---
title: "\"МУК 4.1.1461-03. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств Феноксапроп-П и Феноксапроп-П-этила в воде и Феноксапроп-П в почве, зерне и соломе зерновых колосовых культур, зеленой массе, семенах и масле подсолнечника, льна, сои и рапса, ботве и корнеплодах сахарной и столовой свеклы методом высокоэффективной жидкостной хроматографии\""
number: "МУК 4.1.1461-03"
status: действует
canonical: "https://bukva.ai/docs/ukazanie-ukazaniya-muk-4-1-1461-03"
---

## "МУК 4.1.1461-03. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств Феноксапроп-П и Феноксапроп-П-этила в воде и Феноксапроп-П в почве, зерне и соломе зерновых колосовых культур, зеленой массе, семенах и масле подсолнечника, льна, сои и рапса, ботве и корнеплодах сахарной и столовой свеклы методом высокоэффективной жидкостной хроматографии"

# "МУК 4.1.1461-03. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств Феноксапроп-П и Феноксапроп-П-этила в воде и Феноксапроп-П в почве, зерне и соломе зерновых колосовых культур, зеленой массе, семенах и масле подсолнечника, льна, сои и рапса, ботве и корнеплодах сахарной и столовой свеклы методом высокоэффективной жидкостной хроматографии"

(утв. Минздравом России 24.06.2003)

> [!IMPORTANT]
> Документ включен в Перечень методов (методик) определения остаточных количеств действующих веществ пестицидов в продукции (товарах), подлежащий государственному санитарно-эпидемиологическому надзору (контролю) на таможенной границе и таможенной территории Евразийского экономического союза (Решение Комиссии Таможенного союза от 28.05.2010 N 299).
> Документ включен в Перечень нормативной документации, разрешенной для использования в государственных ветеринарных лабораториях при диагностике болезней животных, рыб, пчел, а также контроля безопасности сырья животного и растительного происхождения (утв. Россельхознадзором 30.07.2009 N 02-03-48/563).
> Документ включен в Перечень основных действующих нормативно-методических документов по методам лабораторного и инструментального контроля в системе государственного санитарно-эпидемиологического нормирования (Письмо Роспотребнадзора от 02.12.2008 N 01/14262-8-32).
> Документ [введен](#p100002) в действие с 30 июня 2003 года.


<div align="right">

<a id="p100001"></a>Утверждаю<br>
Главный государственный<br>
санитарный врач<br>
Российской Федерации,<br>
Первый заместитель<br>
Министра здравоохранения<br>
Российской Федерации<br>
**Г.Г.ОНИЩЕНКО**

</div>

<div align="center">

24 июня 2003 года

</div>



#### <a id="p100003"></a>4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ


<a id="p100004"></a>**ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ**
**ФЕНОКСАПРОП-П И ФЕНОКСАПРОП-П-ЭТИЛА В ВОДЕ**
**И ФЕНОКСАПРОП-П В ПОЧВЕ, ЗЕРНЕ И СОЛОМЕ ЗЕРНОВЫХ КОЛОСОВЫХ**
**КУЛЬТУР, ЗЕЛЕНОЙ МАССЕ, СЕМЕНАХ И МАСЛЕ ПОДСОЛНЕЧНИКА, ЛЬНА,**
**СОИ И РАПСА, БОТВЕ И КОРНЕПЛОДАХ САХАРНОЙ И СТОЛОВОЙ**
**СВЕКЛЫ МЕТОДОМ ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ**

<div align="center">

<a id="p100005"></a>**МУК 4.1.1461-03**

</div>


<div align="right">

<a id="p100002"></a>Дата введения

</div>

<div align="center">

30 июня 2003 года

</div>


1. <a id="p100006"></a>Подготовлены: Федеральным научным центром гигиены им. Ф.Ф. Эрисмана (чл.-корр. РАМН, проф. В.Н. Ракитский, проф. Т.В. Юдина); Московской сельскохозяйственной академией им. К.А. Тимирязева (проф. В.А. Калинин, к. хим. н. А.В. Довгилевич); при участии Департамента госсанэпиднадзора Минздрава России (А.П. Веселов).
2. <a id="p100007"></a>Методические указания рекомендованы к утверждению Комиссией по госсанэпиднормированию при Минздраве России.
3. <a id="p100008"></a>Утверждены Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации, Первым заместителем Министра здравоохранения Российской Федерации, академиком РАМН Г.Г. Онищенко 24 июня 2003 г.
4. <a id="p100009"></a>Введены впервые.


## 1. <a id="p100010"></a>Вводная часть


<a id="p100011"></a>Фирма производитель: Байер КропСайенс (Германия).
<a id="p100012"></a>Торговое название: Пума-супер, Фуроре-супер.
<a id="p100013"></a>Действующее вещество: феноксапроп-П-этил.
<a id="p100014"></a>Этил (R)-2-[4-[(6-хлор-2-бензоксазолил)окси]фенокси]пропаноат (С.А.).
<a id="p100015"></a>Структурная формула: (не приводится).
<a id="p100016"></a>    Эмпирическая формула: С  Н  ClNO                  М. м.: 361,8
                           18 16    5
<a id="p100017"></a>    Белое твердое вещество без запаха.
<a id="p100018"></a>    Температура плавления: 89 - 91 °С.
                                      -4
<a id="p100019"></a>    Давление паров при 20 °С: 5,3 х 10   мПа.
<a id="p100020"></a>    Коэффициент распределения н-октанол/вода: К   log Р = 4,58.
                                               ow
<a id="p100021"></a>    Растворимость  (г/л)  при  20  °С: ацетон - 200, толуол - 200,
этилацетат  -  более  200, этанол - 24; растворимость в воде - 0,7
мг/л.
<a id="p100022"></a>    Вещество стабильно в течение 90 дней при 50 °С, не разрушается
на  свету,  не стабильно в нейтральной и особенно щелочной средах:
DT   = 1000 дней (рН 5), 100 дней (рН 7), 2,4 дня (рН 9).
  50

