---
title: "\"МУК 4.1.1149-02. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств Цимоксанила в воде, почве, зеленой массе растений, клубнях картофеля, ягодах винограда, плодах огурца хроматографическими методами. Методические указания\""
number: "МУК 4.1.1149-02"
status: действует
canonical: "https://bukva.ai/docs/ukazanie-ukazaniya-muk-4-1-1149-02"
---

## "МУК 4.1.1149-02. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств Цимоксанила в воде, почве, зеленой массе растений, клубнях картофеля, ягодах винограда, плодах огурца хроматографическими методами. Методические указания"

# "МУК 4.1.1149-02. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств Цимоксанила в воде, почве, зеленой массе растений, клубнях картофеля, ягодах винограда, плодах огурца хроматографическими методами. Методические указания"

(утв. Минздравом России)

> [!IMPORTANT]
> Документ включен в Перечень методов (методик) определения остаточных количеств действующих веществ пестицидов в продукции (товарах), подлежащий государственному санитарно-эпидемиологическому надзору (контролю) на таможенной границе и таможенной территории Евразийского экономического союза (Решение Комиссии Таможенного союза от 28.05.2010 N 299).
> Документ включен в Перечень нормативной документации, разрешенной для использования в государственных ветеринарных лабораториях при диагностике болезней животных, рыб, пчел, а также контроля безопасности сырья животного и растительного происхождения (утв. Россельхознадзором 30.07.2009 N 02-03-48/563).
> Документ включен в Перечень основных действующих нормативно-методических документов по методам лабораторного и инструментального контроля в системе государственного санитарно-эпидемиологического нормирования (Письмо Роспотребнадзора от 02.12.2008 N 01/14262-8-32).
> Документ [введен](#p100002) в действие с 1 января 2003 года.


<div align="right">

<a id="p100001"></a>Утверждаю<br>
Главный государственный<br>
санитарный врач<br>
Российской Федерации,<br>
Первый заместитель<br>
Министра здравоохранения<br>
Российской Федерации

</div>

<div align="center">

**Г.Г.ОНИЩЕНКО**

</div>



#### <a id="p100003"></a>4.1 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ


<a id="p100004"></a>**ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ ЦИМОКСАНИЛА В ВОДЕ, ПОЧВЕ,**
**ЗЕЛЕНОЙ МАССЕ РАСТЕНИЙ, КЛУБНЯХ КАРТОФЕЛЯ, ЯГОДАХ ВИНОГРАДА,**
**ПЛОДАХ ОГУРЦА ХРОМАТОГРАФИЧЕСКИМИ МЕТОДАМИ**

<a id="p100005"></a>**МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ**

<div align="center">

**МУК 4.1.1149-02**

</div>


<div align="right">

<a id="p100002"></a>Дата введения

</div>

1 января 2003 года

1. <a id="p100006"></a>Методические указания подготовлены: Федеральным научным центром гигиены им. Ф.Ф. Эрисмана (чл.-корр. РАМН, проф. В.Н. Ракитский, проф. Т.В. Юдина); Московской сельскохозяйственной академией им. К.А. Тимирязева (проф. В.А. Калинин, к. хим. н. Довгилевич А.В.); Всероссийским НИИ фитопатологии (А.М. Макеев и др.); Всероссийским НИИ защиты растений (В.И. Долженко и др.); Санкт-Петербургским НИИ лесного хозяйства (Маслаков С.Е., Л.В. Григорьева и др.), при участии Департамента госсанэпиднадзора Минздрава России (А.П. Веселов).
2. <a id="p100007"></a>Методические указания рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию при Минздраве России.
3. <a id="p100008"></a>Утверждены и введены в действие Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации, Первым заместителем Министра здравоохранения Российской Федерации, академиком РАМН Г.Г. Онищенко.
4. <a id="p100009"></a>Введены впервые.


## 1. <a id="p100010"></a>Вводная часть


<a id="p100011"></a>Фирма-производитель: Дюпон, США.
<a id="p100012"></a>Торговое название: Курзат.
<a id="p100013"></a>Название действующего вещества по ИСО: Цимоксанил.
<a id="p100014"></a>Название действующего вещества по IUPAC: 1-(2-циано-2-мето-ксииминоацетил)-3-этилмочевина.

