---
title: "\"МУК 4.1.1393-03. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств Мезотриона в воде, почве, зеленой массе и зерне кукурузы методом газожидкостной хроматографии. Методические указания\""
number: "МУК 4.1.1393-03"
status: действует
canonical: "https://bukva.ai/docs/ukazanie-ukazaniya-muk-4-1-1393-03"
---

## "МУК 4.1.1393-03. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств Мезотриона в воде, почве, зеленой массе и зерне кукурузы методом газожидкостной хроматографии. Методические указания"

# "МУК 4.1.1393-03. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств Мезотриона в воде, почве, зеленой массе и зерне кукурузы методом газожидкостной хроматографии. Методические указания"

(утв. Минздравом России 24.06.2003)

> [!IMPORTANT]
> Документ включен в Перечень методов (методик) определения остаточных количеств действующих веществ пестицидов в продукции (товарах), подлежащий государственному санитарно-эпидемиологическому надзору (контролю) на таможенной границе и таможенной территории Евразийского экономического союза (Решение Комиссии Таможенного союза от 28.05.2010 N 299).
> Документ включен в Перечень нормативной документации, разрешенной для использования в государственных ветеринарных лабораториях при диагностике болезней животных, рыб, пчел, а также контроля безопасности сырья животного и растительного происхождения (утв. Россельхознадзором 30.07.2009 N 02-03-48/563).
> Документ включен в Перечень основных действующих нормативно-методических документов по методам лабораторного и инструментального контроля в системе государственного санитарно-эпидемиологического нормирования (Письмо Роспотребнадзора от 02.12.2008 N 01/14262-8-32).
> Документ [введен](#p100002) в действие с 30 июня 2003 года.


<div align="right">

<a id="p100001"></a>Утверждаю<br>
Главный государственный<br>
санитарный врач<br>
Российской Федерации,<br>
Первый заместитель<br>
Министра здравоохранения<br>
Российской Федерации<br>
**Г.Г.ОНИЩЕНКО**

</div>

24 июня 2003 года


#### <a id="p100003"></a>4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ


<a id="p100004"></a>**ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ МЕЗОТРИОНА**
**В ВОДЕ, ПОЧВЕ, ЗЕЛЕНОЙ МАССЕ И ЗЕРНЕ КУКУРУЗЫ**
**МЕТОДОМ ГАЗОЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ**

<a id="p100005"></a>**МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ**

<div align="center">

**МУК 4.1.1393-03**

</div>


<div align="right">

<a id="p100002"></a>Дата введения

</div>

30 июня 2003 года

1. <a id="p100006"></a>Подготовлены: Федеральным научным центром гигиены им. Ф.Ф. Эрисмана (чл.-корр. РАМН, проф. В.Н. Ракитский, проф. Т.В. Юдина); Московской сельскохозяйственной академией им. К.А. Тимирязева (проф. В.А. Калинин, к.х.н. А.В. Довгилевич); при участии Департамента госсанэпиднадзора Минздрава России (А.П. Веселов). Разработчики методик указаны в конце каждой из них.
2. <a id="p100007"></a>Рекомендованы к утверждению Комиссией по госсанэпиднормированию при Минздраве России.
3. <a id="p100008"></a>Утверждены Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации, Первым заместителем Министра здравоохранения Российской Федерации, академиком РАМН Г.Г. Онищенко 24 июня 2003 г.
4. <a id="p100009"></a>Введены впервые.
5. <a id="p100010"></a>Введены с 30 июня 2003 г.

1. <a id="p100011"></a>Вводная часть

<a id="p100012"></a>Фирма-производитель: ООО Сингента.
<a id="p100013"></a>Торговое название: WF 2795.
<a id="p100014"></a>Название действующего вещества по ИСО: Мезотрион.
<a id="p100015"></a>Название действующего вещества по ИЮПАК: 2-(4-мезил-2-нитробензоил)циклогексан-1,3-дион.
<a id="p100016"></a>Структурная формула <*>:

<a id="p100017"></a>

---

<a id="p100018"></a><*> Не приводится.