<a id="p100023"></a>    Краткая токсикологическая характеристика.
<a id="p100024"></a>    Острая пероральная токсичность  (LD  ) для крыс - 3150 - 4000,
                                       50
для мышей - более 5000 мг/кг; острая дермальная токсичность (LD  )
                                                               50
для крыс - более  2000  мг/кг;  острая  ингаляционная  токсичность
(LC  ) для крыс - более 1,224 мг/л воздуха. Феноксапроп-П-этил  не
   50
вызывает раздражения кожи. LC   для рыб - 0,46 - 0,58 мг/л (96 ч).
                             50
<a id="p100025"></a>Феноксапроп-П-этил не токсичен для пчел, птиц, дождевых червей.
<a id="p100026"></a>Гигиенические нормативы для феноксапроп-П-этила: ОДК в почве - 0,04 мг/кг; ПДК в воде - 0,0003 мг/куб. дм; МДУ в зерне хлебных злаков, моркови, свекле столовой, подсолнечнике (масло) и луке - 0,01, свекле сахарной, сое - 0,05, капусте - 0,02, рапсе, горохе - 0,2 мг/кг.
<a id="p100027"></a>Основной метаболит феноксапроп-П-этила: феноксапроп-П.
<a id="p100028"></a>(R)-2-[4-[(6-хлорбензоксазол-2-илокси)]фенокси]пропионовая кислота (ИЮПАК).
<a id="p100029"></a>(R)-2-[4-[(6-хлор-2-бензоксазолил)окси]фенокси]пропановая кислота (С.А.).
<a id="p100030"></a>Структурная формула: (не приводится).
<a id="p100031"></a>    Эмпирическая формула: С  Н  ClNO                  М. м.: 333,7
                           16 12    5
<a id="p100032"></a>    Светло-бежевый порошок со слабым запахом.
<a id="p100033"></a>    Температура плавления: 155 - 161 °С.
                                      -1
<a id="p100034"></a>    Давление паров при 20 °С: 1,8 х 10   мПа.
<a id="p100035"></a>    Коэффициент  распределения  н-октанол/вода: К   log Р = 1,83 -
                                                 ow
0,24 (рН 5 - 9).
<a id="p100036"></a>Растворимость (г/л) при 20 °С: толуол - 0,5, метанол - 34, этилацетат - 36, ацетон - 80, вода - 0,27 (рН 5,1) и 61 (рН 7,0).
<a id="p100037"></a>Другие физико-химические и токсикологические характеристики феноксапроп-П отсутствуют.
<a id="p100038"></a>Гигиенические нормативы для феноксапроп-П не установлены.

<a id="p100039"></a>Область применения препарата.
<a id="p100040"></a>Феноксапроп-П-этил - послевсходовый гербицид системного действия из группы ингибиторов синтеза жирных кислот. Вещество быстро поглощается листьями и хорошо передвигается в акропетальном и базипетальном направлении в различные органы растения. Феноксапроп-П-этил эффективно уничтожает однолетние и многолетние злаковые сорняки в посевах свеклы, моркови, сои, льна, арахиса, хлопчатника, капусты, лука и картофеля, а в комбинации с антидотом используется для этих же целей и на посевах пшеницы, ржи и тритикале.
<a id="p100041"></a>Проходит регистрационные испытания в России и странах СНГ под торговым названием Пума-супер 100, КЭ (100 г феноксапроп-П-этила и 27 г антидота мефенпир-диэтила в 1 л препарата) и Фуроре-супер 7.5, ЭМВ (69 г феноксапроп-П-этила в 1 л препарата) на посевах озимой и яровой пшеницы, свеклы, капусты, подсолнечника, льна, сои и рапса в качестве послевсходового гербицида при норме расхода 0,8 - 1,2 л/га и однократной обработке за сезон.
<a id="p100042"></a>Феноксапроп-П-этил весьма лабильное вещество и при попадании в воду, почву или растение очень быстро метаболизируется до более устойчивого соединения - (R)-2-[4-[(6-хлорбензоксазол-2-илокси)]фенокси]пропионовой кислоты /феноксапроп-П/.


## 2. <a id="p100043"></a>Методика определения остаточных количеств Феноксапроп-П и Феноксапроп-П-этила в воде и Феноксапроп-П в почве, зерне и соломе зерновых колосовых культур, зеленой массе, семенах и масле подсолнечника, льна, сои и рапса, ботве и корнеплодах сахарной и столовой свеклы методом высокоэффективной жидкостной хроматографии



### <a id="p100044"></a>2.1. Основные положения



##### <a id="p100045"></a>2.1.1 Принцип метода

<a id="p100046"></a>Метод основан на определении феноксапроп-П-этила и его метаболита феноксапроп-П с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) на обращенной фазе с ультрафиолетовым детектором после извлечения препарата из воды гексаном и очистки его на концентрирующем патроне Диапак С16 и экстракции метаболита из подкисленной воды диэтиловым эфиром, из почвы, растительного материала и масла водным ацетонитрилом при ультразвуковой обработке, очистки экстрактов перераспределением в системе несмешивающихся растворителей и на колонке с силикагелем.
<a id="p100047"></a>Количественное определение проводится методом абсолютной калибровки.


##### <a id="p100048"></a>2.1.2 Избирательность метода

<a id="p100049"></a>В предлагаемых условиях метод специфичен в присутствии пестицидов, применяемых в интенсивной технологии выращивания зерновых культур, сахарной и столовой свеклы, подсолнечника, сои, льна и рапса.