<a id="p100015"></a>                                    CN
                                    |
                      CH CH NHCONHCOC=NOCH
                        3  2              3

    C H  N O                                           М. м. 198,2
     7 10 4 3

<a id="p100016"></a>Химически чистый Цимоксанил представляет собой бесцветное кристаллическое вещество.
<a id="p100017"></a>Давление паров: 0,15 мПа при 20 °C.
<a id="p100018"></a>Температура плавления: 160 - 161 °C.
<a id="p100019"></a>Коэффициент распределения н-октанол - вода lоg Р: 0,59 (pH 5); 0,67 (pH 7).
<a id="p100020"></a>Растворимость в воде составляет 890 мг/л. Растворимость в органических растворителях (г/л): ацетон - 62,4; ацетонитрил - 57, бензол - 2, гексан - 1,85, диметилформамид - 185, метанол - 22,9, метиленхлорид - 133, н-октанол - 1,43, толуол - 5,29, хлороформ - 103, этилацетат - 28.
<a id="p100021"></a>    Цимоксанил стабилен в интервале pH 2 - 5, в щелочных растворах
быстро  гидролизуется  (ДТ  - 149 дн. при pH 5, 34 ч при pH 7 и 31
                          50
мин.  при pH 9). В воде водоемов период полураспада составляет 1,8
дн.
<a id="p100022"></a>В почве Цимоксанил быстро разрушается под действием микроорганизмов. В тепличных условиях период полураспада составляет около трех дней, в полевых условиях - от 7 до 14 дней. Миграция по почвенному профилю слабая.
<a id="p100023"></a>В растениях соединение быстро разрушается до нетоксичных метаболитов. Остатки Цимоксанила в клубнях картофеля не обнаруживаются. В ягодах винограда, по данным фирмы Дюпон, остатки составляли ниже 0,2 мг/кг при обработке за несколько дней до уборки.
<a id="p100024"></a>Краткая гигиеническая характеристика
<a id="p100025"></a>    Цимоксанил  относится к умеренно опасным соединениям по острой
(ЛД   для крыс - 960 мг/кг), малоопасным по дермальной токсичности
   50
(ЛД    для  крыс - более    2000  мг/кг)  и  умеренно  опасным  по
   50
ингаляционной  (ЛК    (4  часа)  - 5060 мг/куб. м) токсичности, не
                  50
вызывает раздражения глаз и слабо раздражает кожу.
<a id="p100026"></a>В РФ установлены следующие гигиенические нормативы:
<a id="p100027"></a>ДСД - 0,02 мг/кг массы человека;
<a id="p100028"></a>ОДК в почве - 0,04 мг/кг;
<a id="p100029"></a>ПДК в воде водоемов - 0,3 мг/куб. дм;
<a id="p100030"></a>МДУ в картофеле и огурцах - 0,05 мг/кг;
<a id="p100031"></a>ВМДУ в винограде - 0,1 мг/кг.
<a id="p100032"></a>Цимоксанил - контактный фунгицид с местным системным эффектом, обладающий защитным и лечащим действием. Высокоактивен против грибов, вызывающих фитофтороз и пероноспороз, не действует на возбудителей настоящей мучнистой росы. Длительность защитного действия составляет 4 - 6 дней, поэтому рекомендуется его использование в смеси с другими фунгицидами системного и защитного контактного действия.
<a id="p100033"></a>Зарегистрирован в России под названием Танос, диспергируемые в воде гранулы, 50% (25% Фамоксадона + 25% Цимоксанила) на картофеле с нормой расхода 0,6 кг/га, трехкратная обработка за сезон.


## 2. <a id="p100034"></a>Методика определения Цимоксанила в воде, почве, зеленой массе растений, клубнях картофеля, ягодах винограда, плодах огурца хроматографическими методами



### <a id="p100035"></a>2.1. Основные положения



##### <a id="p100036"></a>2.1.1 Принцип метода

<a id="p100037"></a>Методика основана на определении Цимоксанила с помощью газожидкостной хроматографии при использовании термоионного детектора на неподвижной фазе ХЕ-60 после экстракции органическим растворителем, очистки экстракта путем перевода действующего вещества в водную фазу и повторной экстракции органическим растворителем.
<a id="p100038"></a>Метод ТСХ основан на извлечении Цимоксанила из анализируемого объекта этилацетатом, очистке экстракта на колонке с оксидом алюминия или сублимацией в вакууме и определении тонкослойной хроматографией.
<a id="p100039"></a>Количественное определение проводится методом абсолютной калибровки (ГЖХ) или визуального сравнения величин пятен стандарта и пробы.

##### <a id="p100040"></a>2.1.2 Метрологическая характеристика метода


<a id="p100041"></a>Таблица 1

<a id="p100042"></a>**МЕТРОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА МЕТОДА**