<a id="p100019"></a>Эмпирическая формула: С14Н13NО7S. М. м. 339,3.
<a id="p100020"></a>Химически чистый Мезотрион представляет собой бледно-желтый порошок без запаха.
                             -3
<a id="p100021"></a>    Давление паров: 5,69 х 10   мПа при 20 °С.
<a id="p100022"></a>Температура плавления: 165,3 °С.
<a id="p100023"></a>Растворимость в воде - 2,2 (рН 4,8), 15 (рН 6,9), 22 (рН 9), г/л (при 20 °С).
<a id="p100024"></a>Растворимость в органических растворителях: 1,2-дихлорэтан - 66,3; этилацетат - 18,6; метанол - 4,6; толуол - 3,1 г/кг.
<a id="p100025"></a>Константа диссоциации рКа - 3,12 при 20 °С.
<a id="p100026"></a>Стабилен к гидролизу в стерильных условиях при рН 5 - 9 и фотолизу в воде.
<a id="p100027"></a>Сохранность и подвижность в почве сильно зависит от рН и содержания органического вещества. Кос колеблется от 387 при рН - 4,6 до 19 при рН - 7,0; ДТ50 - от 4 дн. при рН 7,7 и % орг. угл. 0,9 до 31,5 дн. при рН 5,0 и % орг. угл. 2,0.
<a id="p100028"></a>Краткая токсикологическая характеристика.
<a id="p100029"></a>Мезотрион относится к малоопасным для человека и теплокровных животных веществам по оральной (ЛД50 для крыс > 5000 мг/кг) дермальной токсичности (ЛД50 для крыс > 2000 мг/кг) и к умеренно опасным веществам по ингаляционной токсичности (ЛК50 для крыс > 5 мг/л).
<a id="p100030"></a>В России гигиенические нормативы не установлены.
<a id="p100031"></a>Область применения.
<a id="p100032"></a>Мезотрион - системный гербицид из класса трикетонов, хорошо проникающий в растение через корни и листья и передвигающийся в растениях в обоих направлениях - базипетально и акропетально. Эффективно подавляет двудольные однолетние и некоторые злаковые сорняки путем ингибирования биосинтеза каратиноидов в посевах кукурузы при нормах расхода 100 - 25 г/га (до всходов культуры) и 70 - 150 г/га (по всходам кукурузы).

<div align="center">

2. <a id="p100033"></a>Методика определения остаточных количеств<br>
Мезотриона в воде, почве, зеленой массе и зерне кукурузы

</div>

газохроматографическим методом


#### <a id="p100034"></a>2.1 Основные положения



##### <a id="p100035"></a>2.1.1 Принцип метода


<a id="p100036"></a>Методика основана на определении Мезотриона методом газожидкостной хроматографии с использованием детектора по захвату электронов (ДПР, ДЭЗ) после его экстракции из объектов анализа органическим растворителем, очистки экстракта перераспределением действующего вещества между несмешивающимися фазами, гидролиза Мезотриона до 4-(метилсульфонил)-2-нитробензойной кислоты с последующим получением ее метилового эфира.
<a id="p100037"></a>Идентификация вещества проводится по времени удерживания, а количественное определение - методом абсолютной калибровки.


##### <a id="p100038"></a>2.1.2 Избирательность метода


<a id="p100039"></a>В предлагаемых условиях метод специфичен в присутствии пестицидов, применяемых при возделывании кукурузы.


##### <a id="p100040"></a>2.1.3 Метрологическая характеристика метода


<a id="p100041"></a>Метрологическая характеристика метода представлена в табл. 1 - 2.

<a id="p100042"></a>Таблица 1

<a id="p100043"></a>**МЕТРОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА МЕТОДА**


<table>
<colgroup><col width="22%"><col width="12%"><col width="20%"><col width="14%"><col width="12%"><col width="20%"></colgroup>
<tr><td rowspan="2">Анализируемый объект</td><td colspan="5">Метрологические параметры, р = 0,95, n = 20</td></tr>
<tr><td>предел обнаружения, мг/кг</td><td>диапазон определяемых концентраций, мг/кг</td><td>среднее значение определения, %</td><td>стандартное отклонение, S, %</td><td>доверительный интервал среднего результата %, +/-</td></tr>
<tr><td>1</td><td>2</td><td>3</td><td>4</td><td>5</td><td>6</td></tr>
<tr><td>вода</td><td>0,005</td><td>0,005 - 0,05</td><td>88,5</td><td>0,97</td><td>1,81</td></tr>
<tr><td>почва</td><td>0,01</td><td>0,01 - 0,10</td><td>84,0</td><td>0,96</td><td>1,68</td></tr>
<tr><td>зеленая масса</td><td>0,05</td><td>0,05 - 0,50</td><td>81,3</td><td>1,07</td><td>1,83</td></tr>
<tr><td>зерно</td><td>0,05</td><td>0,05 - 0,50</td><td>82,6</td><td>1,47</td><td>2,54</td></tr>
</table>