##### <a id="p100050"></a>2.1.3 Метрологическая характеристика метода


<a id="p100051"></a>Таблица


<table>
<colgroup><col width="13%"><col width="18%"><col width="18%"><col width="13%"><col width="12%"><col width="12%"><col width="13%"></colgroup>
<tr><td>Анализируемый</td><td colspan="6">Метрологические параметры, Р = 0,95, n = 20</td></tr>
<tr><td>объект</td><td>предел обнаружения, мг/куб. дм, мг/кг</td><td>диапазон определяемых концентраций, мг/куб. дм, мг/кг</td><td>среднее значение определения, %</td><td>стандартное отклонение, S, %</td><td>относительное отклонение, %</td><td>доверительный интервал среднего, %</td></tr>
<tr><td colspan="7">Феноксапроп-П-этил</td></tr>
<tr><td>Вода</td><td>0,0003</td><td>0,0003 - 0,003</td><td>93,3</td><td>6,3</td><td>2,8</td><td>+/- 5,8</td></tr>
<tr><td colspan="7">Феноксапроп-П</td></tr>
<tr><td>Вода</td><td>0,0003</td><td>0,0003 - 0,003</td><td>92,4</td><td>6,8</td><td>3,0</td><td>+/- 6,3</td></tr>
<tr><td>Почва</td><td>0,02</td><td>0,02 - 0,2</td><td>83,1</td><td>6,8</td><td>3,0</td><td>+/- 6,3</td></tr>
<tr><td>Зерно</td><td>0,01</td><td>0,01 - 0,1</td><td>80,1</td><td>7,7</td><td>3,4</td><td>+/- 7,1</td></tr>
<tr><td>Солома</td><td>0,05</td><td>0,05 - 0,5</td><td>82,5</td><td>8,9</td><td>4,0</td><td>+/- 8,4</td></tr>
<tr><td>Свекла столовая (корнеплоды)</td><td>0,01</td><td>0,01 - 0,1</td><td>81,1</td><td>5,1</td><td>2,3</td><td>+/- 4,7</td></tr>
<tr><td>Свекла сахарная (корнеплоды)</td><td>0,025</td><td>0,025 - 0,25</td><td>83,2</td><td>5,7</td><td>2,5</td><td>+/- 5,7</td></tr>
<tr><td>Свекла сахарная (ботва)</td><td>0,025</td><td>0,025 - 0,25</td><td>80,1</td><td>6,4</td><td>2,8</td><td>+/- 6,3</td></tr>
<tr><td>Семена подсолнечника</td><td>0,01</td><td>0,01 - 0,1</td><td>80,7</td><td>4,8</td><td>2,1</td><td>+/- 4,5</td></tr>
<tr><td>Масло подсолнечника</td><td>0,01</td><td>0,01 - 0,1</td><td>79,4</td><td>4,6</td><td>2,1</td><td>+/- 4,3</td></tr>
<tr><td>Семена сои</td><td>0,05</td><td>0,05 - 0,5</td><td>81,2</td><td></td><td></td><td></td></tr>
<tr><td>Масло сои</td><td>0,05</td><td>0,05 - 0,5</td><td>83,0</td><td></td><td></td><td></td></tr>
<tr><td>Семена рапса</td><td>0,10</td><td>0,1 - 1,0</td><td>80,7</td><td></td><td></td><td></td></tr>
<tr><td>Масло рапса</td><td>0,10</td><td>0,1 - 1,0</td><td>85,3</td><td></td><td></td><td></td></tr>
<tr><td>Зеленая масса рапса</td><td>0,10</td><td>0,1 - 1,0</td><td>83,1</td><td></td><td></td><td></td></tr>
<tr><td>Семена льна</td><td>0,10</td><td>0,1 - 1,0</td><td>80,7</td><td></td><td></td><td></td></tr>
<tr><td>Масло льна</td><td>0,10</td><td>0,1 - 1,0</td><td>81,2</td><td></td><td></td><td></td></tr>
<tr><td>Соломка</td><td>0,10</td><td>0,1 - 1,0</td><td>83,3</td><td></td><td></td><td></td></tr>
</table>



