorm TM Trace Elements Whole Blood (level 1, level 2, level 3) фирмы Nycomed Pharma AS, Норвегия.
<a id="p100112"></a>5.2.5. Палладиевый матричный модификатор фирмы Merk N 7289 с массовой концентрацией палладия 10000 +/- 200 мг/куб. дм.
<a id="p100113"></a>5.2.6. ЭДТА (этилендиаминтетрауксусной кислоты динатриевая соль), х.ч., ГОСТ 10652, 10%-ный раствор.

##### <a id="p100114"></a>5.2.7 Аргон газообразный, технический, ГОСТ 10157.


##### <a id="p100115"></a>5.2.8 Вода дистиллированная, ГОСТ 6709.


##### <a id="p100116"></a>5.2.9 Кислота азотная, х.ч., ГОСТ 4461.

<a id="p100117"></a>Допускается применение других средств измерения с метрологическими характеристиками и оборудования с техническими характеристиками не хуже, а также реактивов по квалификации не ниже вышеуказанных.

6. <a id="p100118"></a>Требования безопасности

<a id="p100119"></a>При проведении анализа следует руководствоваться требованиями безопасности в соответствии с ГОСТ 12.1.005, ГОСТ 12.1.007 и ГОСТ 12.1.019.

7. <a id="p100120"></a>Требования к квалификации оператора

<a id="p100121"></a>Анализ выполняется специалистом-химиком, прошедшим проверку знаний по технике безопасности, в т.ч. по правилам безопасности при работе в химической лаборатории, включая общие правила работы с кислотами, газовыми баллонами и электроустановками с напряжением до 1000 В, пожарной безопасности и промышленной санитарии, получившим дополнительный инструктаж по правилам работы с особо чистыми веществами в условиях обеспыленных помещений и сдавшим экзамен на право допуска к самостоятельной работе.

8. <a id="p100122"></a>Условия измерений

<a id="p100123"></a>Все аналитические процедуры проводят в обеспыленных помещениях или с использованием обеспыленных рабочих мест. Содержание частиц размером 0,5 мкм в воздухе помещений не должно превышать величины 300 частиц/куб. дм. Содержание частиц в воздухе контролируют с помощью счетчика частиц ПК.ГТА 0.3-002.
<a id="p100124"></a>При работе, согласно ГОСТ 15150, должны быть соблюдены следующие условия:
- <a id="p100125"></a>температура окружающего воздуха должна быть (20 +/- 5) °С;
- <a id="p100126"></a>атмосферное давление от 84,0 до 106,7 кПа (от 630 до 800 мм рт. ст.);
- <a id="p100127"></a>относительная влажность воздуха не более 80% при температуре 25 °С.
<a id="p100128"></a>Все используемые реактивы, посуду, пипетки и наконечники дозаторов перед использованием контролируют на содержание анализируемых элементов.

9. <a id="p100129"></a>Подготовка к выполнению измерений


#### <a id="p100130"></a>9.1 Отбор и хранение проб


<a id="p100131"></a>Отбор проб крови осуществляет квалифицированный медицинский персонал в медицинском учреждении. Пробы крови отбирают в одноразовые пластиковые сосуды объемом не менее 4 куб. см с помощью специальных одноразовых игл. Отбирают не менее 4 куб. см крови.
<a id="p100132"></a>Пробы крови непосредственно после отбора консервируют 10%-ным раствором ЭДТА, исходя из соотношения: 10 куб. мм на 1 куб. см крови.
<a id="p100133"></a>Пробы крови хранят в пластиковой посуде в холодильной камере при -20 °С (допускается хранение в течение 1 - 2 лет). В ходе проведения анализа допускается кратковременное хранение (в течение 1 - 3 дней) в холодильнике при -4 °С.


#### <a id="p100134"></a>9.2 Подготовка посуды


<a id="p100135"></a>Мерные колбы, полиэтиленовые флаконы, пластиковые стаканчики и другую посуду, необходимую для анализа, промывают дистиллированной водой, заполняют 5%-ным раствором очищенной азотной кислоты в дистиллированной воде и выдерживают не менее 2 ч, после чего вновь промывают дистиллированной водой и в течение 2 ч пропаривают в парах дистиллированной воды. По окончании обработки посуду охлаждают, заполняют бидистиллированной водой, закрывают и содержат в таком положении непосредственно до начала анализа, но не более 10 суток.


