---
title: "\"МУК 4.1.1466-03. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств этофумезата в воде, почве, ботве и корнеплодах сахарной, столовой и кормовой свеклы методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания\""
number: "МУК 4.1.1466-03"
status: действует
canonical: "https://bukva.ai/docs/ukazanie-ukazaniya-muk-4-1-1466-03"
---

## "МУК 4.1.1466-03. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств этофумезата в воде, почве, ботве и корнеплодах сахарной, столовой и кормовой свеклы методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания"

# "МУК 4.1.1466-03. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств этофумезата в воде, почве, ботве и корнеплодах сахарной, столовой и кормовой свеклы методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания"

(утв. Минздравом России 24.06.2003)

> [!IMPORTANT]
> Документ включен в Перечень методов (методик) определения остаточных количеств действующих веществ пестицидов в продукции (товарах), подлежащий государственному санитарно-эпидемиологическому надзору (контролю) на таможенной границе и таможенной территории Евразийского экономического союза (Решение Комиссии Таможенного союза от 28.05.2010 N 299).
> Документ включен в Перечень нормативной документации, разрешенной для использования в государственных ветеринарных лабораториях при диагностике болезней животных, рыб, пчел, а также контроля безопасности сырья животного и растительного происхождения (утв. Россельхознадзором 30.07.2009 N 02-03-48/563).
> Документ включен в Перечень основных действующих нормативно-методических документов по методам лабораторного и инструментального контроля в системе государственного санитарно-эпидемиологического нормирования (Письмо Роспотребнадзора от 02.12.2008 N 01/14262-8-32).
> Документ [введен](#p100002) в действие с 30 июня 2003 года.


<div align="right">

<a id="p100001"></a>Утверждаю<br>
Главный государственный<br>
санитарный врач<br>
Российской Федерации,<br>
Первый заместитель<br>
Министра здравоохранения<br>
Российской Федерации<br>
**Г.Г.ОНИЩЕНКО**

</div>

<div align="center">

24 июня 2003 года

</div>



#### <a id="p100003"></a>4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ


<a id="p100004"></a>**ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ ЭТОФУМЕЗАТА В ВОДЕ, ПОЧВЕ,**
**БОТВЕ И КОРНЕПЛОДАХ САХАРНОЙ, СТОЛОВОЙ И КОРМОВОЙ СВЕКЛЫ**
**МЕТОДОМ ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ**

<a id="p100005"></a>**МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ**
**МУК 4.1.1466-03**

<div align="right">

<a id="p100002"></a>Дата введения

</div>

30 июня 2003 года

1. <a id="p100006"></a>Методические указания подготовлены: Федеральным научным центром гигиены им. Ф.Ф. Эрисмана (чл.-корр. РАМН, проф. В.Н. Ракитский, проф. Т.В. Юдина); Московской сельскохозяйственной академией им. К.А. Тимирязева (проф. В.А. Калинин, к. хим. н. А.В. Довгилевич), при участии Департамента госсанэпиднадзора Минздрава России (А.П. Веселов).
2. <a id="p100007"></a>Методические указания рекомендованы к утверждению Комиссией по госсанэпиднормированию при Минздраве России.
3. <a id="p100008"></a>Утверждены Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации, Первым заместителем Министра здравоохранения Российской Федерации, академиком РАМН Г.Г. Онищенко 24 июня 2003 г.
4. <a id="p100009"></a>Введены с 30 июня 2003 г.
5. <a id="p100010"></a>Введены впервые.


