МУК 4.1.1150-02. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Измерение концентраций Цимоксанила в воздухе рабочей зоны методом тонкослойной хроматографии. Методические указания

(утв. Минздравом России)

4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

ИЗМЕРЕНИЕ КОНЦЕНТРАЦИЙ ЦИМОКСАНИЛА В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ МЕТОДОМ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

1. Методические указания подготовлены: Федеральным научным центром гигиены им. Ф.Ф. Эрисмана (чл.-корр. РАМН, проф. В.Н. Ракитский, проф. Т.В. Юдина); Московской сельскохозяйственной академией им. К.А. Тимирязева (проф. В.А. Калинин, к. хим. н. Довгилевич А.В.); Всероссийским НИИ фитопатологии (А.М. Макеев и др.); Всероссийским НИИ защиты растений (В.И. Долженко и др.); Санкт-Петербургским НИИ лесного хозяйства (Маслаков С.Е., Л.В. Григорьева и др.), при участии Департамента госсанэпиднадзора Минздрава России (А.П. Веселов).

2. Методические указания рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию при Минздраве России.

3. Утверждены и введены в действие Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации, Первым заместителем Министра здравоохранения Российской Федерации, академиком РАМН Г.Г. Онищенко.

4. Введены впервые.

1. Вводная часть

Фирма-производитель: Дюпон, США.

Торговое название: Курзат, Танос.

Название действующего вещества по ИСО: Цимоксанил.

Название действующего вещества по IUPAC: 1-(2-циано-2-мето-ксииминоацетил)-3-этилмочевина.

                                CN
                                |

CH CH NHCONHCOC=NOCH

                        3  2              3

    C H  N O                                           М. м. 198,2

 7 10 4 3

Химически чистый Цимоксанил представляет собой бесцветное кристаллическое вещество.

Давление паров: 0,15 мПа при 20 °C.

Температура плавления: 160 — 161 °C.

Коэффициент распределения н-октанол-вода log P: 0,59 (pH 5); 0,67 (pH 7).

Растворимость в воде составляет 890 мг/л. Растворимость в органических растворителях (г/л): ацетон — 62,4; ацетонитрил — 57, бензол — 2, гексан — 1,85, диметилформамид — 185, метанол — 22,9, метилен хлорид — 133, н-октанол — 1,43, толуол — 5,29, хлороформ — 103, этилацетат — 28.

Цимоксанил стабилен в интервале pH 2 — 5, в щелочных растворах быстро гидролизуется (ДТ — 149 дн. при pH 5, 34 ч при pH 7 и 31 50 мин. при pH 9). В воде водоемов период полураспада составляет 1,8 дней.

В почве Цимоксанил быстро разрушается под действием микроорганизмов. В тепличных условиях период полураспада составляет около трех дней, в полевых условиях от 7 до 14 дней. Миграция по почвенному профилю слабая.

В растениях соединение быстро разрушается до нетоксичных метаболитов. Остатки Цимоксанила в клубнях картофеля не обнаруживаются. В ягодах винограда, по данным фирмы Дюпон, остатки составляли ниже 0,2 мг/кг при обработке за несколько дней до уборки.

Краткая гигиеническая характеристика

    Цимоксанил  относится к умеренно опасным соединениям по острой
(ЛД   для крыс - 960 мг/кг), малоопасным по дермальной токсичности

50 (ЛД для крыс — более 2000 мг/кг) и умеренно опасным по 50 ингаляционной (ЛК (4 часа) — 5060 мг/куб. м) токсичности, не 50 вызывает раздражения глаз и слабо раздражает кожу.

В РФ установлены следующие гигиенические нормативы:

ОБУВ в воздухе рабочей зоны — 1,0 мг/куб. м;

ОБУВ в атмосферном воздухе при применении — 0,003 мг/куб. м;

Цимоксанил — контактный фунгицид с местным системным эффектом, обладающий защитным и лечащим действием. Высокоактивен против грибов, вызывающих фитофтороз и пероноспороз, не действует на возбудителей настоящей мучнистой росы. Длительность защитного действия составляет 4 — 6 дней, поэтому рекомендуется его использование в смеси с другими фунгицидами системного и защитного контактного действия.

Зарегистрирован в России под названием Танос (DPX-KP 481), диспергируемые в воде гранулы, 50% (25% Фамоксадона + 25% Цимоксанила) на картофеле с нормой расхода 0,6 кг/га, трехкратная обработка за сезон.

