--- title: "\"МУК 4.1.1208-03. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Хроматографическое определение 1,2,3-бензотриазола в воде. Методические указания\"" number: "МУК 4.1.1208-03" status: действует canonical: "https://bukva.ai/docs/ukazanie-ukazaniya-muk-4-1-1208-03" --- ## "МУК 4.1.1208-03. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Хроматографическое определение 1,2,3-бензотриазола в воде. Методические указания" # "МУК 4.1.1208-03. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Хроматографическое определение 1,2,3-бензотриазола в воде. Методические указания" (утв. Минздравом России 16.03.2003) > [!IMPORTANT] > Документ включен в Перечень основных действующих нормативно-методических документов по методам лабораторного и инструментального контроля в системе государственного санитарно-эпидемиологического нормирования (Письмо Роспотребнадзора от 02.12.2008 N 01/14262-8-32). > Документ [введен](#p100002) в действие с 1 июля 2003 года.
Утверждаю
Главный государственный
санитарный врач
Российской Федерации,
Первый заместитель
Министра здравоохранения
Российской Федерации
**Г.Г.ОНИЩЕНКО**
16 марта 2003 года
#### 4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ **ХРОМАТОГРАФИЧЕСКОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ 1,2,3-БЕНЗОТРИАЗОЛА В ВОДЕ** **МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ**
**МУК 4.1.1208-03**
Дата введения
1 июля 2003 года 1. Подготовлены НИИ экологии человека и гигиены окружающей среды им. А.Н. Сысина РАМН под руководством д.б.н. А.Г. Малышевой авторским коллективом специалистов в составе: к.б.н. Н.П. Зиновьева, к.х.н. Е.Е. Сотников, А.В. Зорина, Т.И. Голова. 2. Утверждены и введены в действие Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации, Первым заместителем Министра здравоохранения Российской Федерации Г.Г. Онищенко 16 марта 2003 г. 4. Введены впервые с 1 июля 2003 г. ## Предисловие В настоящее время токсичные и опасные химические вещества распространены повсюду в окружающей среде. Так, высокое содержание медленно разлагающихся потенциально опасных органических веществ в водах продолжает возрастать, выбросы и стоки вредных химических веществ приобрели большие масштабы и их регламентирование становится важнейшей задачей. Всего несколько лет назад гигиеническая опасность большей части из примерно миллиона загрязняющих веществ не была известна. К счастью, в настоящее время почти все промышленно развитые страны приняли и постоянно ужесточают законодательство, направленное на улучшение контроля качества водных объектов. Для обнаружения и мониторинга соединений привлекается аналитическая химия. Перед ней ставится задача разработки все более совершенных методов, регламентирующих анализ и требующих определения все большего числа веществ и продуктов их трансформации со все более низкими пределами обнаружения. Актуальность разработки и внедрения эффективных аттестованных методов контроля качества воды обусловлена многими факторами. Главные из них: непрерывное расширение перечня нормированных показателей, ужесточение требований к чувствительности существующих методов вследствие изменения гигиенических нормативов в сторону их снижения, идентификация ранее неизвестных соединений в результате более широкого к настоящему времени применения методов обзорного анализа, принадлежность к группам высокотоксичных веществ, частота обнаружения ненормированных соединений. Уже более 40 лет газовая хроматография остается одним из основных методов определения веществ в окружающей среде и, в частности, в водных объектах. Использование капиллярной газовой хроматографии и различных высокочувствительных детектирующих устройств позволили существенно улучшить селективность, снизить пределы обнаружения, повысить надежность идентификации компонентов сложных смесей загрязняющих веществ и продуктов их трансформации различной природы и токсичности. В то же время из всех используемых способов детектирования только масс-спектрометрический обладает наибольшим потенциалом в отношении идентификации компонентов и анализа проб неизвестного состава. Поэтому именно