---
title: "\"МУК 4.1.1215-03. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств амидосульфурона в воде, почве, зерне и соломе зерновых колосовых культур, зерне и зеленой массе кукурузы методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания\""
number: "МУК 4.1.1215-03"
status: действует
canonical: "https://bukva.ai/docs/ukazanie-ukazaniya-muk-4-1-1215-03"
---

## "МУК 4.1.1215-03. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств амидосульфурона в воде, почве, зерне и соломе зерновых колосовых культур, зерне и зеленой массе кукурузы методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания"

# "МУК 4.1.1215-03. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств амидосульфурона в воде, почве, зерне и соломе зерновых колосовых культур, зерне и зеленой массе кукурузы методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания"

(утв. Минздравом России 16.03.2003)

> [!IMPORTANT]
> Документ включен в Перечень методов (методик) определения остаточных количеств действующих веществ пестицидов в продукции (товарах), подлежащий государственному санитарно-эпидемиологическому надзору (контролю) на таможенной границе и таможенной территории Евразийского экономического союза (Решение Комиссии Таможенного союза от 28.05.2010 N 299).
> Документ включен в Перечень нормативной документации, разрешенной для использования в государственных ветеринарных лабораториях при диагностике болезней животных, рыб, пчел, а также контроля безопасности сырья животного и растительного происхождения (утв. Россельхознадзором 30.07.2009 N 02-03-48/563).
> Документ включен в Перечень основных действующих нормативно-методических документов по методам лабораторного и инструментального контроля в системе государственного санитарно-эпидемиологического нормирования (Письмо Роспотребнадзора от 02.12.2008 N 01/14262-8-32).
> Документ [введен](#p100002) в действие с 1 июля 2003 года.


<div align="right">

<a id="p100001"></a>Утверждаю<br>
Главный государственный<br>
санитарный врач<br>
Российской Федерации,<br>
Первый заместитель<br>
Министра здравоохранения<br>
Российской Федерации<br>
**Г.Г.ОНИЩЕНКО**

</div>

16 марта 2003 года


#### <a id="p100003"></a>4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ


<a id="p100004"></a>**ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ АМИДОСУЛЬФУРОНА**
**В ВОДЕ, ПОЧВЕ, ЗЕРНЕ И СОЛОМЕ ЗЕРНОВЫХ КОЛОСОВЫХ КУЛЬТУР,**
**ЗЕРНЕ И ЗЕЛЕНОЙ МАССЕ КУКУРУЗЫ МЕТОДОМ ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ**
**ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ**

<a id="p100005"></a>**МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ**
**МУК 4.1.1215-03**

<div align="right">

<a id="p100002"></a>Дата введения

</div>

1 июля 2003 года

1. <a id="p100006"></a>Методические указания подготовлены: Федеральным научным центром гигиены им. Ф.Ф. Эрисмана (чл.-корр. РАМН, проф. В.Н. Ракитский, проф. Т.В. Юдина); Московской сельскохозяйственной академией им. К.А. Тимирязева (проф. В.А. Калинин, к. хим. н. Довгилевич А.В.); при участии Департамента госсанэпиднадзора Минздрава России (А.П. Веселов). Разработчики методики указаны в конце.
2. <a id="p100007"></a>Методические указания рекомендованы к утверждению Комиссией по госсанэпиднормированию при Минздраве России.
3. <a id="p100008"></a>Утверждены Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации, Первым заместителем Министра здравоохранения Российской Федерации, академиком РАМН Г. Г. Онищенко 16 марта 2003 г.
4. <a id="p100009"></a>Введены с 1 июля 2003 г.
5. <a id="p100010"></a>Введены впервые.