#### <a id="p100136"></a>9.3 Приготовление растворов



##### <a id="p100137"></a>9.3.1 Приготовление очищенной азотной кислоты.

<a id="p100138"></a>Для приготовления очищенной азотной кислоты используют метод двойной перегонки без кипения.
<a id="p100139"></a>Азотную кислоту квалификации х.ч., ГОСТ 4461 заливают в кварцевую установку для перегонки кислот и перегоняют без кипения. Конденсирующийся дистиллят собирают и перегоняют вторично. Очищенную кислоту хранят в полиэтиленовой посуде с двойной пробкой.

##### <a id="p100140"></a>9.3.2 Приготовление бидистиллированной воды.

<a id="p100141"></a>Для приготовления бидистиллированной воды используют метод перегонки без кипения.
<a id="p100142"></a>Дистиллированную воду заливают в кварцевую установку для перегонки воды и перегоняют без кипения. Бидистиллят хранят в полиэтиленовой посуде с двойной пробкой.

##### <a id="p100143"></a>9.3.3 Приготовление азотной кислоты с концентрацией 0,1 моль/куб. дм.

<a id="p100144"></a>7 куб. см дважды перегнанной азотной кислоты растворяют в бидистиллированной воде и доводят объем до 1000 куб. см.

##### <a id="p100145"></a>9.3.4 Приготовление градуировочных растворов.

<a id="p100146"></a>Градуировочные растворы готовят перед каждой серией измерений в мерных колбах вместимостью 100 куб. см последовательным разбавлением. Для разбавления применяется азотная кислота с концентрацией 0,1 моль/куб. дм [(п. 9.3.3)](#p100143).
<a id="p100147"></a>Для приготовления градуировочных растворов с массовыми концентрациями, отличающимися друг от друга в 10 раз, следует пользоваться выделенными именно для этих концентраций мерными колбами и пипетками.
<a id="p100148"></a>Приготовленные градуировочные растворы с массовой концентрацией металлов 200 мкг/куб. дм и менее переливают в полиэтиленовые флаконы вместимостью 100 куб. см и хранят не более суток.
<a id="p100149"></a>Рабочие градуировочные растворы готовят либо из многоэлементного стандартного раствора N 4 фирмы Merk, либо из ГСО 5232 или ГСО 5222.
<a id="p100150"></a>9.3.4.1. Приготовление комплексных градуировочных растворов для определения свинца и кадмия.
<a id="p100151"></a>Приготовление раствора А: 1 куб. см стандартного образца раствора свинца ГСО 5232 отбирают пипеткой в мерную колбу вместимостью 100 куб. см, доводят до метки раствором азотной кислоты с концентрацией 0,1 моль/куб. дм и тщательно перемешивают. Массовая концентрация раствора А - 10 мг/куб. дм. Срок хранения - 1 месяц.
<a id="p100152"></a>Приготовление раствора Б: 0,1 куб. см стандартного образца раствора кадмия ГСО 5222 отбирают пипеткой в мерную колбу вместимостью 100 куб. см, доводят до метки раствором азотной кислоты с концентрацией 0,1 моль/куб. дм и тщательно перемешивают. Массовая концентрация раствора Б - 1,0 мг/куб. дм. Срок хранения - 1 месяц.
<a id="p100153"></a>Приготовление рабочих растворов для построения градуировочных графиков: указанные под соответствующим номером в табл. 4 объемы растворов А и Б отбирают в одни и те же мерные колбы вместимостью 100 куб. см, доводят до метки раствором азотной кислоты с концентрацией 0,1 моль/куб. дм и тщательно перемешивают.