хромато-масс-спектрометрический метод к настоящему времени стал практически основным в многокомпонентном анализе. ## Область применения Методические указания по определению концентраций химических веществ в воде предназначены для использования органами государственного санитарно-эпидемиологического надзора при осуществлении государственного контроля за соблюдением требований к качеству воды централизованного хозяйственно-питьевого водоснабжения, водохозяйственными организациями, производственными лабораториями предприятий, контролирующими состояние водных объектов, а также научно-исследовательскими институтами, работающими в области гигиены водных объектов. Методические указания разработаны в соответствии с требованиями [ГОСТ Р 8.563-96](https://bukva.ai/docs/postanovlenie-329) "Методики выполнения измерений", ГОСТ 17.0.02-79 "Охрана природы. Метрологическое обеспечение контроля загрязненности атмосферы, поверхностных вод и почвы. Основные положения". Методики выполнены с использованием современных физико-химических методов исследования, метрологически аттестованы и дают возможность контролировать содержание химических веществ меньше уровней их предельно допустимых концентраций (0,5 ПДК) в воде, установленных в [СанПиН 2.1.4.559-96](https://bukva.ai/docs/postanovlenie-26-goskomsanepidnadzor-rossii) "Питьевая вода. Гигиенические требования к качеству воды централизованных систем питьевого водоснабжения. Контроль качества", а для веществ, не включенных в перечень этого документа, - в [СанПиН 4630-88](https://bukva.ai/docs/sanitarnye-pravila-4630-88) "Санитарные правила и нормы охраны поверхностных вод от загрязнения". Методические указания одобрены и приняты на бюро секции по физико-химическим методам исследования объектов окружающей среды Проблемной комиссии "Научные основы экологии человека и гигиены окружающей среды" и бюро Комиссии по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию Министерства здравоохранения Российской Федерации. Настоящие методические указания устанавливают количественный хроматографический анализ воды централизованного хозяйственно-питьевого водоснабжения для определения в ней содержания 1,2,3-бензотриазола в диапазоне концентраций 0,05 - 15,0 мг/куб. дм. Методические указания могут быть использованы для анализа воды с более высоким содержанием 1,2,3-бензотриазола (до 20%) после соответствующего разбавления. C H N Мол. масса 119,13 6 5 3 1,2,3-Бензотриазол (азиминобензол) - бесцветные кристаллы, температура плавления 98,5 °С, температура кипения 201 - 204 °С (при 15 мм рт. ст.), трудно растворим в холодной воде, легко растворим в этаноле и диэтиловом эфире, растворим в бензоле и горячей воде, высасывается из воды хлористым натрием и серно-кислым натрием. ПДК в воде централизованных систем питьевого водоснабжения - 0,1 мг/куб. дм. Относится к 3 классу опасности. ## 1. Погрешность измерений Методика обеспечивает выполнение измерений с погрешностью, не превышающей +/- 24,0%, (дельта ), при доверительной вероятности отн. 0,95. ## 2. Метод измерений Измерение концентраций 1,2,3-бензотриазола основано на извлечении его из воды высаливанием при рН 7,5 - 8,0 с последующей экстракцией диэтиловым эфиром, упаривании растворителя, реэкстракции этанолом, хроматографическом разделении на капиллярной колонке, идентификации по удерживаемому объему или масс-спектрометрической идентификации и количественному определению. Нижний предел измерения в анализируемом объеме экстракта 0,25 мкг. Определению не мешают алкиламины, ацетилбензотриазол и фенилбензотриазол. ## 3. Средства измерений, вспомогательные устройства, материалы, реактивы При выполнении измерений применяют следующие средства измерений, вспомогательные устройства, материалы и реактивы. #### 3.1 Средства измерений Газовый хроматограф с пламенно-ионизационным детектором или с масс-селективным детектором с программным обеспечением HPG 1034 с MS Chem Station (серия DOS) Микрошприц вместимостью 10 куб. мм МШ-10 М ГОСТ 8043-75 Весы аналитические лабораторные ВЛА-200 ГОСТ 24104-80Е Меры массы ГОСТ 7328-82Е Цилиндр мерный на 500 куб. см ГОСТ 1770-74Е Мерные