2. Методика определения остаточных количеств Цимоксанила в воздухе рабочей зоны

2.1. Основные положения

2.1.1 Принцип метода

Метод основан на хроматографическом выделении Цимоксанила в тонком слое сорбента с последующим проявлением хроматограмм после хлорирования о-толидиновым реагентом.

Отбор проб осуществляется концентрированием на фильтрах АФА-ХА-20. Количественное определение проводится методом визуального сравнения величин пятен стандарта и пробы.

2.1.2 Избирательность метода

В предлагаемых условиях метод специфичен в присутствии компонентов препаративной формы, а также пестицидов, применяемых в интенсивной технологии выращивания овощных культур, картофеля и винограда (хлор- и фосфорорганические пестициды, пиретроиды, триазолы и дитиокарбаматы).

2.1.3 Метрологическая характеристика метода (P = 0,95)

Число параллельных определений — 6.

Предел обнаружения Цимоксанила в хроматографическом объеме — 0,6 нг.

Предел обнаружения в пробе воздуха — 0,05 мг/куб. м (при отборе 200 л воздуха).

Диапазон определяемых концентраций — 0,05 — 0,3 мг/куб. м.

Среднее значение определения — 91,8%.

Стандартное отклонение (S) — 2,63%.

Относительное стандартное отклонение (DS) — 1,07%.

Доверительный интервал среднего — 2,75%

Суммарная погрешность измерения — +/- 25%.

Низший предел измерения Цимоксанила — 0,2 мкг в хроматографируемой пробе.

Время выполнения измерения, включая отбор пробы воздуха, около одного часа.

2.2. Реактивы, растворы, материалы и оборудование

2.2.1 Реактивы, материалы и растворы

Ацетон, чда ГОСТ 2603-79

Гексан, чда                                        ТУ 6-09-3375-78
Калия иодид, ч                                     ГОСТ 4232-74

Калия перманганат, ч ГОСТ 20490-75

Кислота уксусная ледяная, ч ГОСТ 18270-72

Кислота хлороводородная, концентрированная, ч ГОСТ 3118-77

Спирт этиловый, ректиф., 96%                       ГОСТ 5963-67
о-Толидин, ч                                       ТУ 6-09-2232-75
Хлороформ, чда                                     ГОСТ 20015-74

Цимоксанил с содержанием д.в. 99,4%

2.3. Приборы и оборудование

Испаритель ротационный вакуумный ИР-1М             ТУ 25-11-917-76
или аналогичный с набором колб                     ГОСТ 9737-70

Камера хроматографическая с пришлифованной ГОСТ 25336-82 крышкой или аналогичная

Колбы мерные вместимостью 100 мл                   ГОСТ 1770-74Е
Лампа УФ-света медицинская или аналогичная         МНУ 42-1618-61

Микропипетки на 0,1 мл ГОСТ 20292-74

Микрошприц на 100 мкл или аналогичный ГОСТ 20292-74

Пипетки с делениями на 10 и 1 мл ГОСТ 20292-74

Пластинки хроматографические

Силуфол 254, Хемапол, Чехия

Пробирки градуированные на шлифах ГОСТ 1770-74 вместимостью 10 мл

Пульверизаторы стеклянные ГОСТ 25336-82

Устройство аспирационное или аналогичное ТУ 64-1862-77

Фильтродержатель

Фильтры АФА-ХА-20

Чашки Петри ГОСТ 25336-82

Эксикатор ГОСТ 25336-82

2.4. Отбор проб

Воздух с объемным расходом 10 л/мин. аспирируют через фильтр АФА-ХА-20, помещенный в фильтродержатель. Для измерения 0,5 ОБУВ следует отобрать 200 л воздуха. Срок хранения отобранных проб — не более 7 дней.

2.5. Подготовка к определению

2.5.1 Приготовление стандартных растворов

Стандартный раствор № 1 готовят растворением 10 мг Цимоксанила в ацетоне в мерной колбе вместимостью 100 мл. Для приготовления стандартного раствора № 2 из раствора № 1 пипеткой отбирают 10 мл, переносят в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят до метки гексаном. Стандартные растворы № 1 и 2 стабильны при хранении в холодильнике в течение 6 месяцев.

2.5.2 Приготовление проявляющего реагента

Растворяют 0,16 г о-толидина в 30 мл ледяной уксусной кислоты, доводят до 500 мл дистиллированной водой и прибавляют 1 г иодида калия. Раствор хранят в темной склянке.