<table>
<colgroup><col width="22%"><col width="11%"><col width="18%"><col width="14%"><col width="15%"><col width="20%"></colgroup>
<tr><td rowspan="2">Анализируемый объект</td><td colspan="5">Метрологические параметры, P = 0,95, n = 20</td></tr>
<tr><td>предел обнаружения, мг/кг</td><td>диапазон определяемых концентраций, мг/кг</td><td>среднее значение определения, %</td><td>стандартное отклонение, S</td><td>доверительный интервал среднего результата, %, +/-</td></tr>
<tr><td>1</td><td>2</td><td>3</td><td>4</td><td>5</td><td>6</td></tr>
<tr><td colspan="6">ГЖХ</td></tr>
<tr><td>Почва</td><td>0,02</td><td>0,02 - 0,75</td><td>87,2</td><td>1,04</td><td>2,2</td></tr>
<tr><td>Зеленая масса растений</td><td>0,02</td><td>0,02 - 0,75</td><td>87,1</td><td>0,89</td><td>1,9</td></tr>
<tr><td>Огурцы</td><td>0,02</td><td>0,02 - 0,75</td><td>90,4</td><td>0,90</td><td>1,9</td></tr>
<tr><td>Виноград</td><td>0,02</td><td>0,02 - 0,75</td><td>91,3</td><td>0,72</td><td>1,6</td></tr>
<tr><td>Клубни картофеля</td><td>0,02</td><td>0,02 - 0,75</td><td>87,2</td><td>1,03</td><td>2,1</td></tr>
<tr><td colspan="6">ТСХ</td></tr>
<tr><td>Картофель</td><td>0,04</td><td>0,04 - 0,40</td><td>78</td><td>11</td><td>16</td></tr>
<tr><td>Почва</td><td>0,1</td><td>0,1 - 1,0</td><td>81</td><td>12</td><td>17</td></tr>
<tr><td>Вода</td><td>0,004</td><td>0,004 - 0,04</td><td>81</td><td>13</td><td>17</td></tr>
</table>


<div align="center">

<a id="p100055"></a>Таблица 2

<a id="p100056"></a>**ДОВЕРИТЕЛЬНЫЙ ИНТЕРВАЛ И ПОЛНОТА ОПРЕДЕЛЕНИЯ**<br>
**ЦИМОКСАНИЛА В ПОЧВЕ, ЗЕЛЕНОЙ МАССЕ РАСТЕНИЙ,**<br>
**КЛУБНЯХ КАРТОФЕЛЯ, ОГУРЦАХ И ВИНОГРАДЕ**

</div>



| Среда | Добавлено Цимоксанила, мг/кг | Обнаружено Цимоксанила, мг/кг | Доверительный интервал, +/- | Полнота определения, % |
| --- | --- | --- | --- | --- |
| Почва | 0,75 0,5 0,25 0,1 | 0,640 0,450 0,215 0,0875 | 0,066 0,023 0,02 0,012 | 85,3 90,0 86,0 87,5 |
| Зеленая масса растений | 0,75 0,5 0,25 0,1 | 0,637 0,444 0,211 0,090 | 0,025 0,021 0,012 0,004 | 85,0 88,8 84,5 90,0 |
| Клубни картофеля | 0,75 0,5 0,25 0,1 | 0,655 0,458 0,208 0,087 | 0,019 0,016 0,014 0,006 | 87,4 91,5 83,0 86,8 |
| Огурцы | 0,75 0,5 0,25 0,1 | 0,666 0,461 0,222 0,917 | 0,026 0,022 0,018 0,0039 | 88,8 92,2 88,8 91,7 |
| Виноград | 0,75 0,5 0,25 0,1 | 0,697 0,468 0,222 0,906 | 0,020 0,017 0,011 0,004 | 92,9 92,9 88,8 90,6 |



##### <a id="p100078"></a>2.1.3 Избирательность метода

<a id="p100079"></a>В предлагаемых условиях методы специфичны в присутствии пестицидов, применяемых при выращивании винограда, огурцов и картофеля (дитиокарбаматы, хлор- и фосфорорганические соединения, синтетические пиретроиды).


### <a id="p100080"></a>2.2. Реактивы, растворы, материалы и оборудование



##### <a id="p100081"></a>2.2.1 Реактивы, материалы и растворы

<a id="p100082"></a>Цимоксанил с содержанием д.в. 99,4%
<a id="p100083"></a>Азот, осч ГОСТ 9293-74
<a id="p100084"></a>Алюминия оксид II степени активности по
Брокману, нейтральный, производства ВНР
<a id="p100085"></a>Реанал или аналогичный отечественный             МРТУ 6-09-5296-68
реактив для хроматографии
<a id="p100086"></a>Ацетон ГОСТ 2603-79
<a id="p100087"></a>Вода дистиллированная ГОСТ 7602-72
<a id="p100088"></a>Водород технический                              ГОСТ 3022-70
<a id="p100089"></a>Воздух                                           ГОСТ 11882-73
<a id="p100090"></a>Калия иодид, ч                                   ГОСТ 4232-74
<a id="p100091"></a>Калия перманганат, ч ГОСТ 20490-75
<a id="p100092"></a>Кислота уксусная, ч, ледяная [ГОСТ 18270-72](https://bukva.ai/docs/gost-18270-72)
<a id="p100093"></a>Кислота хлороводородная, 0,1 н раствор
<a id="p100094"></a>Кислота хлороводородная, концентрированная ГОСТ 857-88
<a id="p100095"></a>Натрий серно-кислый, безводный, хч [ГОСТ 4166-76](https://bukva.ai/docs/gost-4166-76)
<a id="p100096"></a>Неподвижные фазы для ГЖХ: 5% ХЕ-60 на
Хроматоне N-AW, размер частиц 0,20 - 0,25 мм,
Хемапол, Чехия
<a id="p100097"></a>Хлороформ                                        ГОСТ 20015-74
<a id="p100098"></a>Этилацетат, хч                                   МРТУ 6-09-6515

