---
title: "\"МУК 4.1.1413-03. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Измерение концентраций клефоксидима в воздухе рабочей зоны методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания\""
number: "МУК 4.1.1413-03"
status: действует
canonical: "https://bukva.ai/docs/ukazanie-ukazaniya-muk-4-1-1413-03"
---

## "МУК 4.1.1413-03. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Измерение концентраций клефоксидима в воздухе рабочей зоны методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания"

# "МУК 4.1.1413-03. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Измерение концентраций клефоксидима в воздухе рабочей зоны методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания"

(утв. Минздравом России 24.06.2003)

> [!IMPORTANT]
> Документ включен в Перечень основных действующих нормативно-методических документов по методам лабораторного и инструментального контроля в системе государственного санитарно-эпидемиологического нормирования (Письмо Роспотребнадзора от 02.12.2008 N 01/14262-8-32).
> Документ [введен](#p100002) в действие с 30 июня 2003 года.


<div align="right">

<a id="p100001"></a>Утверждаю<br>
Главный государственный<br>
санитарный врач<br>
Российской Федерации,<br>
Первый заместитель<br>
Министра здравоохранения<br>
Российской Федерации<br>
**Г.Г.ОНИЩЕНКО**

</div>

24 июня 2003 года


#### <a id="p100003"></a>4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ


<a id="p100004"></a>**ИЗМЕРЕНИЕ КОНЦЕНТРАЦИЙ КЛЕФОКСИДИМА В ВОЗДУХЕ**
**РАБОЧЕЙ ЗОНЫ МЕТОДОМ ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ**
**ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ**

<a id="p100005"></a>**МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ**

<div align="center">

**МУК 4.1.1413-03**

</div>


<div align="right">

<a id="p100002"></a>Дата введения

</div>

30 июня 2003 года

1. <a id="p100006"></a>Подготовлены: Федеральным научным центром гигиены им. Ф.Ф. Эрисмана; Московской сельскохозяйственной академией им. К.А. Тимирязева; при участии Департамента Госсанэпиднадзора Минздрава России. Разработчики методики указаны в конце.
2. <a id="p100007"></a>Методические указания рекомендованы к утверждению Комиссией по госсанэпиднормированию при Минздраве России.
3. <a id="p100008"></a>Утверждены Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации, Первым заместителем Министра здравоохранения Российской Федерации, акад. РАМН Г.Г. Онищенко 24 июня 2003 г.
4. <a id="p100009"></a>Введены с 30 июня 2003 г.
5. <a id="p100010"></a>Введены впервые.

<a id="p100011"></a>Настоящие Методические указания устанавливают метод высокоэффективной жидкостной хроматографии для определения в воздухе рабочей зоны массовой концентрации клефоксидима в диапазоне 0,5 - 5,0 мг/куб. м.
<a id="p100012"></a>Клефоксидим - действующее вещество препарата Аура Плюс, КЭ, (75 г/л), фирма-производитель БАСФ, Германия.
<a id="p100013"></a>3-гидрокси-5-(цис-тиан-3-ил)-2-{1-[(2RS)-2-(4-хлорфенокси)пропоксиимино]-бутил}-циклогекс-2-ен-1-он (IUPAC)

<a id="p100014"></a>    Эмпирическая формула: C  H  ClNO S                М. м.: 466,0
                           24 32    4

<a id="p100015"></a>    Бесцветная вязкая жидкость без запаха. Температура кипения 185
°С   (с   разложением).  Давление  паров  при  20  °С:  0,17  мПа.
Растворимость в органических растворителях при 20 °С (г/л): ацетон
и этилацетат - более 700; изопропиловый спирт - 330. Растворимость
в  воде  при  20  °С - 5,31 мг/л. Вещество мгновенно разлагается в
водных  растворах при рН 5, DT   - 140 дней (рН 7), более 300 дней
                              50
(рН 9).
<a id="p100016"></a>    Константа диссоциации рКа 5,91.
<a id="p100017"></a>    Агрегатное состояние в воздухе рабочей зоны - аэрозоль.
<a id="p100018"></a>    Краткая  токсикологическая  характеристика. Острая пероральная
токсичность   (LD  )   для  крыс  5000  мг/кг;  острая  дермальная
                 50
токсичность  (LD  )  для  крыс  > 4000 мг/кг, острая ингаляционная
                50
токсичность (LK  ) для крыс > 5200 мг/куб. м.
               50
<a id="p100019"></a>Область применения препарата. Клефоксидим - гербицид системного действия из группы ингибиторов биосинтеза жирных кислот, используется для уничтожения однолетних и многолетних злаковых сорняков в посевах риса.
<a id="p100020"></a>Ориентировочный безопасный уровень воздействия (ОБУВ) клефоксидима в воздухе рабочей зоны - 1 мг/куб. м.