### <a id="p100073"></a>2.2. Реактивы, растворы, материалы


<a id="p100074"></a>Феноксапроп-П-этил с содержанием д.в. 98,9%
(АгрЭво, Германия)
<a id="p100075"></a>Феноксапроп-П с содержанием д.в. 99,1%
(АгрЭво, Германия)
<a id="p100076"></a>Ацетонитрил, ч                                   ТУ 6-09-3534-82
<a id="p100077"></a>Вода бидистиллированная                          ГОСТ 7602-72
<a id="p100078"></a>Гексан, ч                                        ТУ 6-09-3375-78
<a id="p100079"></a>Железо (II) серно-кислое, хч [ГОСТ 4148-78](https://bukva.ai/docs/gost-4148-78)
<a id="p100080"></a>Калия перманганат, хч ГОСТ 20490-75
<a id="p100081"></a>Калий углекислый, хч [ГОСТ 4221-76](https://bukva.ai/docs/standart-gost-4221-76)
<a id="p100082"></a>Кальция хлорид, хч                               ГОСТ 4161-77
<a id="p100083"></a>Кислота ортофосфорная, 87%, хч ГОСТ 6552-80
<a id="p100084"></a>Кислота серная, хч ГОСТ 4204-77
<a id="p100085"></a>Кислота хлористоводородная, хч ГОСТ 3118-77
<a id="p100086"></a>Натрия гидроксид, хч ГОСТ 4328-77
<a id="p100087"></a>Натрия сульфат безводный, хч [ГОСТ 4166-76](https://bukva.ai/docs/gost-4166-76)
<a id="p100088"></a>Натрий углекислый, хч                            ГОСТ 83-63
<a id="p100089"></a>Натрия хлорид, хч ГОСТ 4233-77
<a id="p100090"></a>Спирт метиловый, хч                              ГОСТ 6995-77
<a id="p100091"></a>Фосфора пентаксид, ч                             МРТУ 6-09-5759-69
<a id="p100092"></a>Этилацетат [ГОСТ 22300-76](https://bukva.ai/docs/gost-22300-76)
<a id="p100093"></a>Эфир диэтиловый                                  ГОСТ 6265-74
<a id="p100094"></a>Элюент N 1 для колоночной хроматографии:
смесь этилацетат - метанол (7:3 по объему)
<a id="p100095"></a>Элюент N 2 для колоночной хроматографии:
смесь этилацетат - метанол (6:4 по объему)
<a id="p100096"></a>Элюент N 1 для Диапака С16: смесь
ацетонитрил - вода (10:90 по объему)
<a id="p100097"></a>Элюент N 2 для Диапака С16: смесь
ацетонитрил - вода (20:80 по объему)
<a id="p100098"></a>Подвижная фаза N 1 для ВЭЖХ: смесь
ацетонитрил - вода (68:32 по объему)
<a id="p100099"></a>Подвижная фаза N 2 для ВЭЖХ: смесь
ацетонитрил - вода - ортофосфорная кислота
(55:44,9:0,1 по объему)
<a id="p100100"></a>Подвижная фаза N 3 для ВЭЖХ: смесь
ацетонитрил - вода - ортофосфорная кислота
(54:45,9:0,1 по объему)
<a id="p100101"></a>Концентрирующий патрон Диапак С16
(АО БиоХимМак, РФ)

<div align="center">

<a id="p100102"></a>Силикагель для адсорбционной хроматографии<br>
(Вельм, Германия) 1 степени активности или<br>
силикагель КСК (60 - 100 меш)

</div>

<a id="p100103"></a>Стекловата
<a id="p100104"></a>Фильтры бумажные "синяя лента"                   ТУ 6-09-1678.


### <a id="p100105"></a>2.3. Приборы, аппаратура, посуда


<a id="p100106"></a>Жидкостный хроматограф с ультрафиолетовым
детектором фирм Altex (США), Knauer
(Германия) или аналогичный
<a id="p100107"></a>Хроматографическая колонка стальная длиной
15 см, внутренним диаметром 4 мм, заполненная
Диасорбом 130-С8 Т, Диасфером-110-С18 или
Диасорбом 130-С16 Т (АО БиоХимМак, РФ;
119899, Москва, Ленинские горы)
<a id="p100108"></a>Шприц для ввода образцов в жидкостный
хроматограф
<a id="p100109"></a>Шприц для ввода образцов в концентрирующий
патрон Диапак
<a id="p100110"></a>Весы аналитические типа ВЛР-200                    ГОСТ 19401-74
<a id="p100111"></a>Водоструйный насос                                 ГОСТ 10696-75
<a id="p100112"></a>Встряхиватель механический                         ТУ 64-1-1081-73
<a id="p100113"></a>Иономер ЭВ-74 или аналогичный ГОСТ 22261-76
<a id="p100114"></a>Мельница электрическая лабораторная                ТУ 46-22-236-79
или аналогичная
<a id="p100115"></a>Ротационный испаритель, тип ИР-1М                  ТУ 25-11-917-76
<a id="p100116"></a>Сито с диаметром отверстий 1 мм
<a id="p100117"></a>Баня ультразвуковая, модель D-50,
Branson Instr. Со., США
<a id="p100118"></a>Баня водяная                                       ТУ 46-22-603-75
<a id="p100119"></a>Воронка Бюхнера                                    ГОСТ 9147-73
<a id="p100120"></a>Воронки делительные вместимостью 100, 250 мл ГОСТ 25336-82
<a id="p100121"></a>Воронки для фильтрования стеклянные                ГОСТ 8613-75
<a id="p100122"></a>Колба Бунзена                                      ГОСТ 5614-75
<a id="p100123"></a>Колбы круглодонные на шлифе, вместимостью          ГОСТ 9737-70
100, 250 и 500 мл
<a id="p100124"></a>Колбы конические с притертыми пробками ГОСТ 25336-82
вместимостью 250 мл
<a id="p100125"></a>Колбы мерные вместимостью 25, 50, 100 и 1000 мл    ГОСТ 1770-74
<a id="p100126"></a>Колбы грушевидные вместимостью 100, 250 и 500 мл ГОСТ 25336-82
<a id="p100127"></a>Пипетки мерные вместимостью 1, 2, 5 и 10 мл [ГОСТ 20292-74Е](https://bukva.ai/docs/standart-gost-20292-74)
<a id="p100128"></a>Пробирки градуированные с притертыми пробками      ГОСТ 10515-75
вместимостью 5 и 10 мл
<a id="p100129"></a>Цилиндры мерные вместимостью 50, 100, 250 и        ГОСТ 1770-74.
500 мл


### <a id="p100130"></a>2.4. Отбор проб


<a id="p100131"></a>Отбор проб производится в соответствии с "Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, продуктов питания и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов" (N 2051-79 от 21.08.79).
<a id="p100132"></a>Отобранные пробы зерна, семян и соломы подсушивают до стандартной влажности и хранят в стеклянной или полиэтиленовой таре в холодильнике при температуре не выше 4 °С не более трех месяцев. Зеленую массу и корнеплоды хранят в стеклянной посуде в холодильнике при температуре не выше 4 °С не более двух дней; при длительном хранении (не более трех месяцев) пробы замораживают и хранят в морозильной камере при температуре -18 °С. Пробы воды хранят при температуре не выше 4 °С в течение 2 дней, при температуре -18 °С - в течение месяца.
<a id="p100133"></a>Пробы почвы высушивают при комнатной температуре в отсутствии прямого солнечного света до воздушно-сухого состояния и хранят в темном сосуде не более трех месяцев.
<a id="p100134"></a>Перед анализом зерно, семена и солому размалывают на мельнице, зеленую массу и корнеплоды измельчают ножом, сухую почву просеивают через сито с отверстиями диаметром 1 мм.