<a id="p100154"></a>Таблица 4

<div align="center">

<a id="p100155"></a>**УСТАНОВЛЕНИЕ ГРАДУИРОВОЧНОЙ ХАРАКТЕРИСТИКИ**

</div>

**ПРИ ОПРЕДЕЛЕНИИ СВИНЦА И КАДМИЯ**


| N градуировочного раствора | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 |
| --- | --- | --- | --- | --- | --- |
| Объем раствора А, куб. см | 0 | 0,1 | 0,2 | 0,3 | 0,5 |
| Объем раствора Б, куб. см | 0 | 0,025 | 0,05 | 0,1 | 0,15 |
| Массовая концентрация градуировочного раствора свинца, мкг/куб. дм | 0 | 10 | 20 | 30 | 50 |
| Массовая концентрация градуировочного раствора кадмия, мкг/куб. дм | 0 | 0,25 | 0,5 | 1,0 | 1,5 |


<a id="p100161"></a>Приготовленные рабочие градуировочные растворы микродозатором на 1 куб. см переносят в пластиковые стаканчики вместимостью 1 - 2 куб. см и микродозатором добавляют 10 куб. мм раствора матричного модификатора с массовой концентрацией палладия 10000 мг/куб. дм.
<a id="p100162"></a>9.3.4.2. Приготовление градуировочных растворов для определения никеля и цинка.
<a id="p100163"></a>Приготовление раствора В: 1 куб. см комплексного стандартного раствора N 4 фирмы Merk отбирают пипеткой в мерную колбу вместимостью 100 куб. см, доводят до метки раствором азотной кислоты с концентрацией 0,1 моль/куб. дм и тщательно перемешивают. Массовая концентрация цинка и никеля в растворе В - 10 мг/куб. дм. Срок хранения - 1 месяц.
<a id="p100164"></a>Приготовление рабочих растворов для построения градуировочных графиков: указанные в табл. 5 и [6](#p100171) объемы раствора В для соответствующего элемента отбирают в мерные колбы вместимостью 100 куб. см, доводят до метки раствором азотной кислоты с концентрацией 0,1 моль/куб. дм и тщательно перемешивают.

<a id="p100165"></a>Таблица 5

<div align="center">

<a id="p100166"></a>**УСТАНОВЛЕНИЕ ГРАДУИРОВОЧНОЙ ХАРАКТЕРИСТИКИ**

</div>

**ПРИ ОПРЕДЕЛЕНИИ НИКЕЛЯ**


| N градуировочного раствора | 1 | 2 | 3 | 4 |
| --- | --- | --- | --- | --- |
| Объем раствора В, куб. см | 0 | 0,2 | 0,3 | 0,5 |
| Массовая концентрация градуировочного раствора, мкг/куб. дм | 0 | 20 | 30 | 50 |


<a id="p100170"></a>Таблица 6

<div align="center">

<a id="p100171"></a>**УСТАНОВЛЕНИЕ ГРАДУИРОВОЧНОЙ ХАРАКТЕРИСТИКИ**

</div>

**ПРИ ОПРЕДЕЛЕНИИ ЦИНКА <*>**


<a id="p100172"></a>

---

<a id="p100173"></a><*>  Срок хранения растворов - 1 месяц.


| N градуировочного раствора | 1 | 2 | 3 | 4 |
| --- | --- | --- | --- | --- |
| Объем раствора В, куб. см | 2,5 | 5,0 | 10 | 15 |
| Массовая концентрация градуировочного раствора, мкг/куб. дм | 250 | 500 | 1000 | 1500 |



#### <a id="p100177"></a>9.4 Подготовка проб


<a id="p100178"></a>Анализируемые образцы перед проведением пробоподготовки должны иметь комнатную температуру.
<a id="p100179"></a>При проведении анализа на свинец, кадмий и никель анализируемую кровь разбавляют в пять раз. В пластиковые стаканчики объемом 2 куб. см отбирают микродозатором 200 куб. мм пробы и 800 куб. мм бидистиллированной воды, тщательно перемешивают. К полученному раствору микродозатором добавляют 10 куб. мм раствора матричного модификатора с массовой концентрацией палладия 10000 мг/куб. дм. В случае необходимости пробу крови разбавляют в большей степени аналогично описанному способу.
<a id="p100180"></a>При определении цинка кровь разбавляют в 21 раз. В пластиковую пробирку микродозатором отбирают 500 куб. мм анализируемой крови и пипеткой добавляют 10 куб. см дистиллированной воды. В случае необходимости пробу крови разбавляют в большей степени аналогичным образом.


