--- title: "\"МУК 4.1.1232-03. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств трифлоксистробина в воде, почве, яблоках и его метаболита ЦГА 321113 в воде и почве газохроматографическим методом. Методические указания\"" number: "МУК 4.1.1232-03" status: действует canonical: "https://bukva.ai/docs/ukazanie-ukazaniya-muk-4-1-1232-03" --- ## "МУК 4.1.1232-03. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств трифлоксистробина в воде, почве, яблоках и его метаболита ЦГА 321113 в воде и почве газохроматографическим методом. Методические указания" # "МУК 4.1.1232-03. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств трифлоксистробина в воде, почве, яблоках и его метаболита ЦГА 321113 в воде и почве газохроматографическим методом. Методические указания" (утв. Минздравом России 16.03.2003) > [!IMPORTANT] > Документ включен в Перечень методов (методик) определения остаточных количеств действующих веществ пестицидов в продукции (товарах), подлежащий государственному санитарно-эпидемиологическому надзору (контролю) на таможенной границе и таможенной территории Евразийского экономического союза (Решение Комиссии Таможенного союза от 28.05.2010 N 299). > Документ включен в Перечень основных действующих нормативно-методических документов по методам лабораторного и инструментального контроля в системе государственного санитарно-эпидемиологического нормирования (Письмо Роспотребнадзора от 02.12.2008 N 01/14262-8-32). > Документ [введен](#p100002) в действие с 1 июля 2003 года.
Утверждаю
Главный государственный
санитарный врач
Российской Федерации,
Первый заместитель
Министра здравоохранения
Российской Федерации
**Г.Г.ОНИЩЕНКО**
16 марта 2003 года #### 4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ **ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ ТРИФЛОКСИСТРОБИНА В ВОДЕ,** **ПОЧВЕ, ЯБЛОКАХ И ЕГО МЕТАБОЛИТА ЦГА 321113 В ВОДЕ И ПОЧВЕ** **ГАЗОХРОМАТОГРАФИЧЕСКИМ МЕТОДОМ** **МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ** **МУК 4.1.1232-03**
Дата введения
1 июля 2003 года 1. Сборник подготовлен: Федеральным научным центром гигиены им. Ф.Ф. Эрисмана (чл.-корр. РАМН, проф. В.Н. Ракитский, проф. Т.В. Юдина); Московской сельскохозяйственной академией им. К.А. Тимирязева (проф. В.А. Калинин, к. хим. н. А.В. Довгилевич) при участии Департамента госсанэпиднадзора Минздрава России (А.П. Веселов). Разработчики методик контроля указаны в конце каждой из них. 2. Методические указания рекомендованы к утверждению Комиссией по госсанэпиднормированию при Минздраве России. 3. Утверждены и введены в действие Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации, Первым заместителем Министра здравоохранения Российской Федерации, академиком РАМН Г.Г. Онищенко 16 марта 2003 г. 4. Введены впервые. ## 1. Вводная часть Фирма-производитель: Сингента (Швейцария). Торговое название: ЗАТО, ФЛИНТ. Действующее вещество: трифлоксистробин (ЦГА 279202). (Е,Е)-метоксиимино-{2-[1-(3-трифторметилфенил)-этилиденамино-оксиметил]-фенил)}уксусной кислоты метиловый эфир (ИЮПАК). Структурная формула: (не приводится). Эмпирическая формула: C H F N O . 