## 1. <a id="p100011"></a>Вводная часть


<a id="p100012"></a>Фирма-производитель: Байер КропСайенс (Германия).
<a id="p100013"></a>Торговое название: Нортрон, НЦ 8438, Кемирон, Трамат.
<a id="p100014"></a>Действующее вещество: этофумезат.
<a id="p100015"></a>(+)-2-этокси-2,3-дигидро-3,3-диметилбензофуран-5-ил метан-сульфонат (ИЮПАК).
<a id="p100016"></a>(+)-2-этокси-2,3-дигидро-3,3-диметил-5-бензофуранил метан-сульфонат (С.А.).
<a id="p100017"></a>Структурная формула (не приводится).
<a id="p100018"></a>    Эмпирическая формула: C  H  O S.
                           13 18 5
<a id="p100019"></a>    Молекулярная масса: 286,3.
<a id="p100020"></a>    Бесцветное кристаллическое вещество без запаха.
<a id="p100021"></a>    Температура плавления: 70 - 72 °C.
<a id="p100022"></a>    Давление паров при 25 °C: 0,12 - 0,65 мПа.
<a id="p100023"></a>    Коэффициент распределения н-октанол/вода: К   log P = 2,7.
                                               ow
<a id="p100024"></a>    Растворимость   (г/л)   при   25. °C:    ацетон,  дихлорметан,
диметилсульфоксид,  этилацетат  -  более  600, толуол - 300 - 600,
метанол 120 - 150, этанол - 60 - 75, гексан - 4,7, вода - 0,05.
<a id="p100025"></a>    Стабильность   к   гидролизу:  стабилен  при  pH  7  и  9,  но
разлагается сильными щелочами и кислотами (DT   = 30 дней (pH 1) и
                                             50
10 дней (pH 13)).
<a id="p100026"></a>    Разрушается  при  облучении водного раствора солнечным светом:
DT   = 31 час.
  50
<a id="p100027"></a>    В   почве   сохраняется   достаточно  длительное  время:  DT
                                                                50
колеблется  от 10 до 122 дней в лабораторных и от 84 до 407 дней в
полевых   условиях.   Вещество   умеренно   сорбируется   почвами,
локализуется  в  верхнем  30  см  слое  почвы  и  не  вымывается в
грунтовые воды.
<a id="p100028"></a>    Краткая токсикологическая характеристика
<a id="p100029"></a>    Острая  пероральная  токсичность  (LD  ) для крыс - более 5000
                                         50
мг/кг;  острая дермальная токсичность (LD  ) для крыс - более 2000
                                         50
мг/кг;  острая  ингаляционная  токсичность (LC  ) для крыс - более
                                              50
3,97  мг/куб.  дм  воздуха.  Этофумезат не оказывает раздражающего
действия  на слизистые оболочки глаз и кожу кроликов. LC   для рыб
                                                        50
- 12 - 20 мг/л (96 час.).
<a id="p100030"></a>Препарат малотоксичен для рыб, пчел, птиц и диких животных.
<a id="p100031"></a>Гигиенические нормативы: ОДК в почве - 0,2 мг/кг; ПДК в воде водоемов - 0,005 мг/куб. дм; МДУ в свекле столовой, кормовой и сахарной - 0,1 мг/кг; ВМДУ в табаке - 1 мг/кг.
<a id="p100032"></a>Область применения препарата
<a id="p100033"></a>Этофумезат - системный гербицид, поглощается корнями и в меньшей степени листьями растений. Применяется для борьбы с однолетними злаковыми и широколистными сорными растениями в посевах сахарной, столовой и кормовой свеклы при норме расхода 0,5 - 2,0 кг/га путем довсходового внесения или опрыскивания вегетирующих растений. Часто применяется в смеси с препаратами контактного или остаточного действия.


## 2. <a id="p100034"></a>Методика определения остаточных количеств этофумезата в воде, почве, ботве и корнеплодах сахарной, столовой и кормовой свеклы методом высокоэффективной жидкостной хроматографии



### <a id="p100035"></a>2.1. Основные положения



##### <a id="p100036"></a>2.1.1 Принцип метода

<a id="p100037"></a>Метод основан на определении этофумезата с помощью обращенно-фазовой высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) с ультрафиолетовым детектором после извлечения вещества из воды гексаном, из почвы и растительного материала водным ацетоном при ультразвуковой обработке, очистки экстрактов перераспределением в системе несмешивающихся растворителей, а также на колонке с основным оксидом алюминия.
<a id="p100038"></a>Количественное определение проводится методом абсолютной калибровки.

##### <a id="p100039"></a>2.1.2 Избирательность метода

<a id="p100040"></a>В предлагаемых условиях метод специфичен в присутствии пестицидов, применяемых в интенсивной технологии выращивания сахарной, столовой и кормовой свеклы.