### <a id="p100135"></a>2.5. Подготовка к определению



##### <a id="p100136"></a>2.5.1 Подготовка и очистка реактивов и растворителей

<a id="p100137"></a>Органические растворители перед началом работы очищают, сушат и перегоняют в соответствии с типовыми методиками. Гексан встряхивают с небольшими порциями концентрированной серной кислоты до тех пор, пока свежая порция кислоты не перестанет окрашиваться. Затем гексан последовательно промывают водой, 2%-ным раствором гидроксида натрия и снова водой, после чего его сушат над гидроксидом натрия и перегоняют.
<a id="p100138"></a>Этилацетат промывают равным объемом 5%-ного раствора углекислого натрия, сушат над хлористым кальцием и перегоняют.
<a id="p100139"></a>Диэтиловый эфир (1 л) предварительно встряхивают с 20 мл свежеприготовленного раствора железного купороса (30 г сульфата железа в 55 мл воды с добавлением 1,5 г концентрированной серной кислоты). Затем диэтиловый эфир последовательно промывают 0,5%-ным раствором перманганата калия, 5%-ным раствором гидроксида натрия и водой, после чего сушат над хлористым кальцием и перегоняют.
<a id="p100140"></a>Ацетонитрил сушат над пентоксидом фосфора и перегоняют; отогнанный растворитель повторно перегоняют над углекислым калием.
<a id="p100141"></a>Этилацетат промывают равным объемом 5%-ного раствора двууглекислого натрия, сушат над хлористым кальцием и перегоняют.


##### <a id="p100142"></a>2.5.2 Подготовка подвижной фазы для ВЭЖХ

<a id="p100143"></a>При подготовке подвижной фазы N 1 для анализа феноксапроп-П-этила отмеряют 680 мл ацетонитрила, переносят в колбу на 1000 мл, добавляют 320 мл дистиллированной воды, перемешивают, фильтруют, дегазируют.
<a id="p100144"></a>При подготовке подвижной фазы N 2 и 3 для анализа феноксапроп-П отмеряют соответственно 550 и 540 мл ацетонитрила, переносят в колбу на 1000 мл, добавляют 449 и 459 мл бидистиллированной воды и 1 мл ортофосфорной кислоты, перемешивают, фильтруют и дегазируют.


##### <a id="p100145"></a>2.5.3 Кондиционирование колонки

<a id="p100146"></a>Промыть колонку для ВЭЖХ при анализе феноксапроп-П-этила смесью ацетонитрил - вода (68:32 по объему; подвижная фаза N 1), а при анализе феноксапроп-П - смесью ацетонитрил - вода - ортофосфорная кислота (55:44,9:0,1 по объему; подвижная фаза N 2) в течение 30 мин. при скорости подачи растворителя 1 мл/мин. Включить детектор и подождать стабилизации базовой линии (5 - 15 мин.).


##### <a id="p100147"></a>2.5.4 Приготовление стандартных растворов

<a id="p100148"></a>Основной стандартный раствор феноксапроп-П-этила с содержанием 100 мкг/мл готовят растворением 0,010 г препарата, содержащего 98,9% д.в., в ацетонитриле в мерной колбе на 100 мл. Раствор хранят в холодильнике при температуре -12 °С не более 15 дней.
<a id="p100149"></a>Рабочие стандартные растворы с концентрациями 0,03; 0,06; 0,15 и 0,30 мкг/мл готовят из основного стандартного раствора феноксапроп-П-этила соответствующим последовательным разбавлением подвижной фазой N 1 для ВЭЖХ [(п. 2.5.2)](#p100142) непосредственно в день проведения анализа.
<a id="p100150"></a>Основной стандартный раствор феноксапроп-П с содержанием 100 мкг/мл готовят растворением 0,010 г препарата, содержащего 99,1% д.в., в ацетонитриле в мерной колбе на 100 мл. Раствор хранят в холодильнике при температуре -12 °С не более месяца.
<a id="p100151"></a>Рабочие стандартные растворы с концентрациями 0,01; 0,02; 0,03; 0,10 и 0,30 мкг/мл готовят из основного стандартного раствора метаболита соответствующим последовательным разбавлением подвижной фазой N 2 для ВЭЖХ [(п. 2.5.2)](#p100142) непосредственно в день проведения анализа.
<a id="p100152"></a>При изучении полноты открывания феноксапроп-П-этила и феноксапроп-П в модельных матрицах используются ацетонитрильные растворы веществ.


##### <a id="p100153"></a>2.5.5 Построение калибровочного графика

<a id="p100154"></a>Для построения калибровочного графика в инжектор хроматографа вводят по 50 мкл рабочего стандартного раствора феноксапроп-П-этила с концентрациями 0,03; 0,06; 0,15 и 0,30 мкг/мл или рабочего стандартного раствора феноксапроп-П с концентрациями 0,01; 0,02; 0,03; 0,10 и 0,30 мкг/мл. Осуществляют не менее 5 параллельных измерений и находят среднее значение высоты хроматографического пика для каждой концентрации. Строят калибровочный график зависимости высоты хроматографического пика в мм от концентрации препарата или его метаболита в растворе в мкг/мл.