20 19 3 2 4 Молекулярная масса: 408,4. Белый порошок без запаха. Температура плавления: 72,9 °С. -6 Давление паров при 25 °С: 3,4 х 10 Па. Растворимость (г/л) при 25 °С: вода - 0,0006, гексан - 11, толуол - 500, дихлорметан - 500, метанол - 76, ацетон - 500, этилацетат - 500. Стабильность к гидролизу при 20 °С: DT = 3139 дней 50 (рН 5), 80,1 дня (рН 7), 1,1 дня (рН 9). В биологически активных почвах в анаэробных условиях трифлоксистробин быстро разрушается: DT < 1,1 дня, DT = 2 - 3 50 90 дня. Краткая токсикологическая характеристика. Острая пероральная токсичность (LD ) для крыс - более 5000 мг/кг; острая дермальная 50 токсичность (LD ) для крыс - более 2000 мг/кг; острая 50 ингаляционная токсичность (LC ) для крыс - более 4646 мг/куб. м. 50 Трифлоксистробин не оказывает раздражающего действия на кожу и слизистую оболочку глаз кролика, не обладает мутагенными и сенсибилизирующими свойствами. Трифлоксистробин токсичен для дафний, рыб и водорослей в лабораторном эксперименте. Гигиенические нормативы: ПДК в воде водоемов - 0,03 мг/куб. дм; ОДК в почве - 0,2 мг/кг; МДУ в яблоках и грушах - 0,1 мг/кг. Основной метаболит трифлоксистробина: ЦГА 321113. (Е,Е)-метоксиимино-{2-[1-(3-трифторметилфенил)-этилиденамино-оксиметил]-фенил}уксусная кислота (ИЮПАК). Структурная формула: (не приводится). Эмпирическая формула: C H F N O . 19 17 3 2 4 Молекулярная масса: 394,4. Белый порошок без запаха. Другие физико-химические и токсикологические характеристики основного метаболита трифлоксистробина отсутствуют. В биологически активных почвах в аэробных условиях метаболит ЦГА 321113 достаточно стабилен: DT = 110 дней, DT = 279 дней. 50 90 Область применения препарата. Трифлоксистробин - синтетический фунгицид из класса стробилуринов, являющихся продуцентами гриба Strobilurus tenacellus. Вещество эффективно против широкого круга грибных патогенов хлебных злаков, овощных, кормовых, технических и плодовых культур. Обладает защитным и лечебно-профилактическим действием. Проходит регистрационные испытания в России и странах СНГ под торговым названием Зато, ВДГ (500 г/кг) в яблоневых и грушевых садах в качестве средства борьбы с возбудителями мучнистой росы, парши, пятнистостей и болезней при хранении с нормой расхода препарата 0,10 - 0,15 кг/га при 4 - 6-кратной обработке (до и после цветения) за сезон с 10 - 14-дневными интервалами. Трифлоксистробин - весьма лабильное вещество и при попадании в воду или почву достаточно быстро гидролизуется с образованием довольно устойчивого соединения - (Е,Е)-метоксиимино-{2-[1-(3-трифторметилфенил)-этилиденамино-оксиметил]-фенил}уксусной кислоты (ЦГА 321113). В яблоках трифлоксистробин разрушается слабо. ## 2. Методика определения остаточных количеств трифлоксистробина в воде, почве, яблоках и его метаболита ЦГА 321113 в воде и почве газохроматографическим методом ### 2.1. Основные положения ##### 2.1.1 Принцип методики Методика основана на газохроматографическом определении трифлоксистробина и его метаболита ЦГА 321113 (в виде метилового эфира) на неподвижной фазе OV-17 с использованием электронзахватного детектора (ДЭЗ) после экстракции препарата из воды гексаном, из почвы и яблок водным ацетоном, а метаболита из подкисленной воды хлористым метиленом и из почвы водным ацетоном при ультразвуковой обработке, предварительной очистки экстракта перераспределением в системе несмешивающихся растворителей, метилирования метаболита диазометаном до трифлоксистробина и окончательной очистки экстрактов на колонке с силикагелем. Количественное определение проводится методом абсолютной калибровки. ##### 2.1.2 Избирательность метода В предлагаемых условиях метод специфичен в присутствии пестицидов, применяемых при возделывании яблоневых садов. ##### 2.1.3 Метрологическая характеристика метода Таблица 1 **МЕТРОЛОГИЧЕСКИЕ ПАРАМЕТРЫ МЕТОДА**
Метрологические параметры, р = 0,95, n = 20