##### <a id="p100041"></a>2.1.3 Метрологическая характеристика метода


<a id="p100042"></a>Таблица

<a id="p100043"></a>**МЕТРОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА МЕТОДА**


<table>
<colgroup><col width="18%"><col width="16%"><col width="18%"><col width="12%"><col width="11%"><col width="11%"><col width="14%"></colgroup>
<tr><td rowspan="2">Анализируемый объект</td><td colspan="6">Метрологические параметры, P = 0,95, n = 20</td></tr>
<tr><td>предел обнаружения, мг/куб. дм, мг/кг</td><td>диапазон определяемых концентраций, мг/куб. дм, мг/кг</td><td>среднее значение определения, %</td><td>стандартное отклонение, S, %</td><td>относительное отклонение, %</td><td>доверительный интервал среднего, %</td></tr>
<tr><td>Вода</td><td>0,0025</td><td>0,0025 - 0,025</td><td>91,0</td><td>2,1</td><td>0,9</td><td>+/- 1,9</td></tr>
<tr><td>Почва</td><td>0,10</td><td>0,1 - 1,0</td><td>88,0</td><td>3,4</td><td>1,5</td><td>+/- 3,2</td></tr>
<tr><td>Сахарная свекла (ботва)</td><td>0,10</td><td>0,1 - 1,0</td><td>88,9</td><td>4,4</td><td>2,0</td><td>+/- 4,1</td></tr>
<tr><td>Сахарная свекла (корнеплоды)</td><td>0,05</td><td>0,05 - 0,5</td><td>87,3</td><td>3,4</td><td>1,5</td><td>+/- 3,2</td></tr>
<tr><td>Столовая свекла (корнеплоды)</td><td>0,05</td><td>0,05 - 0,5</td><td>86,5</td><td>3,0</td><td>1,3</td><td>+/- 2,8</td></tr>
<tr><td>Кормовая свекла (корнеплоды)</td><td>0,05</td><td>0,05 - 0,5</td><td>83,5</td><td>2,8</td><td>1,3</td><td>+/- 2,6</td></tr>
</table>



### <a id="p100051"></a>2.2. Реактивы, растворы и материалы


<a id="p100052"></a>Этофумезат с содержанием д.в. 99,9%
(АгрЭво, Германия)
<a id="p100053"></a>Ацетон, ч.д.а. ГОСТ 2603-79
<a id="p100054"></a>Ацетонитрил                                      ТУ 6-09-3534-82
<a id="p100055"></a>Вода дистиллированная или деионизованная         ГОСТ 7602-72
<a id="p100056"></a>н-Гексан, х.ч.                                   ТУ 6-09-3375-78
<a id="p100057"></a>Железо (II) серно-кислое, х.ч. [ГОСТ 4148-78](https://bukva.ai/docs/gost-4148-78)
<a id="p100058"></a>Калия перманганат ГОСТ 20490-75
<a id="p100059"></a>Калий углекислый, х.ч. [ГОСТ 4221-76](https://bukva.ai/docs/standart-gost-4221-76)
<a id="p100060"></a>Кальция хлорид, х.ч.                             ГОСТ 4161-77
<a id="p100061"></a>Кислота серная, х.ч. ГОСТ 4204-77
<a id="p100062"></a>Метилен хлористый [ГОСТ 12794-80](https://bukva.ai/docs/standart-gost-12794-80)
<a id="p100063"></a>Натрия сульфат безводный, х.ч. [ГОСТ 4166-76](https://bukva.ai/docs/gost-4166-76)
<a id="p100064"></a>Натрия гидроксид, х.ч. ГОСТ 4328-77
<a id="p100065"></a>Фосфора пентоксид, ч.                            МРТУ 6-09-5759-69
<a id="p100066"></a>Эфир диэтиловый                                  ГОСТ 6255-74
<a id="p100067"></a>Элюент для колоночной хроматографии: смесь
хлористый метилен-диэтиловый эфир (70:30,
по объему)
<a id="p100068"></a>Подвижная фаза для ВЭЖХ: смесь
ацетонитрил - вода (70:30, по объему)
<a id="p100069"></a>Алюминия оксид для хроматографии, I степени