## 1. <a id="p100011"></a>Вводная часть


<a id="p100012"></a>Фирма-производитель: AgrEvo (Германия).
<a id="p100013"></a>Торговое название: ГРОДИЛ (СЕКАТОР).
<a id="p100014"></a>Название действующего вещества по номенклатуре ИСО: амидосульфурон (Ное 075032).
<a id="p100015"></a>Название действующего вещества по номенклатуре ИЮПАК: 3-(4,6-диметоксипиримидин-2-ил)-1-(N-метил-N-метилсульфонил-аминосульфонил)-мочевины.
<a id="p100016"></a>Структурная формула: (не приводится).
<a id="p100017"></a>    Эмпирическая формула: C H  N O S .
                           9 15 5 7 2
<a id="p100018"></a>Молекулярная масса: 369,41.
<a id="p100019"></a>Тонкий порошок белого цвета, частично агломерированный в мелкие комки, со слабо кисловатым запахом.
<a id="p100020"></a>Температура плавления: 158 - 163 °С.
<a id="p100021"></a>                                      -5
    Давление паров при 20 °С: 1,3 х 10   Па.
<a id="p100022"></a>Хорошо растворим в дихлорметане (6,9 г/л), ацетоне (8,1 г/л), этилацетате (3,0 г/л), мало растворим в метаноле (0,87 г/л), толуоле (0,256 г/л), изопропаноле (0,099 г/л), практически не растворим в гексане (0,001 г/л); растворимость в воде (в мг/л): 3,3 (рН 3), 9 (рН 5,8) и 13500 (рН 10).
<a id="p100023"></a>Не стабилен в кислой среде. Период полураспада в воде при рН 5, 7, 9 составляет 34; 365; 365 дней, соответственно.
<a id="p100024"></a>Может присутствовать в воздухе рабочей зоны в виде аэрозоля.
<a id="p100025"></a>    Краткая токсикологическая характеристика:
<a id="p100026"></a>    острая  пероральная токсичность: ЛД   для мышей и крыс - более
                                       50
5000 мг/кг;
<a id="p100027"></a>    острая  дермальная  токсичность:  ЛД    для  крыс - более 5000
                                        50
мг/кг;
<a id="p100028"></a>    острая  ингаляционная  токсичность:  ЛК   для крыс - более 1,8
                                           50
мг/л воздуха.
<a id="p100029"></a>Гигиенические нормативы:
<a id="p100030"></a>ПДК в воде водоемов - 0,003 мг/куб. дм;
<a id="p100031"></a>ОДК в почве - 0,25 мг/кг;
<a id="p100032"></a>МДУ в зерне хлебных злаков - 0,1 мг/кг;
<a id="p100033"></a>ВМДУ в зерне кукурузы - 0,5 мг/кг.
<a id="p100034"></a>Область применения препарата: гродил (амидосульфурон) - послевсходовый гербицид на посевах зерновых (пшеницы, ячменя, ржи, овса, риса), а также льна и посадках картофеля. Препарат применяется от стадии 2 - 7 листьев культурного растения до стадии флангового листа однократно в сезон. Рекомендуемые нормы расхода препарата - 30 - 60 г д.в./га, 200 - 400 л/га.


## 2. <a id="p100035"></a>Методика определения остаточных количеств амидосульфурона в воде, почве, зерне и соломе зерновых колосовых культур, зерне и зеленой массе кукурузы методом высокоэффективной жидкостной хроматографии



### <a id="p100036"></a>2.1. Основные положения



##### <a id="p100037"></a>2.1.1 Принцип методики

<a id="p100038"></a>Методика основана на определении амидосульфурона с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) на обращенной фазе с ультрафиолетовым детектором после экстракции водным ацетоном (из почвы - ацетонитрилом, воды - хлороформом), перераспределения в водный щелочной раствор, его промывки и переэкстракции после подкисления в органическую фазу и очистки на колонке с силикагелем.
<a id="p100039"></a>Количественное определение проводится методом абсолютной калибровки.


##### <a id="p100040"></a>2.1.2 Избирательность метода

<a id="p100041"></a>В предлагаемых условиях метод специфичен в присутствии пестицидов, применяемых в интенсивной технологии при выращивании зерновых культур (хлор- и фосфорорганические пестициды, симмтриазины, фенилмочевины, тио- и дитиокарбаматы).