1. <a id="p100021"></a>Погрешность измерений

<a id="p100022"></a>Методика обеспечивает выполнение измерений с погрешностью, не превышающей +/- 25%, при доверительной вероятности 0,95.

2. <a id="p100023"></a>Метод измерения

<a id="p100024"></a>Измерения концентраций клефоксидима выполняют методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) на обращенной фазе с ультрафиолетовым детектором.
<a id="p100025"></a>Концентрирование клефоксидима из воздуха осуществляют на бумажные фильтры "синяя лента", экстракцию с фильтра проводят метанолом.

<div align="center">

<a id="p100026"></a>Нижний предел измерения в анализируемом объеме пробы - 2 нг.<br>
<a id="p100027"></a>Определению не мешают компоненты препаративной формы.

</div>


3. <a id="p100028"></a>Средства измерений, вспомогательные устройства,
реактивы и материалы


#### <a id="p100029"></a>3.1 Средства измерений


<a id="p100030"></a>Жидкостный хроматограф с ультрафиолетовым
детектором с переменной длиной волны
<a id="p100031"></a>Весы аналитические ВЛА-200 ГОСТ 24104
<a id="p100032"></a>Пробоотборное устройство ОП-442ТЦ (ЗАО
"ОПТЭК", г. Санкт-Петербург) или
аспирационное устройство ЭА-1                     ТУ 25-11-1414-78
<a id="p100033"></a>Барометр-анероид М-67                             ТУ 2504-1797-75
<a id="p100034"></a>Термометр лабораторный шкальный ТЛ-2,
цена деления 1 °С, пределы измерения
**0 - 55 °С                                         ТУ 215-73Е**
<a id="p100035"></a>Колбы мерные, вместимостью 100 и 1000 куб. см     ГОСТ 1770
<a id="p100036"></a>Пипетки градуированные 2 класса точности,
вместимостью 1,0, 2,0, 5,0, 10 куб. см            ГОСТ 29227
<a id="p100037"></a>Пробирки градуированные, вместимостью
5 или 10 куб. см                                  ГОСТ 1770
<a id="p100038"></a>Цилиндры мерные 2 класса точности,
вместимостью 500 и 1000 куб. см                   ГОСТ 1770
<a id="p100039"></a>Допускается использование средств измерения с аналогичными или лучшими характеристиками.


#### <a id="p100040"></a>3.2 Реактивы


<a id="p100041"></a>Клефоксидим с содержанием действующего
вещества 98,5% (БАСФ, Германия)
<a id="p100042"></a>Ацетонитрил для хроматографии, хч                  ТУ-6-09-4326-76
<a id="p100043"></a>Вода бидистиллированная, деионизованная
или перегнанная над КМnО ГОСТ 6709
                        4
<a id="p100044"></a>Метиловый спирт (метанол), хч                      ГОСТ 6995
<a id="p100045"></a>Допускается использование реактивов иных производителей с аналогичной или более высокой квалификацией.