<a id="p100050"></a>Таблица 2

<div align="center">

<a id="p100051"></a>**ДОВЕРИТЕЛЬНЫЙ ИНТЕРВАЛ**<br>
**И ПОЛНОТА ОПРЕДЕЛЕНИЯ МЕЗОТРИОНА В ВОДЕ, ПОЧВЕ,**

</div>

**ЗЕЛЕНОЙ МАССЕ И ЗЕРНЕ КУКУРУЗЫ**


<table>
<colgroup><col width="14%"><col width="20%"><col width="22%"><col width="22%"><col width="23%"></colgroup>
<tr><td>Среда</td><td>Добавлено Мезотриона, мг/кг</td><td>Обнаружено Мезотриона, мг/кг</td><td>Доверительный интервал, +/-</td><td>Полнота определения, %</td></tr>
<tr><td>1</td><td>2</td><td>3</td><td>4</td><td>5</td></tr>
<tr><td rowspan="4">вода</td><td>0,050</td><td>0,044</td><td>0,003</td><td>88,3</td></tr>
<tr><td>0,020</td><td>0,018</td><td>0,001</td><td>89,6</td></tr>
<tr><td>0,010</td><td>0,009</td><td>0,001</td><td>86,6</td></tr>
<tr><td>0,005</td><td>0,005</td><td>0,0003</td><td>89,6</td></tr>
<tr><td rowspan="4">почва</td><td>0,20</td><td>0,169</td><td>0,005</td><td>84,6</td></tr>
<tr><td>0,10</td><td>0,088</td><td>0,003</td><td>87,7</td></tr>
<tr><td>0,02</td><td>0,017</td><td>0,001</td><td>82,4</td></tr>
<tr><td>0,01</td><td>0,008</td><td>0,0002</td><td>81,2</td></tr>
<tr><td rowspan="4">зеленая масса</td><td>0,50</td><td>0,400</td><td>0,008</td><td>79,9</td></tr>
<tr><td>0,20</td><td>0,162</td><td>0,005</td><td>80,9</td></tr>
<tr><td>0,10</td><td>0,083</td><td>0,006</td><td>83,1</td></tr>
<tr><td>0,05</td><td>0,041</td><td>0,004</td><td>81,2</td></tr>
<tr><td rowspan="4">зерно</td><td>0,50</td><td>0,401</td><td>0,017</td><td>80,2</td></tr>
<tr><td>0,20</td><td>0,165</td><td>0,005</td><td>81,9</td></tr>
<tr><td>0,10</td><td>0,084</td><td>0,003</td><td>83,4</td></tr>
<tr><td>0,05</td><td>0,043</td><td>0,006</td><td>85,1</td></tr>
</table>



#### <a id="p100058"></a>2.2 Реактивы, растворы, материалы и оборудование



##### <a id="p100059"></a>2.2.1 Реактивы, материалы и растворы


<a id="p100060"></a>Мезотрион, аналитический стандарт фирмы
Сингента с содержанием д.в. 99,7%
Азот, осч ГОСТ 9293-74
Ацетон ГОСТ 2603-79
Ацетонитрил                                        ТУ 6-09-3534-87
Вода бидистиллированная, деионизированная <*>      ГОСТ 7602-72
Гелий марки "А"                                    ТУ 51-940-80
Калия гидроксид, чда                               ГОСТ 24363-80
Кислота серная, концентрированная, хч ГОСТ 4204-77
Кислота хлороводородная,
концентрированная, хч ГОСТ 3118-77
Медь серно-кислая, ч                               ГОСТ 19347-84Е
Метиламин соляно-кислый, ч                         ТУ 6-09-2088-77
Мочевина, чда [ГОСТ 6691-77](https://bukva.ai/docs/gost-6691-77)
Натрия нитрит, хч ГОСТ 4197-74
Натрий серно-кислый, безводный, хч [ГОСТ 4166-76](https://bukva.ai/docs/gost-4166-76)
Натрий хлористый, хч ГОСТ 4233-77
Толуол, хч                                         ГОСТ 5789-78
Хромовый ангидрид, ч                               ГОСТ 3776-68
Этилацетат, хч [ГОСТ 22300-76](https://bukva.ai/docs/gost-22300-76)
Эфир диэтиловый, хч                                ГОСТ 6265-74


<a id="p100061"></a>

---

<a id="p100062"></a><*> Бидистиллят кипятят в течение 6 ч с марганцово-кислым калием, добавленным из расчета 1 г/л, и затем перегоняют.