##### <a id="p100042"></a>2.1.3 Метрологическая характеристика метода


<a id="p100043"></a>Таблица 1

<a id="p100044"></a>**МЕТРОЛОГИЧЕСКИЕ ПАРАМЕТРЫ МЕТОДА**


<table>
<colgroup><col width="18%"><col width="16%"><col width="18%"><col width="16%"><col width="15%"><col width="16%"></colgroup>
<tr><td rowspan="2">Анализируемый объект</td><td colspan="5">Метрологические параметры, Р = 0,95; n = 24</td></tr>
<tr><td>предел обнаружения, &lt;*&gt; мг/кг (л)</td><td>диапазон определяемых концентраций, мк/кг (л)</td><td>среднее значение определения, %</td><td>стандартное отклонение, S, %</td><td>доверительный интервал среднего результата, %</td></tr>
<tr><td>Вода</td><td>0,001</td><td>0,001 - 0,008</td><td>86,0</td><td>1,89</td><td>+/- 1,33</td></tr>
<tr><td>Почва</td><td>0,01</td><td>0,01 - 0,08</td><td>85,2</td><td>2,00</td><td>+/- 1,42</td></tr>
<tr><td>Зерно</td><td>0,02</td><td>0,02 - 0,16</td><td>74,9</td><td>2,93</td><td>+/- 2,37</td></tr>
<tr><td>Зеленая масса кукурузы и солома</td><td>0,05</td><td>0,05 - 0,4</td><td>80,8</td><td>3,66</td><td>+/- 2,75</td></tr>
<tr><td>Зерно кукурузы</td><td>0,02</td><td>0,02 - 0,16</td><td>80,1</td><td>4,60</td><td>+/- 4,30</td></tr>
<tr><td colspan="6">&lt;*&gt; Предел обнаружения в хроматографируемом объеме - 2,5 нг.</td></tr>
</table>


<div align="right">

<a id="p100052"></a>Таблица 2

</div>


<div align="center">

<a id="p100053"></a>**ПОЛНОТА ОПРЕДЕЛЕНИЯ АМИДОСУЛЬФУРОНА В ВОДЕ, ПОЧВЕ, ЗЕРНЕ**<br>
**И СОЛОМЕ ПШЕНИЦЫ (6 ПОВТОРНОСТЕЙ ДЛЯ КАЖДОЙ КОНЦЕНТРАЦИИ)**

</div>



<table>
<colgroup><col width="19%"><col width="27%"><col width="35%"><col width="19%"></colgroup>
<tr><td>Среда</td><td>Внесено амидосульфурона, мг/кг</td><td>Обнаружено амидосульфурона, мг/кг</td><td>Полнота определения, %</td></tr>
<tr><td rowspan="4">Вода</td><td>0,001</td><td>0,00086 +/- 0,00004</td><td>86,2</td></tr>
<tr><td>0,002</td><td>0,00170 +/- 0,00008</td><td>84,9</td></tr>
<tr><td>0,004</td><td>0,00344 +/- 0,00028</td><td>85,9</td></tr>
<tr><td>0,008</td><td>0,00696 +/- 0,00028</td><td>87,0</td></tr>
<tr><td rowspan="4">Почва</td><td>0,01</td><td>0,0084 +/- 0,0008</td><td>84,3</td></tr>
<tr><td>0,02</td><td>0,0168 +/- 0,0008</td><td>84,7</td></tr>
<tr><td>0,04</td><td>0,0344 +/- 0,0012</td><td>85,6</td></tr>
<tr><td>0,08</td><td>0,0742 +/- 0,0040</td><td>86,1</td></tr>
<tr><td>Зеленая масса кукурузы и</td><td>0,05</td><td>0,0389 +/- 0,0038</td><td>77,9</td></tr>
<tr><td rowspan="3">солома</td><td>0,10</td><td>0,0798 +/- 0,0062</td><td>79,8</td></tr>
<tr><td>0,20</td><td>0,1692 +/- 0,0194</td><td>84,6</td></tr>
<tr><td>0,40</td><td>0,3239 +/- 0,020</td><td>81,1</td></tr>
<tr><td rowspan="4">Зерно</td><td>0,02</td><td>0,0154 +/- 0,0012</td><td>76,9</td></tr>
<tr><td>0,04</td><td>0,0296 +/- 0,0038</td><td>74,1</td></tr>
<tr><td>0,08</td><td>0,0590 +/- 0,0060</td><td>73,8</td></tr>
<tr><td>0,16</td><td>0,1196 +/- 0,0088</td><td>74,8</td></tr>
<tr><td rowspan="4">Зерно кукурузы</td><td>0,02</td><td>0,0151 +/- 0,0006</td><td>75,6</td></tr>
<tr><td>0,04</td><td>0,0319 +/- 0,0011</td><td>79,8</td></tr>
<tr><td>0,08</td><td>0,0653 +/- 0,0020</td><td>81,6</td></tr>
<tr><td>0,16</td><td>0,133 +/- 0,0045</td><td>83,2</td></tr>
</table>