##### <a id="p100155"></a>2.5.6 Подготовка колонки с силикагелем и концентрирующего патрона Диапак С16 для очистки экстракта

<a id="p100156"></a>В нижнюю часть стеклянной колонки длиной 25 см и внутренним диаметром 0,8 см вставляют тампон из стекловаты, закрывают кран и вносят суспензию 5 г силикагеля в 20 мл этилацетата. Дают растворителю стечь до верхнего края сорбента и помещают на него слой безводного сульфата натрия высотой 1 см. Колонку промывают 30 мл смеси этилацетат - метанол (1:1 по объему) со скоростью 1 - 2 капли в секунду и затем 20 мл этилацетата.
<a id="p100157"></a>Концентрирующий патрон Диапак С16 промывают последовательно с помощью медицинского шприца 5 мл бидистиллированной воды и 5 мл ацетонитрила со скоростью 5 мл/мин.


##### <a id="p100158"></a>2.5.7 Проверка хроматографического поведения феноксапроп-П на колонке с силикагелем

<a id="p100159"></a>В круглодонную колбу емкостью 10 мл отбирают 0,1 мл стандартного раствора феноксапроп-П с концентрацией 10 мкг/мл, отдувают растворитель потоком теплого воздуха, остаток растворяют в 2 - 3 мл этилацетата и наносят на подготовленную колонку. Промывают колонку 40 мл элюента N 1 (смесь этилацетат - метанол, 7:3) и затем 60 мл элюента N 2 (смесь этилацетат - метанол, 6:4) со скоростью 1 - 2 капли в секунду. Отбирают фракции по 5 мл каждая, упаривают досуха, остаток растворяют в 2,5 мл подвижной фазы N 2 для ВЭЖХ [(п. 2.5.2)](#p100142) и анализируют на содержание феноксапроп-П по [п. 2.7.2](#p100188).
<a id="p100160"></a>Фракции, содержащие феноксапроп-П, объединяют, упаривают досуха, остаток растворяют в 10 мл подвижной фазы N 2 для ВЭЖХ и вновь анализируют по [п. 2.7.2](#p100188). Рассчитывают содержание вещества в элюате, определяют полноту смывания с колонки и необходимый для очистки объем элюента.
<a id="p100161"></a>*Примечание.* Профиль вымывания феноксапроп-П может меняться при использовании новых партий сорбента и растворителей.


### <a id="p100162"></a>2.6. Описание определения



##### <a id="p100163"></a>2.6.1 Экстракция феноксапроп-П-этила и очистка экстракта

<a id="p100164"></a>2.6.1.1. Вода. Образец предварительно отфильтрованной воды объемом 100 мл помещают в делительную воронку емкостью 250 мл и обрабатывают 30 мл гексана при встряхивании в течение 1 мин. Отделяют органический слой и водную фазу экстрагируют гексаном еще дважды порциями по 20 мл. Объединенную органическую фазу пропускают через слой безводного сульфата натрия и упаривают на роторном испарителе досуха при температуре 30 °С. Остаток количественно переносят двумя порциями (по 1 мл) смеси ацетонитрил - вода (1:9 по объему) в подготовленный концентрирующий патрон Диапак С16 [(п. 2.5.6)](#p100155) и последний промывают 5 мл указанной выше смеси со скоростью 5 мл/мин. Феноксапроп-П-этил элюируют 7 мл смеси ацетонитрил - вода (2:8 по объему). Раствор упаривают досуха на роторном испарителе при температуре 45 °С, сухой остаток растворяют в 1 мл подвижной фазы N 1 для ВЭЖХ [(п. 2.5.2)](#p100142) и анализируют на содержание феноксапроп-П-этила по [п. 2.7.1](#p100176).