#### <a id="p100181"></a>9.5 Подготовка приборов к работе



##### <a id="p100182"></a>9.5.1 Подготовка спектрометра AAS-3 к работе.

<a id="p100183"></a>Подготовку спектрометра и ламп с полым катодом к работе проводят согласно техническому описанию прибора и в соответствии с приведенными ниже условиями проведения анализа.
<a id="p100184"></a>Измерения абсорбции цинка проводят в режиме с коррекцией фона на длине волны 213,9 нм. Ширину щели монохроматора устанавливают равной 0,20 мм. Используют пламя ацетилен-воздух: расход горючего газа - 50 куб. дм/ч, окислителя - 70 куб. дм/ч. Время интегрирования устанавливают 2 с, время задержки - 2 с, время установки нуля - 2 с, время автоматического уравновешивания нулевой точки - 0,3 с.

##### <a id="p100185"></a>9.5.2 Подготовка спектрометра "Hitachi Z-9000" к работе.

<a id="p100186"></a>Подготовку спектрометра и ламп с полым катодом к работе проводят согласно техническому описанию прибора и в соответствии с приведенной ниже таблицей условий проведения анализа (табл. 7).

<a id="p100187"></a>Таблица 7

<div align="center">

<a id="p100188"></a>**УСЛОВИЯ ПРОВЕДЕНИЯ АНАЛИЗА НА СПЕКТРОМЕТРЕ**

</div>

**"HITACHI Z-9000"**


<table>
<colgroup><col width="26%"><col width="25%"><col width="25%"><col width="25%"></colgroup>
<tr><td></td><td>Pb</td><td>Cd</td><td>Ni</td></tr>
<tr><td>Длина волны</td><td>283,3 нм</td><td>228,8 нм</td><td>232,0 нм</td></tr>
<tr><td>Корректор фона</td><td>Зееман</td><td>Зееман</td><td>Зееман</td></tr>
<tr><td>Тип атомизатора</td><td>пиропечь с платформой</td><td>пиропечь с платформой</td><td>пиропечь</td></tr>
<tr><td>Модификатор</td><td>нитрат палладия</td><td>нитрат палладия</td><td>-</td></tr>
<tr><td>Объем дозирования</td><td>10 куб. мм</td><td>10 куб. мм</td><td>-</td></tr>
<tr><td>Способ регистрации абсорбции</td><td>интегральный</td><td>интегральный</td><td>интегральный</td></tr>
<tr><td colspan="4">Температурная программа: начальная температура, °С/конечная температура, °С/время, с/скорость газа, мл/мин.</td></tr>
<tr><td>1 стадия (сушка)</td><td>80/200/40/100</td><td>80/200/40/100</td><td>80/200/40/100</td></tr>
<tr><td>2 стадия (озоление)</td><td>200/700/120/100</td><td>200/700/120/100</td><td>200/700/60/100</td></tr>
<tr><td>3 стадия (озоление)</td><td>700/700/30/100</td><td>700/700/30/100</td><td>700/700/30/100</td></tr>
<tr><td>4 стадия (атомизация)</td><td>2000/2000/5/0</td><td>2000/2000/5/0</td><td>2700/2700/5/0</td></tr>
<tr><td>5 стадия (отжиг)</td><td>2800/2800/3/100</td><td>2800/2800/3/100</td><td>3000/3000/3/100</td></tr>
</table>


<a id="p100202"></a>Анализ проводят, используя Зееман-корректор фона и импульсный нагрев пиропечи на стадии атомизации. Анализируемую пробу дозируют вручную с помощью микродозатора Eppendorf. Для анализа свинца и кадмия используют пиропечь с платформой и матричный модификатор. Контролируют величину "Sample Blank" и учитывают в случае необходимости (если величина сигнала абсорбции от "Sample Blank" превышает величину сигнала абсорбции от холостой печи).