### <a id="p100060"></a>2.2. Реактивы, растворы и материалы


<a id="p100061"></a>Амидосульфурон с содержанием д.в. 98,5%
<a id="p100062"></a>Ацетон, чда ГОСТ 2603-79
<a id="p100063"></a>Ацетонитрил для хроматографии, хч                  ТУ 6-09-4326-76
<a id="p100064"></a>Вода бидистиллированная, деионизованная
или перегнанная над KMnO
                        4
<a id="p100065"></a>Спирт метиловый                                    ГОСТ 6995-77
<a id="p100066"></a>н-Гексан, ч                                        ТУ 6-09-3375-78
Хлороформ (Фармакопея СССР)
<a id="p100067"></a>Кислота ортофосфорная, хч, 1 М и 0,005 М ГОСТ 6552-80
водные растворы
<a id="p100068"></a>Элюент N 1 для колоночной хроматографии:
смесь гексан-ацетон, 90:10 по объему
<a id="p100069"></a>Элюент N 2 для колоночной хроматографии:
смесь гексан-ацетон, 85:15 по объему
<a id="p100070"></a>Силикагель для колоночной хроматографии, L
100 - 160 меш, Хемапол (Чехия)
или аналогичный
<a id="p100071"></a>Натрия гидроксид, хч, 1 N раствор                  ГОСТ 11078-78
<a id="p100072"></a>Натрий серно-кислый безводный, хч, [ГОСТ 4166-76](https://bukva.ai/docs/gost-4166-76)
предварительно прокаленный в муфельной
печи при 600 °С в течение 4 ч
<a id="p100073"></a>Калий фосфорно-кислый двузамещенный,
3-водный, чда [ГОСТ 2493-75](https://bukva.ai/docs/standart-gost-2493-75)
<a id="p100074"></a>Натрий фосфорно-кислый двузамещенный, чда [ГОСТ 11773-76](https://bukva.ai/docs/gost-11773-76)
<a id="p100075"></a>Бумажные фильтры "белая лента" обеззоленные        ТУ 6-09-2678-77

<div align="center">

<a id="p100076"></a>Универсальная индикаторная бумага<br>
<a id="p100077"></a>Стекловата<br>
<a id="p100078"></a>Лед

</div>



### <a id="p100079"></a>2.3. Приборы, аппаратура, посуда


<a id="p100080"></a>Жидкостный хроматограф с ультрафиолетовым
детектором с переменной длиной волны
Shimadzu (Япония) или аналогичный
<a id="p100081"></a>Хроматографическая колонка стальная длиной
25 см, внутренним диаметром 4,6 мм,
содержащая Hipersil ODS или Lichrosorb RP-8
(альтернативная фаза), зернением 5 мкм
<a id="p100082"></a>Шприц для ввода образцов для жидкостного
хроматографа
<a id="p100083"></a>Ротационный вакуумный испаритель ИР-1М             ТУ 25-11-917-74
или аналогичный
<a id="p100084"></a>Весы аналитические ВЛА-200                         ГОСТ 34104-80Е
или аналогичные
<a id="p100085"></a>Насос водоструйный                                 ГОСТ 10696-75
<a id="p100086"></a>Весы лабораторные общего назначения
с наибольшим пределом взвешивания до 500 г
и пределом допустимой погрешности +/- 0,038 г ГОСТ 19491-74
<a id="p100087"></a>Мельница электрическая лабораторная                ТУ 46-22-236-79
или аналогичная
<a id="p100088"></a>Аппарат для встряхивания или аналогичный           ТУ 64-1-1081-73
<a id="p100089"></a>Гомогенизатор или аналогичный                      МРТУ 42-1505-63
<a id="p100090"></a>Иономер ЭВ-74 или аналогичный ГОСТ 22261-76
<a id="p100091"></a>Мешалка магнитная ММ-5 или аналогичная             ТУ 25-11.834-80
<a id="p100092"></a>Печь муфельная
<a id="p100093"></a>Воронки делительные на 100, 250, 500 и 1000 мл ГОСТ 25336-82Е
<a id="p100094"></a>Воронки химические конусные диаметром ГОСТ 25336-82Е
34 - 40 мм и 100 - 120 мм
<a id="p100095"></a>Воронка Бюхнера ГОСТ 9147-80Е
<a id="p100096"></a>Колба Бунзена ГОСТ 25336-82Е
<a id="p100097"></a>Колбы плоскодонные на 250 и 500 мл                 ГОСТ 9737-70
<a id="p100098"></a>Цилиндры мерные на 25, 50, 100, 250, 500           ГОСТ 1770-74Е
и 1000 мл
<a id="p100099"></a>Колбы мерные на 100 и 1000 мл                      ГОСТ 1770-74
<a id="p100100"></a>Пипетки мерные на 0,1; 1,0; 2,0; 5,0 и 10 мл [ГОСТ 20292-74](https://bukva.ai/docs/standart-gost-20292-74)
<a id="p100101"></a>Колбы круглодонные на шлифе на 10, 100 и 250 мл    ГОСТ 9737-70
<a id="p100102"></a>Колонка стеклянная длиной 25 см, внутренним
диаметром 8 - 10 мм
<a id="p100103"></a>Стаканы химические на 100, 200 и 500 мл ГОСТ 25336-82Е
<a id="p100104"></a>Сито с диаметром отверстий 0,5 - 1 мм
<a id="p100105"></a>Скальпель или ножницы