<div align="center">

активности по Брокману, основной                 МРТУ 6-09-3916-83

</div>

<a id="p100070"></a>Стекловата
<a id="p100071"></a>Фильтры бумажные "синяя лента"                   ТУ 6-09-1678-77


### <a id="p100072"></a>2.3. Приборы, аппаратура, посуда


<a id="p100073"></a>Жидкостный хроматограф с ультрафиолетовым
детектором фирмы Altex (США) или аналогичный
<a id="p100074"></a>Самописец регистрирующий фирмы Kipp
a.Zonen BD 41 или аналогичный
<a id="p100075"></a>Колонка хроматографическая длиной 15 см и
внутренним диаметром 4 мм, заполненная
Kromasil 100А-С18, зернением 5 мкм
(АО БиоХимМак, Москва, Воробьевы горы, МГУ)
<a id="p100076"></a>Шприц для ввода образцов в жидкостной
хроматограф емкостью 100 мкл
<a id="p100077"></a>Весы аналитические типа ВЛР-200                    ГОСТ 19401-74
<a id="p100078"></a>Водоструйный насос                                 ГОСТ 10696-75
<a id="p100079"></a>Гомогенизатор                                      МРТУ 42-1505-63
<a id="p100080"></a>Прибор для перегонки при атмосферном давлении
<a id="p100081"></a>Ротационный испаритель, тип ИР-1М                  ТУ 25-11-917-76
<a id="p100082"></a>Сито с диаметром отверстий 1 мм
<a id="p100083"></a>Сушильный шкаф
<a id="p100084"></a>Баня ультразвуковая, модель D-50, Branson
Instr.Co., США, или аналогичная
<a id="p100085"></a>Воронка Бюхнера                                    ГОСТ 9147-73
<a id="p100086"></a>Воронки для фильтрования стеклянные                ГОСТ 8613-75
<a id="p100087"></a>Воронки делительные вместимостью 100 и 250 мл ГОСТ 25336-82
<a id="p100088"></a>Колба Бунзена                                      ГОСТ 5614-75
<a id="p100089"></a>Колбы конические с притертыми пробками
вместимостью 250 мл ГОСТ 25336-82
<a id="p100090"></a>Колбы мерные  вместимостью 50 и 100 мл             ГОСТ 1770-74
<a id="p100091"></a>Колбы грушевидные вместимостью 50, 100 мл ГОСТ 25336-82
<a id="p100092"></a>Цилиндры мерные вместимостью 50, 100 и 250 мл      ГОСТ 1770-74
<a id="p100093"></a>Пробирки градуированные с притертыми
пробками, вместимостью 5 и 10 мл                   ГОСТ 10515-75
<a id="p100094"></a>Пипетки мерные вместимостью 1, 2 и 5 мл [ГОСТ 20292-74Е](https://bukva.ai/docs/standart-gost-20292-74)
<a id="p100095"></a>Хроматографическая колонка стеклянная
25 x 1,8 см


### <a id="p100096"></a>2.4. Отбор проб


<a id="p100097"></a>Отбор проб производится в соответствии с "Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, продуктов питания и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов" (N 2051-79 от 21.08.79).
<a id="p100098"></a>Отобранные пробы почвы, ботвы и корнеплодов свеклы хранят в стеклянной или полиэтиленовой таре в холодильнике не более суток. Для длительного хранения пробы почвы доводят до воздушно-сухого состояния и хранят в холодильнике при температуре не выше 4 °C в течение 3 месяцев; образцы ботвы и корнеплодов свеклы хранят до анализа в морозильной камере при температуре -18 °C. Пробы воды хранят при температуре не выше 4 °C в течение 2 дней, при температуре -18 °C в течение месяца.
<a id="p100099"></a>Перед анализом сухую почву просеивают через сито с отверстиями диаметром 1 мм, а ботву и корнеплоды измельчают.