Анализируемый объектПредел обнаружения, мг/куб. дм, мг/кгДиапазон определяемых концентраций, мг/куб. дм, мг/кгСреднее значение определения, %Стандартное отклонение, SОтносительное отклонение, DSДоверительный интервал среднего, %
Трифлоксистробин
Вода0,00050,0005 - 0,00593,35,32,4+/- 5,0
Почва0,010,01 - 0,193,66,62,9+/- 6,2
Яблоки0,020,02 - 0,293,35,92,6+/- 5,5
ЦГА 321113
Вода0,00050,0005 - 0,00593,84,62,1+/- 4,3
Почва0,010,01 - 0,186,35,32,4+/- 4,9
### 2.2. Реактивы, растворы, материалы Трифлоксистробин, аналитический стандарт с содержанием д.в. 99,9% (Новартис, Швейцария) ЦГА 321113, аналитический стандарт с содержанием д.в. 99,0% (Новартис, Швейцария) Ацетон, ч.д.а. ГОСТ 2603-79 Вода бидистиллированная ГОСТ 7602-72 Гексан, ч. ТУ 6-09-3375-78 Калия перманганат ГОСТ 20490-75 Калий углекислый, х.ч. [ГОСТ 4221-76](https://bukva.ai/docs/standart-gost-4221-76) Кальция хлорид ГОСТ 4161-77 Кислота серная, х.ч. ГОСТ 4204-77 Кислота хлористоводородная, х.ч. ГОСТ 3118-77 Натрия гидроксид, х.ч. ГОСТ 4328-77 Натрия сульфат безводный, х.ч. [ГОСТ 4166-76](https://bukva.ai/docs/gost-4166-76) Натрий двууглекислый, х.ч. ГОСТ 83-79 Натрия хлорид, х.ч. ГОСТ 4233-77 N-метил-N-нитрозо-п-толуолсульфонамид (Мерк, Германия) или N-нитрозометилмочевина ТУ 6-09-11-1643-82 Спирт метиловый, х.ч. ГОСТ 6995-77 Толуол ГОСТ 5789-78 Хлористый метилен [ГОСТ 12794-80](https://bukva.ai/docs/standart-gost-12794-80) Этилацетат [ГОСТ 22300-76](https://bukva.ai/docs/gost-22300-76) Эфир диэтиловый ГОСТ 6562-74 Элюент N 1 для колоночной хроматографии: смесь гексан-этилацетат, 95:5, по объему Элюент N 2 для колоночной хроматографии: смесь гексан-этилацетат, 90:10, по объему Силикагель для адсорбционной хроматографии (Вельм, Германия) I степени активности или силикагель КСК (60 - 100 меш.) Стекловата
Целит 535 (2 - 15 мкм) /Серва, Германия/
или аналогичный
Фильтры бумажные "синяя лента" ТУ 6-09-16-78
### 2.3. Приборы, аппаратура, посуда Хроматограф газовый с детектором по захвату электронов Tracor 570 (США) или другой аналогичного типа ("Кристалл 2000 М") Колонка хроматографическая, стеклянная, 1800 х 2 мм, неподвижная фаза - 3% OV-17 на Хромосорбе W(HP) (0,15 - 0,18 мм) Колонка хроматографическая, стеклянная, 1800 х 2 мм, неподвижная фаза - 3% SE-30 на Газ-хром Q (0,15 - 0,20 мм) Микрошприц емкостью 10 мкл, МШ-10Ф ТУ 64-1-2850 Баня ультразвуковая, модель D-50 Branson Inst. Co., США или другая аналогичного типа Весы аналитические типа ВЛР-200 ГОСТ 19401-74 Водоструйный насос ГОСТ 10696-75 Встряхиватель механический ТУ 64-1-1081-73 Гомогенизатор МРТУ 42-1505-63 Иономер ЭВ-74 или аналогичный ГОСТ 22261-76 Прибор для перегонки при атмосферном давлении Ротационный испаритель тип ИР-1М ТУ 25-11-917-76 Сито с диаметром отверстий 1 мм Баня водяная ТУ 46-22-603-75 Воронка Бюхнера ГОСТ 9147-73 Воронки делительные вместимостью 100, 250 и 500 мл ГОСТ 25336-82 Воронки для фильтрования стеклянные ГОСТ 8613-75 Колба Бунзена ГОСТ 5614-75 Колбы круглодонные на шлифе вместимостью 100, 250 и 500 мл ГОСТ 9737-70 Колбы конические с притертыми пробками вместимостью 250 мл ГОСТ 25336-82 Колбы мерные вместимостью 25, 50, 100 мл ГОСТ 1770-74 Колбы грушевидные вместимостью 20, 100 мл ГОСТ 25336-82 Пипетки мерные вместимостью 1, 2, 5 и 10 мл [ГОСТ 20292-74Е](https://bukva.ai/docs/standart-gost-20292-74) Пробирки градуированные с притертыми пробками вместимостью 5 и 10 мл ГОСТ 10515-75 Цилиндры мерные вместимостью 25, 50, 100, 250 и 500 мл ГОСТ 1770-74 ### 2.4. Отбор проб Отбор проб производится в соответствии с "Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, продуктов питания и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов" (N 2051-79 от 21.08.1979). Отобранные пробы почвы и яблок хранят в стеклянной или полиэтиленовой таре в холодильнике не более трех дней. Для длительного хранения пробы почвы доводят до воздушно-сухого состояния и хранят в холодильнике; пробы яблок хранят до анализа в морозильной камере при температуре -18 °С. Пробы воды хранят при температуре не выше 4 °С в течение 3 дней, при температуре -18 °С - в течение месяца. Перед анализом сухую почву просеивают через сито с отверстиями диаметром 1 мм, а яблоки измельчают. ### 2.5. Подготовка к определению ##### 2.5.1 Подготовка и очистка реактивов и растворителей Органические растворители перед началом работы очищают, сушат и перегоняют в соответствии с типовыми методиками. Гексан и хлористый метилен встряхивают с небольшими порциями концентрированной серной кислоты до тех пор, пока свежая порция кислоты не перестанет окрашиваться. Затем гексан последовательно промывают водой, 2%-м раствором гидроксида натрия и снова водой, после чего его сушат над гидроксидом натрия и перегоняют. Этилацетат промывают равным объемом 5%-го раствора двууглекислого натрия, сушат над хлористым кальцием и перегоняют. Ацетон перегоняют над перманганатом калия и поташом (на 1 л ацетона 10 г KMnO и 2 г К СО ). 4 2 3 Диэтиловый эфир (1 л) предварительно встряхивают с 20 мл свежеприготовленного раствора железного купороса (30 г сульфата железа в 50 мл воды с добавлением 1,5 г концентрированной серной кислоты). Затем диэтиловый эфир последовательно промывают 0,5%-м раствором перманганата калия, 5%-м раствором гидроксида натрия и водой, после чего сушат над хлористым кальцием и перегоняют. ##### 2.5.2 Подготовка и кондиционирование колонки Готовую насадку (3% OV-17 на Хромосорбе W(HP)) засыпают в стеклянную колонку, уплотняют под вакуумом, колонку устанавливают в термостат хроматографа, не подсоединяя к детектору, и стабилизируют в токе азота при температуре 250 °С в течение 8 - 10 ч. ##### 2.5.3 Приготовление стандартных растворов Основной стандартный раствор трифлоксистробина с содержанием 100 мкг/мл готовят растворением 0,010 г препарата, содержащего 99,9% д.в., в толуоле в мерной колбе на 100 мл. Раствор хранят в холодильнике не более месяца. Рабочие стандартные растворы с концентрациями 0,025; 0,05; 0,125 и 0,25 мкг/мл готовят из основного стандартного раствора трифлоксистробина соответствующим последовательным разбавлением толуолом. Рабочие растворы хранят в холодильнике не более 3 дней. При изучении полноты открывания трифлоксистробина в модельных матрицах используются ацетоновые растворы вещества. Основной стандартный раствор метаболита ЦГА 321113 с содержанием 100 мкг/мл готовят растворением 0,010 г препарата, содержащего 99,0% д.в., в ацетоне в мерной колбе на 100 мл. Раствор хранят в холодильнике не более месяца. Из основного стандартного раствора метаболита готовят разбавлением ацетоном рабочие растворы с концентрациями 0,1; 0,5 и 2,5 мкг/мл, которые хранят в холодильнике не более 3 дней. Рабочие растворы используются при изучении полноты открывания метаболита в воде и почве. При расчете количества вводимого в матрицу метаболита учитывают соотношение молекулярных масс ЦГА 321113 и трифлоксистробина. ##### 2.5.4 Построение калибровочного графика Для построения калибровочного графика в инжектор хроматографа вводят по 2 мкл рабочего стандартного раствора трифлоксистробина с