##### <a id="p100099"></a>2.2.2 Приборы, оборудование, посуда

<a id="p100100"></a>Хроматограф газовый с термоионным
детектором "Цвет-600" или другой
аналогичного типа
<a id="p100101"></a>Баня водяная                                     ТУ 46-22-603-75
<a id="p100102"></a>Воронки делительные на 1000 мл ГОСТ 25336-82
<a id="p100103"></a>Воронки делительные на 250 мл                    ГОСТ 10054-75
<a id="p100104"></a>Воронки для фильтрования стеклянные              ГОСТ 8613-75
<a id="p100105"></a>Встряхиватель механический                       ТУ 64-1-1081-73
<a id="p100106"></a>Камера хроматографическая с ГОСТ 25336-82
пришлифованной крышкой
<a id="p100107"></a>Колбы грушевидные вместимостью 50 мл ГОСТ 25336-82
<a id="p100108"></a>Колбы конические плоскодонные на 100 и           ГОСТ 10394-72
250 мл, КПШ-100, КПШ-250
<a id="p100109"></a>Колбы мерные на 25, 50, 100 мл                   ГОСТ 1770-74
<a id="p100110"></a>Колбы плоскодонные вместимостью 500 и 250 мл ГОСТ 25336-82
<a id="p100111"></a>Колонка хроматографическая с краном и
оттянутым носиком длиной 10 см,
внутренним диаметром 1 см
<a id="p100112"></a>Компрессор воздушный УК-40-2М
<a id="p100113"></a>Концентраторы грушевидные (конические)           ГОСТ 10394-72
**НШ29 КГУ-100-14/19, ТС**
<a id="p100114"></a>Лампа УФ-света или аналогичная                   ТУ 16-535-280-74
<a id="p100115"></a>Микрошприц на 100 мкг [ГОСТ 20292-74](https://bukva.ai/docs/standart-gost-20292-74)
<a id="p100116"></a>Насос водоструйный                               ГОСТ 10696-75
<a id="p100117"></a>Пипетки мерные на 0,1; 1,0; 5,0; 10; 25 мл [ГОСТ 20292-74](https://bukva.ai/docs/standart-gost-20292-74)
<a id="p100118"></a>Пластинки хроматографические, Сорбифил
(г. Краснодар), или аналогичные
<a id="p100119"></a>Пробирки градуированные с пробками на            ГОСТ 1770-74
шлифах вместимостью 10 мл
<a id="p100120"></a>Пульверизатор ГОСТ 25336-82
<a id="p100121"></a>Ротационный испаритель ИР-1М                     ТУ 25-11-917-74
<a id="p100122"></a>Стаканы химические стеклянные на 100 мл          ГОСТ 6236-72
<a id="p100123"></a>Фильтры бумажные "красная лента" ТУ 6-09-1678-86
<a id="p100124"></a>Цилиндры мерные вместимостью 100 мл              ГОСТ 1770-74


### <a id="p100125"></a>2.3. Подготовка к определению



##### <a id="p100126"></a>2.3.1 Подготовка и кондиционирование колонки для газожидкостной хроматографии

<a id="p100127"></a>Готовую насадку (5% ХЕ-60 на Хроматоне N-AW) засыпают в стеклянную колонку, уплотняют под вакуумом, колонку устанавливают в термостате хроматографа, не подсоединяя к детектору, и стабилизируют в токе азота при температуре 230 °C в течение 8 - 10 часов. Для достижения предела обнаружения проводят тренировку колонки в течение 48 - 72 часов, вводя каждый час по 3 мкл стандартного раствора Цимоксанила с концентрацией 10 мкг/мл.

##### <a id="p100128"></a>2.3.2 Приготовление колонки с оксидом алюминия

<a id="p100129"></a>В стеклянную хроматографическую колонку помещают ватный тампон, затем суспензию 4 г оксида алюминия в 15 мл хлороформа (при открытом кране колонки). Когда сорбент заполнит всю колонку, дают возможность стечь избытку растворителя, оставляя маленький слой его (0,2 - 0,3 см) на поверхности оксида алюминия. Кран закрывают. Колонка готова к работе.