### <a id="p100106"></a>2.4. Отбор проб


<a id="p100107"></a>Отбор проб производится в соответствии с "Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов" (N 2051-79 от 21.08.79).
<a id="p100108"></a>Отобранные образцы зерна и соломы можно хранить в стеклянной или полиэтиленовой таре в холодильнике при температуре не выше 4 °С в течение месяца. Пробы воды хранятся при температуре не выше 4 °С в течение 3 дней, при температуре -20 °С - в течение месяца.
<a id="p100109"></a>Пробы почвы подсушивают при комнатной температуре в отсутствии прямого солнечного света. Сухие почвенные образцы можно хранить в течение года.
<a id="p100110"></a>Перед анализом зерно измельчают на мельнице, солому режут ножом на кусочки не более 0,5 см, воду (при наличии взвеси) фильтруют через неплотный бумажный фильтр, сухую почву просеивают через сито с отверстиями диаметром 0,5 - 1 мм.


### <a id="p100111"></a>2.5. Подготовка к определению



##### <a id="p100112"></a>2.5.1 Подготовка подвижной фазы для ВЭЖХ

<a id="p100113"></a>Отмеряют 300 мл ацетонитрила прозрачного при 238 нм, переносят в колбу на 1000 мл, добавляют 100 мл метанола и 600 мл 0,005 М раствора ортофосфорной кислоты, фильтруют, дегазируют.


##### <a id="p100114"></a>2.5.2 Кондиционирование колонки

<a id="p100115"></a>Промыть колонку для ВЭЖХ системой ацетонитрил-метанол 0,005 М-ортофосфорная кислота (300-100-600 по объему) в течение 30 мин. при скорости подачи растворителя 1 мл/мин. Включить детектор и подождать стабилизацию базовой линии (5 - 15 мин.).


##### <a id="p100116"></a>2.5.3 Приготовление фосфатного буферного раствора N 1 (рН 10)

<a id="p100117"></a>    1,42  г безводного Na HPO  и 40 г NaCl растворяют в химическом
                         2   4
стакане в 400 мл воды, доводят рН до 10 путем добавления по каплям
1 N NaOH  при  перемешивании  и  фиксируют  рН  раствора с помощью
иономера.


##### <a id="p100118"></a>2.5.4 Приготовление 0,05 М раствора двузамещенного фосфорно-кислого калия

<a id="p100119"></a>    1,14  г  K HPO  х 3H O переносят в мерную  колбу  на  100  мл,
              2   4     2
добавляют  60  -  70  мл  бидистиллированной воды, перемешивают до
полного  растворения  осадка, доводят водой до метки, контролируют
рН полученного раствора с помощью иономера, доводя его значение до
10 с помощью 1 N раствора едкого натра.


##### <a id="p100120"></a>2.5.5 Приготовление стандартных растворов

<a id="p100121"></a>Стандартный раствор амидосульфурона с содержанием 100 мкг/мл готовят растворением 0,01 г вещества в ацетонитриле в мерной колбе на 100 мл. Раствор хранится в холодильнике не более 10 дней.
<a id="p100122"></a>Рабочие стандартные растворы с концентрацией 0,125; 0,25; 0,5 и 1,0 мкг/мл готовят из раствора, содержащего 100 мкг/мл амидосульфурона, соответствующим последовательным разбавлением подвижной фазой для ВЭЖХ [(п. 2.5.1)](#p100112). Растворы немедленно после приготовления помещаются в холодильник, где хранятся не более суток.