##### <a id="p100165"></a>2.6.2 Экстракция феноксапроп-П

<a id="p100166"></a>2.6.2.1. Вода. Водную фазу, оставшуюся после экстракции гексаном из [п. 2.6.1.1](#p100164), переносят в делительную воронку емкостью 250 мл, подкисляют 1 н НСl до рН 2 и трижды экстрагируют диэтиловым эфиром (30 + 20 + 20 мл). Объединенную органическую фазу пропускают через слой безводного сульфата натрия и упаривают на роторном испарителе досуха при температуре 30 °С. Остаток растворяют в 1 мл подвижной фазы N 2 для ВЭЖХ [(п. 2.5.2)](#p100142) и анализируют на содержание феноксапроп-П по [п. 2.7.2](#p100188).
<a id="p100167"></a>2.6.2.2. Почва. Навеску (10 г) воздушно-сухой почвы помещают в коническую колбу емкостью 250 мл, приливают 100 мл 80%-ного водного раствора ацетонитрила и помещают в ультразвуковую баню на 7 мин. Суспензию фильтруют под вакуумом на воронке Бюхнера через бумажный фильтр. Почву еще раз экстрагируют 50 мл 80%-ного ацетонитрила в ультразвуковой бане в течение 5 мин. Из объединенного экстракта отбирают аликвоту (около 70 мл) раствора, эквивалентную 5 г почвы. Дальнейшую очистку проводят по [п. п. 2.6.3](#p100171) и [2.6.4](#p100173).
<a id="p100168"></a>2.6.2.3. Зерно, семена, солома, соломка. Навеску размолотых зерна и семян (10 г) или соломы (5 г) помещают в коническую колбу емкостью 250 мл, приливают 100 мл 80%-ного ацетонитрила и помещают в ультразвуковую баню на 7 мин. Суспензию фильтруют под вакуумом на воронке Бюхнера через бумажный фильтр. Растительный материал повторно экстрагируют 50 мл 80%-ного ацетонитрила в ультразвуковой бане в течение 5 мин. Из объединенного экстракта муки или соломы отбирают аликвоту (около 70 мл) раствора, эквивалентную соответственно 5 г зерна и семян или 2,5 г соломы и соломки. Дальнейшую очистку проводят по [п. п. 2.6.3](#p100171) и [2.6.4](#p100173).
<a id="p100169"></a>2.6.2.4. Зеленая масса, корнеплоды. К навеске (25 г) измельченного материала добавляют 125 мл 80%-ного ацетонитрила и гомогенизируют 3 мин. при 10000 об./мин., после чего суспензию помещают в ультразвуковую баню на 5 мин. К суспензии добавляют 2 г целита и фильтруют под вакуумом на воронке Бюхнера через бумажный фильтр в колбу на 250 мл. Осадок на фильтре промывают 50 мл 80%-ного ацетонитрила. Из объединенного экстракта отбирают пятую часть объема (около 35 мл) раствора, эквивалентную 5 г растительной ткани. Дальнейшую очистку проводят по [п. п. 2.6.3](#p100171) и [2.6.4](#p100173).
<a id="p100170"></a>2.6.2.5. Масло. Навеску (5 г) масла помещают в коническую колбу емкостью 100 мл, приливают 50 мл 80%-ного ацетонитрила и эмульсию энергично перемешивают в течение 30 мин. на аппарате для встряхивания. Ацетонитрильную фазу осторожно декантируют в делительную воронку емкостью 200 мл, а к оставшемуся маслу приливают 50 мл 80%-ного ацетонитрила и эмульсию перемешивают в течение 30 мин. на аппарате для встряхивания. Эмульсию переносят в делительную воронку, которую помещают в холодильник на 30 мин. для четкого разделения слоев. Отделяют ацетонитрильную фазу и пропускают ее через хлопковую вату в грушевидную колбу емкостью 200 мл. Дальнейшую очистку проводят по [п. п. 2.6.3](#p100171) и [2.6.4](#p100173).


##### <a id="p100171"></a>2.6.3 Очистка экстрактов

<a id="p100172"></a>Отобранные аликвоты растительного (из [п. п. 2.6.2.3](#p100168), [2.6.2.4](#p100169) и [2.6.2.5](#p100170)) и почвенного (из [п. 2.6.2.2](#p100167)) экстрактов упаривают до объема 7 - 10 мл на роторном испарителе при температуре 40 °С. Водный остаток переносят в делительную воронку вместимостью 100 мл, приливают 15 мл бидистиллированной воды, 20 мл гексана и смесь встряхивают в течение 1 мин. Органический слой отбрасывают. Водную фазу подкисляют 1 н HCl до рН 2, переносят в делительную воронку, прибавляют 20 мл диэтилового эфира и смесь встряхивают 1 мин. Собирают органическую фазу и экстракцию водной фракции диэтиловым эфиром повторяют еще два раза (по 10 мл). Объединенную органическую фазу пропускают через слой безводного сульфата натрия и упаривают досуха на роторном испарителе при температуре 30 °С.


##### <a id="p100173"></a>2.6.4 Очистка на колонке с силикагелем

<a id="p100174"></a>Остаток в колбе, полученный при упаривании очищенных по [п. 2.6.3](#p100171) экстрактов зерна, семян, зеленой массы, корнеплодов, масла и почвы, растворяют в 5 мл этилацетата и 3 мл полученного раствора вносят в подготовленную хроматографическую колонку [(п. 2.5.6)](#p100155). Остаток экстрактов соломы и соломки льна растворяют в 3 мл этилацетата и количественно переносят в хроматографическую колонку. Колонку промывают 20 мл смеси этилацетат - метанол (7:3 по объему), которые отбрасывают. Метаболит элюируют 40 мл смеси этилацетат - метанол (6:4 по объему) и собирают элюат в грушевидную колбу емкостью 100 мл. Раствор упаривают досуха на роторном испарителе при температуре 30 °С. Сухой остаток экстрактов зерна, почвы, семян и масла подсолнечника и сои растворяют в 3 мл, экстрактов соломы и соломки льна в 5 мл, экстрактов зеленой массы, семян и масла рапса, а также семян и масла льна в 6 мл подвижной фазы N 2 для ВЭЖХ [(п. 2.5.2)](#p100142) и анализируют на содержание метаболита по [п. 2.7.2](#p100188). Сухой остаток экстрактов ботвы и корнеплодов свеклы растворяют в 3 мл подвижной фазы N 3 для ВЭЖХ и анализируют на содержание метаболита по [п. 2.7.3](#p100203).


### <a id="p100175"></a>2.7. Условия хроматографирования



##### <a id="p100176"></a>2.7.1 Феноксапроп-П-этил

<a id="p100177"></a>Жидкостный хроматограф с ультрафиолетовым детектором Altex (США).
<a id="p100178"></a>Колонка стальная длиной 15 см, внутренним диаметром 4 мм, заполненная Диасорбом 130-С16 Т, зернением 7 мкм.

<a id="p100179"></a>    Температура колонки       комнатная
<a id="p100180"></a>    Подвижная фаза            ацетонитрил - вода (68:32 по объему)
<a id="p100181"></a>    Скорость потока элюента   0,8 мл/мин.
<a id="p100182"></a>    Рабочая длина волны       240 нм
<a id="p100183"></a>    Чувствительность          0,01 ед. абсорбции на шкалу
<a id="p100184"></a>    Объем вводимой пробы      50 мкл
<a id="p100185"></a>    Время выхода              6,8 мин.
    феноксапроп-П-этила
<a id="p100186"></a>    Линейный диапазон         1,5 - 15,0 нг.
    детектирования

<a id="p100187"></a>Образцы, дающие пики большие, чем стандартный раствор с концентрацией 0,3 мкг/мл, разбавляют подвижной фазой N 1 для ВЭЖХ.