##### <a id="p100063"></a>2.2.2 Приборы, аппаратура, посуда


<a id="p100064"></a>Аппарат для встряхивания или аналогичный           ТУ 64-1-1081-73
Баня водяная                                       ТУ 46-22-603-75
Банки с крышками для экстракции на 250 мл,
полипропилен, кат. N 3120-0250, NALGENE
Весы аналитические ВЛА-200 или аналогичные         ГОСТ 34104-80Е
Весы лабораторные ГОСТ 19491-74
Виалы (пузырьки) с тефлоновыми прокладками
емкостью 40 мл, кат. N Z 27,702-9, Aldrich
Водоструйный насос                                 ГОСТ 10696-75
Воронки делительные на 250 и 500 мл                ГОСТ 23336-82
Воронки для фильтрования, стеклянные               ГОСТ 8613-75
Испаритель ротационный, вакуумный ИР-1М
или аналогичный                                    ТУ 25-11-917-4
Колонка капиллярная кварцевая HP-5
(Crosslinked 5% РН ME Siloxane), длина 15 м
Колбы конические плоскодонные на 100 и 250 мл,
**КПШ-250                                            ГОСТ 10394-72**
Колбы мерные на 10, 25, 50, 100 мл                 ГОСТ 1770-74
Концентраторы грушевидные НШ29 КГУ-100 (250)       ГОСТ 10394-72
Микропипетки на 0,1 мл                             ГОСТ 1770-74
Микрошприц на 10 мкл                               ТУ Е-2.833.0.24
Нагревательный блок для виал, Dri-Block DB-3,
Tecam
Насос водоструйный                                 ГОСТ 10696-75
Пипетки мерные на 1,0; 2,0 и 5,0 мл [ГОСТ 20292-74](https://bukva.ai/docs/standart-gost-20292-74)
Пипетки Пастеровские длиной 230 мм,
Z 31,073 - 5, Aldrich
Стаканы химические на 250 мл ГОСТ 25336-82E
Фильтры бумажные "красная лента" ТУ 6-09-1678-86
Хроматограф газовый "Кристалл 2000М" с
электронозахватным детектором (ЭЗД) с
пределом детектирования по Линдану
              -4
не выше 4 х 10   и набором приспособлений
для капиллярной колонки или аналогичный
Центрифуга или аналогичная                         МРТУ 42-219-69
Цилиндры мерные на 25, 50 и 100 мл                 ГОСТ 1770-74


#### <a id="p100065"></a>2.3 Подготовка к определению



##### <a id="p100066"></a>2.3.1 Подготовка и кондиционирование колонки для газожидкостной хроматографии


<a id="p100067"></a>Капиллярную колонку устанавливают в термостате хроматографа, не подсоединяя к детектору, и стабилизируют в токе гелия при температуре на 20 °С ниже предельного значения для выбранной неподвижной фазы в течение 8 - 10 ч.


##### <a id="p100068"></a>2.3.2 Приготовление реактивов



###### <a id="p100069"></a>2.3.2.1 Приготовление реактива Джонса для гидролиза.

<a id="p100070"></a>В колбу объемом 250 мл наливают 154 мл дистиллированной воды, добавляют 14 мл концентрированной серной кислоты и 53,6 г хромового ангидрида (СrO3) и тщательно перемешивают. Хранят раствор при комнатной температуре.

###### <a id="p100071"></a>2.3.2.2 Приготовление реактива А.

<a id="p100072"></a>В колбу объемом 250 мл наливают 200 мл дистиллированной воды, добавляют 14 мл концентрированной серной кислоты и 10 г сульфата меди, перемешивают до полного растворения соли. В полученный раствор добавляют 80 г сульфата натрия, перемешивают содержимое колбы 5 - 10 мин. Хранят при комнатной температуре.

###### <a id="p100073"></a>2.3.2.3 Получение N-нитрозо-N-метилмочевины.

<a id="p100074"></a>При отсутствии готового препарата N-нитрозометилмочевины осуществляют его синтез. Все работы необходимо проводить в вытяжном шкафу! В круглодонную колбу со шлифом емкостью 1 л, снабженную обратным холодильником, помещают 80 г метиламина гидрохлорида и 300 г мочевины, растворяют содержимое в 400 мл воды и кипятят 3 ч с обратным холодильником на водяной бане. По истечении срока раствор в колбе охлаждают до комнатной температуры и добавляют в него 110 г нитрита натрия. Затем раствор охлаждают в бане со льдом или снегом, содержащим поваренную соль, до 0 °С. Охлажденный раствор медленно (Осторожно! Вспенивание!) при перемешивании переливают в стакан емкостью 2 л, содержащий смесь 600 г льда и 60 мл концентрированной серной кислоты, охлаждаемый снаружи смесью льда с поваренной солью, следя за тем, чтобы температура внутри стакана не поднималась выше 2 °С. Всплывшие кристаллы нитрозометилмочевины немедленно отфильтровывают через фильтр в воронке Бюхнера под вакуумом и промывают на фильтре ледяной водой.
<a id="p100075"></a>Внимание! Нитрозометилмочевину хранят во влажном состоянии в темной склянке с пластмассовой пробкой в морозильнике, т.к. под действием света и тепла она может взорваться.