#### <a id="p100046"></a>3.3 Вспомогательные устройства, материалы


<a id="p100047"></a>Бумажные фильтры "синяя лента",
обеззоленные                                       ТУ 6-09-2678-77
<a id="p100048"></a>Воронки конусные диаметром 30 - 37 и 60 мм ГОСТ 25336
<a id="p100049"></a>Груша резиновая
<a id="p100050"></a>Колбы грушевидные на шлифе, вместимостью
100 куб. см                                        ГОСТ 10394
<a id="p100051"></a>Колбы круглодонные на шлифе,
вместимостью 250 куб. см [ГОСТ 9737](https://bukva.ai/docs/standart-gost-9737-93)
<a id="p100052"></a>Мембранные фильтры капроновые,
диаметром 47 мм
<a id="p100053"></a>Насос водоструйный                                 ГОСТ 10696
<a id="p100054"></a>Пробирки центрифужные ГОСТ 25336
<a id="p100055"></a>Ротационный вакуумный испаритель ИР-1М
или ротационный вакуумный испаритель
В-169 фирмы Buchi, Швейцария                       ТУ 25-11-917-74
<a id="p100056"></a>Стаканы химические, вместимостью 100 куб. см ГОСТ 25336
<a id="p100057"></a>Стекловата
<a id="p100058"></a>Стеклянные палочки
<a id="p100059"></a>Установка для перегонки растворителей
<a id="p100060"></a>Набор для фильтрации растворителей через
мембрану
<a id="p100061"></a>Холодильник водяной, обратный [ГОСТ 9737](https://bukva.ai/docs/standart-gost-9737-93)
<a id="p100062"></a>Хроматографическая колонка стальная,
длиной 20 см, внутренним диаметром 2 мм,
содержащая Spherisorb S5 ODS 2, зернением
5 мкм
<a id="p100063"></a>Шприц для ввода образцов для жидкостного
хроматографа, вместимостью 50 - 100 куб. мм
<a id="p100064"></a>Допускается применение хроматографических колонок и другого оборудования с аналогичными или лучшими техническими характеристиками.

4. <a id="p100065"></a>Требования безопасности

<a id="p100066"></a>4.1. При работе с реактивами соблюдают требования безопасности, установленные для работ с токсичными, едкими, легковоспламеняющимися веществами по ГОСТ 12.1.005-88.
<a id="p100067"></a>4.2. При выполнении измерений с использованием жидкостного хроматографа соблюдают правила электробезопасности в соответствии с ГОСТ 12.1.019-79 и инструкцией по эксплуатации прибора.

<div align="center">

5. <a id="p100068"></a>Требования к квалификации операторов

</div>


<a id="p100069"></a>К выполнению измерений допускают специалистов, имеющих квалификацию не ниже лаборанта-исследователя, с опытом работы на жидкостном хроматографе.

<div align="center">

6. <a id="p100070"></a>Условия измерений

</div>


<a id="p100071"></a>При выполнении измерений соблюдают следующие условия:
- <a id="p100072"></a>процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха (20 +/- 5) °С и относительной влажности не более 80%;
- <a id="p100073"></a>выполнение измерений на жидкостном хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.

<div align="center">

7. <a id="p100074"></a>Подготовка к выполнению измерений

</div>


<a id="p100075"></a>Перед выполнением измерений проводят очистку ацетонитрила (при необходимости), подготовку подвижной фазы для ВЭЖХ, приготовление растворов, кондиционирование хроматографической колонки, установление градуировочной характеристики, отбор проб.


#### <a id="p100076"></a>7.1 Очистка ацетонитрила


<a id="p100077"></a>Ацетонитрил кипятят с обратным холодильником над пентоксидом фосфора не менее 1 ч, после чего перегоняют, непосредственно перед употреблением ацетонитрил повторно перегоняют над прокаленным карбонатом калия.


#### <a id="p100078"></a>7.2 Приготовление 0,005 М раствора ортофосфорной кислоты


<a id="p100079"></a>Для приготовления 0,005 М раствора ортофосфорной кислоты в мерную колбу вместимостью 1000 куб. см помещают 0,35 куб. см ортофосфорной кислоты, доводят водой до метки, тщательно перемешивают.


#### <a id="p100080"></a>7.3 Подготовка подвижной фазы для ВЭЖХ


<a id="p100081"></a>В мерную колбу вместимостью 1000 куб. см помещают 550 куб. см 0,005 М ортофосфорной кислоты, добавляют 450 куб. см ацетонитрила, перемешивают, фильтруют и дегазируют.


#### <a id="p100082"></a>7.4 Кондиционирование хроматографической колонки


<a id="p100083"></a>Промывают колонку подвижной фазой [(п. 7.3)](#p100080) в течение 30 мин. при скорости подачи растворителя 0,4 куб. см/мин. до установления стабильной базовой линии.