2.5.3 Подготовка хроматографической камеры

Хроматографическую камеру за один час до начала хроматографирования заполняют смесью подвижных растворителей гексан-ацетон (3:2) или хлороформом. Объем подвижного растворителя в камере должен по высоте находиться не выше, чем на 0,7 — 1,0 см от уровня дна камеры.

2.5.4 Подготовка камеры для хлорирования

Камеру для хлорирования готовят следующим образом: на дно эксикатора помещают чашку Петри с 5 г перманганата калия, а затем к ее содержимому осторожно приливают 15 мл концентрированной соляной кислоты. Эксикатор закрывают пришлифованной крышкой. Камера может быть использована через 5 — 10 мин.

2.6. Описание определения

Фильтр из патрона с помощью пинцета и стеклянной палочки переносится в стеклянный бюкс вместимостью 30 мл и заливают 10 мл этилового спирта. Фильтр несколько раз отжимают стеклянной палочкой в растворителе, а затем растворитель переносят в грушевидную колбу вместимостью 50 мл, отжимая капли растворителя с фильтра стеклянной палочкой. Эту процедуру повторяют еще два раза. Из объединенного спиртового раствора с помощью ротационного вакуумного испарителя полностью отгоняют растворитель. К сухому остатку пипеткой добавляют 5 мл гексана. Колбочку закрывают пробкой на шлифе и ее стенки тщательно обмывают растворителем. Аликвотную часть раствора (100 мкг) с помощью микрошприца на 100 мкл или микропипетки на 0,1 мл наносят на хроматографическую пластинку Силуфол 254. Справа и слева таким же образом наносят серию градуировочных растворов Цимоксанила с содержанием 0,2; 0,3; 0,4; 0,5; 1,0 мкг. Градуировочные растворы готовят в мерных пробирках с пробками на шлифе вместимостью 10 мл согласно табл. 1.

Таблица

	Номер стандарта
	1	2	3	4	5	...	9
Внесено стандартного раствора Цимоксанила 10 мкг/мл, мл	2	3	4	5	6	...	10
Добавлено гексана, мл	8	7	6	5	4	...	0
Концентрация Цимоксанила в полученном растворе, мкг/мл	2	3	4	5	6	...	10
Содержание Цимоксанила в хроматографируемый пробе, мкг	0,2	0,3	0,4	0,5	0,6	...	1,0

Хроматограммы развивают в системе гексан-ацетон (3:2) или в хлороформе. После развития хроматограммы высушенную пластинку помещают под УФ-лампу на 10 мин., а затем на 10 мин. в свежеприготовленную хлорирующую камеру. После удаления избытка хлора пластинку обрабатывают из пульверизатора проявляющим реактивом. Цимоксанил проявляется на хроматограммах темными пятнами на белом фоне с Rf 0,66 +/- 0,02 в первой системе подвижных растворителей и 0,21 +/- 0,05 в хлороформе. Линейный диапазон определения 0,2 — 1,0 мкг. Пятна стабильны в течение 5 — 8 мин.

Количественное измерение содержания Цимоксанила в пробе проводят путем сравнения интенсивности окраски и площади пятен пробы и того стандарта, площадь и интенсивность окраски которого наиболее близка площади и интенсивности окраски рабочей пробы.

2.7. Обработка результатов анализа и расчет концентрации

Концентрацию Цимоксанила в воздухе С (мг/куб. м) вычисляют по формуле:

                             A V

C = -----,

                                V  V
                                 0  1

где:

A — содержание Цимоксанила, найденное в хроматографируемой пробе, мкг;

V — общий объем экстракта пробы, мл;

V — объем пробы, взятой для хроматографирования, мл; 1

V — объем воздуха, отобранного для анализа и приведенного к 0 стандартным условиям, л.

Примечание. Для расширения диапазона измерения концентрации Цимоксанила в воздухе при его большой концентрации можно в грушевидную колбочку пипеткой добавлять большее замеренное количество гексана или, наоборот, после концентрирования добавлять в грушевидную колбочку пипеткой меньшее количество гексана.

3. Требования техники безопасности

Помещение, в котором проводится определение Цимоксанила, обязательно должно быть оборудовано приточно-вытяжной вентиляцией.

Работу с образцами, стандартами и растворителями следует проводить в вытяжном шкафу с использованием индивидуальных средств защиты.

Необходимо соблюдать общепринятые правила безопасности при работе с органическими растворителями, токсичными веществами, электронагревательными приборами и сжатыми газами.

4. Разработчики

Ф.Р. Мельцер, К.Ф. Новикова, НИИХСЗР, г. Москва.

---