###### <a id="p100076"></a>2.3.2.4 Приготовление раствора диазометана.

<a id="p100077"></a>Внимание! Диазометан взрывоопасен и очень ядовит. Все работы необходимо проводить в вытяжном шкафу!
<a id="p100078"></a>В коническую колбу на 100 мл вносят 20 мл 40%-ного раствора гидроксида калия и 50 мл диэтилового эфира, колбу помещают в баню со льдом и охлаждают до температуры 2 - 4 °С. В охлажденную смесь порциями при перемешивании на магнитной мешалке или стеклянной палочкой вносят 5 г нитрозометилмочевины. Реакционную смесь выдерживают на холоде 10 мин. Затем эфирный слой сливают в чистую коническую колбу емкостью 100 мл, добавляют 10 - 15 гранул гидроксида калия и колбу оставляют в бане со льдом или холодильнике на 2 - 3 ч для осушения раствора.
<a id="p100079"></a>Раствор диазометана в эфире хранят в морозильнике в течение 1 - 2 суток. При хранении сосуды с раствором нельзя плотно закрывать!


##### <a id="p100080"></a>2.3.3 Приготовление стандартных растворов


<a id="p100081"></a>Взвешивают 50 мг Мезотриона в мерной колбе на 50 мл, растворяют навеску в ацетоне и доводят объем до метки ацетоном (стандартный раствор N 1, концентрация 1 мг/мл).
<a id="p100082"></a>Стандартный раствор N 1 можно хранить в холодильнике в течение 6 мес.
<a id="p100083"></a>Методом последовательного разбавления готовят стандартные растворы Мезотриона в ацетоне с концентрацией 0,5; 1,0; 2,0 и 5,0 мкг/мл для построения калибровочного графика и внесения в контрольный образец.

###### <a id="p100084"></a>2.3.3.1 Гидролиз стандартных растворов и проб.

<a id="p100085"></a>Из полученных стандартных растворов Мезотриона отбирают по 1 мл и помещают в виалы или пузырьки с плотно закрывающимися крышками, имеющими тефлоновые прокладки. Содержимое виал высушивают в токе теплого воздуха, затем в каждый пузырек добавляют по 2 мл реактива Джонса (см. [п. 2.3.2.1),](#p100069) закрывают виалы крышками и перемешивают содержимое, обмывая стенки виал. Помещают виалы в песчаную баню или драй-блок, нагретый до температуры 88 - 89 °С, и выдерживают их в течение 13 мин. Через 5 мин. после начала гидролиза содержимое виал быстро перемешивают еще раз и продолжают гидролиз. Внимание! При гидролизе температура не должна опускаться ниже 85 °С.
<a id="p100086"></a>По окончании гидролиза виалы охлаждают при комнатной температуре. В каждую виалу добавляют по 10 мл деионизированной бидистиллированной воды, 2 - 3 г сульфата натрия и 10 мл этилацетата, плотно закрывают крышками, встряхивают содержимое виал в течение 30 с и оставляют на 5 мин. для полного разделения слоев. Из верхнего слоя этилацетата пипеткой отбирают 8 - 9 мл и переносят в чистую виалу (следить за тем, чтобы конец пипетки не касался нижнего слоя! Использовать каждый раз чистые пипетки!).
<a id="p100087"></a>К отобранной порции этилацетата добавляют 2 мл реактива А [(п. 2.3.2.2),](#p100071) закрывают виалу крышкой, встряхивают 20 с и оставляют на 5 мин. Из верхнего слоя отбирают 6 - 7 мл этилацетата, переносят в чистую виалу, добавляют 2 мл реактива А, встряхивают 30 с и оставляют на 5 мин. Затем отбирают из верхнего слоя 5 мл этилацетата и переносят в концентратор емкостью 100 мл. Этилацетат в концентраторе упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре 50 °С.
<a id="p100088"></a>При гидролизе Мезотриона получают 4-(метилсульфонил)-2-нитробензойную кислоту - MNBA.
<a id="p100089"></a>Гидролиз проб, содержащих Мезотрион, проводится аналогичным образом.