концентрацией 0,025, 0,05, 0,125 и 0,25 мкг/мл. Осуществляют не менее 5 параллельных измерений и находят среднее значение высоты хроматографического пика для каждой концентрации. Строят калибровочный график зависимости высоты хроматографического пика в мм от концентрации трифлоксистробина в растворе в мкг/мл. ##### 2.5.5 Приготовление раствора диазометана в эфире В круглодонной колбе на 100 мл растворяют 5 г N-метил-N-нитрозо-п-толуолсульфонамида в 16 мл смеси диэтилового эфира и метанола (1:1). Колбу присоединяют к холодильнику, нижний конец которого снабжен алонжем с отводом, проходящим через резиновую пробку с отводом и погруженным в слой эфира (40 мл) на дне приемника. Приемник охлаждают смесью льда и соли. В капельницу помещают 15 мл 50%-го раствора едкого калия. Реакцию начинают добавлением в реакционный сосуд раствора едкого калия по каплям, избегая бурного вскипания реакционной массы. Об окончании реакции судят по прекращению выделения диазометана в диэтиловый эфир. ##### 2.5.6 Подготовка колонки с силикагелем для очистки экстракта В нижнюю часть стеклянной колонки длиной 25 см и внутренним диаметром 1,2 см вставляют тампон из стекловаты, закрывают кран и приливают около 10 мл гексана. Затем в колонку вносят суспензию 5 г силикагеля в 20 мл гексана. Дают растворителю стечь до верхнего края сорбента и помещают на него слой безводного сульфата натрия высотой 1 см. Колонку промывают последовательно 50 мл элюента N 2 и 30 мл элюента N 1 со скоростью 1 - 2 капли в секунду, после чего она готова к работе. ##### 2.5.7 Проверка хроматографического поведения трифлоксистробина на колонке с силикагелем В круглодонную колбу емкостью 10 мл отбирают 0,1 мл стандартного раствора трифлоксистробина с концентрацией 10 мкг/мл. Отдувают растворитель током теплого воздуха, остаток растворяют в 3 мл элюента N 1 и наносят на колонку. Промывают колонку 50 мл элюента N 1, затем 70 мл элюента N 2 со скоростью 1 - 2 капли в секунду. Отбирают фракции по 10 мл каждая, упаривают, остаток растворяют в 2 мл толуола и анализируют на содержание трифлоксистробина по [п. 2.7.](#p100104) Фракции, содержащие трифлоксистробин, объединяют, упаривают досуха, остаток растворяют в 4 мл толуола и вновь анализируют по [п. 2.7.](#p100104) Рассчитывают содержание трифлоксистробина в элюате, определяют полноту вымывания вещества из колонки и необходимый для очистки экстракта объем элюента. *Примечание.* Профиль вымывания трифлоксистробина может меняться при использовании новой порции сорбента и растворителей. ### 2.6. Описание определения ##### 2.6.1 Экстракция трифлоксистробина и метаболита ЦГА 321113 и очистка экстракта 2.6.1.1. Вода. В делительную воронку емкостью 250 мл помещают 100 мл предварительно отфильтрованной воды. Добавляют 20 мл гексана и встряхивают 1 мин. Верхний органический слой отделяют, собирая в грушевидную колбу на 100 мл. Водную фазу экстрагируют гексаном еще дважды порциями по 20 мл. Объединенную органическую фазу пропускают через слой безводного сульфата натрия и упаривают на роторном вакуумном испарителе досуха при температуре 30 °С. Дальнейшую очистку экстракта проводят по [п. 2.6.3.](#p100102) Водную фазу, оставшуюся после экстракции гексаном, переносят в делительную воронку емкостью 250 мл, подкисляют 1 н HCl до рН 2 и трижды экстрагируют хлористым метиленом порциями по 20 мл. Объединенную органическую фазу, содержащую метаболит трифлоксистробина, пропускают через слой безводного сульфата натрия и упаривают небольшими порциями в 20-мл грушевидной