### <a id="p100100"></a>2.5. Подготовка к определению



##### <a id="p100101"></a>2.5.1 Подготовка и очистка реактивов и растворителей

<a id="p100102"></a>Органические растворители перед началом работы очищают, сушат и перегоняют в соответствии с типовыми методиками. Гексан и хлористый метилен встряхивают с небольшими порциями концентрированной серной кислоты до тех пор, пока свежая порция кислоты не перестанет окрашиваться. Затем растворители последовательно промывают водой, 2%-ным раствором гидроксида натрия и снова водой, после чего сушат над гидроксидом натрия и перегоняют.
<a id="p100103"></a>    Ацетон  перегоняют  над  перманганатом калия и поташом (на 1 л
ацетона 10 г KMnO  и 2 г K CO ).
                 4        2  3
<a id="p100104"></a>Ацетонитрил сушат над пентоксидом фосфора и перегоняют; отогнанный растворитель повторно перегоняют над углекислым калием.
<a id="p100105"></a>Диэтиловый эфир (1 л) предварительно встряхивают с 20 мл свежеприготовленного раствора железного купороса (30 г сульфата железа в 55 мл воды с добавлением 1,5 г концентрированной серной кислоты). Затем диэтиловый эфир последовательно промывают 0,5%-ным раствором перманганата калия, 5%-ным раствором гидроксида натрия и водой, после чего сушат над хлористым кальцием и перегоняют.

##### <a id="p100106"></a>2.5.2 Подготовка подвижной фазы для ВЭЖХ

<a id="p100107"></a>Отмеряют 700 мл ацетонитрила, переносят в мерную колбу емкостью 1000 мл, добавляют 300 мл бидистиллированной воды, перемешивают, фильтруют и дегазируют.

##### <a id="p100108"></a>2.5.3 Кондиционирование колонки

<a id="p100109"></a>Промыть колонку для ВЭЖХ смесью ацетонитрил - вода (70:30, по объему) в течение 30 мин. при скорости подачи растворителя 1 мл/мин. Включить детектор и подождать стабилизации базовой линии (5 - 15 мин.).

##### <a id="p100110"></a>2.5.4 Приготовление стандартных растворов

<a id="p100111"></a>Основной стандартный раствор этофумезата с содержанием 100 мкг/мл готовят растворением 0,010 г вещества, содержащего 99,9% д.в., в ацетонитриле в мерной колбе на 100 мл. Раствор хранят в холодильнике не более месяца.
<a id="p100112"></a>Рабочие стандартные растворы с концентрациями 0,1; 0,2; 0,5 и 1,0 мкг/мл готовят из основного стандартного раствора этофумезата соответствующим последовательным разведением подвижной фазой для ВЭЖХ ([п. 2.5.2](#p100106)). Рабочие растворы хранят в холодильнике при температуре не выше 4 °C не более 7 дней.
<a id="p100113"></a>При изучении полноты открывания этофумезата в модельных матрицах используются ацетонитрильные растворы вещества.

##### <a id="p100114"></a>2.5.5 Построение калибровочного графика

<a id="p100115"></a>Для построения калибровочного графика в инжектор хроматографа вводят по 50 мкл рабочего стандартного раствора этофумезата с концентрацией 0,1; 0,2; 0,5 и 1,0 мкг/мл. Осуществляют не менее 5 параллельных измерений и находят среднее значение высоты хроматографического пика для каждой концентрации. Строят калибровочный график зависимости высоты хроматографического пика в мм от концентрации этофумезата в растворе в мкг/мл.

##### <a id="p100116"></a>2.5.6 Подготовка колонки с оксидом алюминия для очистки экстракта

<a id="p100117"></a>В нижнюю часть стеклянной колонки длиной 25 см и внутренним диаметром 1,8 см вставляют тампон из стекловаты, закрывают кран и приливают около 10 мл гексана. Затем в колонку вносят суспензию 10 г основного оксида алюминия I степени активности по Брокману в 20 мл гексана. Дают растворителю стечь до верхнего края сорбента и помещают на него слой безводного сульфата натрия высотой 1 см. Колонку промывают 20 мл гексана со скоростью 1 - 2 капли в секунду, после чего она готова к работе.