#### <a id="p100084"></a>7.5 Приготовление градуировочных растворов


<a id="p100085"></a>7.5.1. Исходный раствор клефоксидима для градуировки (концентрация 1 мг/куб. см). В мерную колбу вместимостью 100 куб. см помещают 0,1 г клефоксидима, доводят до метки метанолом, тщательно перемешивают. Раствор хранится в холодильнике не более месяца.
<a id="p100086"></a>Растворы N 1 - 5 готовят объемным методом путем последовательного разбавления исходного стандартного раствора.
<a id="p100087"></a>7.5.2. Раствор N 1 клефоксидима для градуировки (концентрация 10 мкг/куб. см). В мерную колбу вместимостью 100 куб. см помещают 1 куб. см исходного стандартного раствора клефоксидима с концентрацией 1 мг/куб. см [(п. 7.5.1),](#p100085) разбавляют метанолом до метки. Раствор хранится в холодильнике в течение 2 недель.
<a id="p100088"></a>7.5.3. Рабочие растворы N 2 - 5 клефоксидима для градуировки (концентрация 0,1 - 1,0 мкг/куб. см). В 4 мерные колбы вместимостью 100 куб. см помещают по 1,0, 2,5, 5,0 и 10,0 куб. см стандартного раствора N 1 с концентрацией 10 мкг/куб. см [(п. 7.5.2),](#p100087) доводят до метки подвижной фазой (подготовленной по [п. 7.3),](#p100080) тщательно перемешивают, получают рабочие растворы N 2 - 5 с концентрацией клефоксидима 0,1, 0,25, 0,5 и 1,0 мкг/куб. см, соответственно.
<a id="p100089"></a>Растворы готовятся и используются в день анализа.


#### <a id="p100090"></a>7.6 Отбор проб


<a id="p100091"></a>Отбор проб воздуха проводят в соответствии с требованиями ГОСТ 12.1.005-88 "ССБТ. Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху рабочей зоны". В течение 15 мин. последовательно отбирают 3 пробы, для чего воздух аспирируют в течение 5 мин. с объемным расходом 1 - 5 куб. дм/мин. через бумажный фильтр "синяя лента", помещенный в фильтродержатель.
<a id="p100092"></a>Для измерения концентрации клефоксидима на уровне 0,5 ОБУВ воздуха рабочей зоны необходимо отобрать 1 куб. дм воздуха. Срок хранения отобранных проб, помещенных в полиэтиленовые пакеты, в холодильной камере при 4 °С - 5 дней.


#### <a id="p100093"></a>7.7 Установление градуировочной характеристики


<a id="p100094"></a>Градуировочную характеристику, выражающую зависимость площади пика (отн. единицы) от концентрации клефоксидима в растворе (мкг/куб. см), устанавливают методом абсолютной калибровки по 4 растворам для градуировки N 2 - 5.
<a id="p100095"></a>В инжектор хроматографа вводят по 20 куб. мм каждого градуировочного раствора и анализируют в условиях хроматографирования по [п. 7.7.1.](#p100096) Осуществляют не менее 3 параллельных измерений. Устанавливают площадь пика клефоксидима.

##### <a id="p100096"></a>7.7.1 Условия хроматографирования

<a id="p100097"></a>Измерения выполняют при следующих режимных параметрах:
<a id="p100098"></a>Жидкостный хроматограф с ультрафиолетовым детектором
<a id="p100099"></a>Колонка стальная длиной 25 см, внутренним диаметром 2,1 мм, содержащая Spherisorb S5 ODS 2, зернением 5 мкм.
<a id="p100100"></a>Температура колонки: комнатная.
<a id="p100101"></a>Подвижная фаза: 0,005 М ортофосфорная кислота - ацетонитрил (55:45, по объему).
<a id="p100102"></a>Скорость потока элюента: 0,4 куб. см/мин.
<a id="p100103"></a>Рабочая длина волны: 250 нм.
<a id="p100104"></a>Чувствительность: 0,005 ед. абсорбции на шкалу.
<a id="p100105"></a>Объем вводимой пробы: 20 куб. мм.
<a id="p100106"></a>Ориентировочное время выхода клефоксидима: 8,9 - 9,1 мин.
<a id="p100107"></a>Линейный диапазон детектирования: 2 - 20 нг.
<a id="p100108"></a>Образцы, дающие пики большие, чем стандартный раствор клефоксидима с концентрацией 1,0 мкг/куб. см, разбавляют подвижной фазой (подготовленной по [п. 7.3).](#p100080)
<a id="p100109"></a>Градуировочный график проверяют ежедневно по анализу 2 стандартных растворов различной концентрации. Если значения площади отличаются более чем на 7% от данных, заложенных в градуировочную характеристику, ее строят заново, используя свежеприготовленные рабочие стандартные растворы.