##### <a id="p100130"></a>2.3.3 Подготовка хлорирующей камеры

<a id="p100131"></a>    Камеру   для   хлорирования готовят  следующим   образом:   на
дно эксикатора помещают чашку Петри с  5 г  KMnO ,  а  затем  к ее
                                                4
содержимому осторожно приливают 15 мл концентрированной    соляной
кислоты. Эксикатор закрывают пришлифованной крышкой. Камера  может
быть использована через 5 - 10 мин.

##### <a id="p100132"></a>2.3.4 Подготовка хроматографических камер

<a id="p100133"></a>В хроматографические камеры за один час до начала хроматографирования наливают хлороформ или смесь растворителей: гексан-ацетон (3:2) для насыщения камеры парами подвижных растворителей. Объем подвижного растворителя в камере должен находиться по высоте не выше, чем 0,7 - 1 см от уровня дна камеры.

##### <a id="p100134"></a>2.3.5 Приготовление проявляющего реагента

<a id="p100135"></a>Растворяют в мерной колбе на 500 мл 0,16 г о-толидина в 30 мл ледяной уксусной кислоты, добавляют дистиллированной воды примерно до 300 мл и прибавляют 1 г иодида калия. При помешивании растворяют иодид калия и доводят объем раствора до метки дистиллированной водой. Раствор хранят в темной склянке. Годен к употреблению в течение длительного времени.

##### <a id="p100136"></a>2.3.6 Приготовление стандартных растворов

<a id="p100137"></a>Взвешивают 50 мг Цимоксанила в мерной колбе на 50 мл, растворяют навеску в этилацетате и доводят объем до метки этилацетатом (стандартный раствор N 1, концентрация 1 мг/мл).
<a id="p100138"></a>Стандартный раствор N 1 можно хранить в холодильнике в течение 1 месяца. Методом последовательного разбавления готовят стандартные растворы Цимоксанила в этилацетате с концентрацией 10,0; 5,0; 2,5; 2,0 и 1,0 мкг/мл для построения калибровочного графика.
<a id="p100139"></a>Для ТСХ приготавливают стандартные растворы Цимоксанила в ацетоне с концентрацией 100 и 10 мкг/мл.

##### <a id="p100140"></a>2.3.7 Построение калибровочного графика

<a id="p100141"></a>Для построения калибровочного графика вводят в хроматограф последовательно по 3 раза по 2,5 мкл каждого из полученных пяти растворов, измеряют высоту или площадь пиков, рассчитывают среднее значение высоты пика или его площади для каждой концентрации и строят график зависимости высоты пика или площади от концентрации Цимоксанила мкг/мл.


### <a id="p100142"></a>2.4. Отбор проб


<a id="p100143"></a>Отбор проб производится в соответствии с "Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов" (N 2051-79 от 21.08.79). Отобранные пробы хранят в стеклянной или полиэтиленовой таре в холодильнике при температуре не выше 4 °C. Для длительного хранения пробы почвы подсушиваются при комнатной температуре в отсутствии прямого солнечного света. Сухие почвенные образцы могут храниться в течение года. Растительные образцы замораживаются (лучше жидким азотом) и хранятся в холодильнике при -10 °C в течение 1 месяца, предварительно определяется содержание влаги.
<a id="p100144"></a>Перед анализом сухую почву просеивают через сито с отверстиями диаметром 0,1 мм, растительный материал режут ножом на кусочки длиной не более 0,5 см, остальные объекты измельчают на гомогенизаторе или на терке.


### <a id="p100145"></a>2.5. Проведение определения



##### <a id="p100146"></a>2.5.1 Вода. ТСХ

<a id="p100147"></a>500 мл воды помещают в делительную воронку вместимостью 1000 мл, добавляют около 5 г хлорида натрия и 50 мл хлороформа. Смесь в течение нескольких минут энергично встряхивают. После разделения слоев нижний хлороформный слой сливают в плоскодонную колбу вместимостью 250 мл. Экстракцию Цимоксанила повторяют еще дважды тем же количеством растворителя. Объединенный экстракт сушат над безводным сульфатом натрия (10 - 12 г). Раствор сливают через бумажный фильтр порциями в грушевидную колбочку вместимостью 50 мл. Концентрируют каждую порцию с помощью ротационного вакуумного испарителя до объема 2 мл. Последнюю порцию растворителя отгоняют полностью. К сухому остатку пипеткой добавляют 1 мл гексана, колбочку закрывают пробкой на шлифе и ее стенки тщательно обмывают растворителем.