##### <a id="p100118"></a>2.5.7 Проверка хроматографического поведения этофумезата на колонке с оксидом алюминия

<a id="p100119"></a>В круглодонную колбу емкостью 10 мл отбирают 0,1 мл стандартного раствора этофумезата с концентрацией 10 мкг/мл. Отдувают растворитель током теплого воздуха, остаток растворяют в 3 мл смеси гексан - хлористый метилен (1:1, по объему) и наносят на хроматографическую колонку ([п. 2.5.6](#p100116)). Промывают колонку 40 мл хлористого метилена и затем 30 мл смеси хлористый метилен - диэтиловый эфир (70:30, по объему) со скоростью 1 - 2 капли в секунду. Отбирают фракции по 10 мл каждая, упаривают, остаток растворяют в 1 мл подвижной фазы для ВЭЖХ ([п. 2.5.2](#p100106)) и анализируют на содержание этофумезата по [п. 2.7](#p100131).
<a id="p100120"></a>Фракции, содержащие этофумезат, объединяют, упаривают досуха, остаток растворяют в 2,5 мл подвижной фазы для ВЭЖХ и вновь анализируют по [п. 2.7](#p100131). Рассчитывают содержание этофумезата в элюате, определяют полноту вымывания вещества из колонки и необходимый для очистки экстракта объем элюента.
<a id="p100121"></a>*Примечание.* Профиль вымывания этофумезата может меняться при использовании новой партии сорбента и растворителей.


### <a id="p100122"></a>2.6. Описание определения



##### <a id="p100123"></a>2.6.1 Экстракция этофумезата

<a id="p100124"></a>2.6.1.1. Вода. 100 мл предварительно отфильтрованной воды помещают в делительную воронку емкостью 250 мл и трижды экстрагируют гексаном порциями по 30 мл при энергичном встряхивании в течение 1 мин. Объединенную органическую фазу пропускают через слой безводного сульфата натрия и упаривают досуха на роторном испарителе при температуре 30 °C. Сухой остаток растворяют в 2,5 мл подвижной фазы для ВЭЖХ ([п. 2.5.2](#p100106)) и анализируют на содержание этофумезата по [п. 2.7](#p100131).
<a id="p100125"></a>2.6.1.2. Почва. Навеску (25 г) воздушно-сухой почвы помещают в коническую колбу на 250 мл, приливают 100 мл смеси ацетон - вода (80:20, по объему) и помещают в ультразвуковую баню на 5 мин. Суспензию фильтруют под вакуумом на воронке Бюхнера через бумажный фильтр. Остаток на фильтре промывают 50 мл смеси ацетон - вода (80:20, по объему). Из объединенного экстракта отбирают аликвоту раствора (около 12 мл), эквивалентную 2,5 г почвы. Дальнейшую очистку экстракта проводят по [п. п. 2.6.2](#p100127) и [2.6.3](#p100129).
<a id="p100126"></a>2.6.1.3. Ботва и корнеплоды свеклы. К навеске (25 г) измельченного растительного материала приливают 100 мл смеси ацетон - вода (80:20, по объему) и гомогенизируют 5 мин. при 10000 об./мин. Суспензию фильтруют под вакуумом на воронке Бюхнера через бумажный фильтр в колбу на 250 мл. Остаток на фильтре промывают 50 мл смеси ацетон - вода (80:20, по объему). Из объединенного экстракта отбирают аликвоту раствора, эквивалентную соответственно 5 г корнеплодов или 2,5 г ботвы. Дальнейшую очистку экстракта проводят по п. п. 2.6.2 и [2.6.3](#p100129).

##### <a id="p100127"></a>2.6.2 Очистка экстракта

<a id="p100128"></a>Аликвоту почвенного (из [п. 2.6.1.2](#p100125)) или растительного (из [п. 2.6.1.3](#p100126)) экстракта упаривают до водной фазы на роторном испарителе при температуре 40 °C. Водный остаток переносят в делительную воронку емкостью 100 мл, приливают 25 мл бидистиллированной воды и 30 мл гексана и воронку встряхивают в течение 1 мин. После разделения слоев отделяют гексановую фракцию, а водную фазу экстрагируют гексаном еще дважды (30 + 20 мл). Объединенный гексановый экстракт пропускают через стеклянный фильтр, заполненный безводным сульфатом натрия, и затем упаривают досуха на роторном испарителе при температуре 30 °C. Дальнейшую очистку экстракта проводят по п. 2.6.3.