колбы вместимостью ГОСТ 29169-91 100 куб. см, 250 куб. см и 1000 куб. см Пипетки емкостью 0,1 куб. см и 0,2 куб. см ГОСТ 29169-91. #### 3.2 Вспомогательные устройства Колонка кварцевая капиллярная хроматографическая длиной 30 м внутренним диаметром 0,25 мм, покрытая неподвижной фазой SPB-1 (диметилполисилоксан) с толщиной пленки 1,0 мкм Воронка делительная емкостью 500 куб. см ГОСТ 9613-75 Прибор для концентрирования эфирных экстрактов (рис. 1 - не приводится) Баня водяная ТУ 61-1-423-72 Шкаф сушильный электрический 2В-151 Редуктор водородный ТУ 26-05-463-76 Редуктор кислородный ТУ 26-05-235-70. #### 3.3 Материалы и реактивы Эфир серный для наркоза, стабилизированный, Госфармакопея Натрий гидроксид, х.ч. ГОСТ 4328-77 Вода дистиллированная ГОСТ 6709-72 Этанол, х.ч. ТУ 6-09-1710-77 Натрий хлористый, х.ч. ГОСТ 4233-77 Гелий газообразный марки А ТУ 51-940-80 Азот сжатый, ос.ч. ГОСТ 9293-74 Водород сжатый ГОСТ 3022-80 Воздух сжатый ГОСТ 1188-73 1,2,3-Бензотриазол, ч. ТУ 6-09-1291-75. ## 4. Требования безопасности 4.1. При работе с реактивами соблюдают требования безопасности, установленные для работы с токсичными, едкими и легковоспламеняющимися веществами по ГОСТ 12.1.005-88 и 12.1.007-76. 4.2. При выполнении измерений концентраций 1,2,3-бензотриазола с использованием газовых хроматографов с пламенно-ионизационным детектором или масс-селективным детектором соблюдают правила электробезопасности в соответствии с ГОСТ 12.1.019-79 и инструкциями по эксплуатации приборов. ## 5. Требования к квалификации оператора К выполнению измерений на газовых хроматографах допускают специалистов, имеющих квалификационную группу по работе на установках с высоким напряжением не ниже четвертой, прошедших соответствующий курс обучения и знающих устройство и правила эксплуатации приборов. ## 6. Условия измерений При выполнении измерений соблюдают следующие условия. 6.1. Приготовление растворов и подготовку проб к анализу проводят в нормальных условиях при температуре воздуха (20 +/- 5) °С, атмосферном давлении 630 - 800 мм рт. ст. и влажности воздуха не более 80% при температуре 25 °С. 6.2. Выполнение измерений на газовых хроматографах проводят в условиях, рекомендуемых технической документацией к приборам и настоящими методическими указаниями. ## 7. Подготовка к выполнению измерений и проведение измерений Перед выполнением измерений проводят следующие работы: приготовление растворов, подготовку хроматографической колонки, установление градуировочной характеристики, отбор проб. #### 7.1 Приготовление растворов Рабочий раствор N 1 1,2,3-бензотриазола для градуировки (с = 1 мг/куб. см). Навеску 1,2,3-бензотриазола в количестве 100 мг вносят в мерную колбу вместимостью 100 куб. см, приливают этанол до метки и тщательно перемешивают. Срок хранения рабочего раствора N 1 - 1 месяц в холодильнике. Рабочий раствор N 2 1,2,3-бензотриазола для градуировки (с = 10 мг/куб. см). Навеску 1,2,3-бензотриазола в количестве 1,0 г вносят в мерную колбу вместимостью 100 куб. см, приливают этанол до метки и тщательно перемешивают. Срок хранения рабочего раствора N 2 - 1 месяц в холодильнике. 1 н раствор гидроксида натрия. В мерную колбу вместимостью 1000 куб. см помещают 40 г гидроксида натрия, доливают дистиллированную воду до метки и перемешивают. #### 7.2 Подготовка хроматографической колонки Кварцевую капиллярную колонку предварительно кондиционируют, нагревая в термостате ступенчато с 70 до 220 °С, и выдерживают при этой температуре в течение 4 ч. По охлаждении термостата до комнатной температуры выход колонки подсоединяют к пламенно-ионизационному детектору или к устройству сопряжения с масс-селективным детектором и создают в нем разряжение, затем записывают нулевую линию при параметрах проведения хроматографического анализа. При отсутствии заметных флуктуаций приступают к работе. #### 7.3 Установление градуировочной характеристики Градуировочную характеристику устанавливают на градуировочных растворах 1,2,3-бензотриазола в воде. Она выражает зависимость площади пика 1,2,3-бензотриазола от его концентрации в мг/куб. дм и строится по 5 сериям растворов для градуировки. Для этого в мерную колбу вместимостью 250 куб. см в соответствии с табл. 1 и 2 помещают рабочий раствор 1,2,3-бензотриазола, доводят дистиллированной водой до метки и перемешивают. Таблица 1 **ГРАДУИРОВОЧНЫЕ РАСТВОРЫ ДЛЯ УСТАНОВЛЕНИЯ ГРАДУИРОВОЧНОЙ**
