МУК 4.1.1151-02. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств Циперметрина в шампиньонах методом газожидкостной хроматографии. Методические указания

(утв. Минздравом России)

Утверждаю Главный государственный санитарный врач Российской Федерации, Первый заместитель Министра здравоохранения Российской Федерации

4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ ЦИПЕРМЕТРИНА В ШАМПИНЬОНАХ МЕТОДОМ ГАЗОЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ МУК 4.1.1151-02

Дата введения 1 января 2003 года

1. Методические указания подготовлены: Федеральным научным центром гигиены им. Ф.Ф. Эрисмана (чл.-корр. РАМН, проф. В.Н. Ракитский, проф. Т.В. Юдина); Московской сельскохозяйственной академией им. К.А. Тимирязева (проф. В.А. Калинин, к. хим. н. Довгилевич А.В.); Всероссийским НИИ фитопатологии (А.М. Макеев и др.); Всероссийским НИИ защиты растений (В.И. Долженко и др.); Санкт-Петербургским НИИ лесного хозяйства (Маслаков С.Е., Л.В. Григорьева и др.), при участии Департамента госсанэпиднадзора Минздрава России (А.П. Веселов).

2. Методические указания рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию при Минздраве России.

3. Утверждены и введены в действие Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации, Первым заместителем Министра здравоохранения Российской Федерации, академиком РАМН Г.Г. Онищенко.

4. Введены впервые.

1. Вводная часть

Торговое название: ИНТА-ВИР ВРП (37,5 г/кг).

Действующее вещество: Циперметрин.

(1RS)-цис-транс-3-(2,2-дихлорвинил)-1,1-диметилцикло-пропан-карбоновой кислоты (RS)-альфа-циан-3-феноксибензиловый эфир.

Структурная формула (не приводится).

    C  H  Cl NO                                        М. м. 416,3
     22 19  2  3

Технический продукт (90% основного вещества) — вязкая желтоватая масса, превращающаяся в жидкость при температуре 60 °C.

Давление паров при 20 °C: менее 190 нПа.

Растворимость в органических растворителях при 21 °C (г/куб. дм): ацетон, хлороформ, циклогексанон, ксилол — более 450; этанол — 337; гексан — 103. Растворимость технического продукта в воде при 20 °C — 0,01 — 0,2 мг/куб. дм. Более устойчив в кислой, чем в щелочной среде.

Краткая токсикологическая характеристика

Острая пероральная токсичность (LD ) для крыс — 251 — 4123 50

ПДК в воздухе рабочей зоны — 0,5 мг/куб. м, ПДК м. р. в атмосферном воздухе — 0,04 мг/куб. м.

МДУ в шампиньонах — 0,1 мг/кг.

Область применения препарата

Применяется для борьбы с вредителями овощных, плодовых, бахчевых, ягодных, цветочных культур, виноградной лозы. Дает удовлетворительные результаты (в г/га) против сосущих (15 — 25) и грызущих (50 — 100) вредителей, в т.ч. жуков.

2. Методика определения остаточных количеств Циперметрина в шампиньонах методом газожидкостной хроматографии

2.1. Основные положения

2.1.1 Принцип метода

Методика основана на извлечении Циперметрина из анализируемых проб смесью ацетона с гексаном (1:1), очистке экстракта перераспределением в системе несмешивающихся растворителей, количественном определении методом газожидкостной хроматографии (ГЖХ) с использованием детектора постоянной скорости рекомбинации ионов (ДПР). Количественное определение проводится методом абсолютной калибровки.

2.1.2 Избирательность метода

В предлагаемых условиях метод специфичен в присутствии пестицидов, применяемых в интенсивной технологии выращивания шампиньонов.