##### <a id="p100129"></a>2.6.3 Очистка на колонке с оксидом алюминия

<a id="p100130"></a>Остаток в колбе, полученный при упаривании очищенных по [п. 2.6.2](#p100127) экстрактов растительного материала или почвы, количественно переносят тремя 1-мл порциями смеси гексан - хлористый метилен (1:1, по объему) в кондиционированную хроматографическую колонку ([п. 2.5.6](#p100116)). Промывают колонку 40 мл хлористого метилена, которые отбрасывают. Этофумезат элюируют 30 мл смеси хлористый метилен - диэтиловый эфир (70:30, по объему), собирая элюат в грушевидную колбу емкостью 50 мл. Раствор упаривают досуха на роторном испарителе при температуре 30 °C. Сухие остатки почвы, ботвы и корнеплодов свеклы растворяют в 2,5 мл подвижной фазы для ВЭЖХ ([п. 2.5.2](#p100106)) и анализируют по п. 2.7.


### <a id="p100131"></a>2.7. Условия хроматографирования


<a id="p100132"></a>Жидкостный хроматограф с ультрафиолетовым детектором Altex (США) или аналогичный
<a id="p100133"></a>Колонка стальная длиной 15 см внутренним диаметром 4 мм, содержащая Kromasil 100А - С18 зернением 5 мкм
<a id="p100134"></a>    Температура колонки                комнатная
<a id="p100135"></a>    Подвижная фаза                     ацетонитрил - вода (70:30,
                                       по объему)
<a id="p100136"></a>    Скорость потока элюента            0,6 мл/мин.
<a id="p100137"></a>    Рабочая длина волны                280 нм
<a id="p100138"></a>    Чувствительность                   0,02 ед. абсорбции на шкалу
<a id="p100139"></a>    Объем вводимой пробы               50 мкл
<a id="p100140"></a>    Скорость протяжки ленты самописца  15 см/ч
<a id="p100141"></a>    Время удерживания этофумезата      около 6 мин.
<a id="p100142"></a>    Линейный диапазон детектирования   5 - 50 нг
<a id="p100143"></a>    Альтернативная неподвижная фаза    Диасорб 130-С10СN
<a id="p100144"></a>    Подвижная фаза                     ацетонитрил - вода (70:30,
                                       по объему)
<a id="p100145"></a>    Скорость потока элюента            0,7 мл/мин.
<a id="p100146"></a>    Время удерживания этофумезата      4 мин.
<a id="p100147"></a>Образцы, дающие пики большие, чем стандартный раствор с концентрацией 5,0 мкг/мл, разбавляют подвижной фазой для ВЭЖХ.


### <a id="p100148"></a>2.8. Обработка результатов анализа


    Содержание   этофумезата   рассчитывают   методом   абсолютной
калибровки по формуле:

                              H  x A x V
                               1
<a id="p100149"></a>                          X = ----------,
                                H  x m
                                 0

<a id="p100150"></a>    где:
<a id="p100151"></a>    X - содержание этофумезата в пробе, мг/кг или мг/куб. дм;
<a id="p100152"></a>    H  - высота пика образца, мм;
     1
<a id="p100153"></a>    H  - высота пика стандарта, мм;
     0
<a id="p100154"></a>    A - концентрация стандартного раствора, мкг/мл;
<a id="p100155"></a>    V  - объем экстракта, подготовленного для хроматографирования,
мл;
<a id="p100156"></a>    m - масса или объем анализируемой части образца, г или мл (для
воды - 100 мл; для почвы и ботвы - 2,5 г; для корнеплодов - 5 г).


## 3. <a id="p100157"></a>Требования техники безопасности


<a id="p100158"></a>Необходимо соблюдать общепринятые правила безопасности при работе с органическими растворителями, токсичными веществами, электронагревательными приборами и сжатыми газами.


## 4. <a id="p100159"></a>Контроль погрешности измерений


<a id="p100160"></a>Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с рекомендациями [МИ 2335-95](https://bukva.ai/docs/mi-2335-95). ГСИ. Внутренний контроль качества результатов количественного химического анализа.


## 5. <a id="p100161"></a>Разработчики


<a id="p100162"></a>Макеев А.М., к. биол. н.; Дубовая Л.В.
<a id="p100163"></a>ВНИИ фитопатологии, 143050, Московская обл., п/о Большие Вяземы, тел. 592-92-20.



<a id="p100164"></a>

---