**ХАРАКТЕРИСТИКИ ПРИ ОПРЕДЕЛЕНИИ КОНЦЕНТРАЦИЙ**
**1,2,3-БЕНЗОТРИАЗОЛА В ВОДЕ**
| Номер раствора | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | | --- | --- | --- | --- | --- | --- | --- | --- | | Объем рабочего раствора N 1 (с = 1 мг/куб. см), куб. мм | 0 | 12,5 | 25,0 | 62,5 | 125,0 | 187,5 | 250,0 | | Концентрация 1,2,3-бензотриазола в воде, мг/куб. дм | 0 | 0,05 | 0,1 | 0,25 | 0,5 | 0,75 | 1,0 | Таблица 2
**ГРАДУИРОВОЧНЫЕ РАСТВОРЫ ДЛЯ УСТАНОВЛЕНИЯ ГРАДУИРОВОЧНОЙ**
**ХАРАКТЕРИСТИКИ ПРИ ОПРЕДЕЛЕНИИ КОНЦЕНТРАЦИЙ**
**1,2,3-БЕНЗОТРИАЗОЛА В ВОДЕ**
| Номер раствора | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | | --- | --- | --- | --- | --- | --- | --- | --- | | Объем рабочего раствора N 2 (с = 10 мг/куб. см), куб. мм | 0 | 37,5 | 75,0 | 125,0 | 187,5 | 250,0 | 375,0 | | Концентрация 1,2,3-бензотриазола в воде, мг/куб. дм | 0 | 1,5 | 3,0 | 5,0 | 7,5 | 10,0 | 15,0 | При построении градуировочной характеристики 250 куб. см градуировочного раствора помещают в делительную воронку вместимостью 500 куб. см, приливают раствор 1 н гидроксида натрия до рН 7,5 - 8, вносят 1 г хлористого натрия, приливают 35 куб. см диэтилового эфира и периодически встряхивают, сбрасывая избыточное давление. После расслоения эфирный слой сливают в колбу с оттянутым дном. Водный слой еще дважды экстрагируют 15 куб. см диэтилового эфира. Объединенный эфирный экстракт концентрируют на установке, изображенной на рис. 1. К полученному концентрату добавляют этанол до объема 0,1 куб. см. Анализируют 2 куб. мм экстракта на газовом хроматографе с пламенно-ионизационным детектором или на газовом хроматографе с масс-селективным детектором. Условия проведения газохроматографического анализа с пламенно-ионизационным детектором: задержка деления потока газа-носителя при вводе пробы 0,5 мин.; температура испарителя 220 °С; температура детектора 250 °С; температура колонки 150 °С в течение 2 мин., затем нагрев со скоростью 5 °С/мин. до температуры 220 °С, после чего изотермически при 220 °С в течение 10 мин.; расход газа-носителя (азота) 0,44 куб. см/мин.; поддув газа-носителя (азота) 35 куб. см/мин.; расход водорода 35 куб. см/мин.; расход воздуха 350 куб. см/мин.; -10 чувствительность шкалы электрометра 2 - 200 х 10 А; время удерживания 1,2,3-бензотриазола 12,1 мин.; общее время анализа 26 мин. На полученных хроматограммах рассчитывают площади пиков 1,2,3-бензотриазола и по средним результатам из 5 серий строят градуировочную характеристику, выражающую зависимость площади пиков (кв. мм) от концентрации (мг/куб. дм) 1,2,3-бензотриазола. Условия проведения хромато-масс-спектрометрического анализа: задержка деления потока газа-носителя (гелия) при вводе пробы 0,5 мин.; температура испарителя 220 °С; температура интерфейса 280 °С; температура колонки 150 °С в течение 2 мин., затем нагрев со скоростью 5 °С/мин. до температуры 220 °С, после чего изотермически при 220 °С в течение 10 мин.; время удерживания 1,2,3-бензотриазола 12,1 мин.; общее время анализа 26 мин. Масс-спектры электронного удара органических соединений получают при следующих параметрах: энергия ионизирующих электронов 70 эВ; температура масс-селективного детектора 172 °С; диапазон сканирования масс 45 - 550 m|z; число сканирований в секунду 1, 2; число выборок 2; напряжение на электронном умножителе 1635 В; ток эмиссии 50 мкА. Идентификацию 1,2,3-бензотриазола осуществляют с помощью библиотечного поиска в библиотеке NBS компьютера и по времени удерживания. Интегрируют площадь пика 1,2,3-бензотриазола и по средним результатам из 5 серий строят градуировочную характеристику для 1,2,3-бензотриазола. Градуировку проверяют 1 раз в 6 месяцев. #### 7.4 Отбор проб Основные требования к отбору проб по [ГОСТ Р 51592-00](https://bukva.ai/docs/standart-gost-r-51592-2000) и [ГОСТ Р 51593-00](https://bukva.ai/docs/postanovlenie-gost-r-51593-2000). Объем