##### <a id="p100148"></a>2.5.2 Почва

<a id="p100149"></a>2.5.2.1. ГЖХ. Навеску 50 г воздушно-сухой почвы помещают в коническую колбу объемом 250 мл, равномерно смачивают 10 мл воды и перемешивают. Добавляют в колбу 100 мл ацетона, встряхивают на приборе для встряхивания 1 час. После выдерживания в течение 10 минут экстракт фильтруют методом декантации через фильтр "красная лента" в концентратор. Повторяют экстракцию дважды: 50 мл ацетона в течение 0,5 часа и 50 мл ацетона - 15 минут. Экстракты объединяют, добавляют в концентратор 20 мл дистиллированной воды и упаривают ацетон на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 50 °C. Далее экстракт очищают по следующей схеме.
<a id="p100150"></a>2.5.2.1.1. Очистка экстракта. Водный экстракт помещают в делительную воронку, ополаскивая концентратор 30 мл воды. Добавляют в воронку 20 мл хлороформа и интенсивно встряхивают 2 минуты. После разделения фаз нижний хлороформный слой собирают в стакан объемом 100 мл. Экстракцию повторяют дважды, используя по 20 мл хлороформа, объединенный хлороформный экстракт помещают в чистую делительную воронку, добавляют туда 10 мл 0,1 н соляной кислоты и интенсивно встряхивают 2 минуты. После разделения фаз нижний хлороформовый слой собирают в конический концентратор, пропуская его через слой безводного серно-кислого натрия. Осушитель ополаскивают 10 мл хлороформа. Экстракт упаривают на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 50 °C. Последние капли растворителя удаляют током воздуха. Сухой остаток растворяют в 1 мл этилацетата и вводят в хроматограф 2,5 мкл пробы.
<a id="p100151"></a>2.5.2.2. Почва ТСХ. К 10 г почвы, растертой в фарфоровой ступке, добавляют 2 мл дистиллированной воды. Почву тщательно увлажняют. Экстракцию Цимоксанила проводят этилацетатом три раза порциями по 50 мл при механическом встряхивании колбы в течение 30 мин. Дальнейшее определение проводят по схеме, описанной ниже с любой очисткой.

###### <a id="p100152"></a>2.5.2.2.1 Очистка  экстракта  хроматографией  на  колонке  с

Al O .
  2 3
<a id="p100153"></a>Сухой остаток с помощью 2 - 3 мл хлороформа количественно переносится на колонку с оксидом алюминия. Каждый раз дают возможность раствору впитаться в сорбент, открывая кран колонки, но не допуская ее осушения: Во всех случаях над сорбентом должен оставаться небольшой слой растворителя (2 - 3 мм). Цимоксанил элюируют с колонки 10 мл хлороформа, собирая элюат в круглодонную колбу. Элюирование проводят со скоростью 1 кап./с. Равномерность потока растворителя обеспечивается вакуумом, регулируемым водоструйным насосом. Из приемной колбы вместимостью 20 - 25 мл с помощью ротационного вакуумного испарителя полностью отгоняют растворитель. К сухому остатку пипеткой добавляют 1 мл гексана. Колбочку закрывают пришлифованной пробкой и ее стенки тщательно обмывают растворителем.

###### <a id="p100154"></a>2.5.2.2.2 Очистка экстракта микросублимацией в вакууме.

<a id="p100155"></a>Сухой остаток с помощью 2 - 3 мл хлороформа количественно переносится в патрон сублиматора. Патрон помещают на горячую баню и полностью удаляют растворитель, регулируя равномерное распределение остатка по дну сублиматора. В патрон помещают "палец" сублиматора и проводят микросублимацию Цимоксанила на кипящей бане при 0,1 - 0,3 мм рт. ст. в течение 40 мин. После окончания сублимации Цимоксанил смывают с "пальца" сублиматора в грушевидную колбочку вместимостью 25 мл с помощью 10 мл ацетона. Из колбочки с помощью ротационного вакуумного испарителя полностью отгоняют растворитель. К сухому остатку пипеткой добавляют 1 мл гексана. Колбочку закрывают пробкой на шлифе и ее стенки тщательно обмывают растворителем.

##### <a id="p100156"></a>2.5.3 Виноград, огурцы, клубни картофеля, зеленая масса. ГЖХ.

<a id="p100157"></a>Навеску 50 г измельченных плодов огурцов, клубней картофеля, ягод винограда или зеленой массы помещают в коническую колбу объемом 250 мл, добавляют 50 мл этилацетата и встряхивают на приборе для встряхивания 1 час. Затем раствор методом декантации переносят в делительную воронку через фильтр "красная лента". После разделения слоев нижнюю водную фракцию помещают в колбу для повторной экстракции, верхний слой этилацетата собирают в концентратор.
<a id="p100158"></a>Повторно проводят экстракцию 50 мл этилацетата в течение 0,5 часа. Органический экстракт объединяют, добавляют в концентратор 20 мл дистиллированной воды и отгоняют этилацетат на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 50 °C.
<a id="p100159"></a>2.5.3.1. Очистка экстракта. Водный экстракт помещают в делительную воронку, ополаскивая концентратор 30 мл воды. Добавляют в воронку 20 мл хлороформа и интенсивно встряхивают 2 минуты. После разделения фаз нижний хлороформный слой собирают в стакан объемом 100 мл. Экстракцию повторяют дважды, используя по 20 мл хлороформа, объединенный хлороформный экстракт помещают в чистую делительную воронку, добавляют туда 10 мл 0,1 н соляной кислоты и интенсивно встряхивают 2 минуты. После разделения фаз нижний хлороформовый слой собирают в конический концентратор, пропуская его через слой безводного серно-кислого натрия. Осушитель ополаскивают 10 мл хлороформа. Экстракт упаривают на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 50 °C. Последние капли растворителя удаляют током воздуха. Сухой остаток растворяют в 1 мл этилацетата и вводят в хроматограф 2,5 мкл пробы.