2.1.3 Метрологическая характеристика метода (P = 0,95)

Число параллельных определений                  24

Предел обнаружения в хроматографируемом объеме  0,2 нг

Предел обнаружения в пробе                      0,008 мг/кг

Диапазон определяемых концентраций              0,008 - 0,04 мг/кг

Среднее значение определения                    87,1
Относительное стандартное отклонение (DS)       2,06%
Доверительный интервал среднего                 +/- 4,24%

Таблица

ПОЛНОТА ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЦИПЕРМЕТРИНА В ШАМПИНЬОНАХ (6 ПОВТОРНОСТЕЙ ДЛЯ КАЖДОЙ КОНЦЕНТРАЦИИ)

2.2. Реактивы, растворы и материалы

Циперметрин с содержанием д.в. 99,0% (ВНИИХСЗР, г. Москва)

Ацетон ГОСТ 2603-79

Вода дистиллированная ГОСТ 6709-72

н-гексан, хч                                       ТУ 6-09-4521-77
Натрий серно-кислый безводный, хч                  ГОСТ 1277-81

Хроматон-супер с 5% OV-17 (0,16 — 0,20 мм), Хемапол, Чехия

Фильтры бумажные «синяя лента» ТУ 6-09-2678-77

2.3. Приборы, аппаратура, посуда

Газовый хроматограф «Цвет-560», снабженный ТУ 2.722.150 детектором постоянной скорости рекомбинации ионов (ДПР) с пределом детектирования по -14 линдану 4 x 10 г/куб. см или другой с аналогичными или улучшенными характеристиками

Аппарат для встряхивания типа АВУ-6с               ТУ 64-1-2851-78
Весы аналитические типа ВЛА-200                    ГОСТ 34104-80Е
Насос водоструйный                                 ГОСТ 10696-75
Ротационный вакуумный испаритель ИР-1М             ТУ 25-11-917-76

или аналогичный

Хроматографическая колонка стеклянная длиной 1 м, внутренним диаметром 3 мм

Воронки делительные вместимостью 500 куб. дм ГОСТ 3613-75

Воронки химические конусные диаметром 34 — 40 мм ГОСТ 25336-82Е

Колбы мерные вместимостью 100 куб. см ГОСТ 1770-74Е

Колбы грушевидные со шлифом ГОСТ 10394-72 вместимостью 100 куб. см

Колбы плоскодонные конические ГОСТ 10394-63

Микрошприц типа МШ-1 ТУ 5Е2-833-024

Пипетки вместимостью 2, 5 и 10 куб. см ГОСТ 20292-74Е

Цилиндры мерные ГОСТ 1770-74Е

2.4. Отбор проб

Отбор, хранение и подготовка проб проводится в соответствии с «Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов и объектов окружающей среды для определения микроколичества пестицидов», утвержденными за № 2051-79 от 21.08.79.

Отобранные образцы шампиньонов можно хранить в стеклянной или полиэтиленовой таре в холодильнике при температуре не выше 4 °C не более 2 дней, в морозильной камере при температуре -18 °C — в течение месяца.

Перед анализом грибы измельчают с помощью ножа или скальпеля на кубики с длиной граней около 5 мм.

2.5. Подготовка к определению

Перед выполнением измерений проводят следующие работы: приготовление растворов, подготовка хроматографических колонок и установление градуировочной характеристики.

2.5.1 Подготовка и кондиционирование хроматографических колонок

Готовую насадку (5% OV-17 на Хроматоне-супер, 0,16 — 0,20 мм) засыпают в стеклянную колонку длиной 1 м, уплотняют под вакуумом, колонку устанавливают в термостате хроматографа, не подсоединяя к детектору, и стабилизируют в токе азота при температуре 270 °C в течение 10 — 12 часов.

2.5.2 Приготовление стандартных растворов

2.5.2.1. Исходный раствор Циперметрина для градуировки (концентрация 100 мкг/куб. см). В мерную колбу вместимостью 100 куб. см помещают 0,01 г Циперметрина, доводят до метки гексаном, тщательно перемешивают. Раствор хранится в холодильнике в течение месяца.