отобранной пробы воды должен быть не менее 500 куб. см. Пробы отбирают в емкости, изготовленные из полимерного материала или темного стекла. Пробы следует хранить не более 6 ч при температуре не более 25 °С. Хранение проб более 6 ч проводят по [ГОСТ Р 51592-00](https://bukva.ai/docs/standart-gost-r-51592-2000). ## 8. Выполнение измерений Анализируют 250 куб. см образца, как описано в [п. 7.3](#p100074). Идентификацию 1,2,3-бензотриазола осуществляют по времени удерживания или с помощью библиотечного поиска. Для получения результатов измерения концентрации 1,2,3-бензотриазола проводят анализ 2 параллельных проб воды. Перед обработкой любых результатов измерений необходимо проанализировать "холостую пробу" дистиллированной воды по [п. 7.3](#p100074), чтобы убедиться в отсутствии помех и загрязнений. ## 9. Обработка (вычисление) результатов измерений Концентрацию 1,2,3-бензотриазола (мг/куб. дм) в воде определяют по градуировочной характеристике после вычисления площади пика или компьютерного интегрирования хроматограммы. Вычисляют среднее значение концентрации 1,2,3-бензотриазола в воде: _ 2 С = 0,5 SUM С . i=1 i Рассчитывают относительную разницу результатов 2 параллельных измерений одной пробы: _ |С - С | <= 0,01 х d х С, 1 2 где d - норматив оперативного контроля сходимости, равный 33,8%. ## 10. Оформление результатов измерения Средние значения результатов измерения концентрации 1,2,3-бензотриазола в воде оформляют протоколом по форме: Протокол N количественного химического анализа 1. Дата проведения анализа _______________________________________ 2. Место отбора пробы ____________________________________________ 3. Название лаборатории __________________________________________
4. Юридический адрес лаборатории _________________________________ **РЕЗУЛЬТАТЫ ХИМИЧЕСКОГО АНАЛИЗА**
| Шифр или N пробы | Определяемый компонент | Концентрация, мг/куб. дм | Погрешность измерения, % | | --- | --- | --- | --- | Исполнитель: Руководитель лаборатории: ## 11. Контроль погрешности измерений 11.1. Контроль сходимости. Выполняют по [п. 9](#p100124). При превышении норматива оперативного контроля сходимости эксперимент повторяют. При повторном превышении норматива выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам контроля, и устраняют их. #### 11.2 Оперативный контроль погрешности. Проводится при смене реактивов, после ремонта прибора. Образцами для контроля являются реальные пробы воды, к которым делаются добавки измеряемых веществ в виде растворов. Отбирают 2 пробы воды и к 1 из них делают добавку таким образом, чтобы содержание определяемого вещества увеличилось по сравнению с исходным на 50 - 150% и концентрация в пробе не выходила за верхний диапазон. Каждую пробу анализируют в точном соответствии с прописью методики и получают результат анализа исходной рабочей пробы - С и рабочей пробы с добавкой- исх. 1 С . Результаты анализа исходной рабочей пробы С и с добавкой - исх. 1 С получают по возможности в одинаковых условиях, т.е. их получает один аналитик с использованием 1 набора мерной посуды, 1 партии реактивов и т.д. Результаты контроля признаются удовлетворительными, если выполняется условие: 1 |C - C - C| < Kg, исх. где: C - добавка вещества, мг/куб. дм; Kg - норматив оперативного контроля погрешности, мг/куб. дм. При внешнем контроле (Р = 0,95) принимают: _____________________________ / 1 2 2 Kg = \/(ДЕЛЬТА С ) + (ДЕЛЬТА С ) , исх. 1 где ДЕЛЬТА С и ДЕЛЬТА С - характеристика погрешности для исх. исходной пробы и пробы с добавкой, мг/куб. дм: ДЕЛЬТА С = 0,01 х дельта х С и исх. отн. исх. 1 1 ДЕЛЬТА С = 0,01 х дельта х С . отн. При внутрилабораторном контроле (Р = 0,90) принимают: K'g = 0,84 х Kg. При превышении оперативного контроля погрешности эксперимент повторяют. При повторном превышении указанного норматива выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам контроля, и устраняют их. Методические указания разработаны А.Г. Малышевой, А.А. Беззубовым (НИИ экологии человека и гигиены окружающей среды им. А.Н. Сысина РАМН, г. Москва), Н.Б. Гавриловым, В.А. Савельевой (АКВАХИМ). ---