колбе на роторном вакуумном испарителе досуха при температуре 30 °С. Дальнейшую очистку экстракта проводят по [п. п. 2.6.2](#p100100) и [2.6.3.](#p100102) 2.6.1.2. Яблоки. К навеске (25 г) измельченного материала добавляют 100 мл смеси ацетон - вода (2:1, по объему), гомогенизируют 3 мин. при 10000 об./мин. и суспензию перемешивают в течение 20 мин. на аппарате для встряхивания. Добавляют 2 г целита и фильтруют под вакуумом на воронке Бюхнера через бумажный фильтр в колбу на 250 мл. Осадок на фильтре промывают 50 мл смеси ацетон - вода (2:1, по объему). Из объединенного экстракта отбирают аликвоту раствора (около 15 мл), эквивалентную 2,5 г растительного материала, и упаривают ее до водной фазы на роторном вакуумном испарителе при температуре 40 °С. Водный остаток переносят в делительную воронку емкостью 100 мл, приливают 10 мл насыщенного раствора хлорида натрия и 15 мл гексана. Смесь встряхивают в течение 1 мин. и после ее расслоения отделяют гексановый слой, который пропускают через стеклянный фильтр, заполненный безводным сульфатом натрия, в грушевидную колбу вместимостью 100 мл. Экстракцию водной фракции гексаном повторяют еще два раза (по 15 мл). Объединенный гексановый экстракт, содержащий трифлоксистробин, выпаривают на роторном испарителе досуха при температуре 30 °С. Дальнейшую очистку экстракта проводят по [п. 2.6.3.](#p100102) 2.6.1.3. Почва. Навеску (25 г) воздушно-сухой почвы помещают в коническую колбу емкостью 250 мл, приливают 100 мл смеси ацетон - вода (2:1, по объему) и помещают в ультразвуковую баню на 5 мин. К суспензии добавляют 2 г целита и фильтруют под вакуумом на воронке Бюхнера через бумажный фильтр. Осадок на фильтре промывают 50 мл смеси ацетон - вода (2:1, по объему). Из объединенного экстракта отбирают аликвоту раствора (около 27 мл), эквивалентную 5 г почвы, и упаривают ее до водной фазы на роторном вакуумном испарителе при температуре 40 °С. Водный остаток переносят в делительную воронку емкостью 100 мл, приливают 15 мл бидистиллированной воды и 15 мл гексана. Смесь встряхивают в течение 1 мин. и после ее расслоения отделяют гексановую фракцию, которую пропускают через стеклянный фильтр, заполненный безводным сульфатом натрия, в грушевидную колбу вместимостью 100 мл. Экстракцию водной фракции гексаном повторяют еще два раза (по 15 мл). Объединенный гексановый экстракт, содержащий трифлоксистробин, выпаривают на роторном испарителе досуха при температуре 30 °С. Дальнейшую очистку экстракта проводят по [п. 2.6.3.](#p100102) Оставшуюся после обработки гексаном водную фазу подкисляют 1 н HCl до рН 2 и переносят в делительную воронку емкостью 100 мл. Приливают 10 мл хлористого метилена и воронку встряхивают в течение 1 мин. После разделения слоев отделяют дихлорметановую фракцию, которую пропускают через стеклянный фильтр, заполненный безводным сульфатом натрия, в грушевидную колбу вместимостью 20 мл. Экстракцию водной фракции хлористым метиленом повторяют еще два раза (10 + 10 мл). Объединенный дихлорметановый экстракт, содержащий метаболит ЦГА 321113, выпаривают на роторном испарителе досуха при температуре 30 °С. Дальнейшую очистку экстракта проводят по п. п. 2.6.2 и [2.6.3.](#p100102) ##### 2.6.2 Метилирование К сухим остаткам водного (из [п. 2.6.1.1)](#p100095) и почвенного (из [п. 2.6.1.3)](#p100098) экстрактов, содержащим метаболит ЦГА 321113, приливают соответственно 2 и 3 мл эфирного раствора диазометана (из [п. 2.5.5),](#p100084) перемешивают, закрывают колбочки пробками и оставляют