###### <a id="p100090"></a>2.3.3.2 Метилирование стандартных растворов и проб.

<a id="p100091"></a>Для получения метилового эфира MNBA (MNBA-Me) к сухому остатку в концентраторе добавляют 2 мл раствора диазометана в диэтиловом эфире, плотно закрывают концентратор, перемешивают содержимое, обмывая стенки концентратора, и оставляют при комнатной температуре на 30 мин. По окончании метилирования эфир из концентратора удаляют током воздуха или азота. Сухой остаток в концентраторе разводят в 5 мл толуола.
<a id="p100092"></a>Метилирование проб, содержащих MNBA, проводится аналогичным образом.


##### <a id="p100093"></a>2.3.4 Построение калибровочного графика


<a id="p100094"></a>Для построения калибровочного графика вводят в хроматограф последовательно по 1 мкл каждого из полученных четырех растворов (для каждой концентрации делают не менее 3 вводов) и измеряют высоту или площадь пиков. По полученным данным рассчитывают среднее значение высоты пика или его площади для каждой концентрации и строят график зависимости высоты пика или его площади от концентрации Мезотриона в мкг/мл.


#### <a id="p100095"></a>2.4 Отбор проб


<a id="p100096"></a>Отбор проб производится в соответствии с "Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов" (N 2051-79, 21.08.79).
<a id="p100097"></a>Пробы воды и почвы хранятся в холодильнике в закрытых бутылках и запаянных пластиковых пакетах соответственно; пробы зеленой массы кукурузы хранятся в запаянных пластиковых пакетах в замороженном виде при температуре -18 °С. Пробы зерна кукурузы подсушивают до стандартной влажности и хранят в закрытой стеклянной или полиэтиленовой таре при комнатной температуре.
<a id="p100098"></a>Почву растирают в ступке и просеивают через сито с размером отверстий 3 мм. Зерно измельчают на лабораторной мельнице, зеленую массу измельчают ножницами.


#### <a id="p100099"></a>2.5 Описание определения



##### <a id="p100100"></a>2.5.1 Вода


<a id="p100101"></a>Отбирают 200 мл анализируемой пробы воды в стакан объемом 250 мл, подкисляют ее концентрированной хлороводородной кислотой до рН = 2 при интенсивном перемешивании стеклянной палочкой или на механической мешалке и переливают пробу в делительную воронку емкостью 500 мл. Добавляют в воронку 5 г хлорида натрия, 50 мл этилацетата и встряхивают содержимое воронки в течение 1 - 2 мин. После разделения слоев нижний водный слой сливают в стакан емкостью 250 мл, а этилацетат собирают в концентратор, пропуская его через безводный сульфат натрия. Водную фазу возвращают в делительную воронку и повторяют экстракцию еще два раза порциями этилацетата по 30 мл. Объединенные в концентраторе порции этилацетата выпаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре 50 °С <*>.
<a id="p100102"></a>Сухой остаток растворяют в 1 - 2 мл ацетона, тщательно обмывают стенки концентратора и переносят раствор Пастеровской пипеткой в виалу. Концентратор ополаскивают небольшими порциями ацетона еще 2 раза, собирая ацетон в ту же виалу. Из виалы ацетон удаляют током теплого воздуха <*>.

<a id="p100103"></a>

---

<a id="p100104"></a><*> При необходимости, анализ можно прервать на данном этапе. Концентраторы или виалы закрывают пробками и оставляют до следующего дня в холодильнике.

<a id="p100105"></a>После этого сухой остаток заливают 2 мл реактива Джонса [(п. 2.3.2.1),](#p100069) плотно закрывают крышками и проводят гидролиз пробы, как указано в [п. 2.3.3.1,](#p100084) и ее метилирование, как указано в [п. 2.3.3.2.](#p100090)
<a id="p100106"></a>По окончании метилирования эфир из концентратора удаляют током воздуха или азота. Сухой остаток в концентраторе разводят в 10 мл толуола. В хроматограф вводят 1 мкл пробы.


