МУК 4.1.1548-03. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Методические указания по измерению концентрации 5-карбамоил-5Н-дибенз[b,f]-азепина (карбамазепина) методом высокоэффективной жидкостной хроматографии в воздухе рабочей зоны

(утв. Минздравом России 29.06.2003)

29 июня 2003 года

4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ИЗМЕРЕНИЮ КОНЦЕНТРАЦИИ 5-КАРБАМОИЛ-5Н-ДИБЕНЗ[B,F]-АЗЕПИНА (КАРБАМАЗЕПИНА) МЕТОДОМ ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ

с момента утверждения

Методические указания подготовлены коллективом специалистов в рамках Проблемной Комиссии «Научные основы гигиены труда и профпатологии». Утверждены Первым заместителем Министра здравоохранения Российской Федерации, Председателем Комиссии по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г.Г. Онищенко в июне 2003 г.

Методические указания по измерению концентраций вредных веществ в воздухе рабочей зоны (сборник 37) разработаны с целью обеспечения контроля соответствия фактических концентраций вредных веществ их предельно допустимым концентрациям (ПДК) и ориентировочным безопасным уровням воздействия (ОБУВ) — санитарно-гигиеническим нормативам и являются обязательными при осуществлении санитарного контроля.

Методика контроля вредных веществ в воздухе рабочей зоны разработана и подготовлена в соответствии с требованиями ГОСТ 12.1.005-88 ССБТ «Воздух рабочей зоны. Общие санитарно-гигиенические требования».

Методика выполнена с использованием современных методов исследования, метрологически аттестована и дает возможность контролировать концентрации химических веществ на уровне и меньше их ПДК и ОБУВ в воздухе рабочей зоны, установленных в ГН 2.2.5.686-98 «Предельно допустимые концентрации (ПДК) вредных веществ в воздухе рабочей зоны» и ГН 2.2.5.687-98 «Ориентировочные безопасные уровни воздействия (ОБУВ) вредных веществ в воздухе рабочей зоны».

Структурная формула не приводится.

C H № O 15 12 2

М. м. 236,27.

Карбамазепин — белый или белый с желтоватым оттенком кристаллический порошок с температурой плавления 189 — 193 °C. Практически нерастворим в воде, умеренно растворим в спирте 95%, легко растворим в хлороформе.

В воздухе находится в виде аэрозоля.

Обладает общетоксическим действием.

ОБУВ в воздухе — 0,1 мг/куб. м.

Характеристика метода

Метод основан на применении высокоэффективной жидкостной хроматографии с УФ-детектированием.

Отбор проб проводится с концентрированием на фильтр.

Нижний предел измерения в хроматографируемом объеме (10 мкл) — 0,01 мкг.

Нижний предел измерения в воздухе — 0,05 мг/куб. м (при отборе 200 л воздуха).

Диапазон измеряемых концентраций вещества в воздухе от 0,05 до 0,75 мг/куб. м.

Измерению не мешают пары органических соединений.

Суммарная погрешность не превышает +/- 20%.

Время выполнения измерения, включая отбор проб, — 1 час 30 мин.

Приборы, аппаратура, посуда

Микроколоночный жидкостный хроматограф «Милихром» или другой модели с УФ-детектором.

Хроматографическая колонка длиной 60 мм, внутренним диаметром 2 мм, заполненная сорбентом «Силасорб 600».

Весы аналитические ВЛА-200 или ВЛР-2, ГОСТ 24104-80Е.

Аспирационное устройство, модель 822, ТУ 64-1-862-72.

Фильтродержатели, ТУ 95-72-05-77.

Колбы мерные вместимостью 25, 100 мл, ГОСТ 1770-74Е.

Пипетки вместимостью 1, 2, 5 мл, ГОСТ 29227-91.

Пробирки со шлифом градуированные вместимостью 10 — 15 мл, ГОСТ 1770-74Е.

Реактивы, растворы, материалы

Карбамазепин фармакопейный, ВФС 42-2803-96, Россия.

Спирт метиловый, ГОСТ 6995-77.

Элюент: метиловый спирт.

Стандартный раствор № 1 с концентрацией 100 мкг/мл карбамазепина готовят растворением 0,01 г вещества в метаноле в мерной колбе вместимостью 100 мл.

Раствор устойчив в течение недели при хранении в холодильнике.

Градуировочные растворы с концентрацией 0-1-2-5-10-15 мкг/мл готовят соответствующим разбавлением стандартного раствора № 1 спиртом метиловым.

Растворы устойчивы в течение 3 суток при хранении в холодильнике.

Фильтры АФА-ВП-10, ТУ 95-743-80.

Отбор пробы воздуха

Воздух с объемным расходом 10 л/мин. аспирируют через фильтр АФА-ВП-10. Для определения 0,5 ОБУВ следует отобрать 200 л воздуха. Срок хранения проб в закрытых бюксах — 3 недели в холодильнике.

Подготовка к измерению

Инжектируют в хроматограф от 0,01 до 0,15 мкг карбамазепина из градуировочных растворов при максимальном объеме вводимой пробы 10 мкл.

Условия хроматографирования градуировочных смесей и анализируемых проб:

    Температура термостата колонки                     +20 °C
    Скорость потока элюента                            30 мкл/мин.

Элюент: метиловый спирт

    Длина волны УФ-детектора                           286 нм
    Время удерживания карбамазепина                    5,8 мин.
    Максимальный объем вводимой пробы                  10 мкл
    Скорость движения диаграммной ленты                180 мм/мин.
    Диапазон чувствительности УФ-детектора             0,8 ед.