##### <a id="p100160"></a>2.5.4 Клубни картофеля. ТСХ.

<a id="p100161"></a>Навеску анализируемой пробы (50 г) помещают в плоскодонную колбу вместимостью 500 мл, заливают 100 мл этилацетата и проводят экстракцию Цимоксанила при помощи механического встряхивания колбы в течение 30 мин. Экстракт фильтруют в круглодонную колбу вместимостью 500 мл. Экстракцию Цимоксанила повторяют еще дважды тем же количеством растворителя. Этилацетат удаляют с помощью ротационного вакуумного испарителя полностью. Далее очистку экстракта можно проводить двумя способами: хроматографией на колонке с оксидом алюминия или микросублимацией в вакууме ([п. п. 2.5.2.2.1](#p100152) и [2.5.2.2.2](#p100154)).


### <a id="p100162"></a>2.6. Условия хроматографирования и обработка результатов



##### <a id="p100163"></a>2.6.1 Условия хроматографирования.


###### <a id="p100164"></a>2.6.1.1 ГЖХ.

<a id="p100165"></a>    Хроматограф  "Цвет-600"  с  термоионным  азотным  детектором с
                                         -13
пределом  детектирования  не  выше 5 х 10    г/куб. см  по азоту в
азобензоле
                                                   9        -11
<a id="p100166"></a>    Рабочая шкала электрометра               4 x 10  (4 x 10    А)
<a id="p100167"></a>    Скорость движения ленты самописца        300 мм/час
<a id="p100168"></a>    Колонка стеклянная спиральная, длина     2 м
<a id="p100169"></a>     внутренний диаметр                      2 мм
<a id="p100170"></a>    Носитель  Хроматон  N-AW,  размер  частиц  0,200  -  0,250 мм,
неподвижная фаза 5 % ХЕ-60
<a id="p100171"></a>    Температура: термостата колонки          170 °C
<a id="p100172"></a>                 переходной камеры           360 °C
<a id="p100173"></a>                 испарителя                  340 °C
<a id="p100174"></a>    Газовый режим: водород                   12 мл/мин.
<a id="p100175"></a>                   азот                      33 мл/мин.
<a id="p100176"></a>                   воздух                    180 мл/мин.
<a id="p100177"></a>    Объем пробы, вводимой в испаритель       2,5 мкл
<a id="p100178"></a>    Абсолютное время удерживания             1 мин. 22 с
<a id="p100179"></a>    Цимоксанила
<a id="p100180"></a>Линейность детектирования сохраняется в пределах 2,5 - 37,5 нг. Каждую анализируемую пробу вводят в хроматограф 3 раза и вычисляют среднюю высоту пика. Образцы, дающие пики большие, чем стандартный раствор с концентрацией 15 мкг/мл, разбавляют.

###### <a id="p100181"></a>2.6.2.2 ТСХ.

<a id="p100182"></a>На хроматографические пластинки Сорбифил с помощью микрошприца на 100 мкл или микропипетки на 0,1 мл наносят аликвотную часть полученного по пунктам ([2.5.1](#p100146), [2.5.2.2.1](#p100152), [2.5.2.2.2](#p100154)) раствора (100 мкл). Справа и слева таким же способом наносят серию стандартных растворов Цимоксанила с содержанием 0,2; 0,3; 0,4; 0,5...1,0 мкг. Градуировочные растворы готовят в градуированных пробирках вместимостью 10 мл с пробками на шлифе согласно табл. 3.