##### <a id="p100107"></a>2.5.2 Почва


<a id="p100108"></a>2.5.2.1. Экстракция. Навеску почвы 25 г помещают в пластиковую банку емкостью 250 мл, заливают 50 мл смеси ацетонитрил:вода - 1:1 и экстрагируют Мезотрион в течение 30 мин. на встряхивателе. По окончании встряхивания пробу центрифугируют 10 мин. со скоростью 2000 об./мин. Экстракт фильтруют через бумажный фильтр в концентратор емкостью 250 мл. Экстракцию повторяют еще раз, используя 50 мл экстрагирующей смеси и встряхивая пробу в течение 30 мин., центрифугируют и отфильтровывают экстракт в тот же концентратор. Объединенный экстракт упаривают до водного остатка на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 40 °С.
<a id="p100109"></a>2.5.2.2. Очистка экстракта, гидролиз и метилирование. К водному остатку в концентраторе добавляют 10 мл 5%-ного бикарбоната натрия, подщелачивая раствор до рН = 8, перемешивают содержимое и переносят в делительную воронку емкостью 250 мл. Концентратор обмывают 50 мл воды и сливают ее в ту же делительную воронку. К содержимому воронки добавляют 50 мл дистиллированной воды, 5 г хлорида натрия и 20 мл диэтилового эфира. Встряхивают воронку в течение 30 с, промывая водную фазу эфиром. После разделения фаз нижнюю водную фазу сливают в стакан емкостью 250 мл, а эфир отбрасывают. Водную фазу возвращают в делительную воронку и промывают 20 мл эфира еще раз. Эфирную фракцию отбрасывают.
<a id="p100110"></a>Промытую эфиром водную фазу сливают в стакан и подкисляют ее концентрированной хлороводородной кислотой до рН = 2, добавляя кислоту по каплям при интенсивном перемешивании пробы стеклянной палочкой или механической мешалкой. (Осторожно! Возможно вспенивание!)
<a id="p100111"></a>Подкисленную водную фазу переносят в чистую делительную воронку и встряхивают, удаляя остатки СО2. После этого в делительную воронку наливают 50 мл этилацетата и реэкстрагируют Мезотрион в этилацетат, встряхивая воронку 1 - 2 мин. После разделения фаз нижнюю водную фазу сливают в стакан емкостью 250 мл, а этилацетат собирают в концентратор, пропуская его через безводный сульфат натрия. Водную фазу возвращают в делительную воронку и повторяют экстракцию еще два раза порциями этилацетата по 50 мл. Объединенные в концентраторе порции этилацетата упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре 50 °С.
<a id="p100112"></a>Сухой остаток растворяют в 1 - 2 мл ацетона, тщательно обмывают стенки концентратора и переносят раствор Пастеровской пипеткой в виалу. Концентратор ополаскивают небольшими порциями ацетона еще 2 раза, собирая ацетон в ту же виалу.
<a id="p100113"></a>Из виалы ацетон удаляют током теплого воздуха. После этого сухой остаток заливают 2 мл реактива Джонса [(п. 2.3.2.1),](#p100069) виалу плотно закрывают крышкой и проводят гидролиз пробы с последующей переэкстракцией продуктов гидролиза в этилацетат, как указано в [п. 2.3.3.1,](#p100084) и ее метилирование, как указано в [п. 2.3.3.2.](#p100090)
<a id="p100114"></a>По окончании метилирования эфир из концентратора удаляют током воздуха или азота. Сухой остаток в концентраторе разводят в 5 мл толуола.


##### <a id="p100115"></a>2.5.3 Зеленая масса кукурузы


<a id="p100116"></a>Навеску измельченного растительного материала 10 г помещают в пластиковую банку емкостью 250 мл, заливают 50 мл смеси ацетонитрил:вода - 1:1 и экстрагируют Мезотрион в течение 30 мин. на встряхивателе. Экстракт фильтруют через бумажный фильтр в концентратор емкостью 250 мл. Экстракцию повторяют еще раз, используя 50 мл экстрагирующей смеси и встряхивая пробу в течение 30 мин. Экстракт фильтруют в тот же концентратор. Объединенный экстракт упаривают на ротационном вакуумном испарителе до водного остатка при температуре не выше 40 °С. (Осторожно! При интенсивном вскипании пробы возможен ее переброс в приемную колбу!)
<a id="p100117"></a>К водному остатку в концентраторе добавляют 30 мл 5%-ного водного раствора бикарбоната натрия, подщелачивая раствор до рН = 8, перемешивают содержимое и отфильтровывают через бумажный фильтр в делительную воронку емкостью 500 мл. Концентратор обмывают 50 мл дистиллированной воды и отфильтровывают ее в ту же делительную воронку. К содержимому воронки добавляют еще 100 мл дистиллированной воды, 5 г хлорида натрия и 30 мл диэтилового эфира.
<a id="p100118"></a>Далее анализ проводят по схеме, указанной в [п. 2.5.2.2.](#p100109)