##### <a id="p100123"></a>2.5.6 Построение градуировочного графика

<a id="p100124"></a>Для построения градуировочного графика в инжектор хроматографа вводят по 20 мкл рабочего стандартного раствора амидосульфурона с концентрацией 0,125; 0,25; 0,5 и 1,0 мкг/мл.
<a id="p100125"></a>Осуществляют не менее 5 параллельных измерений. Находят среднее значение высоты хроматографического пика для каждой концентрации. Строят градуировочный график зависимости высоты хроматографического пика в мм от концентрации амидосульфурона в растворе в мкг/мл.


##### <a id="p100126"></a>2.5.7 Подготовка колонки с силикагелем для очистки экстракта

<a id="p100127"></a>Нижнюю часть стеклянной колонки длиной 25 см, внутренним диаметром 8 - 10 мм уплотняют тампоном из стекловаты, медленно выливают в колонку (при открытом кране) суспензию 5 г силикагеля в 30 - 40 мл гексана. Дают растворителю стечь до верхнего края сорбента и помещают на него слой безводного сульфата натрия высотой 1 см. Колонку промывают 20 мл элюента N 2 состава (по объему) гексан-ацетон, 85:15, затем 20 мл гексана со скоростью 1 - 2 кап./с. После этого колонка готова к работе.


##### <a id="p100128"></a>2.5.8 Проверка хроматографического поведения амидосульфурона на колонке с силикагелем

<a id="p100129"></a>В круглодонную колбу на 10 мл отбирают 0,1 мл стандартного раствора амидосульфурона с концентрацией 100 мкг/мл, отдувают растворитель потоком теплого воздуха, остаток растворяют в 2 - 3 мл элюента N 1 и наносят на колонку. Промывают колонку 20 мл элюента N 1, затем 60 мл элюента N 2 со скоростью 1 - 2 кап./с. Отбирают фракции по 5 мл каждая, упаривают, остаток растворяют в 5 мл подвижной фазы для ВЭЖХ [(п. 2.5.1)](#p100112) и анализируют на содержание амидосульфурона по [п. 2.7](#p100155).
<a id="p100130"></a>Фракции, содержащие амидосульфурон, объединяют, упаривают досуха, остаток растворяют в 10 мл подвижной фазы для ВЭЖХ и вновь анализируют по [п. 2.7](#p100155). Рассчитывают содержание вещества в элюате, определяют полноту смывания с колонки и необходимый для очистки объем элюента.
<a id="p100131"></a>*Примечание.* Профиль вымывания может измениться при использовании новой партии сорбентов и растворителей.


### <a id="p100132"></a>2.6. Описание определения



##### <a id="p100133"></a>2.6.1 Вода



###### <a id="p100134"></a>2.6.1.1 Экстракция.

<a id="p100135"></a>Из средней пробы воды отбирают 250 мл, подкисляют 1 М ортофосфорной кислотой до рН 2,0 (контролируя его значение на иономере) и помещают в делительную воронку вместимостью 500 мл.
<a id="p100136"></a>Добавляют 75 мл хлороформа и встряхивают 3 минуты. Нижний органический слой отделяют, собирая в коническую колбу на 250 мл. Водный слой экстрагируют хлороформом еще дважды порциями по 50 мл.

###### <a id="p100137"></a>2.6.1.2 Очистка экстракта.

<a id="p100138"></a>    Объединенную органическую фазу переносят в делительную воронку
на 250 - 500 мл, добавляют 30 мл 0,05 М K HPO (по [п. 2.5.4](#p100118)),
                                              2   4
встряхивают  3 минуты. Верхний водный слой отделяют, собирая его в
химический  стакан  вместимостью 150 - 200 мл. Операцию экстракции
повторяют  еще  дважды, используя по 30 мл 0,05 М раствора К НРО .
                                                            2   4
Объединенную   водную   фазу  подкисляют  1  М  H PO   до  рН  2,0
                                                 3  4
(контролируя    его    значение   на   иономере).   Амидосульфурон
экстрагируют  из подкисленного водного раствора хлороформом трижды
порциями  по  20  мл.  Органическую  фазу  пропускают  через  слой
безводного  сульфата  натрия,  осушитель  промывают  10  -  15  мл
хлороформа.   Объединенные   экстракт   и  промывку  упаривают  на
ротационном  вакуумном  испарителе  при  температуре не выше 40 °С
почти  досуха,  оставшийся  растворитель  отдувают потоком теплого
воздуха.
<a id="p100139"></a>Остаток растворяют в 2 мл подвижной фазы для ВЭЖХ [(п. 2.5.1)](#p100112) и анализируют на содержание амидосульфурона по [п. 2.7](#p100155).