2.5.2.2. Раствор № 1 для градуировки (соответствует концентрации Циперметрина 10 мкг/куб. см). В мерную колбу вместимостью 100 куб. см помещают 10 куб. см исходного стандартного раствора Циперметрина (с концентрацией 100 мкг/куб. см), доводят до метки гексаном, тщательно перемешивают. Раствор хранится в холодильнике в течение месяца.

2.5.2.3. Рабочие растворы № 2 — 5 для градуировки (соответствуют концентрации Циперметрина 0,2 — 1 мкг/куб. см). В мерные колбы вместимостью 100 куб. см вносят с помощью пипетки 2, 5, 8 и 10 куб. см раствора № 1 концентрации 10 мкг/куб. см в гексане (п. 2.5.2.2) и доводят до метки гексаном. Получают растворы № 2 — 5 с концентрациями 0,2; 0,5; 0,8 и 1,0 мкг/куб. см.

2.5.3 Построение градуировочного графика

Для построения градуировочного графика в испаритель хроматографа вводят по 1 мкл рабочего стандартного раствора, соответствующего концентрации Циперметрина 0,2; 0,5; 0,8 и 1,0 мкг/куб. см.

Осуществляют не менее 5 параллельных измерений. Находят среднее значение высоты хроматографического пика для каждой концентрации. Строят градуировочный график зависимости высоты хроматографического пика в мм от концентрации в мкг/куб. см.

2.6. Описание определения

2.6.1 Экстракция и очистка экстракта

Измельченную пробу массой 25 г помещают в коническую колбу емкостью 250 — 300 куб. см, добавляют 100 куб. см смеси ацетона с гексаном в объемном соотношении 1:1, вносят 25 г безводного сульфата натрия и извлекают Циперметрин при механическом встряхивании в течение 30 минут. Экстракт фильтруют через бумажный фильтр. Остаток на фильтре промывают гексаном (20 куб. см). Полученный раствор переносят в делительную воронку вместимостью 500 куб. см, вносят 10 куб. см воды, встряхивают 2 — 3 мин., нижний водный слой отбрасывают. Операцию промывки повторяют дважды. Гексановую фазу сушат безводным сульфатом натрия, упаривают на ротационном испарителе почти досуха при температуре, не превышающей 40 °C, отдувают потоком воздуха. Остаток в колбе растворяют в 1 куб. см гексана и хроматографируют.

2.6.2 Условия хроматографирования

Хроматограф газовый «Цвет-560» с детектором постоянной скорости рекомбинации ионов

Хроматографическая колонка длиной 1 м, внутренним диаметром 3 мм, заполненная 5% OV-17 на Хроматоне-супер (0,16 — 0,20 мм)

    Температура термостата колонки           270 °C
                           детектора         320 °C
                           испарителя        280 °C
    Скорость газа-носителя (азота)           40 +/- 1 куб. см/мин.

                                                10

    Скорость диаграммной ленты               200 мм/ч
    Время удерживания Циперметрина           4 мин. 50 с
    Линейный диапазон детектирования         0,2 - 1,0 нг

2.7. Обработка результатов анализа

Содержание Циперметрина в анализируемой пробе рассчитывают методом абсолютной калибровки по формуле:

                             V

X = A -----, V m ал

где:

X — содержание Циперметрина в пробе, мг/кг;

A — количество вещества, найденное по градуировочному графику, в хроматографируемом объеме раствора, нг;

V — конечный объем пробы, подготовленной для

V — объем аликвоты пробы, введенной в хроматограф, куб. мм; ал

m — масса анализируемой пробы, г.

3. Требования техники безопасности

При выполнении определения остаточных количеств Циперметрина в шампиньонах необходимо соблюдать требования безопасности при работе в химических лабораториях в соответствии с «Правилами устройства, техники безопасности, производственной санитарии, противоэпидемиологического режима и личной гигиены при работе в лечебных и санитарно-эпидемиологических учреждениях системы МЗ СССР» (N 2455-81 от 20.10.81), а также требования, изложенные в документации.

4. Разработчики