##### <a id="p100119"></a>2.5.4 Зерно кукурузы


<a id="p100120"></a>Навеску измельченного зерна 10 г помещают в пластиковую банку емкостью 250 мл, заливают 50 мл смеси ацетонитрил:вода - 1:1 и экстрагируют Мезотрион, как указано в [п. 2.5.2.](#p100107) Объединенный экстракт упаривают на ротационном вакуумном испарителе до водного остатка при температуре не выше 40 °С. (Осторожно! При интенсивном вскипании пробы возможен ее переброс в приемную колбу!)
<a id="p100121"></a>Далее анализ проводят по схеме, указанной в [п. 2.5.2.2.](#p100109)


#### <a id="p100122"></a>2.6 Условия хроматографирования и обработка результатов



##### <a id="p100123"></a>2.6.1 Условия хроматографирования


<a id="p100124"></a>    Хроматограф "Кристалл 2000М" с  электронозахватным  детектором

<div align="center">

      63                                                -14

</div>

(ЭЗД    Ni)  с пределом детектирования по Линдану 5 х 10    г/куб.
см.
<a id="p100125"></a>Колонка капиллярная кварцевая НР-5 (Crosslinked 5% РН МE Siloxane), длина 15 м, внутренний диаметр 0,32 мм, толщина пленки 0,25 мкм.
<a id="p100126"></a>Температура термостата колонки программированная. Начальная температура - 180 °С, выдержка 3 мин.; нагрев колонки по 2 градуса в минуту до температуры 200 °С, выдержка 7 мин.; нагрев колонки по 30 градусов в минуту до температуры 260 °С, выдержка 4 мин.
<a id="p100127"></a>Температура испарителя - 250 °С, детектора - 320 °С.
<a id="p100128"></a>Газовый режим - нормальный.
<a id="p100129"></a>Газ-носитель - гелий (Г1). Тип регулятора расхода гелия - РРГ 11, линейная скорость - 20 см/с, давление на входе 28,56 кПа.
<a id="p100130"></a>Газ 2 (Г2) - гелий (продувка испарителя), расход 1 мл/мин., сброс 1:20.
<a id="p100131"></a>Газ 3 (Г3) - азот (поддув в детектор), расход во время анализа - 35 мл/мин.
<a id="p100132"></a>Продувка системы после анализа при температуре 260 °С в течение 4 мин.: продувка испарителя гелием - 50 мл/мин.; продувка детектора азотом - 65 мл/мин.
<a id="p100133"></a>Абсолютное время удерживания Мезотриона - 9 мин. 52 с - 10 мин. 05 с.
<a id="p100134"></a>Объем вводимой пробы - 1 мкл.
<a id="p100135"></a>Линейность детектирования сохраняется в пределах 0,05 - 0,5 нг.
<a id="p100136"></a>Образцы, дающие пики, большие, чем стандартный раствор с концентрацией 0,5 мкг/мл, разбавляют.


##### <a id="p100137"></a>2.6.2 Обработка результатов анализов


<a id="p100138"></a>Содержание Мезотриона в пробах воды, почвы, зеленой массе и зерне кукурузы рассчитывают методом абсолютной калибровки по формуле:

                           H1 х A х V
<a id="p100139"></a>                      X = ------------ х P,
                          H0 х m х 100

<a id="p100140"></a>где:
<a id="p100141"></a>X - содержание Мезотриона в пробе, мг/кг или мг/л;
<a id="p100142"></a>H1 - высота пика образца, мм;
<a id="p100143"></a>H0 - высота пика стандарта, мм;
<a id="p100144"></a>A - концентрация стандартного раствора по Мезотриону, мкг/мл;
<a id="p100145"></a>V - объем экстракта, подготовленного для хроматографирования (мл);
<a id="p100146"></a>m - масса или объем анализируемого образца, г или мл;
<a id="p100147"></a>P - содержание Мезотриона в аналитическом стандарте.

3. <a id="p100148"></a>Требования техники безопасности

<a id="p100149"></a>Необходимо соблюдать общепринятые правила безопасности при работе с органическими растворителями, токсичными веществами, электронагревательными приборами и сжатыми газами.

4. <a id="p100150"></a>Разработчики

<a id="p100151"></a>Калинин В.А., проф., к.с-х.н., Калинина Т.С., к.с-х.н., Довгилевич А.В., к.х.н., Фролова Н.С.
<a id="p100152"></a>Московская сельскохозяйственная академия им. К.А. Тимирязева. Учебно-научный консультационный центр "Агроэкология пестицидов и агрохимикатов", 127550, Москва, Тимирязевская ул., д. 53, стр. 1, телефон/факс: 976-37-68/976-43-26.



<a id="p100153"></a>

---