##### <a id="p100140"></a>2.6.2 Почва



###### <a id="p100141"></a>2.6.2.1 Экстракция.

<a id="p100142"></a>Навеску 25 г воздушно-сухой почвы помещают в коническую колбу на 250 мл, добавляют 100 мл смеси ацетонитрил-вода, 9:1 по объему и перемешивают с помощью магнитной мешалки в течение 30 мин. Экстракт фильтруют под вакуумом на воронке Бюхнера через бумажный фильтр. Фильтр с осадком промывают 4 раза по 15 - 20 мл ацетонитрила (каждый раз просасывая фильтр досуха). Объединенный ацетонитрильный раствор переносят в круглодонную колбу на 250 мл и концентрируют на ротационном вакуумном испарителе при температуре бани не выше 40 °С до водного остатка (объема около 10 мл).

###### <a id="p100143"></a>2.6.2.2 Очистка экстракта.

<a id="p100144"></a>    К  оставшемуся водному раствору добавляют 30 мл 0,05 М К НРО ,
                                                            2   4
при  необходимости  доводят  рН раствора до 10 с помощью 1 N NaOH.
Раствор переносят в делительную воронку вместимостью 100 - 150 мл,
промывают   дважды   хлороформом   порциями   по  20  мл,  который
отбрасывают.  Водный  раствор  подкисляют  1  М  H PO   до  рН 2,0
                                                  3  4
(контролируя    его    значение   на   иономере).   Амидосульфурон
экстрагируют хлороформом трижды порциями по 20 мл.
<a id="p100145"></a>Объединенную органическую фазу фильтруют через слой безводного сульфата натрия, осушитель промывают 10 - 15 мл хлороформа. Раствор упаривают на ротационном вакуумном испарителе при температуре бани не выше 40 °С почти досуха, оставшийся растворитель отдувают потоком теплого воздуха.
<a id="p100146"></a>Остаток растворяют в 2 мл подвижной фазы для ВЭЖХ [(п. 2.5.1)](#p100112) и анализируют на содержание амидосульфурона по [п. 2.7](#p100155).


##### <a id="p100147"></a>2.6.3 Зерно и солома



###### <a id="p100148"></a>2.6.3.1 Экстракция.

<a id="p100149"></a>Навеску 25 г измельченного зерна (10 г соломы) помещают в коническую колбу на 250 мл, добавляют 100 мл смеси ацетон-вода, 9:1 по объему для зерна (150 мл для соломы) и гомогенизируют 5 мин. при 1000 об./мин. Отстоявшийся раствор сливают через бумажный фильтр в мерный цилиндр с пришлифованной пробкой вместимостью 250 мл. Процедуру экстракции повторяют, используя по 100 мл смеси ацетон-вода, 9:1 по объему для зерна и соломы. Измеряют общий объем экстракта, отбирают его половину, переносят в круглодонную колбу вместимостью 250 мл и концентрируют на ротационном вакуумном испарителе до водного остатка (10 - 15 мл).

###### <a id="p100150"></a>2.6.3.2 Очистка экстракта.

<a id="p100151"></a>    К  оставшемуся  водному  раствору  добавляют  30 мл фосфатного
буфера N 1 с рН 10 (по [п. 2.5.3](#p100116)). Колбу помещают в баню с ледяной
водой  (температура  5  -  7  °С)   на 20 мин. Охлажденный раствор
быстро  фильтруют  через  неплотный  бумажный фильтр в делительную
воронку  вместимостью  100  мл  и  промывают  его  тремя  порциями
хлороформа  по  30  мл. Органическую фазу отбрасывают. Водную фазу
переносят  в  химический  стакан,  подкисляют  1 М H PO  до рН 2,0
                                                    3  4
(фиксируя  его  значение  на  иономере). Переносят раствор вновь в
делительную  воронку,  обмывая  стакан  хлороформом,  и подвергают
экстракции хлороформом трижды порциями по 30 мл.
<a id="p100152"></a>Далее очистку экстракта продолжают в соответствии с процедурой [п. 2.6.1.2](#p100137), описанной для воды. После этого экстракты зерна и соломы подвергают дополнительной очистке на колонке с силикагелем по п. 2.6.3.3.