10. <a id="p100203"></a>Проведение измерений

<a id="p100204"></a>10.1. Проведение анализа с помощью атомно-абсорбционного спектрометра AAS-3 с атомизацией в пламени.
<a id="p100205"></a>Определение массовой концентрации цинка в крови осуществляют атомно-абсорбционным методом с пламенным способом атомизации и дейтериевым корректором фона.
<a id="p100206"></a>Градуировочный раствор или анализируемую пробу через капилляр вводят в пламенный атомизатор подготовленного к работе спектрометра [(п. 9.5.1)](#p100182), атомизируют и регистрируют величину атомной абсорбции. Проводят три параллельных измерения каждой пробы.
<a id="p100207"></a>10.2. Проведение анализа с помощью атомно-абсорбционного спектрометра "Hitachi Z-9000" с электротермической атомизацией.
<a id="p100208"></a>Определение массовой концентрации свинца, кадмия и никеля осуществляют атомно-абсорбционным методом с электротермическим способом атомизации пробы, импульсным нагревом атомизатора и Зееман-корректором фона. Никель определяют в графитовой печи с пиропокрытием. Свинец и кадмий определяют в многоэлементном режиме в пиропечи с платформой, при этом используют палладиевый модификатор.
<a id="p100209"></a>В предварительно отожженный электротермический атомизатор подготовленного к работе спектрометра [(п. 9.5.2)](#p100185) вручную с помощью микродозатора Eppendorf вводят 10 куб. мм анализируемой пробы или градуировочного раствора. Затем пробу высушивают, озоляют и атомизируют в соответствии с приведенными в [табл. 7](#p100188) режимами атомизации. Полученную величину атомной абсорбции регистрируют с помощью печатающего устройства или самопишущего потенциометра класса, соответствующего используемому для анализа спектрометру. Проводят три параллельных измерения каждой пробы.
<a id="p100210"></a>После определения 3 - 5 проб крови с поверхности пиропечи или платформы удаляют образовавшуюся в ходе анализа золу.

#### <a id="p100211"></a>10.3 Построение градуировочных графиков.

<a id="p100212"></a>Параметры линейной зависимости градуировочных графиков рассчитывают методом наименьших квадратов. График строят по трем параллельным измерениям каждого из градуировочных растворов.
<a id="p100213"></a>10.3.1. Построение градуировочных графиков при определении свинца, кадмия и никеля.
<a id="p100214"></a>Для построения градуировочных графиков при определении свинца, кадмия и никеля используют персональный компьютер. На оси ординат откладывают значение массовой концентрации элемента, а на оси абсцисс - значение атомной абсорбции. С помощью персонального компьютера методом наименьших квадратов рассчитывают коэффициенты a и b для уравнения y = a + bx, а также коэффициент корреляции.

##### <a id="p100215"></a>10.3.2 Построение градуировочного графика при определении цинка.

<a id="p100216"></a>Для построения градуировочного графика при определении цинка используют встроенный компьютер Спектрометра AAS-3. На оси ординат откладывают значение атомной абсорбции, а по оси абсцисс - соответствующее значение массовой концентрации определяемого элемента (C) в мг/куб. дм. Масштаб градуировочного графика устанавливается автоматически.

##### <a id="p100217"></a>10.3.3 Контроль стабильности градуировочного графика.

<a id="p100218"></a>Через каждые 10 проб в каждой серии измерений определяют содержание металла в градуировочном растворе, соответствующем середине градуировочного интервала. Величина относительного расхождения между измерениями не должна превышать величину допустимого расхождения (табл. 8). В том случае, когда это условие не выполняется, по результатам измерений проводят рекалибровку или построение нового градуировочного графика.

<a id="p100219"></a>Таблица 8

<div align="center">

<a id="p100220"></a>**ВЕЛИЧИНА ДОПУСТИМОГО РАСХОЖДЕНИЯ ИЗМЕРЕНИЙ ДЛЯ КОНТРОЛЯ**

</div>

**СТАБИЛЬНОСТИ ГРАДУИРОВОЧНОГО ГРАФИКА**


| Определяемый элемент | Массовая концентрация | Относительная величина допустимого расхождения, % |
| --- | --- | --- |
| Pb Cd Ni Zn | 30 мкг/куб. дм 1,0 мкг/куб. дм 30 мкг/куб. дм 0,5 мг/куб. дм | 10 15 15 10 |