<div align="center">

8. <a id="p100110"></a>Выполнение измерений

</div>


<a id="p100111"></a>Фильтр с отобранной пробой переносят в химический стакан вместимостью 100 куб. см, заливают 10 куб. см метанола, помещают на встряхиватель на 10 мин. Растворитель сливают, фильтр еще дважды обрабатывают новыми порциями метанола, объемом 10 куб. см.
<a id="p100112"></a>Объединенный экстракт упаривают в грушевидной колбе на ротационном вакуумном испарителе при температуре бани не выше 35 °С почти досуха, оставшийся растворитель отдувают потоком теплого воздуха, остаток растворяют в 5 куб. см подвижной фазы (подготовленной по [п. 7.3)](#p100080) и анализируют при условиях хроматографирования, указанных в [п. 7.7.1.](#p100096)
<a id="p100113"></a>Пробу вводят в инжектор хроматографа не менее двух раз. Устанавливают площадь пика, с помощью градуировочного графика определяют концентрацию клефоксидима в хроматографируемом растворе.
<a id="p100114"></a>Перед анализом опытной пробы проводят хроматографирование холостой (контрольной) пробы - экстракта неэкспонированного фильтра.

<div align="center">

9. <a id="p100115"></a>Обработка результатов измерений

</div>


<a id="p100116"></a>Массовую концентрацию клефоксидима в пробе воздуха рабочей зоны X, мг/куб. м, рассчитывают по формуле:

                                    C x W
<a id="p100117"></a>                                X = -----,
                                     V
                                      20

<a id="p100118"></a>где:
<a id="p100119"></a>C - концентрация клефоксидима в хроматографируемом растворе, найденная по градуировочному графику в соответствии с величиной площади хроматографического пика, мкг/куб. см;
<a id="p100120"></a>W - объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, куб. см;
<a id="p100121"></a>    V     -   объем   пробы   воздуха,  отобранного  для  анализа,
     20
приведенного  к  стандартным  условиям  (давление  760 мм рт. ст.,
температура 20 °С)

                           0,386 x P x u x t
<a id="p100122"></a>                     V   = -----------------,
                      20      (273 + T)

<a id="p100123"></a>где:
<a id="p100124"></a>T - температура воздуха при отборе пробы (на входе в аспиратор), °С;
<a id="p100125"></a>P - атмосферное давление при отборе пробы, мм рт. ст.;
<a id="p100126"></a>u - расход воздуха при отборе пробы, куб. дм/мин.;
<a id="p100127"></a>t - длительность отбора пробы, мин.
<a id="p100128"></a>*Примечание.* Идентификация и расчет концентрации клефоксидима в пробах могут быть проведены с помощью программ обработки хроматографических данных с применением компьютера, включенного в аналитическую систему.

10. <a id="p100129"></a>Оформление результатов измерений

                             _
<a id="p100130"></a>    За  результат  анализа  (X) принимается среднее арифметическое
                                                   _
результатов двух параллельных определений X  и X  (X = (X  + X ) /
                                           1    2        1    2
2),  расхождение  между  которыми  не превышает значений норматива
оперативного контроля сходимости (d): |X  - X | <= d.
                                        1    2

                                  _
                          d     x X
                           отн.
<a id="p100131"></a>                      d = ---------, мг/куб. м,
                             100

    где:
    d - норматив оперативного контроля сходимости, мг/куб. м;
    d      -  норматив  оперативного контроля сходимости, % (равен
     отн.
15%).
<a id="p100132"></a>    Результат количественного анализа представляют в виде:
                         _
    -  <a id="p100133"></a>результат анализа X (мг/куб. м), характеристика погрешности
дельта, %, Р = 0,95 или
      _
    - <a id="p100134"></a>X +/- ДЕЛЬТА мг/куб. м, Р = 0,95, где

                                    _
                           дельта x X
<a id="p100135"></a>                  ДЕЛЬТА = ----------, мг/куб. м
                              100

<a id="p100136"></a>Результат измерений должен иметь тот же десятичный разряд, что и погрешность.

11. <a id="p100137"></a>Контроль погрешности измерений

<a id="p100138"></a>Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с рекомендациями [МИ 2335-95.](https://bukva.ai/docs/mi-2335-95) ГСИ "Внутренний контроль качества результатов количественного химического анализа".

12. <a id="p100139"></a>Разработчики

<a id="p100140"></a>Юдина Т.В., Федорова Н.Е., Волкова В.Н. (Федеральный научный центр гигиены им. Ф.Ф. Эрисмана, г. Мытищи Московской обл.).



<a id="p100141"></a>

---