стоять в течение 1 ч при комнатной температуре. Затем растворы упаривают досуха током воздуха. ##### 2.6.3 Очистка на колонке с силикагелем Остаток в колбе, полученный при упаривании экстрактов воды, растительного материала и почвы (из [п. п. 2.6.1.1,](#p100095) [2.6.1.2](#p100097) и [2.6.1.3)](#p100098) или метилированных по [п. 2.6.2](#p100100) экстрактов воды и почвы, количественно переносят тремя 1-мл порциями элюента N 1 в подготовленную хроматографическую колонку [(п. 2.5.6).](#p100087) Промывают колонку 40 мл элюента N 1, которые отбрасывают. Трифлоксистробин элюируют 60 мл элюента N 2, собирая элюат в грушевидную колбу емкостью 100 мл. Раствор упаривают досуха на роторном испарителе при температуре 30 °С. Сухие остатки экстрактов воды, почвы и яблок растворяют в 2 мл толуола и анализируют по п. 2.7. ### 2.7. Условия хроматографирования Газовый хроматограф Tracor 570 (США)
63
с детектором по захвату электронов (Ni ) -9 Показания электрометра 1 х 10 А Скорость движения ленты самописца 15 см/ч Колонка стеклянная, спиральная 1800 х 2 мм Неподвижная фаза - 3% OV-17 на Хромосорбе W(HP) (0,15 - 0,18 мм) Температура испарителя 250 °С, термостата колонки 240 °С, детектора 300 °С Скорость потока газа-носителя (азот) 30 мл/мин. Объем вводимой пробы 2 мкл Время удерживания трифлоксистробина 2 мин. 20 с Предел детектирования 0,05 нг Линейный диапазон детектирования 0,05 - 0,5 нг Альтернативная фаза: 3% SE-30 на Газ-хром Q (0,15 - 0,20 мм) Колонка стеклянная 1800 х 2 мм Условия хроматографирования те же. Каждую анализируемую пробу вводят 3 раза и вычисляют среднюю высоту пика. Образцы, дающие пики большие, чем стандартный раствор с концентрацией 0,25 мкг/мл, разбавляют толуолом. ### 2.8. Обработка результатов анализа Содержание трифлоксистробина рассчитывают методом абсолютной калибровки по формуле: H х А х V 1 X = ----------, Н х m 0 где: Х - содержание трифлоксистробина в пробе, мг/кг или мг/куб. дм; Н - высота пика образца, мм; 1 Н - высота пика стандарта, мм; 0 А - концентрация стандартного раствора трифлоксистробина, мкг/мл; V - объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, мл; m - объем или масса анализируемой части образца, мл или г (для воды - 100 мл; для яблок - 2,5 г; для почвы - 5 г). Содержание метаболита ЦГА 321113 рассчитывают методом абсолютной калибровки по формуле: H х А х V 1 X = ----------, Н х m х К 0 где: Х - содержание ЦГА 321113 в пробе, мг/кг или мг/куб. дм; Н - высота пика образца, мм; 1 Н - высота пика стандарта, мм; 0 А - концентрация стандартного раствора трифлоксистробина, мкг/мл; V - объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, мл; m - объем (мл) или масса (г) анализируемой части образца (для воды - 100 мл; для почвы - 5 г); К - коэффициент пересчета, учитывающий соотношение молекулярных масс трифлоксистробина и ЦГА 321113, равный 1,035. ## 3. Требования техники безопасности Необходимо соблюдать общепринятые правила безопасности при работе с органическими растворителями, токсичными веществами, электронагревательными приборами. ## 4. Контроль погрешности измерений Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с рекомендациями [МИ 2335-95](https://bukva.ai/docs/mi-2335-95) "ГСИ. Внутренний контроль качества результатов количественного химического анализа". ## 5. Разработчики Павлова Н.Н., н.с., канд.биол.н.; Талалакина Т.Н., н.с., Чканикова Е.В., н.с., канд.мед.н.; Макеев А.М., зав. лаб., канд.биол.н. ВНИИ фитопатологии, 143050, Московская обл., п/о Большие Вяземы. ---