###### <a id="p100153"></a>2.6.3.3 Очистка на колонке с силикагелем.

<a id="p100154"></a>Остаток в колбе, полученный при упаривании очищенных по [п. 2.6.1.2](#p100137) экстрактов зерна и соломы, с помощью 3 - 5 мл элюента N 1 количественно переносят пипеткой в колонку с силикагелем, дают растворителю стечь до верхнего края сорбента. Промывают колонку 30 мл гексана, 20 мл элюента N 1, которые отбрасывают. Амидосульфурон элюируют с колонки 50 мл основного элюента N 2 в круглодонную колбу на 100 мл и упаривают досуха при температуре бани не выше 40 °С, остаток экстракта зерна растворяют в 2 мл, соломы - в 1 мл подвижной фазы для ВЭЖХ [(п. 2.5.1)](#p100112) и анализируют по п. 2.7.


### <a id="p100155"></a>2.7. Условия хроматографирования


<a id="p100156"></a>Жидкостный хроматограф с ультрафиолетовым детектором Shimadzu (Япония).
<a id="p100157"></a>Колонка стальная длиной 25 см, внутренним диаметром 4,6 мм.
<a id="p100158"></a>Температура колонки: комнатная.
<a id="p100159"></a>Подвижная фаза: ацетонитрил-метанол-0,005 М ортофосфорная кислота (300:100:600 по объему).
<a id="p100160"></a>Скорость потока элюента: 1 мл/мин.
<a id="p100161"></a>Рабочая длина волны: 238 нм.
<a id="p100162"></a>Чувствительность: 0,01 ед. абсорбции на шкалу.
<a id="p100163"></a>Объем вводимой пробы: 20 мкл.

##### <a id="p100164"></a>2.7.1 Неподвижная фаза: Hipersil ODS, зернением 5 мкм

<a id="p100165"></a>Время выхода амидосульфурона: около 12 мин.

##### <a id="p100166"></a>2.7.2 Альтернативная неподвижная фаза: Lichrosorb RP-8, зернением 5 мкм

<a id="p100167"></a>Время выхода амидосульфурона: около 16 мин.
<a id="p100168"></a>Линейный диапазон детектирования: 2,5 - 20 нг.
<a id="p100169"></a>Образцы, дающие пики большие чем стандартный раствор с концентрацией 1,0 мкг/мл, разбавляют подвижной фазой для ВЭЖХ.


### <a id="p100170"></a>2.8. Обработка результатов анализа


<a id="p100171"></a>Содержание амидосульфурона рассчитывают методом абсолютной калибровки по формуле:

                                С х V
<a id="p100172"></a>                            Х = -----,
                                m х К

<a id="p100173"></a>где:
<a id="p100174"></a>Х - содержание амидосульфурона в пробе, мг/кг (мг/л);
<a id="p100175"></a>С - концентрация амидосульфурона в хроматографируемом растворе, найденная по градуировочному графику, мкг/мл;
<a id="p100176"></a>V - объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, мл;
<a id="p100177"></a>m - масса (объем) анализируемого образца, г (мл);
<a id="p100178"></a>К - коэффициент, учитывающий взятую для анализа часть объема экстракта. К = 1 для воды и почвы, К = 0,5 для зерна и соломы.


## 3. <a id="p100179"></a>Требования техники безопасности


<a id="p100180"></a>Необходимо соблюдать общепринятые правила безопасности при работе с органическими растворителями, токсичными веществами, электронагревательными приборами, сжатыми газами.


## 4. <a id="p100181"></a>Контроль погрешности измерений


<a id="p100182"></a>Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с рекомендациями [МИ 2335-95](https://bukva.ai/docs/mi-2335-95). ГСИ "Внутренний контроль качества результатов количественного химического анализа".


## 5. <a id="p100183"></a>Разработчики


<a id="p100184"></a>Калинин В.А., профессор, к.с-х.н.; Довгилевич Е.В., к.б.н.; Калинина Т.С, к.с-х.н.; Довгилевич А.В., к.х.н.; Устименко Н.В., к.б.н.
<a id="p100185"></a>Московская сельскохозяйственная академия им. К.А. Тимирязева. 127550, Москва, Тимирязевская ул., д. 53/1, УНКЦ "Агроэкология пестицидов и агрохимикатов". Телефон/факс: 976-43-26.



<a id="p100186"></a>

---