11. <a id="p100226"></a>Вычисление результатов измерений


#### <a id="p100227"></a>11.1 Определение массовой концентрации свинца,

кадмия и никеля

<a id="p100228"></a>По регистрируемой величине абсорбции на основании полученных для градуировочного графика коэффициентов "a" и "b" рассчитывают массовую концентрацию (C) определяемых элементов в образце:

<a id="p100229"></a>C = (a х A + b) х n, мкг/куб. дм,

<a id="p100230"></a>где:
<a id="p100231"></a>A - регистрируемая величина абсорбции;
<a id="p100232"></a>a и b - коэффициенты градуировочного графика;
<a id="p100233"></a>n - степень разбавления.
<a id="p100234"></a>За результат анализа принимают среднее значение из трех параллельных определений каждой пробы.
<a id="p100235"></a>Значения допускаемой относительной суммарной погрешности результатов анализа при доверительной вероятности 0,95 представлены в [табл. 2](#p100047).


#### <a id="p100236"></a>11.2 Определение массовой концентрации цинка


<a id="p100237"></a>    Определение  массовой  концентрации цинка в разбавленной пробе
(С    )   осуществляют    автоматически  с   помощью   встроенного
  разб
компьютера  атомно-абсорбционного  спектрометра AAS-3 на основании
градуировочного графика.
<a id="p100238"></a>    Массовую концентрацию цинка в анализируемом образце определяют
по формуле:

<a id="p100239"></a>                  C = C      х n, мкг/куб. дм,
                       разб

<a id="p100240"></a>    где n - степень разбавления.
<a id="p100241"></a>За результат анализа принимают среднее значение из трех параллельных определений каждой пробы.
<a id="p100242"></a>Значения допускаемой относительной суммарной погрешности результатов анализа при доверительной вероятности 0,95 представлены в [табл. 3](#p100053).

12. <a id="p100243"></a>Оформление результатов измерений

<div align="center">

<a id="p100244"></a>Результаты анализа представляются в следующем виде:

</div>


<a id="p100245"></a>C +/- ДЕЛЬТА, мкг/куб. дм (P = 0,95),

<a id="p100246"></a>где:
<a id="p100247"></a>C - концентрация определяемого элемента [(п. 11)](#p100226);
<a id="p100248"></a>ДЕЛЬТА - абсолютная погрешность определения концентрации определяемого элемента, при доверительной вероятности P = 0,95.
<a id="p100249"></a>Значение ДЕЛЬТА рассчитывается по формуле:

<a id="p100250"></a>ДЕЛЬТА = (С х дельта) / 100,

<a id="p100251"></a>где дельта, % - характеристика погрешности, представленная в [табл. 3](#p100053).

13. <a id="p100252"></a>Контроль погрешности методики

<a id="p100253"></a>Контроль проводят в каждой серии измерений с помощью контрольных проб (проб с известным содержанием металлов). Контрольные пробы анализируют через каждые 20 реальных проб. Общее число контрольных проб в каждой серии не менее двух.


#### <a id="p100254"></a>13.1 Оперативный контроль воспроизводимости


<a id="p100255"></a>Контроль воспроизводимости осуществляют для рабочего или контрольного образца не реже одного раза в месяц. При этом относительная величина расхождения между результатами первичного и повторного измерений образца не должна превышать норматив воспроизводимости (D) в [табл. 3](#p100053).


#### <a id="p100256"></a>13.2 Оперативный контроль точности


<a id="p100257"></a>При оперативном контроле точности результатов через каждые 20 образцов анализируют контрольную пробу. Величина относительного расхождения между измеренной и известной массовой концентрацией определяемого элемента не должна превышать величину норматива контроля точности из [табл. 3](#p100053) для соответствующей концентрации. Если это условие не выполняется, проведение анализа приостанавливают, выясняют причины получения аномального результата, устраняют их и возобновляют аналитическую процедуру. При этом аннулируют результаты, полученные после анализа предыдущей контрольной пробы, а соответствующие пробы анализируют повторно.

14. <a id="p100258"></a>Норма затрат времени

<a id="p100259"></a>Время проведения анализа для определения свинца, кадмия и никеля составляет 2 ч.

<div align="center">

<a id="p100260"></a>Время проведения анализа для определения цинка составляет 1 ч.

</div>




<a id="p100261"></a>

---