##### <a id="p100188"></a>2.7.2 Феноксапроп-П

<a id="p100189"></a>Жидкостный хроматограф с ультрафиолетовым детектором Altex (США).
<a id="p100190"></a>Колонка стальная длиной 15 см, внутренним диаметром 4 мм, заполненная Диасорбом 130-С8 Т, зернением 7 мкм.

<a id="p100191"></a>    Температура колонки         комнатная
<a id="p100192"></a>    Подвижная фаза              ацетонитрил - вода - ортофосфорная
                                кислота (55:44,9:0,1 по объему)
<a id="p100193"></a>    Скорость потока элюента     0,7 мл/мин.
<a id="p100194"></a>    Рабочая длина волны         240 нм
<a id="p100195"></a>    Чувствительность            0,01 ед. абсорбции на шкалу
<a id="p100196"></a>    Объем вводимой пробы        50 мкл
<a id="p100197"></a>    Время выхода метаболита     6,8 мин.
<a id="p100198"></a>    Линейный диапазон           0,5 - 15,0 нг
    детектирования
<a id="p100199"></a>    Альтернативная неподвижная  Диасорб 130-С16 Т
    фаза:
<a id="p100200"></a>    Подвижная фаза              ацетонитрил - вода - ортофосфорная
                                кислота (60:39,9:0,1 по объему)
<a id="p100201"></a>    Время выхода метаболита     5,4 мин.

<a id="p100202"></a>Образцы, дающие пики большие, чем стандартный раствор с концентрацией 0,3 мкг/мл, разбавляют подвижной фазой N 2 для ВЭЖХ.


##### <a id="p100203"></a>2.7.3 Феноксапроп-П

<a id="p100204"></a>Жидкостный хроматограф с ультрафиолетовым детектором Knauer (Германия).
<a id="p100205"></a>Колонка стальная длиной 15 см, внутренним диаметром 4 мм, заполненная Диасфером 110-С18, зернением 5 мкм.

<a id="p100206"></a>    Температура колонки         комнатная
<a id="p100207"></a>    Подвижная фаза              ацетонитрил - вода - ортофосфорная
                                кислота (54:45,9:0,1 по объему)
<a id="p100208"></a>    Скорость потока элюента     0,7 мл/мин.
<a id="p100209"></a>    Рабочая длина волны         240 нм
<a id="p100210"></a>    Чувствительность            0,005 ед. абсорбции на шкалу
<a id="p100211"></a>    Объем вводимой пробы        20 мкл
<a id="p100212"></a>    Время выхода метаболита     9,5 мин.
<a id="p100213"></a>    Линейный диапазон           0,2 - 2,5 нг.
    детектирования

<a id="p100214"></a>Образцы, дающие пики большие, чем стандартный раствор с концентрацией 0,3 мкг/мл, разбавляют подвижной фазой N 3 для ВЭЖХ.


### <a id="p100215"></a>2.8. Обработка результатов анализа


<a id="p100216"></a>Содержание феноксапроп-П-этила рассчитывают методом абсолютной калибровки по формуле:

                            Н  х А х V
                             1
<a id="p100217"></a>                        Х = ----------,
                              Н  х m
                               0

    где:
    Х - содержание феноксапроп-П-этила в пробе, мг/куб. дм;
    Н  - высота пика образца, мм;
     1
    Н  - высота пика стандарта, мм;
     0
    А  -  концентрация  стандартного раствора феноксапроп-П-этила,
мкг/мл;
    V - объем  экстракта, подготовленного для хроматографирования,
мл;
    m - объем анализируемой пробы, мл.
<a id="p100218"></a>    Содержание   феноксапроп-П   рассчитывают  методом  абсолютной
калибровки по формуле:

                            Н  х А х V
                             1
<a id="p100219"></a>                        Х = ----------,
                              Н  х m
                               0

    где:
    Х - содержание феноксапроп-П в пробе, мг/кг или мг/куб. дм;
    Н  - высота пика образца, мм;
     1
    Н  - высота пика стандарта, мм;
     0
    А  - концентрация стандартного раствора феноксапроп-П, мкг/мл;
    V - объем  экстракта, подготовленного для хроматографирования,
мл;
    m - масса или объем анализируемой части образца, г или мл (для
воды - 100 мл; для зерна, семян, зеленой массы, масла и почвы -  3
г; для соломы и соломки - 2,5 г).
<a id="p100220"></a>При расчете содержания феноксапроп-П в эквивалентах феноксапроп-П-этила полученное значение Х умножают на 1,08.


## 3. <a id="p100221"></a>Требования техники безопасности


<a id="p100222"></a>Необходимо соблюдать общепринятые правила безопасности при работе с органическими растворителями, токсичными веществами, электронагревательными приборами.


## 4. <a id="p100223"></a>Контроль погрешности измерений


<a id="p100224"></a>Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с рекомендациями [МИ 2335-95](https://bukva.ai/docs/mi-2335-95). ГСИ "Внутренний контроль качества результатов количественного химического анализа".


## 5. <a id="p100225"></a>Разработчики


<a id="p100226"></a>Талалакина Т.Н.; Дубовая Л.В.; Макеев А.М., к. биол. н.
<a id="p100227"></a>ВНИИфитопатологии, 143050, Московская обл., п/о Большие Вяземы, тел. 592-92-20.



<a id="p100228"></a>

---