Строят градуировочный график, выражающий зависимость площади пика (кв. мм) карбамазепина на хроматограмме от количества вещества в анализируемом объеме пробы (мкг).

Построение градуировочного графика необходимо проводить не менее чем по 5 точкам, выполняя 6 параллельных измерений для каждого раствора. Проверку градуировочного графика следует проводить при изменении условий анализа, но не реже 1 раза в месяц.

Проведение измерения

Фильтр с отобранной пробой помещают в пробирку с пришлифованной пробкой, добавляют 10 мл метанола, оставляют на 10 мин., периодически помешивая стеклянной палочкой для лучшего растворения вещества. Затем фильтр тщательно отжимают и удаляют. Степень десорбции вещества с фильтра — 95%.

Хроматографирование анализируемого раствора проводят в тех же условиях, что и при построении градуировочного графика.

Количественное определение карбамазепина в анализируемой пробе проводят по предварительно построенному градуировочному графику. При расчете концентрации учитывают площадь пика от чистого фильтра, вычитая ее из площади пробы.

Расчет концентрации

Концентрацию карбамазепина в воздухе «C» (мг/куб. м) вычисляют по формуле:

                            a х B

C = -----, б х V

a — содержание вещества в хроматографируемом объеме пробы, найденное по градуировочному графику, мкг;

B — общий объем анализируемого раствора, мл;

б — объем раствора пробы, взятый для хроматографирования, мл;

V — объем воздуха, отобранный для анализа и приведенный к стандартным условиям, л (см. Приложение 1).

Приложение 1

Приведение объема воздуха к стандартным условиям проводят по следующей формуле:

                      V  x (273 + 20) x P
                       t

                    V   = -------------------,
                     20    (273 + t) x 101,33

где:

V — объем воздуха, отобранный для анализа, л; t

P — барометрическое давление, кПа (101,33 кПа = 760 мм рт. ст.);

t — температура воздуха в месте отбора пробы, °C.

Для удобства расчета V следует пользоваться таблицей 20 коэффициентов (Приложение 2). Для приведения воздуха к стандартным условиям надо умножить V на соответствующий коэффициент. t

Приложение 2

°C	Давление P, кПа/мм рт. ст.
	97,33/ 97,86/ 98,4/ 98,93/ 99,46/ 100/ 100,53/ 101,06/ 101,33/ 101,86/ 730 734 738 742 746 750 754 758 760 764
-30	1,1582 1,1646 1,1709 1,1772 1,1836 1,1899 1,1963 1,2026 1,2058 1,2122
-26	1,1393 1,1456 1,1519 1,1581 1,1644 1,1705 1,1768 1,1831 1,1862 1,1925
-22	1,1212 1,1274 1,1336 1,1396 1,1458 1,1519 1,1581 1,1643 1,1673 1,1735
-18	1,1036 1,1097 1,1158 1,1218 1,1278 1,1338 1,1399 1,1460 1,1490 1,1551
-14	1,0866 1,0926 1,0986 1,1045 1,1105 1,1164 1,1224 1,1284 1,1313 1,1373
-10	1,0701 1,0760 1,0819 1,0877 1,0986 1,0994 1,1053 1,1112 1,1141 1,1200
-6	1,0540 1,0599 1,0657 1,0714 1,0772 1,0829 1,0887 1,0945 1,0974 1,1032
-2	1,0385 1,0442 1,0499 1,0556 1,0613 1,0669 1,0726 1,0784 1,0812 1,0869
0	1,0309 1,0366 1,0423 1,0477 1,0535 1,0591 1,0648 1,0705 1,0733 1,0789
+2	1,0234 1,0291 1,0347 1,0402 1,0459 1,0514 1,0571 1,0627 1,0655 1,0712
+6	1,0087 1,0143 1,0198 1,0253 1,0309 1,0363 1,0419 1,0475 1,0502 1,0557
+10	0,9944 0,9999 0,0054 1,0108 1,0162 1,0216 1,0272 1,0326 1,0353 1,0407
+14	0,9806 0,9860 0,9914 0,9967 1,0027 1,0074 1,0128 1,0183 1,0209 1,0263
+18	0,9671 0,9725 0,9778 0,9830 0,9884 0,9936 0,9989 1,0043 1,0069 1,0122
+20	0,9605 0,9658 0,9711 0,9783 0,9816 0,9868 0,9921 0,9974 1,0000 1,0053
+22	0,9539 0,9592 0,9645 0,9696 0,9749 0,9800 0,9853 0,9906 0,9932 0,9985
+24	0,9475 0,9527 0,9579 0,9631 0,9683 0,9735 0,9787 0,9839 0,9865 0,9917
+26	0,9412 0,9464 0,9516 0,9566 0,9618 0,9669 0,9721 0,9773 0,9799 0,9851
+28	0,9349 0,9401 0,9453 0,9503 0,9555 0,9605 0,9657 0,9708 0,9734 0,9785
+30	0,9288 0,9339 0,9391 0,9440 0,9432 0,9542 0,9594 0,9645 0,9670 0,9723
+34	0,9167 0,9218 0,9268 0,9318 0,9368 0,9418 0,9468 0,9519 0,9544 0,9595
+38	0,9049 0,9099 0,9149 0,9199 0,9248 0,9297 0,9347 0,9397 0,9421 0,9471

---