<a id="p100183"></a>Таблица 3

<div align="right">

<a id="p100184"></a>**ШКАЛА СТАНДАРТОВ**

</div>



<table>
<colgroup><col width="55%"><col width="6%"><col width="8%"><col width="6%"><col width="6%"><col width="6%"><col width="6%"><col width="6%"></colgroup>
<tr><td rowspan="2"></td><td colspan="7">Номер стандарта</td></tr>
<tr><td>1</td><td>2</td><td>3</td><td>4</td><td>5</td><td>...</td><td>9</td></tr>
<tr><td>Внесено стандартного раствора Цимоксанила 10 мкг/мл, мл</td><td>2</td><td>3</td><td>4</td><td>5</td><td>6</td><td>...</td><td>10</td></tr>
<tr><td>Добавлено гексана, мл</td><td>8</td><td>7</td><td>6</td><td>5</td><td>4</td><td>...</td><td>0</td></tr>
<tr><td>Концентрация Цимоксанила в полученном растворе, мкг/мл</td><td>2</td><td>3</td><td>4</td><td>5</td><td>6</td><td>...</td><td>10</td></tr>
<tr><td>Содержание Цимоксанила в хроматографируемой пробе, мкг</td><td>0,2</td><td>0,3</td><td>0,4</td><td>0,5</td><td>0,6</td><td>...</td><td>1,0</td></tr>
</table>


<a id="p100190"></a>    Хроматограмму развивают  в системе хлороформ или гексан-ацетон
(3:2).  При  очистке  экстракта  на  колонке  с  Al О   сначала  в
                                                   2 3
хлороформе,  а затем, после высушивания пластинки, в гексан-ацетон
(3:2). После развития  высушенную хроматограмму помещают под лампу
УФ-света  на  10  мин,  а  затем на 10 мин. в  свежеприготовленную
хлорирующую   камеру.   После  удаления  избытка  хлора  пластинку
обрабатывают  из  пульверизатора проявляющим реактивом. Цимоксанил
проявляется  на  хроматограмме в виде темных пятен на белом фоне с
R  0,21  +/-  0,05  в  хлороформе,  R   0,45  +/-  0,05  в системе
 f                                   f
гексан-ацетон  и  R  0,66  +/-  0,02  при  сочетании  двух  систем
                   f
подвижных  растворителей.  Линейный диапазон определения 0,2 - 1,0
мкг. Пятна стабильны в течение длительного времени.

##### <a id="p100191"></a>2.6.2 Обработка результатов анализов


###### <a id="p100192"></a>2.6.2.1 ГЖХ.

<a id="p100193"></a>    Содержание Цимоксанила в пробе рассчитывают методом абсолютной
калибровки по формуле:

                             H  A V c
                              1
<a id="p100194"></a>                         X = --------- x P,
                             H  m 100
                              0

<a id="p100195"></a>    где:
<a id="p100196"></a>    X - содержание гербицида в пробе, мг/кг;
<a id="p100197"></a>    H  - высота пика стандарта, мм;
     1
<a id="p100198"></a>    H  - высота пика образца, мм;
     0
<a id="p100199"></a>    A - концентрация стандартного раствора, мкг/мл;
<a id="p100200"></a>    V - объем  экстракта,  подготовленного для хроматографирования
(мл);
<a id="p100201"></a>    c  -  фактор  разбавления,  учитывающий взятие аликвоты в ходе
определения;
<a id="p100202"></a>    m - масса анализируемого образца, г или мл.
<a id="p100203"></a>    P - содержание Цимоксанила в аналитическом стандарте, %.

###### <a id="p100204"></a>2.6.2.2 ТСХ.

<a id="p100205"></a>Количественное определение Цимоксанила проводят путем сравнения площади и интенсивности окраски пятен рабочей пробы и серии стандартов.
<a id="p100206"></a>    Содержание  Цимоксанила  в  анализируемой  пробе  вычисляют по
формуле:

                                C V
<a id="p100207"></a>                            X = ----,
                                V  P
                                 а

<a id="p100208"></a>    где:
<a id="p100209"></a>    X  -  содержание  Цимоксанила  в  анализируемой  пробе,  мг/кг
(мг/л);
<a id="p100210"></a>    C  -  содержание  Цимоксанила,  найденное в хроматографируемой
пробе, мкг;
<a id="p100211"></a>    V - общий объем раствора, мл;
<a id="p100212"></a>    V  - объем аликвоты, нанесенной на пластинку, мл;
     а
<a id="p100213"></a>    P - навеска или объем анализируемой пробы, г (мл).


## 3. <a id="p100214"></a>Требования техники безопасности


<a id="p100215"></a>Необходимо соблюдать общепринятые правила безопасности при работе с органическими растворителями, токсичными веществами, электронагревательными приборами и сжатыми газами.


## 4. <a id="p100216"></a>Разработчики


<a id="p100217"></a>ГЖХ. Калинин В.А., профессор, к. с-х. н.; Калинина Т.С., к. с-х. н.; Довгилевич А.В., к. хим. н.; Довгилевич Е.В., к. биол. н.
<a id="p100218"></a>Московская сельскохозяйственная академия им. К.А. Тимирязева. 127550, Москва, Тимирязевский пр., 2, кафедра химических средств защиты растений. Телефон: (095) 976-02-20.

<div align="center">

<a id="p100219"></a>ТСХ. ВНИИХСЗР, г. Москва, Новикова К.Ф., к. хим. н. и др.

</div>




<a id="p100220"></a>

---